一起新生儿柯萨奇病毒B组引起的暴发流行

对1993年9月至10月沈阳某妇婴医院发生的一起新生儿集体感染,用间接免疫荧光法检测了36例患儿血清中的柯萨奇B组病毒的特异性IgM抗体,28例阳性,阳性率为77.8％。病毒分离结果为:12例患儿咽拭子中1例阳性;9例患儿便标本中4例阳性;4例患儿骨髓标本中3例阳性。同时,3例死亡患儿的9份解剖标本(包括心肌、心血、心包积液、脑组织和肠组织)全部病毒分离阳性。其中2例死亡患儿的心肌分离株经中和试验鉴定为柯萨奇病毒B组3型。同时对部分(9例)患儿母亲和全部(20例)有关医护人员进行的柯萨奇B组病毒IgM抗体检测结果为,2例患儿母亲阳性。对1993年10月30日至1994年5月31日期间1616例临产孕妇的柯萨奇B组病毒IgM抗体检测中,65例阳性,阳性率为4.02％。其中1993年10月30日至11月17日期间的146例被检孕妇中,12例阳性,阳性率为8.22％。表明,1993年9～10月期间沈阳市有柯萨奇病毒流行。     

间接ELISA检测柯萨奇B组病毒抗体

用PEG处理的CoxB病毒抗原,建立了快速测定该组1～6型病毒抗体的ELISA法,其特异性与中和试验相同。用此法测定健康人330名,病毒性心肌炎患者122例,不明原因发热患者45例。结果显示:健康人群普遍存在低水平该组病毒抗体。CoxB病毒感染与病毒性心肌炎密切相关,也是原因不明发热的重要病因,因此该项检查对CoxB组病毒感染的病因诊断有重要意义。     

柯萨奇B3病毒对心肌细胞钙平衡的影响

目的 探讨柯萨奇Ｂ３病毒（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ｂ３,ＣＶＢ３）对膜离子通道及离子交换载体的影响,了解病毒感染导致细胞内钙超载的原因。方法 酶灌注法获得单个心肌细胞后用光聚焦显微镜和钙离子荧光探针（Ｆｌｕｏ ３／ＡＭ）检测ＣＶＢ３感染对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响及利用模片钳全细胞电流记录技术观察ＣＶＢ３对Ｌ型钙通道电流,钠通道电流和钠钙交换电流的影响。结果 ＣＶＢ３感染使细胞内的游离钙     

柯萨奇B3病毒引起心肌细胞凋亡的初步探索

目的 以病毒性心肌炎（ｖｉｒａｌ ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ,ＶＭＣ）细胞感染模型为基础,研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３ ｖｉｒｕｓ,ＣＶＢ３）感染与心肌细胞凋亡的关系。方法 在嗜鼠心肌柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察细胞超微结构的改变,同时取细胞悬液以流式细胞仪检测“凋亡峰”,了解细胞亡率,并采用酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）定量测定ＣＶＢ３ｍ病毒感染后１、２、４、     

柯萨奇B1病毒VP1基因序列分析

柯萨奇病毒Ｂ组 (ＣＶＢ)有 6个血清型 (ＣＶＢ1～ 6 ) ,是引起人类病毒性心肌炎等疾病的主要病原 ,近年来其发病呈上升趋势 ,目前尚缺乏有效防治措施。ＣＶＢＶＰ1基因编码其主要中和抗原 ,本研究拟克隆柯萨奇Ｂ1病毒 (ＣＶＢ1)中国分离株的ＶＰ1基因并测定其序列 ,以期为我国ＣＶＢ1感染的防治提供理论基础。1　材料和方法1 1　材料　ＣＶＢ1中国分离株由哈尔滨医科大学克山病研究所提供。ｐＭＤ18 Ｔ(ＴａＫａＲａ公司 )为 2 7ｋｂ的ＴＡ克隆载体。Ｖｅｒｏ细胞和ＪＭ10 9菌株由中国预防医学科学院病毒学研究所诊断二室提供。ＶＰ1的Ｐ…     

柯萨奇B组病毒致病性的分子生物学研究

柯萨奇B组病毒(coxsackievirus group B,CVB)是微小RNA病毒科肠道病毒属成员,病毒性心肌炎的病例中大约有20%~25%是由柯萨奇B组病毒引起.CVB的致病机制十分复杂,病毒基因组以及病毒蛋白均在病毒致病过程中发挥重要作用.因此,对柯萨奇B组病毒的基因组、结构蛋白以及某些非结构蛋白与靶细胞内分子间相互作用生物信息的认识是阐述该病分子机制的基础.     

