高原低氧环境下大鼠肾脏水通道蛋白2的表达及意义

目的 研究高原低氧环境下大鼠肾脏内髓水通道蛋白2（AQP2）mRNA及蛋白的表达。 方法 将40只雄性SD大鼠随机分为24 h、48 h、72 h及1周组，同时设立对照组（西宁地区）。将4个实验组由西宁地区（2260 m）带至青海大学可可西里高原医学研究基地(4600 m)，在不同时间点处死取材。用放射免疫法检测血浆抗利尿激素(AHD)浓度，Western印迹、实时定量PCR、免疫荧光等方法检测AQP2蛋白及mRNA的表达。 结果 暴露于高原低氧环境后，大鼠AHD水平首先呈下降趋势，24 h为（142.46±10.57）；48 h时达到最低水平，仅为对照组的28.5%[（86.94±6.49） μg/L比（302.53±10.48） μg/L]；后逐渐上升，72 h组为（169.65±11.15） μg/L，与对照组差异均有统计学意义（均P < 0.01）；1周时为（306.46±11.14） μg/L达到对照组水平。AQP2 mRNA的表达与AHD水平的变化相一致，初入高原后呈下降趋势，48 h时达到最低水平，后逐渐上升，24 h、48 h、72 h组与对照组差异均有统计学意义（分别为0.04±0.005，0.03±0.002，0.04±0.003比0.09±0.008，均P < 0.01），1周时为（0.09±0.01），达到对照组水平。AQP2蛋白表达与mRNA的表达变化一致。免疫荧光结果显示，对照组及1周组大鼠肾脏荧光强度表达一致，其余各组较低，48 h组荧光强度最低。 结论 在高原低氧环境下大鼠肾脏内髓AQP2 mRNA和蛋白的表达在缺氧早期呈下降趋势，后逐渐上升到正常水平，其改变可能和机体对缺氧的程度和高原低氧的习服过程有关。     

肾脏水通道蛋白2基因和蛋白表达的调节及影响因素

水通道蛋白2(AQP2)属于膜整合蛋白,在肾脏内髓部集合管分布较多,主要受抗利尿激素(AVP)调节,是调节体内水代谢平衡的重要物质基础.近年研究表明除受抗利尿激素调节外还受渗透压、酸碱度、肾上腺皮质激素、药物、饮食、神经系统等因素影响.本文就影响水通道蛋白2基因和蛋白水平表达的因素作一综述.     

氯胺酮对脑外伤大鼠脑组织水通道蛋白-4表达的影响

目的 观察氯胺酮对脑外伤大鼠脑组织水通道蛋白-4（AQP-4）表达的影响，探讨氯胺酮减轻脑外伤的作用机制。方法 健康雄性Wistar大鼠152只，随机分为对照组和治疗组，每组76只。采用自由落体致脑外伤动物模型，治疗组大鼠伤后1 h腹腔注射氯胺酮120 mg／kg，对照组相同时间给予容量生理盐水。每组分别在伤后6、12、24、48和72h随机处死15只大鼠，每个时点的5只大鼠用于测定脑组织含水量，每个时点的其余10只大鼠经心脏灌注后取脑组织，观察脑组织病理学改变及神经元凋亡情况，测定AQP-4表达。结果 与对照组比较，治疗组大鼠伤后各时间点脑含水量、AQP-4表达及神经元凋亡计数均降低（P〈0．05或0．01），脑组织病理学改变明显减轻。结论 氯胺酮120 mg／kg通过抑制脑外伤大鼠脑组织AQP-4的表达，减少了神经元的凋亡，从而减轻脑损伤。     

