ELISA检测乙肝两对半的影响因素分析

目的:分析使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清乙型肝炎两对半的相关影响因素.方法:回顾总结近年来我院用ELISA法检测乙肝两对半的检测全过程,对异常检验结果利用过程追踪法通过现场管理五要素(人、 机、 料、 法、 环)分析其影响因素.结果:影响其检测结果准确性的主要因素是人(人员素质、 操作流程是否规范)、 机...     

国产ELISA法乙肝五项检测试剂的评价

乙肝病毒标志物检测是临床实验室常规的检测项目，主要为HBsAg、抗-HBs、HbeAg、抗-Hbe、抗-HBc。临床实验室检测多采用ELISA方法。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。由于ELISA方法国产乙肝五项检测试剂生产众多，在灵敏度、特异度、稳定性重复性上有着较大的差异。为了解目前ELISA方法国产乙肝五项检测试剂的情况，我们选择三个厂家的试剂进行比对评价。     

乙肝标志物中ＨＢｓＡｇ“阴性”结果的探讨

我们随机对在我院就诊患的５６１２份血清标本进行了乙肝标志物（ＨＢＶＭ）五项指标（ＨＢｓＡｇ、抗—ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗—ＨＢｅ、抗—ＨＢｃ）的检测，并着重对ＨＢｓＡｇ阴性而其他标志物阳性的血清标本进行了探讨，同时观察了ＨＢｓＡｇ的滴度与其他标志物阳性的关系。     

低浓度乙肝标志物的检测分析

用ELISA法检测乙肝标志物，迄今已有几十年的历史。随着仪器和诊断试剂的迅速发展，因而对实验室的室内质量控制提出了更高的要求。但在实际工作中，有些实验室并没有使用室内质控物进行严格的室内质量控制，且操作方法不统一。为了解我省对乙肝标志物低浓度测定的符合率、用酶仪法与目视判断读法结果的比较，我们对参加省临检中心室间质评的医院实验室进行了统计分析，现报告如下：１材料１．１参评实验室：我省二级以上医院实验室１７１家，其中７３家用酶标仪判读结果，９８家用目视判读结果。１．２乙肝标志物；HBsAg弱阳性浓度为２…     

HBV DNA定量与乙肝标志物检测结果对比分析

目的 探讨血清中HBV DNA定量与乙肝标志物（HBV-M）之间的关系及临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和ELISA法分别检测535例门诊病人的血清HBV DNA含量和HBV-M,并对结果进行对比分析.结果 HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为88.8%（207/233）,平均拷贝数为1.0＊10^8/ml;HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为31.6%（50/158）,平均拷贝数为6.2＊106/ml;HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为21.7%（15/69）,平均拷贝数为1.8＊106/ml;HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为6.2%（1/16）,平均拷贝数3.2＊103/ml;全阴性组血清HBV DNA检出率为5.0%,平均拷贝数为2.0＊103/ml;其他组合,HBV DNA检出率为0.结论 对临床HBV感染、复制及传染性的判断,除乙肝标志物ELISA检测外,加做HBV DNA FQ-PCR检测具有重要意义.     

加样时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎血清标志物的影响

目前,实验室常规做乙型肝炎(HBV)血清标志物检测多采用快速酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunoadsordent Assay;ELISA)一步法,即样本和包被的相应抗体或抗原以及相应酶标抗体同时在30 min内反应完成,而多数实验室仍采用手工加样法,在此过程中如果样本量较大,同一批检样中加在前面的样本与加在最后的样本时间相差较大,少则半小时,多则一个小时,这一时间差远     

乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测对诊治乙肝的临床价值

选取200例乙肝患者为观察对象,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测病患血清中的HBV-DNA,乙肝血清标志物两对半的检测采用ELISA方法,观察分析检测结果的相关性。结果检测结果显示,大三阳组患者血清HBV-DNA检出率为97.4%,拷贝数1.8E+06/ml;小三阳组患者的血清HBV-DNA检出率为63.3%,拷贝数1.8E+03/ml;HBs Ag(+)HBc Ab(+)组血清HBV-DNA检出率为62.5%,平均拷贝数量7.9E+03ml。HBV-DNA水平和HBV M的表现模式存在关联,大三阳患者的标本HBV-DNA值较小三阳组与HBs Ag(+)HBc Ab(+)的标本更高,说明HBe Ag会影响到HBV-DNA的水平。乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测对于乙肝诊断具有推广价值。     

