调节性T细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的小鼠暴发型肝炎模型中作用的初步探讨

目的 检测调节性T细胞(Tr)在3型鼠肝炎病毒(MHV-3)诱导的小鼠暴发型肝炎模型中的比例变化及细胞因子表达,初步探讨Tr在该疾病模型中的作用.方法 通过腹腔注射MHV-3感染BALB/cJ小鼠诱导暴发型肝炎,观察小鼠的生存时间,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,利用苏木精-伊红(HE)染色法检测肝脏病理学改变,分离感染不同时间点外周血、脾脏以及肝脏中的淋巴细胞,利用流式细胞术来检测Tr的比例以及细胞因子IL-10表达水平.结果 BALB/cJ小鼠感染MHV-3后,全部在3～6d内死亡,血清ALT、AST水平随着感染时间延长逐渐升高,HE染色显示肝脏组织炎症及坏死程度逐渐加重,流式细胞术检测发现随着感染时间延长,小鼠肝脏中的Tr的比例明显升高.同时肝脏Tr分泌细胞因子1L-10的比例以及肝脏组织IL-10的mRNA水平逐渐升高.结论 MHV-3诱导的小鼠暴发型肝炎模型中Tr在肝脏中的比例和功能显著升高,这种代偿性升高提示Tr可能发挥调节机体过度免疫反应的功能.     

慢病毒载体介导的鼠基因工程调节性T细胞对小鼠移植物抗宿主病的作用研究

目的 通过慢病毒载体介导的鼠叉状头螺旋转录因子(Foxp3)基因表达构建鼠基因工程调节性T细胞(Tr),探讨输注基因工程Tr细胞对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法 利用慢病毒载体介导,将鼠Foxp3基因转导入BALB/c小鼠的CD4+CD25-T淋巴细胞,即为基因工程Tr细胞.建立小鼠异基因骨髓移植模型,在移植时联合输注基因工程Tr,通过受鼠移植后生存期、组织病理学改变、炎性细胞因子浓度等指标评价其防治GVHD的作用.并与单纯照射组、移植对照组、空载体对照组相比较.结果 单纯照射组、移植对照组、工程Tr组和空载体对照组小鼠存活时间分别为(8.8±0.6)d、(36.7±2.5)d、(51.6±4.0)d和(34.1±2.3)d,工程Tr组小鼠存活时间明显长于其他各组(P＜0.05).移植对照组及空载体对照组小鼠肝脏、皮肤和小肠病理切片均存在GVHD病理改变,工程Tr组长期存活小鼠的肝脏、皮肤和小肠常规病理切片结构基本正常,未见GVHD病理表现.移植后移植对照组、工程Tr组、空载体对照组受鼠血清IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度在21～28 d时达高峰,工程Tr组在21 d时IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度高峰较其他两组为低(P＜0.05).结论 小鼠异基因骨髓移植时联合输注基因工程Tr细胞可通过减少受鼠移植后炎性细胞因子的分泌有效减少GVHD的发生,减轻其严重程度.     

CD4+ CD25+调节性T细胞在流产中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群.Tr免疫学特性主要在于抑制自身反应性T细胞的活化,并参与外周免疫耐受,对维持机体内环境的稳定起重要作用.Tr在流产中发挥重要的免疫调节作用.     

加味玉屏风散对创伤应激小鼠CD4+CD25+调节性T细胞影响的实验研究

目的观察创伤应激状态下及口服加味玉屏风散(玉屏风散加党参)后对小鼠CD4+CD25+Tr细胞影响.方法采用小鼠截肢应激模型,将50只BALB/c小鼠随机分为5组正常对照组(A)、应激对照组(B)、应激+加味玉屏风散高(C)、中(D)、低(E)剂量组.采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾细胞悬液中CD4+CD25-T、CD4-CD25+T、CD4+CD25+Tr的细胞数.结果创伤后72h小鼠外周血及脾细胞悬液中CD4+CD25+Tr细胞比例明显升高(P<0.01),CD4+CD25-T细胞、CD4-CD25+T细胞比例明显降低(P<0.01);给予加味玉屏风散后各组小鼠外周血及脾细胞悬液中CD4+CD25+Tr细胞比例明显降低(P<0.01),CD4+CD25-T细胞、CD4-CD25+T细胞比例明显升高(P<0.01);其中C组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论创伤后小鼠CD4+CD25+Tr表达增强,加味玉屏风散可有效抑制其表达.     

