肾综合征出血热病毒对人胚肾原代细胞感染作用的研究

近年来对该病进行了广泛研究 ,但其发病机理尚不清楚。为了搞清肾综合征出血热病毒 (ＨＦＲＳＶ)对肾组织的损伤机理 ,本文首次选用易饲养、敏感、高效的人胚肾原代细胞直接攻击ＨＦＲＳＶ。为确保结果的准确性 ,改用了胶原酶温和消化法 ,取得令人满意的结果。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　材料　 (1)ＨＦＲＳ病毒株 :Ｈａｎｔａａｎ病毒 76 / 118株 ,Ｌｅｅ Ｈ .等分离自南朝鲜黑线姬鼠 ,从第四军医大学汪美先教授处引进。昆明种小白鼠乳鼠脑内接种 (0 0 2 /只 )传代 ,取鼠脑研制成 2 0 %病毒悬液。ＬＤ50 =ｌｏｇ6 5 / 0 .0 2ｍ…     

流行性出血热的治疗 流行性出血热病原学、血清学研究进展

流行性出血热(EHF)是由病毒引起的一种自然疫源性疾病。自1978年李镐汪等首次分离到朝鲜出血热(KHF)病毒以来,近几年在国内外均有重大突破,为本病在病原学、血清学及防治工作的研究中取得了丰硕的成果,尤其在病原学、血清学研究上更为显著。就这方面简要介绍如下。一、病原学研究:动物方面:首先由李镐汪等采用EHF病人恢复期血清,用间接免疫荧光方法检查疫区黑线姬鼠脏器组织冰冻切片标本,发现肺、肾组织细胞浆中呈现荧光颗粒,将此阳性组织感染非疫区黑线姬鼠,反复传代,获得了能稳定传代并能增殖的毒株,经特异性检查确认分离到KHF病毒。我国于     

北京肾综合征出血热病毒的分离及其特性研究

自1978年Lee等用黑线姬鼠传代获得肾综合征出血热(HFRS)病原以来,我国学者严玉辰、宋干等亦从黑线姬鼠分离到HFRS病原相关因子,并适应在Vero-E_6、A549、2BS细胞上。1985、1986年,我们应用IFAT或IFA免疫荧光技术,从A、D、E、F四个监测点鼠类中检出6份黑线姬鼠肺HFRS病毒抗原,带毒率为0.9～1.9%;检     

长爪沙鼠肾原代细胞的特性和应用

据报道对EHFV敏感的正常动物细胞有黑线姬鼠肺细胞,大白鼠肺细胞,金黄地鼠肾细胞和鸡胚细胞等。我站曾证明长爪沙鼠肾细胞对EHFV敏感,本文重点介绍沙鼠肾细胞(MK)的特性以及在流行性出血热病毒研究中的应用。材料和方法一、病毒株,浙_(10)株自EHF病人血清分离,浙_3、浙_7株自黑线姬鼠肺分离,76118株自南朝鲜黑线姬鼠肺分离,     

用Vero-E6细胞从疫区褐家鼠分离流行性出血热病毒的研究

1981年以来,山西部分农村及城市相继出现流行性出血热(EHF)的流行,褐家鼠是主要传染源。我们用Vero-E6(简称E6)细胞直接从疫区褐家鼠肺组织中分离出可传代的EHF病毒。现将初步鉴定结果报告如下。材料和方法一、褐家鼠肺组织标本:选EHF病毒抗原强阳性鼠肺组织,用10%小牛血清Eagle氏液制成10%肺组织悬液,2000rpm20分钟离心,取上清液为分离病毒材料。     

2007年浙江省鼠类感染汉坦病毒监测及病毒分离

目的了解浙江省鼠类自然感染汉坦病毒（HV）情况和病毒型别,为肾综合征出血热（HFRS）防治提供科学依据。方法采集鼠类肺组织和血清标本,用间接免疫荧光试验检测鼠血清IgG抗体,直接免疫荧光试验检测鼠肺Hv抗原。HV抗原阳性鼠肺接种Vero—E6细胞分离病毒,用HV单克隆荧光抗体鉴定分离株的型别。结果共捕获鼠形动物1129只,其中黑线姬鼠为优势种,鼠肺HV抗原阳性率为3．0％,鼠血标本IgG抗体阳性57份,阳性率8．0％。分离到6株汉滩（HTN）型病毒,其中来自黑线姬鼠5株,褐家鼠1株。结论浙江省存在以黑线姬鼠为主要传染源的HFRS疫源地,HV主要流行型别为HTN型。     