柯萨奇病毒B感染和细胞内信号传导调控

近年来病毒性心肌炎在儿童中的发病率逐年上升,其中柯萨奇病毒B是引起病毒性心肌炎最主要的病原,随着研究的不断深入发现细胞内信号传导通路在病毒性心肌炎的发病机制中起重要作用。CVB感染宿主细胞后能对胞内多种信号传导通路进行调控,这些信号传导通路反过来又能影响CVB与CAR的结合,影响病毒在细胞内的增殖,改变被感染细胞的病理生理过程。     

柯萨奇病毒B感染和细胞内信号传导调控

近年来病毒性心肌炎在儿童中的发病率逐年上升,其中柯萨奇病毒B是引起病毒性心肌炎最主要的病原,随着研究的不断深入发现细胞内信号传导通路在病毒性心肌炎的发病机制中起重要作用。CVB感染宿主细胞后能对胞内多种信号传导通路进行调控,这些信号传导通路反过来又能影响CVB与CAR的结合,影响病毒在细胞内的增殖,改变被感染细胞的病理生理过程。     

柯萨奇B组病毒致病的分子生物学机制

本文对柯萨奇B组病毒（CVB）致病性与抗原性的近期研究内容进行了复习，CVB的每个血清型存在多种毒株。病毒基因组编码区与非编码区核苷酸决定CVB的致病力。心肌球蛋白的氨基酸序列与疾病的发生有关联。T细胞基因在CVB致病及CVB蛋白2PC在CVB性自身免疫反应中均有重要地位。     

Recombination in human coxsackievirus B5 strains that caused an outbreak of viral encephalitis in Henan, China

In 2011, human coxsackievirus B5 (CVB5) caused an outbreak of viral encephalitis in Henan, China. Complete genome sequence analysis based on two isolates showed that the 5′ half of the genome (nt 1-4540) had high similarity (>97 %) to that of CVB5 strain GU376747, and the 3′ half (nt 4700–7402) showed high similarity (>96 %) to that of human coxsackievirus B3 (CVB3) strain GQ141875. These isolates had the highest similarity (97.7 %) to the Changchun strain, based on the complete genome, rather than to other CVB5 strains isolated from Henan in recent years. There were therefore at least two groups of CVB5 circulating in Henan Province, which evolved at different rates.     

一起病毒性脑炎病因的分子生物学鉴定

目的探讨2003年山东济南地区病毒性脑炎（VE）流行病因。方法通过随机PCR及肠道病毒特异性的RT—PCR扩增获得病毒分离株特异性核酸片段，测序并进行同源性分析和多序列比对，确定病毒种类及分型。结果从患者标本中分离到5株病毒，以随机PCR获得其中1株病毒的核酸片段，经BLAST分析发现其与肠道病毒同源性最高，然后分别测得5株病毒5’端非编码区及部分VP1区核酸序列，经序列比对分析，确定5株病毒均为小RNA病毒科肠道病毒属的柯萨奇B5，并且均与2002--2004年间浙江无菌性脑膜炎流行期间分离的柯萨奇B5分离株同源性最高（95％以上）。结论柯萨奇B5是2003年济南地区VE流行的重要病因之一。     

Molecular phylogenetic and positive selection analysis of Japanese encephalitis virus strains isolated from pigs in China

Japanese encephalitis virus (JEV) is one of the most important virus which causes encephalitis. This disease is most prevalent in the south, southeast and the east region of Asia. In this study, two JEV strains, named JEV/SW/GD/01/2009 and JEV/SW/GZ/09/2004, were isolated from aborted fetuses and seminal fluid of pigs in China. To determine the characteristic of these virus isolates, the virulence of two newly JEV isolates was investigated, the result evidenced that the JEV/SW/GD/01/2009 did not kill mice, while the JEV/SW/GZ/09/2004 displayed neurovirulence with 0.925 log₁₀ p.f.u./LD50. Additionally, the full genome sequences of JEV were determined and compared with other known JEV strains. Results demonstrated that the genome of two JEV isolates was 10,976 nucleotides (nt) in length. As compared to the Chinese vaccine strain SA14-14-2, the JEV/SW/GD/01/2009 and the JEV/SW/GZ/09/2004 showed 99.7% and 97.5% identity at the nucleotide level, 99.6% and 96.7% identity at the amino acid level, respectively. Phylogenetic analysis, based on the full-length genome revealed that two JEV isolates were all clustered into genotype III compared to the reference strains. Furthermore, selection analyses revealed that dominant selective pressure acting on the JEV genome was purifying selection. Four sites under positive selection were identified: codon 521 (amino acid E-227), 2296 (amino acid NS4b-24), 3048 (amino acid NS5-521) and 3055 (amino acid NS5-528). Amino acid E-227 was proved to be related to neurovirulence. Taken together, the molecular epidemiology and functional of positively selected amino acid sites of two newly JEV isolates were fully understood, which might be helpful to predict possible changes in virulence.     