树突状细胞扩增抗原特异性CD4+ CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)是同时具有免疫低反应性和免疫抑制性功能两大特征的T细胞.研究证实,CD4+ CD25+ Tr在抑制器官特异性自身免疫性疾病及GVHD是抗原特异性的,因此,应用器官特异性而不是多克隆性的Tr将大大促进以Tr为基础的免疫治疗.而具有调节活性的CD4+ CD25+ Tr仅占人类外周血CIM+ T细胞的1%～2%,因此,研究体外大量扩增的方法 对于以Tr基础的治疗至关重要.研究表明,树突状细胞(DC)作为机体强有力的专职抗原递呈细胞可以扩增具有抗原特异性的CD4+ CD25+ Tr且能增加后者的抑制活性,这为治疗自身免疫性疾病及GVHD提供了新的治疗前景.     

急性ITP患儿外周血Tr细胞及其与IL-2的相关性研究

CD4+CD25+Foxp3+T调节性T细胞(regulation T cell,Tr细胞)是维持机体免疫耐受的重要调控者,在自身免疫病中的作用已引起关注.急性特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患儿外周血中Tr细胞数量的减少及相关细胞因子(IL-10、TGF-β)含量的降低,与急性ITP患儿的细胞免疫失调有关.而IL-2是Th1类细胞因子,IL-2 能否促进或抑制Tr细胞的增殖尚未见报道.为探讨ITP患儿Tr细胞数量受细胞因子IL-2的影响状况,我们用流式细胞术和ELISA法分析患儿外周血中Tr细胞及细胞因子IL-2的变化.     

HSP60口服耐受对小鼠脾细胞中调节性T细胞的影响

HSP60特异性免疫反应在许多炎症反应中起重要作用.近来口服耐受(oral tolerance)已成功用于许多自身免疫性疾病的实验研究和临床治疗.但能否通过口服诱导特异性调节性T细胞(Tr),目前国内外研究甚少.本研究通过HSP60口服耐受,观察其对小鼠脾细胞中Tr细胞的影响.     

抑制NF-κB活性诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用

目的 研究调节性T细胞(Tr)和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法 以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠(对照组)和IκBα△N-Tg小鼠(实验组)分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;流式细胞术分别检测两组受鼠脾脏内Tr在移植前以及移植术后7 d、30 d和100 d的变化规律,以及Th17细胞在移植术后5 d时的变化;Western blot检测两组心脏移植物内IL-17在移植后3 d和5 d的表达.结果 实验组心脏移植物存活时间均大于100 d,HE染色未见心脏移植物内有明显淋巴细胞浸润;实验组Tr比例在移植后7 d和30 d时明显升高(21.23±3.95,23.17±4.11 vs 11.64±1.96,P0.05),而对照组Tr在移植前后则无明显变化;与对照组相比,实验组Th17细胞及移植物内IL-17表达在移植术后5 d时均明显下降.结论 特异性受体T细胞NF-κB功能缺陷可以打破受体内Tr/Th17细胞平衡,在移植术后早期促进T细胞向Tr分化而抑制向Th17细胞分化,从而阻止急性排斥反应发生,诱导耐受.     

CD8+调节性T细胞及其应用的研究进展

CD8+T淋巴细胞的亚群不仅具有细胞毒性作用,还能调节机体的免疫反应.具有免疫抑制作用的CD8+调节性T细胞(Tr)能有效阻断过强的免疫应答,维持机体的免疫稳态.随着医学科学的不断发展,近年来对CD8+Tr的分型、作用机制及其参与调节自体免疫、器官移植耐受、肿瘤免疫和感染免疫应答等方面的研究取得了巨大进展.     