黑线姬鼠感染流行性出血热病毒后的排毒情况的研究

黑线姬鼠是野鼠型流行性出血热(EHF)的主要传染源。该鼠自然感染EHF病毒后,其病毒可泛嗜多个脏器,并从尿、粪和唾液向外界排出病毒。本研究用黑线姬鼠实     

福建北部山区肾综合征出血热血清流行病学调查

用IFAT检查周宁县657只鼠肺,城镇室内褐家鼠的HFRS病毒抗原的阳性率为4.72%,野外黑线姬鼠宁波亚种为5.95%。褐家鼠有外窜。城镇病例主要传染源为褐家鼠,多属于褐家鼠型出血热,农村或野外感染的病例主要传染源为黑线姬鼠,主要属于黑线姬鼠型出血热。褐家鼠型出血热症状比黑线姬鼠型出血热的症状轻。黑线姬鼠流行高峰之后出现人间流行高峰。福建北部山区是我国黑线姬鼠型出血热自然疫源地带的东南边缘部分,自然疫源地多属于山区小盆地型。周宁县除野外有黑线姬鼠型自然疫源地外,室内尚有褐家鼠型疫源地。恢复期病人血清检查21份,阳性率为90.48%,抗体维持较久,经9年仍有查出者,健康人群检查172份未发现隐性感染。     

天台县汉坦病毒宿主动物调查及病毒分离结果

目的了解2011—2018年浙江省天台县汉坦病毒(HV)宿主动物的种群分布、带毒情况和病毒型别,为防制肾综合征出血热(HFRS)提供依据。方法在天台县HFRS监测点采用夹夜法捕获鼠形动物,对鼠种和鼠龄进行鉴定,分析当地鼠种构成和鼠密度。取鼠肺和鼠血,采用免疫荧光法检测HV抗原和抗体,HV抗原阳性鼠肺用HV S片段特异性引物进行RT-PCR核酸检测,并进行分离病毒和鉴定型别。结果 2011—2018年天台县平均鼠密度为4.44%,野外鼠密度为4.94%,居民区鼠密度为2.23%。捕获鼠形动物10种,野鼠优势鼠种为黑线姬鼠,家鼠优势鼠种为褐家鼠。鼠肺HV抗原阳性67份,阳性率为4.13%,其中1份来自褐家鼠,其他66份均来自黑线姬鼠;鼠血抗体阳性79份,阳性率为4.86%,均来自黑线姬鼠。67份HV抗原阳性鼠肺标本经RT-PCR扩增后,阳性34份,阳性率为50.75%。分离到22株HV,其中汉滩型(HTN) 21株,汉城型(SEO) 1株,均分离自黑线姬鼠。结论天台县存在以黑线姬鼠为主要传染源的HFRS疫源地,主要流行型别为HTN型,同时首次在天台县发现黑线姬鼠携带SEO型病毒。     

应用含生物素-亲和素放大系统的双夹心酶联吸附法确定肾综合征出血热病毒的三个血清型

目前已从世界上的许多地区分离到肾综合征出血热病毒,但它们的血清型均没有被确定。作者收集了来源于5种宿主及6个地区的7种出血热病毒株,包括南朝鲜黑线姬鼠分离的76-118株,中国湖北病人急性期血清分离的湖北-Ⅰ株,日本大白鼠分离的SR-11株,美国新奥尔良褐家鼠分离的Tch株,瑞典及芬兰欧洲棕背(鼠平)分离的Hallnas和Puumala株,以及美国宾州田鼠分离的PHV株。将上述病毒株分别接种子Vero E6细胞,7～12天后刮下感染细胞,用缓冲液重悬为10%     

不同环境黑线姬鼠中流行性出血热自然感染状况调查

在1984年10～11月间,用间接免疫荧光方法对不同环境黑线姬鼠中流行性出血热(EHF)的自然感染状况进行了调查,现将结果报告如下: 一、黑线姬鼠中EHF的自然感染状况:本次     

流行性出血热病毒株间抗原差异的研究——Ⅰ.病毒株的分离与鉴定

本文报告从流行性出血热(EHF)病人和鼠中分离出28株能在Vero-E_6细胞上繁殖并适应于乳小白鼠稳定传代的病原因子。用分离株感染的鼠脑切片和参考株EHF病毒A16株感染的Vero-E_6细胞滴片,同时以IFAT法进行特异性血清学试验和排除试验,二者检测结果一致,说明分离株为EHF病毒;用HI对所分离的24株病毒的免疫血清分型表明,病毒株来源于黑线姬鼠的为野鼠型毒株,来源于褐家鼠的主要为家鼠型毒株。进一步研究来源于不同疫源地类型疫区和潜在疫区毒株间的抗原性差异,将对EHF的防制有指导性意义。     

流行性出血热病毒持续感染细胞的建立

目前已知流行性出血热病毒(EHFV)对原代细胞敏感,如长爪沙鼠肾原代细胞,金黄地鼠肾原代细胞等,对传代细胞敏感的如如非洲绿河猴肾细胞(Vero-E_6。),人胚肺癌细胞(A_(549))等,但未见EHFV在传代细胞上呈持续感染状态,现将EHFV浙37株在地鼠肾传代细胞(BHK)上连续传代的结果报道如下。     