自动化工作模式基乙肝标志物检测中的应用

肝炎在我国人群中感染率很高 ,尤以乙型肝炎感染为甚 ,大约 10 %左右。因而乙型肝炎标志物检测在预防医学、临床诊断和治疗中具有非常重要的意义。而它检测的准确性也日益受到医学界以至全社会的关注。酶联免疫方法(ＥＬＩＳＡ)检测乙肝标志物本身的准确性受到加试剂、加样品、洗板、显色温度和时间等多因素的影响。因此把握好ＥＬＩＳＡ操作过程中的每个环节是得出最后准确结果的关键。我们采用电子取样器加样 ,洗板机洗板 ,酶标仪———计算机ＥＬＩＳＡ ＨＢＶｍ信息处理软件对ＨＢＶｍ检测结果进行半定量分析处理的工作模式3年 ,大大减…     

乙肝标志物定量检测的临床意义

目的探讨乙肝标志物定量检测的临床意义。方法用时间分辨免疫荧光分析法（TRFIA）对1139名公务员进行两对半定量检测同时用酶联免疫吸附实验（ELISA）对相同的标本进行乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）定性检测;日常门诊和住院病人3745人用ELISA进行两对半定性检测。结果公务员TRFIA定量检测HBsAg阳性（〉0．5ng／ml）率6．4％;ELISA定性检测相同标本HBsAg阳性率6．2％;公务员TRFIA定量检测乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）阳性（〉10mIU／m1）率62．3％;日常门诊和住院病人ELISA定性检测HBsAg、HBsAb阳性率分别为11．8％、44．1％。结论乙肝标志物定量检测的灵敏度、准确性更高,临床意义更广泛,尤其是HBsAg和HBsAb。     

儿科乙型病毒性肝炎血清五项标志物常见模式和不常见模式分析

[目的]通过检测儿科血清乙肝两对半，分析其存在的常见模式和不常见模式。[方法]采用快速酶联固相免疫一步法（ELISA）检测3988份血清标本中乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（HBe—Ab）、乙肝核心抗体（HBcAb）。[结果]检测结果分析发现儿科血清乙肝两对半常见模式9种、不常见模式8种和罕见模式1种。随机抽取44分标本采用电化学发光法复检，更改模式标本达15份，变更率34．1％。建议对临床标本出现的不常见模式和罕见模式进行常规复检，以提高儿科乙型病毒性肝炎血清学检测结果的可靠性。[结论]实验室应对临床标本出现的不常见模式和罕见模式进行复检，从提高儿科乙型病毒性肝炎血清免疫学检测的可靠性。     

在乙型肝炎表面抗原破坏试验中对ELISA法检验结果影响因素的研究

试验表明，在ＨＢｓＡｇ破坏试验中，用ＥＬＩＳＡ法检测时，样品含小牛血清量愈多检出ＨＢｓＡｇ的灵敏度愈高。某些阴离子表面活性剂使检测结果呈假阴性，加适宜中和剂可将之克服。新洁尔灭与脂肪醇聚氧乙烯醚可使检测结果呈假阳性。所试中和剂中，仅亚硫酸钠与半胱氨酸可使测得的Ｓ／Ｎ值下降，其余无明显影响。     

IFN-α治疗慢性乙型肝炎的效果及其影响因素

目的分析干扰素-α（IFN-α）治疗慢性乙型肝炎（CHB）效果的影响因素。方法选择2006—2009年青岛市传染病医院住院的CHB病人46例,应用IFN-α治疗48周,根据IFN-α疗效将其分为应答组与无应答组,评价病人的宿主、病毒载量及生化指标等因素对疗效的影响。结果两组的性别比例、年龄和病程比较差异无显著性（P〉0.05）;应答组治疗前HBV-DNA载量显著低于无应答组,ALT水平显著高于无应答组（t=2.381、2.800,P〈0.05）;HBeAg阳性病人的应答率显著高于HBeAg阴性病人（χ2=4.193,P〈0.05）;应答组在治疗12周时HBV-DNA载量下降〉2 log的比例显著高于无应答组（χ2=4.278,P〈0.05）。结论治疗前HBV-DNA载量低、ALT水平高和HBeAg阳性以及治疗12周时HBV-DNA应答情况可以作为IFN-α治疗CHB病人48周时应答的预测因素。     

乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物检测

目的比较分析乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物的检测结果。方法采用ELISA法和荧光PCR法对316例乙型肝炎病人及其配偶进行乙型肝炎五项指标与HBVDNA定量检测。结果HBVDNA的阳性率和含量在HBeAg（＋）与HBeAg（-）组差异均有显著意义（χ^2=31．97、68．79,P〈0．01）;HBsAg的相对滴度与HBVDNA的含量关系不密切。乙型肝炎病人配偶HBV感染率为58．2％,有4例HBVDNA含量〉1．0×10^6 copies／L。结论HBeAg与HBV的复制和HBVDNA的高含量关系密切,而HBsAg的相对滴度则不能反映HBV的复制程度及传染性强弱。配偶间的密切接触可以引起HBV感染,但很少导致HBVDNA在体内的存在和复制。     