转染IL-10的树突状细胞对小鼠哮喘气道表达的影响

研究小鼠重组腺病毒载体Ad-mIL-10及其转染的树突状细胞(dendritic cell,DC)对小鼠哮喘模型气道炎症的影响,探讨其相关的发病机制。用基因工程的方法构建小鼠IL-10腺病毒重组体Ad-mIL-10,并转染小鼠骨髓来源的DC。以卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏小鼠并雾化吸入激发的方法制作小鼠哮喘模型。第一次腹腔OVA致敏后静脉给予Ad-mIL-10、Ad-EGFP、Ad-EGFP转染的DC或Ad-mIL-10转染的DC,并设立哮喘模型制作对照组,观察各组小鼠血液、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的CD3+T细胞中的IL-10+IL-4-的Tr细胞及IL-10+IL-4+的Th2细胞比例变化,ELISA方法测定外周血及肺泡灌洗液中的IFN-γ、IL-4、IL-10水平,以观察Th1、Th2细胞的数量、功能变化以及IL-10的变化。结果显示Ad-mIL-10、Ad-EGFP、Ad-EGFP-DC对哮喘模型小鼠体内Tr细胞和Th2细胞的数量及肺部炎症局部的Th1及Th2细胞功能无明显影响;Ad-mIL-10转染的DC可以诱导哮喘模型小鼠体内IL-4-IL-10+的Tr细胞的增加及IL-4+IL-10+的Th2细胞的减少,并抑制哮喘模型小鼠肺部Th2细胞的功能,但对Th1细胞的功能无明显影响。提示单独应用Ad-mIL-10静脉注射产生高浓度的IL-10并不能诱导Tr细胞分化和抑制Th2细胞的激活。Ad-mIL-10转染的DC可以诱导原始T细胞向Tr细胞方向分化,并抑制Th2细胞的数量和功能。     

调节性T细胞与恶性肿瘤免疫治疗

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)是一类具有维持机体自身耐受的T细胞亚群,其分布广泛,且有不同的表型.它们可由胸腺自然产生,也可在外周血中诱导产生.这群细胞具有免疫无能和免疫抑制特性,其抑制作用机制可能是通过细胞间直接接触和/或分泌抑制性细胞因子发挥效应.去除CD4+CD25+Tr或抑制其功能可增强机体抗肿瘤作用,为肿瘤治疗提供了一种可行的免疫治疗方法.     

刊外交流

用于预防和治疗流感的异种免疫球蛋白的干 AB 片刘凤英鞍山市药品检验所北性激素对小鼠回忆应答影响的研究傅梅等天津医学院免疫学教研室人参茎叶总皂甙对白发性高血压大鼠免疫功能的影响宁宇等锦州医学院微生物教研室甲状腺疾病患者 Tu 与 Tr 细胞亚群的临床观察吴国梁南京军区总医院     

链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠胸腺中CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠胸腺中CD4 CD25 调节性T(Tr)细胞数的变化。方法将40只健康昆明小鼠随机分为4组,每组各10只。Ⅰ组小鼠腹腔注射枸橼酸钠缓冲液(0.2mL/只)作为对照;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠分别腹腔注射20、40、80mg/kg的STZ连续5d,每天1次。用尿糖试纸检测小鼠尿糖。用葡萄糖测定试剂盒检测小鼠血糖。用间接ELISA法检测小鼠自身抗体的水平。用流式细胞术检测胸腺中Tr细胞数的变化。结果Ⅱ、Ⅲ组小鼠血糖、自身抗体的水平明显高于对照组(P<0.05),胰岛中有淋巴细胞浸润,胸腺中Tr细胞数低于对照组。结论STZ可诱导小鼠产生糖尿病,但不同剂量的STZ所引起的胰腺和胸腺的病理变化不同。其中,中等剂量的STZ既可诱导小鼠发生糖尿病,又可使胸腺中Tr细胞数减少。后者可能与小鼠自身免疫性糖尿病的发生有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞的发育与胸腺CD4-CD25+细胞关联性的探讨

目的:探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells,CD4 CD25 Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25 细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4 CD25 Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25 细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4 CD25 T和CD4 CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4 CD25 Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25 细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4 CD25-T细胞增殖更强,CD4 CD25 Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25 细胞很有可能是CD4 CD25 Tr的前体。     

CD4+CD25+调节T细胞及其功能

CD4 CD25 T细胞亚群具有免疫调节功能,是机体内调节性T细胞(Teguolatory T cells,Tr)的主要类型,于1995年首次由Sakaguchi等提出.     