用乳大白鼠肺原代细胞分离出EHF病毒

采用哈尔滨市郊区暴发的流行性出血热(EHF)宿主动物鼠肺组织悬液,接种乳大白鼠肺组织原代细胞(简称Rn1细胞)分离出可连续传代的EHF病毒株,编号为A-483株进行了系统鉴定。A-483株在Rn1细胞能稳定传代,不产生病变。用A_(64)、A_(163)、R_(294)、S_(23)殊免疫血清进行了交叉免疫荧光检查,结果证明所分离株与国内其他省的抗原相近,其特异免疫血清抗体滴度为1∶20～1∶1280以上。该株对哈市郊区8对EHF病人双份血清间接免疫荧光抗体增长动态均为4倍以上:急性期1∶20～1∶320、恢复湖1∶80～1∶1280之间。该株与牡丹江地区10名EHF病人的急性期血清间接免疫荧光抗体滴度为1∶80～1∶320,恢复期为1∶80～1∶1280。该抗原与10份正     

内蒙古地区流行性出血热监测点2008—2009年鼠间监测分析

目的对内蒙古呼伦贝尔市莫力达瓦旗流行性出血热监测点进行鼠间流行性出血热的调查。方法本调查在疫区监测点采用鼠密度调查、免疫荧光法检测鼠肺EHF抗原和酶联免疫法检测鼠血EHF总抗体的方法进行。结果该疫区鼠类平均密度为9.88%,其中黑线姬鼠(31.65%)为野外优势鼠种,居民区以褐家鼠(46.01%)占主要优势;鼠肺标本的带毒率为3.30%,鼠血总抗体的阳性率为0.73%;病毒抗原阳性数最多的鼠种为大仓鼠、黑线仓鼠、黑线姬鼠。结论该疫区是混合型疫区,且鼠间普遍存在汉坦病毒自然感染。居民区有大量野鼠存在,应该引起高度重视,加大疫情监测和防控力度,以监测数据为依据,制定出科学有效的防制措施。     

套式反转录—聚合酶链反应检测革螨体内肾综合征出血热病毒的？…

用ＨＴＮ病毒姬鼠型Ｍ基因型特异性引物，异硫氰酸胍一步法提取ＲＮＡ，ｎｅｓｔｅｄ ＲＴ－ＰＣＲ检测鼠和肺和厩真厉螨体人７６－１１８株病毒ＲＮＡ，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和点印迹杂交证实。结果表明，姬鼠型７６－１１８株病毒液和叮刺感染病毒乳鼠后第１０天既真厉螨组织悬液接种乳鼠第９天鼠肺，叮刺后第１０天和３０天螨，均检出病毒ＲＮＡ。     

河南省开封县啮齿动物分布特征及自然感染EHFV的调查

目的掌握河南省开封县鼠类分布特征,了解鼠类自然感染肾综合征出血热病毒(EHFV)现状,为控制人类出血热疫情提供依据。方法用布夹法开展鼠密度调查,用直接免疫荧光技术进行鼠肺带毒检查。结果共有效布放鼠夹3451夹次,捕获鼠886只,鼠密度为25.67%。带毒50只,鼠类带毒率为5.64%。捕获鼠种有大家鼠、小家鼠、黑线姬鼠、大仓鼠和小仓鼠。结论证实河南省开封县存在肾综合征出血热病毒的自然循环,应采取有效措施控制流行性出血热疫情。     

肾综合征出血热病毒引起细胞融合及其在病毒感染性和中和抗体滴定中的应用

本文报道肾综合征出血热(HFRS)病毒在pH4.9～6.3条件下可使细胞与细胞融合,通过细胞融合灶计数法测定其病毒感染性和中和抗体。此法较蚀斑形成法、间接免疫荧光法和免疫酶法简便、快速。作者用HFRS病毒76-118株(来自黑线姬鼠)、SR-11(实验鼠)和TB-314(家鼠)分别接种于Vero-E6细胞,10～14天     

某部驻区鼠类感染肾综合征出血热病毒的分子流行病学调查

目的 了解某部驻区鼠类感染肾综合征出血热病毒状况和病毒型别.方法 夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠类的种群构成.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增鼠类脏器模板的M片段基因序列,用BLAST软件进行序列分析,并用Clustal X(1.8)进行聚类分析.结果 共发现六种鼠类,分别为褐家鼠、大仓鼠、大林姬鼠、黑线姬鼠、棕背鼠平和花鼠,褐家鼠为优势鼠种,占35.85%;RT-PCR检测结果显示,2只大林姬鼠的肺和肝组织检测出了汉坦病毒,对一份阳性标本进行序列测定并分析其核苷酸序列,显示它为汉城型汉坦病毒.结论 该部驻区鼠类携带汉城型汉坦病毒,主要宿主动物为大林姬鼠.     

流行性出血热病毒气溶胶实验感染黑线姬鼠的初步报告

本文用 EHF 病毒气溶胶实验感染非疫区黑线姬鼠,结果 EHF 病毒气溶胶在230(±5)ID_(50)/m~3时黑线姬鼠吸入20min 可使其感染,但吸入少于20min 则未能感染,表明 EHF 病毒可通过呼吸道感染。