Identification and phylogenetic analysis of orf virus from goats in Taiwan

An outbreak of contagious ecthyma in goats in central Taiwan was investigated. The disease was diagnosed by physical and histopathologic examinations, and the etiology of the disease was identified as orf virus by electron microscopy and polymerase chain reaction (PCR) and sequence of major envelope protein (B2L) gene. The entire protein-coding region of B2L gene were cloned and sequenced. Phylogenetic analysis of B2L amino acid sequences showed that the orf virus identified in this outbreak was closer to the Indian ORFV-Mukteswar 59/05 isolate. This is the first report on the molecular characterization of orf virus in Taiwan.     

人血免疫球蛋白在病毒性脑炎治疗中的临床应用观察

目的 探究人血免疫球蛋白在临床上对病毒性脑炎的应用疗效.方法 将我院2013年8月至2014年2月收治的102例病毒性脑炎患者随机分为观察组和对照组,每组各51例,全部患者均符合病毒性脑炎的诊断标准.对照组患者给予阿昔洛韦抗病毒、止惊、降颅内压、冬眠疗法、加压氧和糖皮质激素等常规治疗,观察组患者在对照组的基础上给予人血免疫球蛋白,剂量为500mg/(kg·d),共3天,比较两组患者的治疗效果.结果 观察组患者各种临床症状的恢复时间明显少于对照组,住院时间也明显少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组患者在治疗后并发症的发生率和病死率明显低于对照组,差异有统计学意义(x2=18.21,P＜0.05).结论 阿昔洛韦常规联合人血免疫球蛋白可以更好地协同治疗病毒性脑炎,减少患者临床症状的恢复时间,缩短住院病程,减少并发症的发生,减轻不良反应.     

Classical swine fever virus NS5A regulates viral RNA replication through binding to NS5B and 3'UTR

In this report, classical swine fever virus (CSFV) NS5A inhibit viral RNA replication when its concentration reached and surpassed the level of NS5B. Three amino acid fragments of CSFV NS5A, 137-172, 224-268 and 390-414 individually were shown to be essential to NS5B binding. The former two fragments were independently necessary for regulation of viral RNA replication and correlated with NS5B and 3′UTR binding activity. We also found that amino acids W143, V145, P227, T246, P257, K399, T401, E406 and L413 of CSFV NS5A were essential to NS5B binding activity. Furthermore, these amino acids were shown to be necessary for viral RNA replication and infection and conserved in NS5A proteins of CSFV, BDV, BVDV and HCV. These results indicated that NS5A may regulate viral RNA replication by binding to NS5B and 3′UTR. NS5A can still regulate viral RNA synthesis through binding to 3′UTR when binding to NS5B is not available.     

以癫癎为主要症状的慢性病程的病毒性脑炎

目的：探讨以癫癎为主要首发症状且表现为慢性病程的病毒性脑炎的临床特点、诊断和治疗转归。方法：总结4例患者的临床表现、脑电图（EEG）、脑脊液（CSF）、影像学表现和病理检查及治疗转归等临床资料。结果：4例患者均以癫癎为首发和主要症状，病情虽呈进行性加重，但均表现为慢性病程及高级皮层功能受损，其中2例有颅内压轻度增高，4例中仅1例有影像学改变。患者的EEG检查均表现为α指数显著减少的慢波背景。其中2例患者曾手术治疗并对脑组织进行了病理检查，发现脑组织为炎性改变。所有患者单纯应用抗癫癎药物治疗效果不佳，经足量抗病毒治疗后病情好转或痊愈。结论：对癫癎病程在半年以内和（或）合并有其它脑皮层功能减退的症状，EEG有与年龄不相称的慢波优势活动者，在充分排除了其它相关疾病的情况下，应考虑有慢性病毒性脑炎之可能。     

