槲皮素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的:观察槲皮素(Que)对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏病理和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨槲皮素对肾间质纤维化的保护作用及作用机制.方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型.将36只大鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、槲皮素(剂量100 mg·kg-1·d-1)治疗组(Que组).术后10 d以化学比色法测定梗阻侧肾组织匀浆中羟脯氨酸(Hyp)的含量;HE和Masson染色观察大鼠肾脏病理变化;采用免疫组织化学法、Western blot法检测各组大鼠梗阻侧肾脏α-SMA的表达部位及蛋白表达水平.结果:HE和Masson染色联合图像分析显示大鼠UUO术后10 d梗阻侧肾脏呈现肾间质纤维化,经 Que治疗梗阻侧肾脏病理改变减轻(P＜0.05).免疫组织化学和免疫蛋白印记分析显示经Que治疗梗阻侧肾脏α-SMA染色阳性表达范围和相对表达丰度明显减少(P＜0.01).同时经Que治疗后肾组织匀浆中的Hyp含量降低(P＜0.05).结论:槲皮素可以减轻UUO大鼠肾间质纤维化,其作用机制与抑制肾小管上皮细胞转化成肌成纤维细胞有关.     

与大鼠肾间质纤维化相关microRNA的初步研究

目的 观察microRNA(miRNA)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中的表达,筛选与肾间质纤维化(RIF)相关的miRNA.方法 将48只SD大鼠分为UUO组和假手术组(Sham组),时间点为术后3d、7d、14 d.Masson染色观察肾脏病理.茎环实时定量PCR检测48条miRNA在肾组织的表达.结果 术后第3天,UUO组可见灶状肾间质水肿和单个核细胞浸润 ;术后第7天,灶状间质纤维化 ;术后第14天,显著间质纤维化.Sham组肾脏未见明显病变.相对于Sham组,UUO组在术后3d、7d和14 d分别有25条、24条和21条miRNA的表达差异有统计学意义(均P＜ 0.05).其中有5条miRNA(miR-132、miR-192、miR-194、miR-29c和miR-203)在术后3、7和14 d一致上调或下调,且与肾小管间质病变程度相关(均P＜0.05).结论 在大鼠UUO模型的RIF过程中20多条miRNA存在差异表达,提示miRNA可能参与RIF的发生发展过程.miR-132、miR-192、miR-194、miR-29c和miR-203与大鼠RIF关系密切,值得进一步研究.     

热休克蛋白47在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:研究热休克蛋白47在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化(EMT)中的作用,探讨以HSP47为靶点防治肾脏间质纤维化的策略。方法:采用UUO大鼠模型,雄性SD大鼠72只随机分为假手术组(Sham组)、UUO模型组(UUO组)、UUO模型+超声联合脂质微泡+HSP47反义寡核苷酸组(antisenseODNs组)以及UUO模型+超声联合脂质微泡+HSP47正义寡核苷酸组(senseODNs组),每组18只,于术后14 d处死各组大鼠。HE和Masson染色法观察各组大鼠肾脏病理改变,Western blotting及Real-time PCR方法检测HSP47、波形蛋白(Vimentin)、紧密连接蛋白(Zona occludens-1,ZO-1)及Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的表达。结果:HE和Masson染色显示,与Sham组相比,UUO组大鼠肾间质宽度明显增加,肾小管扩张及上皮细胞变性,肾小管损伤程度、间质纤维化程度逐渐增加(P0.05)。与UUO组相比,antisenseODNs组病变程度较UUO组减轻(P0.05),senseODNs组无明显差别(P0.05)。Western blotting及Real-time PCR显示,与Sham组相比,UUO组HSP47蛋白及mRNA表达明显升高(P0.05),同时Vimentin、Col-Ⅰ蛋白及mRNA表达上调,而ZO-1蛋白及mRNA表达下调(P0.05);与UUO组相比,antisenseODNs组HSP47蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05),同时Vimentin及Col-Ⅰ蛋白及mRNA表达下调,而ZO-1蛋白及mRNA表达上调(P0.05),纤维化程度明显减轻;senseODNs组HSP47、Vimentin、Col-Ⅰ、ZO-1蛋白及mRNA表达无明显变化(P0.05)。结论:UUO模型大鼠肾小管上皮细胞EMT过程中HSP47表达上调,抑制HSP47表达能部分逆转肾小管上皮细胞EMT。     

美沙拉嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF-κB和TGF-β1表达的影响

目的 观察单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质核因子κB (NF-κB)、转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达变化,探讨美沙拉嗪干预后对其表达的影响.方法 将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SOR组)、模型组(UUO组)、美沙拉嗪治疗组(MES组),每组10只.建立单侧输尿管梗阻大鼠模型72 h后灌胃给药:MES组给予美沙拉嗪(200 mg·kg-1 ·d-1)灌胃给药;SOR组、UUO组给予等量生理盐水灌胃给药.建模成功后第10天检测各组血肌酐、尿素氮,并取梗阻侧肾组织,行HE及Masson染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学检测NF-κB p65和TGF-β1在肾间质的表达和变化.结果 ①UUO组术后第10天梗阻侧肾脏肾小管间质损害指数明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).②UUO组大鼠肾间质NF-κB p65及TGF-β1表达增加,明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).结论 单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏存在肾小管间质的炎症损伤和纤维化,美沙拉嗪通过抑制NF-κB p65和TGF-β1表达而减轻肾间质炎性损害和纤维化.     