乙型肝炎血清学标志物抗力的比较

经检测，对钴－６０辐照，病人血清中ＨＢｓＡｇ、ｐＨＳＡ－Ｒ与ＨＢＶ－ＤＮＡ抗力较其中ＨＢＶ－ＤＮＡｐ、ＨＢｅＡｇ及纯化ＨＢｓＡｇ者为强．ＨＢＶ颗粒经１７．９０ｋＧｙ剂量辐照后在电镜下仅见碎片．对所试含氯消毒剂、碘酊、高锰酸钾、盐酸与过氧化物消毒剂，病人血清中的ＨＢｓＡｇ较其中ｐＨＳＡ－Ｒ、ＨＢｅＡｇ及纯化ＨＢｓＡｇ的抗力为强．     

时间分辨荧光免疫分析法乙型肝炎血清标志物分析灵敏度的建立与分析

[目的]乙型肝炎表面抗原和表面抗体定量测定试剂盒。[方法]时间分辨荧光免疫分析法的分析灵敏度进行建立与分析，以便更好的指导临床诊断和进行流行病学研究。[结果]通过实验研究，乙型肝炎病毒表面抗原定量检测试剂盒和表面抗体定量检测试剂盒的检测低限分别为0．0356ng／ml和0．548mIU／ml，生物检测限分别为0．200ng／ml和5．00mIU／ml，功能灵敏度分别为0．200ng／ml和5．00mIU／ml，线性范围分别为0．200ng／ml-300ng／ml和5．00mIU／ml～1200mIU／ml，并达到中国药品生物制品检定所检定要求。[结论]时间分辨荧光免疫分析法乙型肝炎病毒定量检测试剂盒具有灵敏度高，线性范围宽，特异性强的特点，已能有效应用于临床体外诊断和流行病学研究。     

酶联免疫吸附实验中和法检测乙肝表面抗原价值的探讨

[目的]通过酶联免疫吸附实验夹心法与中和法检测乙肝表面抗原的对比,探讨中和法在临床诊断中的应用价值。[方法]酶联免疫吸附实验中和法检测10例常规方法认定乙肝表面抗原抗体皆阳性患者血清（罕见模式）表面抗原。[结果]经过PCR进一步复查确认常规检测中1例结果为假阳性,通过健康者血清检测夹心法与中和法无差异性可言,而通过夹心法诊断为异常的标本检测显示两种方法有明显统计学差异。[结论]中和试验可以应用于以往除PCR以外难以诊断的乙型肝炎病人的筛选。     

乙型肝炎的父-婴传播途径检测分析

众所周知，乙型肝炎病毒感染有家庭聚集现象。其原因与乙型肝炎的垂直传播途径直接相关。由父方、母方或双方将HBV病毒传播到子一代的过程被称为垂直传播，这是HBV的家庭聚集现象的主要原因。母子传播的途径已为广大群众所熟知。事实上，父亲在垂直传播过程中也起到相当重要的作用。[第一段]     

乙型肝炎病毒荧光PCR基因分型方法的建立和应用

[目的]建立一种在临床上准确、快速、简便地对乙型肝炎病毒进行基因分型（BCD三型）的方法。[方法]大量分析已分型的HBV基因组序列，寻找出HBV各基因型的型特异性碱基的分布规律，设计型特异性的引物和探针，利用已知全序列HBV建立荧光PCR的基因分型方法。并与PCR-RFLP及S基因测序等分型方法作比较。[结果]荧光PCR方法对已知基因组序列的HBV分型结果与基因组分析完全一致，利用大量随机临床标本摸索的最佳反应条件为94℃，1min；94℃，10s，60℃，30s，40个循环。与PCR-RFLP相比，分型结果一致性在84．0％；与S基因测序分型相比，一致性为96．2％。[结论]利用荧光PCR能灵敏、快速、准确地进行乙型肝炎病毒基因分型，方便临床应用和流行病学调查。     

ELISA法测定血清S100B蛋白

目的建立ELISA测定血清S100B蛋白的方法。方法制备S100B单克隆和多克隆抗体,以双抗体夹心法测定血清S100B蛋白。结果方法的平均回收率为93.7%-104%,批内及批间平均变异分别为3.7%和5.9%,方法的线性为0-12.5μg/l,参考值范围为0.14-0.38μg/l。结论该法简便、快速、特异、敏感,适于临床常规应用。