云南省病毒性脑炎和不明原因发热患者的相关病毒IgM抗体检测及分析

目的 调查云南省病毒性脑炎和不明原因发热病例的发病病因.方法 在云南省部分地区采集病毒性脑炎和不明原因发热患者血清和脑脊液标本,用ELISA法检测患者标本中包括虫媒病毒、肠道病毒和呼吸道病毒中15种病毒的IgM抗体.结果 在云南省共采集病毒性脑炎患者血清和脑脊液标本526份,不明原因发热患者血清标本221份.经ELISA法检测,病毒性脑炎患者标本中乙型脑炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、版纳病毒、单纯疱疹病毒、腮腺炎病毒、登革热病毒和罗斯河病毒的IgM抗体阳性率依次为50.95％(阳性数=268)、21.48％ (113)、19.58％(103)、7.41％ (39)、3.04％(16)、1.71％(9)、1.00％(5)和0.38％(2);不明原因发热患者血清中乙型脑炎病毒、登革热病毒、单纯疱疹病毒、版纳病毒、腮腺炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、罗斯河病毒和巴马森林病毒的IgM抗体阳性率依次为21.27％ (47)、20.36％ (45)、13.12％(29)、12.67％ (28)、11.76％ (26)、4.52％(10)、1.81％(4)、1.81％(4)和0.45％(1).乙型脑炎病毒、登革热病毒、版纳病毒、罗斯河病毒和巴马森林病毒感染以7-10月为主,柯萨奇病毒、埃可病毒、单纯疱疹病毒和腮腺炎病毒感染以7-8月居多.结论 乙型脑炎病毒是云南省夏秋季病毒性脑炎流行的主要病原体,柯萨奇、埃可和单纯疱疹病毒是散发性病毒性脑炎的重要病原;登革、版纳、单纯疱疹和腮腺炎病毒是不明原因发热的重要病毒病原并可能存在罗斯河和巴马森林等蚊媒病毒的流行.     

药物与高压氧联合治疗病毒性脑炎的效果

目的 观察药物联合高压氧治疗对病毒性脑炎的疗效.方法 回顾性收集104例病毒性脑炎患者的临床资料.根据是否接受过高压氧治疗分为药物联合高压氧治疗组及单纯药物治疗组,比较两组患者的疗效和后遗症的发生率.结果 高压氧联合药物治疗组与单纯药物治疗组的有效率分别为96.4％（54/56）和87.5％ （42/48）,差异有统计学意义（X2 =8.36,P＜0.05）,后遗症的发生率分别为3.4％（2/56）和12.5％（6/48）,差异有统计学意义（X2 =5.63,P＜0.05）.高压氧联合药物治疗组平均治愈为14.8天,单纯药物治疗组平均治愈时间为22.1天,两组差异有统计学意义（t=1.56,P＜0.05）.结论 高压氧联合药物治疗病毒性脑炎的效果优于单纯使用药物治疗.     

山西省临汾市ECHO30病毒所致病毒性脑炎疫情的病原学分析

目的 对山西省临汾市一起病毒性脑炎疫情进行病原学分析.方法 用Real-timePCR方法对9份咽拭子标本进行肠道病毒核酸检测.对肠道病毒核酸阳性的标本,分别扩增肠道病毒5'UTR区和VP2基因区片段,PCR扩增产物测序后,经BLAST比对初步确定病毒型别为ECHO30;使用ECHO30的特异性引物扩增VP1基因部分片段,测序后使用MEGA 4.0软件与NCBI数据库的其他ECHO30毒株进行进化分析.结果 9份病毒性脑炎标本中有4份为肠道病毒阳性;经肠道病毒5'UTR片段、VP2基因和VP1基因测序,确定4条临汾株ECHO30病毒核苷酸序列与2004年浙江ECHO30株和ECHO30标准株Bastianni同源性较高,且4条ECHO30病毒VP1基因的差异性为0.5％.进化分析显示,本地区的4株ECHO30病毒自成一簇,且与中国大陆地区的其他参考株亲缘关系较近.结论 肠道病毒属ECHO30病毒引发山西省临汾市病毒性脑炎疫情,有必要监测本地区的病毒性脑炎病原谱.