转录因子Foxp3与肿瘤免疫及其调控

Foxp3高表达于CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr),与其分化、发育和免疫调节功能关系密切.较为普遍的观点认为Foxp3是Tr的一个特征性分子标志.而新近的研究提出,Foxp3不仅仅表达于Tr细胞,并有人提出表面分子标志CD127才是调节性T细胞的特异性标志,争论的结果有待进一步证实.近年,Foxp3对Tr的发生、发育及免疫功能的影响已逐渐成为免疫学研究热点,Foxp3与肿瘤免疫调节的关系越来越被广泛关注,机体对Foxp3的不同的调控机制成为学者讨论的焦点,但Foxp3的确切调节机制还有待进一步深入研究.     

扩散性抗原决定簇特异性Th2/Tr1细胞被动免疫治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究

目的 :研究用扩散性抗原决定簇特异性Th2 /Tr1细胞被动免疫治疗实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)的有效性和可能性。方法 :应用髓鞘蛋白脂质蛋白 (PLP) 139 15 1诱发EAE小鼠模型 ,通过转染方式建立具有高效表达IL 10特性的抗原特异性Th2 /Tr1样T细胞系 ,在EAE小鼠发病 6d后给予静脉注射。小鼠每天称体重并进行神经功能评分。实验结束时 ,取脊髓进行PLP免疫组化染色 ,应用数字化图像分析技术进行图像分析。结果 :注射扩散性抗原决定簇MBP87 99特异性Th2 /Tr1样T细胞的治疗组小鼠的临床评分明显改善 ,并伴有复发率的下降、首次复发时间的延迟 (P <0 0 5 )。PLP免疫组化染色的图像分析结果显示 ,接受MBP87 99特异性Th2 /Tr1样T细胞治疗组小鼠脊髓内PLP像素水平为正常值的 94 37%± 0 5 2 %,而对照组小鼠为正常PLP水平的 91 94%± 0 5 0 %(P <0 0 0 1) ,与对照组比较 ,治疗组小鼠脊髓内脱髓鞘病变下降 30 %。结论 :扩散性抗原决定簇特异性Th2 /Tr1细胞被动免疫治疗可明显减少脱髓鞘病变 ,改善EAE的临床症状 ,为多发性硬化的免疫治疗提供了理论依据。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在肾脏疾病中的作用

CD4+ CD25+ 调节性T细胞(Tr)是一个具有独立功能的T细胞亚群,是机体维持自身免疫耐受的重要组成部分,在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面都有一定作用,其T细胞亚群在多种免疫性疾病中发挥重要的调节作用,但国内外有关该群细胞在肾脏疾病中作用的报道较少.     

调节性T细胞表面标记及抑制功能的对比初探

机体是免疫活化与免疫抑制平衡的整体,CD4+调节性T细胞(Tr)是主要负责负性调节的细胞,但是目前关于CD4+Tr细胞特征性的标记仍众说纷纭.转录因子Foxp3是目前公认的Tr细胞的标记,CD4+CD25+Foxp3+T细胞是经典的Tr细胞标记,然而Foxp3定位在细胞内,透膜标记后细胞丧失功能及活性,所以用此群细胞进行功能研究受到限制[1].后来不同的报道表明CD4+CD39+T细胞、CD4+CD73+T细胞以及CD4+CD25+CD127low/-T细胞也高表达Foxp3并具有免疫抑制功能[2-4],但对于各群细胞的特异性并未做比较研究.本研究通过检测正常人外周血中CD4+CD25highT细胞、CD4+CD39+T细胞、CD4+CD73+T细胞、CD4+CD25+CD127low/-T细胞占CD4+T细胞的百分率、Foxp3蛋白的表达及抑制功能试验,寻找更好的Tr细胞表面的特异性标志.     

调节性T细胞和人类系统性红斑狼疮关系的研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫系统疾病、可累及全身各个系统、脏器和组织,调节性T细胞(Tr)在其发生发展中发挥了重要的作用.目前所知的Tr具有免疫抑制的作用,包括两个亚群--CD4+Tr(CD4+CD25+Tr、Tr1和Th3细胞)和CD8+Tr(Ts细胞和CD8+CD25+T细胞).全面了解Tr和人类SLE的关系是在此领域发展新的免疫学治疗方法的基础.