黄芪对肾病综合征大鼠肾脏水通道蛋白的影响

目的:探讨黄芪对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其可能的作用机制.方法:24只大鼠随机分成正常对照组(NC组),阿霉素肾病组(NS组),阿霉素肾病 黄芪干预组(A组)和阿霉素肾病 福辛普利干预组(F组),每组6只,在第4周末时检测各组大鼠血尿生化和血尿钠及渗透压等,同时检测了大鼠肾脏皮髓质AQP2、AQP3、AVP V2受体mRNA和蛋白表达情况.结果:(1)阿霉素大鼠在4周末有明显的肾病综合征表现,且有高血钠和高血渗伴低尿钠和低尿渗,黄芪能明显降低大鼠血胆固醇和甘油三酯,而黄芪和福辛普利均能降低血钠,改善高血渗,并提高尿渗和尿钠.(2)黄芪能上调阿霉素肾病大鼠肾髓质AQP2 mRNA的表达,同时降低肾脏AQP2蛋白表达.而对肾脏AQP3的表达无影响,福辛普利仅能减少肾脏AQP3 mRNA和蛋白表达.(3)与对照组相比,NS大鼠肾脏AVP V2受体表达明显下调,黄芪能上调AVP V2 mRNA和蛋白的表达,但福辛普利对此没有影响.结论:黄芪能改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留状态,其机制可能与其调节AQP2和AVP V2受体的表达有关.     

尾加压素Ⅱ及其受体mRNA在糖尿病大鼠肾脏的表达

尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,UⅡ）是迄今体内最强的缩血管活性肽,其缩血管效应是内皮素1（ET-1）的10倍以上。研究证明人体一种孤立G蛋白耦联受体GPR14是UⅡ的特异性受体,UⅡ与其受体构成UⅡ-UⅡ受体系统,二者特异性结合可产生多种生物学效应。本研究观察UⅡ及其受体GPR14在糖尿病大鼠肾脏的表达规律,探讨它们在糖尿病肾病肾小管损伤发生中的可能作用。     

短暂性脑缺血对老年大鼠海马水通道蛋白-4表达的影响

目的 探讨短暂性脑缺血对老年人鼠海马水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响.方法 健康老年Wistar大鼠160只,年龄19～21月,体重420～670 g,随机分为4组(n=40):假手术组(S组)、I1～3组分别脑缺血1、3、5 min.采用四动脉阻断法建立大鼠全脑缺血模型,于脑缺血后12 h、1、2、3和7 d(T1～5)时随机取4只大鼠,断头后取海马组织,计算脑水含量,光镜下观察海马组织病理学结果,采用免疫组化方法测定海马AQP-4的表达水平,TUNEL法测定神经元凋亡情况.结果 与S组比较,I3组各时点脑水含量、海马凋亡神经元计数和AQP-4表达上调,I2组海马凋亡神经元计数升高(P<0.05或0.01),其余指标差异无统计学意义,I1组以上指标差异均无统计学意义(P0.05);I3组T3和T4时海马凋亡神经元计数高于I2组(P<0.05);I2组海马组织病理学损伤最严重.结论 老年大鼠短暂性脑缺血导致的脑水肿可能与脑组织AQP-4的表达上调有关.     

黄芪对肾病综合征与充血性心力衰竭时血管加压素系统异常的不同改善作用

应用阿霉素所致大鼠肾病综合征（ＮＳ）模型与腹主动脉－下腔静脉造瘘所致大鼠充血性心力衰竭（ＣＨＦ）模型，研究了精氨酸血管加压素（ＡＶＰ）系统在其中的变化以及黄芪的保护作用。斑点杂交显示下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ表达在ＮＳ增加，在ＣＨＦ降低。逆转录－聚合酶链反应表明肾脏皮质ＡＶＰＶ１α受体ｍＲＮＡ表达在ＮＳ增加，在ＣＨＦ降低。黄芪对ＮＳ中ＡＶＰ系统的高表达与ＣＨＦ中ＡＶＰ系统的低表达均有改善作用。上述变化均不是通过渗透性调节机制，心房利钠肽（ＡＮＰ）在其中亦不是起主要作用，对此进行了讨论。     

黄芪对肾病综合征与充血性心力衰竭时血管加压素系统异常的不同改…

应用阿霉素所致大鼠肾病综合征模型与腹主动脉－下腔静脉造瘘所致大鼠充性心力衰竭模型，研究了精氨酸血管加压素系统在其中的变化以及黄芪的保护作用。斑点杂交显示下丘脑ＶＡＰｍＲＮＡ表达在ＮＳ增加，在ＣＨＦ降低。     

大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白2和水通道蛋白4表达的影响

目的 研究大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白（AQP）2、AQP4表达的影响及探讨大黄利尿机制。 方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组，每组8只，分别给予不同剂量大黄总蒽醌灌胃，每天1次，共灌5 d。第4天测定大鼠24 h尿量，尿液Na+水平及尿渗透浓度。5 d后处死大鼠，腹主动脉取血，进行血液生化指标检测；并留取肾脏，用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。 结果 与正常对照组比较，大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠24 h尿量显著增加[(16.21±1.96) ml、(18.16±1.80) ml比（13.85±1.25）ml, P均＜ 0.05]，低剂量组大鼠尿量变化不明显；中、高剂量组大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA表达均显著下降（P均＜ 0.01），高剂量组大鼠肾脏AQP4蛋白及mRNA表达显著下降（P ＜ 0.01）；中剂量组大鼠AQP4蛋白表达下降（P ＜ 0.01），但mRNA表达无显著降低；低剂量组大鼠AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达无显著变化。 结论 大黄总蒽醌能降低大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平，这可能是大黄产生利尿的机制之一。     

黄芪当归合剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏血管活性物质变化的影响

目的 本研究通过观察黄芪当归合剂(A&A)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平及一氧化氮合酶(NOS)的影响，以进一步揭示A&A抑制肾纤维化机制。方法 Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)、UUO和UAA(UUO+A&A)组，造模后0、3、7、10 d分析各组肾脏中NO、Ang-Ⅱ、ET-1水平和NOS活性及3种NOS的表达。结果 (1)造模后UUO组的Ang-Ⅱ和ET-1水平持续增高；A&A仅在第3天时降低Ang-Ⅱ水平(P < 0.05)。(2)造模后UUO组的NO浓度在第10天时才明显增高；而UAA组中NO浓度逐渐增高，第3天时明显高于UUO组(P < 0.05)。(3)UUO组内皮型eNOS在髓质血管内表达增高，且UAA组与UUO组间没有显著性差异。第3天时UAA组神经型nNOS表达低于UUO组(P < 0.05)。UAA组cNOS的活性明显高于Sham和UUO组。诱导型iNOS表达和活性3组间差异均无统计学意义。结论 梗阻性肾病中，A&A在早期降低肾内Ang-Ⅱ水平、且持续增强eNOS活性使NO产生增加，从而可能降低血管张力、改善肾脏的缺血及缺氧状态，减轻肾间质纤维化。     

c-kit在人肝硬化及肝细胞肝癌组织中的表达及意义

目的探讨肝脏祖细胞标志物c-kit在人肝硬化及肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法对30例肝硬化、40例肝细胞肝癌标本及3例正常组织标本进行常规组织学观察以及c-kit、CD45免疫组化染色,对肿瘤细胞的分化程度及肝硬化组织门静脉炎症程度进行分型和评分,分析c-kit表达与肝硬化及肝细胞肝癌的临床病理特征的联系。结果正常肝脏中c-kit染色阴性。20／30例肝硬化中发现c-kit（＋）细胞,位于门脉周围区域和纤维间隔内,个别阳性细胞整合到成熟胆管,肝硬化结节中没有发现c-kit（＋）细胞。19／40例HCC组织中存在c-kit （＋）肿瘤细胞,在肿瘤细胞之间或肿瘤结节周围分散分布。HBsAg及Anti-HBc在c-kit（＋）与c-kit （-）HCC之间表达有显著性差异（χ^2=5．063,P〈0．05;χ^2=6．667,P〈0．05）。c-kit表达与肿瘤的分化程度紧密相关（χ^2=10．384,P〈0．05）,分化程度越低,c-kit表达越高。结论骨髓来源的肝脏祖细胞参与了部分肝硬化病变过程中的肝再生及HCC的形成和发展,c-kit表达情况对于判断HCC预后有一定意义。     

肝、肾联合移植治疗肾移植术后移植肾功能衰竭并肝硬化一例报告

目的 报告1例移植肾功能丧失并肝炎后肝硬化者再次接受肝，肾联合移植。方法 给1例肾移植术后移植肾功能丧失并肝炎皇肝硬化患者先行失功能移植肾的切除。针对患者群体反应抗体（PRA）较高（66%），切除术后第5d开始每天给予环磷酰胺50mg。连服3个半月，并行血浆置换2次。PRA降至23%。3个半月后施行一期肝，肾联合移植，肝移植采用原位背驮式肝移植术式。供肾移植于左髂窝，肝血流开放后每间隔30min检测PRA1次，术后免疫抑制治疗采用他克莫司（FK506）。霉酚酸酯（MMF）和激素。结果 术后移植肝，肾立即发挥功能。肝动，静脉血流开放后，，PRA由23%降至5%。并维持在8%左右。术后乙型肝炎病毒表面抗原转阴，丙型肝炎病毒抗体阴性，随访3个月，移植肝，肾功能正常。结论 对于移植肾功能丧失，且合并有肝硬化，肝功能不良者，再次施行肝，肾联合移植是可行的。     

肝硬化患者气单胞菌败血症的临床研究

气单胞菌为革兰阴性短杆菌，兼性厌氧，可存在于海水、淡水、污水和食品中，是人和动物的肠道共患病原菌。健康儿童或成人的胃肠道中不易发现该菌。该菌偶尔可引起腹泻，但多为自限性。气单胞菌感染常见于有严重基础疾病如慢性肝病和恶性肿瘤的患者，在这部分患者中，气单胞菌败血症的病死率很高，为24％-68％。为加强对肝硬化患者气单胞菌败血症的认识并引起临床医师的重视，     

血清胱抑素C对肝硬化病人肾功能损害的早期诊断价值研究

目的 探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)检测对肝硬化病人肾功能损害早期诊断的意义.方法 测定76例肝硬化病人24 h肌酐清除率(Ccr)以及血清肌酐(SCr)和血清Cys C水平.以CCr＜80 ml/min/1.73 m2作为肾功能损害诊断标准,采用t检验、相关性分析和ROC曲线分析探讨Cys C的诊断价值.结果 在Child分级肝损害病人的肾功能评估能力比较中,Cys C能灵敏反映CCr变化,而Scr的反映能力明显低于Cys C.SCr与CCr有着显著的负相关性(CysC:r=-0.763,P＜0.001;SCr:r=-0.571,P＜0.01),而Cys C的相关系数较高.ROC曲线分析显示Cys C的曲线下面积(AUC)值明显高于SCr(0.830比0.612).结论 与SCr比较,Cys C能更准确地早期发现肝硬化病人的肾功能损害,常规监测肝硬化病人Cys C水平,对预防肝肾综合征的发生具有积极意义.     

肝硬化失代偿期并发意外肝癌患者的肝移植及其临床特点

目的探讨肝硬化失代偿期并发意外肝癌患者的肝移植效果及其临床特点。方法11例肝硬化失代偿期患者接受原位肝移植,在术后的病肝病理检查中意外发现癌灶(称之为"意外肝癌"),其原发病,8例为乙型肝炎后肝硬化,丙型肝炎后肝硬化、酒精性肝硬化和原发性硬化性胆管炎各1例。11例术后采用他克莫司、霉酚酸酯及甲泼尼龙预防排斥反应,3个月后撤除霉酚酸酯,6个月后撤除甲泼尼龙。病肝沿水平面作间隔1 cm连续平行切片,对于直径大于1 cm或有灰白色结节者,完整取材。结果11例中,术前仅4例(36.4%,4/11)的甲胎蛋白(AFP)水平超过正常值。除1例肿瘤为多发外,其余均为单发,肿瘤直径最大为2.0 cm,平均直径为1.18 cm;肿瘤TNM分期,Ⅰ期占72.7%,Ⅲ期占27.3%;存在微血管侵犯2例,包膜完整、无血管及淋巴侵犯2例;病理诊断为胆管细胞癌1例,肝细胞癌10例。术后随访12～50个月,1例因肿瘤复发于术后10个月死亡。结论意外肝癌的病理学特点为肿瘤分期早,多为单发,组织分化程度高,肝移植后的1年存活率与良性肝病患者肝移植类似,肿瘤复发率低。     

Pin1在肝硬化和肝癌组织中的表达及其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系

目的通过检测Pin1在肝硬化组织和肝癌原发灶及门静脉癌栓中的表达,了解Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段的表达情况,同时验证其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系。方法用免疫组织化学染色法检测20例肝硬化组织,21例肝癌原发灶及门静脉中Pin1的表达,同时检测21例肝癌原发灶中乙型肝炎病毒X蛋白的表达情况,并用SPSS10.0软件进行相关性分析。结果肝硬化组织和大部分门静脉癌栓中Pin1的表达较肝癌原发灶中Pin1的表达强(P<0.05)。在肝癌组织中Pin1的表达与HBx的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段表达不同,同时Pin1可以通过直接或间接作用稳定HBx的表达,为阐明其在肝癌发生、发展中的作用提供了新的思路。     

Heart transplantation in patients with liver cirrhosis

OBJECTIVE: Liver cirrhosis is considered to be a contraindication to heart transplantation. However, the clinical outcome of heart transplantation in patients with liver cirrhosis has not been reported. Here, we sought to evaluate the clinical outcome of heart transplantation in cirrhotic patients. METHODS: Data were collected by retrospective chart review. Patients with liver cirrhosis at the time of transplantation were included. RESULTS: Between 1987 and 2007, 12 patients with liver cirrhosis underwent heart transplantation at the authors' hospital. Diagnosis of liver cirrhosis was based on preoperative abdominal sonography in five, autopsy in five, and laparotomy in two patients. Causes of heart failure were dilated cardiomyopathy in four, coronary artery disease in three, congenital heart disease in three and valvular heart disease in two patients. Causes of liver cirrhosis were alcoholism in two, cardiac in seven, and unknown in three patients. The Child classification was class A in three, class B in five and class C in four patients. Overall, the hospital mortality rate was 50% and major in-hospital complications occurred in nine patients (75%). Patients with non-cardiomyopathy diagnosis, previous sternotomy, and massive ascites had a high hospital mortality rate. The median follow-up duration was 33.5 months. There was no late death. Late post-transplant complications occurred in four patients and there was no event of liver dysfunction. All survivors were in Child class A at outpatient follow-up. CONCLUSIONS: Although there was high mortality and morbidity, patients with end-stage heart failure and liver cirrhosis can be considered for heart transplantation with careful case selection.     

人肝再生增强因子基因转导对大鼠肝硬化的保护作用

目的 探讨人肝再生增强因子(augmenter of liverregeneration，ALR)基因转导对肝硬化的保护作用。方法 构建hALR真核表达载体，并以肌肉注射方式转导至硫代乙酰胺诱导的大鼠肝硬化模型中，观察对肝硬化大鼠的代谢支持作用。结果 构建的hALR真核表达载体pchALR肌肉注射后显著降低了血清AST、ALT、ADH水平，延长了生存时间，提高了存活率。结论 人肝再生增强因子基因转导对肝硬化大鼠具有预防和治疗作用，可显著降低血清AST、ALT、ADH水平，延长生存时间，提高存活率。     

生长分化因子-15在慢性乙型肝炎和肝硬化中的表达

生长分化因子-15（GDF-15）又称巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）,是转化生长因子-B（TGF-B）超家族成员之一。     

高压氧疗法在肝硬化形成过程中预防和治疗作用的实验研究

目的　在肝硬化进程中低氧血症可能起着重要作用 ,为探索其新疗法 ,我们实施了高压氧对肝纤维化进程影响的实验研究。方法　用 60 %四氯化碳将 75只Wistar大鼠致肝硬化 ,其间大鼠被随机分为 :肝硬化对照组 ,常压氧组 ,压力对照组 ,2 0ATA(atmosphereabsolute,ATA)组和 2 5ATA组 ;治疗结束后观察肝功能检查及肝脏病理组织变化。结果　 2 5ATA下给氧可使肝功能明显改善 (P <0 0 5 ) ;余者仅对部分肝功能指标有影响。光镜 :肝脏病理组织学改变有所好转。讨论　高压氧治疗通过改善机体有氧代谢 ,在药物毒性肝硬化制备过程中可延缓肝硬化进程。