芍药苷对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的:探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法:36只清洁级雄性SD大鼠,随机分为假手术组(SOR)、模型组(UUO)、芍药苷治疗组(PF),每组12只。以左侧输尿管结扎制作UUO模型,并用PF干预治疗。分别于术后第7、14 d各组各处死6只大鼠。采血测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),梗阻侧肾组织做HE、MASSON染色观察肾间质病变程度,免疫组化检测核转录因子-κB(NF-κB),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMAB)表达水平。结果:各组间血BUN、Scr相比差异无显著统计学意义。与假手术组相比,模型组HE,Masson染色大鼠肾间质程度明显加重,胶原沉积明显。免疫组化结果显示NF-κB,MCP-1,α-SMAB均明显升高(P <0. 05)。与模型组相比,治疗组大鼠HE,Masson染色大鼠肾间质程度及胶原沉积明显改善,免疫组化结果显示NF-κB,MCP-1,α-SMA明显下降,但仍高于假手术组(P <0. 05)。结论:芍药苷可通过抑制NF-κB,MCP-1的表达,抑制炎症反应,减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏转化生长因子β受体亚型表达的变化

目的 探讨转化生长因子β（TGF-β）Ⅰ型受体（RⅠ）、Ⅱ型（RⅡ）受体以及下游Smad蛋白在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏中表达及意义。 方法 90只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组（CON组）、假手术组（SOR组）和单侧输尿管梗阻组（UUO组）,分别于术后1、3、7、14、21 d处死,检测各组大鼠肾功能;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态改变;实时定量PCR基因芯片分析正常大鼠和肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-βⅠ、Ⅱ、Ⅲ型受体及Smad蛋白家族表达。筛选出差异表达的受体亚型,进一步应用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测和验证筛选出的差异受体亚型在不同分期肾间质纤维化大鼠肾组织的分布和表达。 结果 与CON组相比,UUO组大鼠的Scr及BUN于术后3 d开始升高（P < 0.05）,第21天达峰值（P < 0.01）;UUO组术后3 d肾间质可见明显炎性细胞浸润;14 d后出现明显肾小管萎缩;21 d可见明显肾间质纤维化。UUO组肾组织TGF-βⅠ型受体ALK-5、ALK-7和TGF-βRⅡ的mRNA表达于术后3 d上升并随梗阻时间延长逐渐增加（P < 0.05）,于14 d达到峰值（均P < 0.01）;ALK-6的mRNA表达于术后3 d下降（P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐减少,于14 d达谷值（P < 0.01）。ALK-5、ALK-6、ALK-7和TGF-βRⅡ蛋白表达与基因表达一致。Smad2/3及磷酸化（p）-Smad2/3的蛋白表达于术后3 d上升（均P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐增加,于14 d达到峰值（均P < 0.01）。 结论 在肾间质纤维化进展中不同TGF-β受体亚型存在不同的变化规律并与肾间质纤维化进展密切关联。     

Wnt-7a蛋白抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾脏上皮细胞-间充质细胞转分化

目的 观察Wnt-7a蛋白对单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾脏纤维化的拮抗作用.方法 18只雄性C57BL/6小鼠按随机数字法分为假手术组、UUO模型组和Wnt-7a蛋白治疗组,每组6只.于术后7d处死小鼠,留取梗阻侧肾组织,行Masson染色观察肾间质纤维化程度;免疫组化染色检测肾组织E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)、波形蛋白的表达;Western印迹法测定肾皮质中E-钙黏蛋白和 α-SMA的表达.结果 术后第7天,与假手术组相比,模型组体质量显著下降(P＜0.05),肾组织间质纤维化相对面积显著增多(P＜0.05),肾组织α-SMA及波形蛋白的表达显著增加(P＜0.05),E-钙黏蛋白表达显著减少(P＜0.05).与模型组相比,Wnt-7a蛋白治疗组体质量无明显改变(P＞0.05),肾组织间质纤维化相对面积显著减少(P＜0.05),α-SMA及波形蛋白的表达显著减少(P＜0.05),E-钙黏蛋白表达显著增高(P＜0.05).结论 Wnt-7a蛋白可以抑制肾脏上皮细胞,间充质细胞转分化的发生而减轻肾脏纤维化.     

intermedin对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 观察intermedin( IMD)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响.方法 雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(n=10,行左输尿管分离术)、模型组(UUO,n=10)、氯沙坦组(n=10)和IMD组(n=10),后3组行左输尿管结扎术.各组大鼠分别于术后第14、21天随机选取5只,腹主动脉采血并留取梗阻侧肾组织之后处死.HE、Masson染色观察肾组织病理变化;比色法测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及新鲜肾组织羟脯氨酸(Pro)含量;免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)、IMD的表达水平,并进行半定量分析.结果 与假手术组相比,不同时间点UUO组血BUN、Scr、肾组织Pro含量及TGF-β1、IMD的阳性表达均显著升高(P＜0.05);与UUO组相比,氯沙坦组血BUN、Scr、肾组织Pro含量及TGF-β1、IMD表达均降低(P＜0.05),IMD组除IMD表达增加外,其余均降低(P＜0.05).结论 IMD可减轻UUO肾间质纤维化,改善肾功能,其机制可能与拮抗纤维化炎性介质TGF-β1有关.     

梗阻性肾病大鼠肾组织periostin的表达及意义

目的 研究梗阻性肾病大鼠肾组织periostin表达的变化及其与肾间质纤维化的相关性.方法 18只SD雄性大鼠按随机数字法分成3组:假手术组、模型组和贝那普利组,每组6只.用单侧输尿管结扎法建立梗阻性肾病大鼠模型.RT-PCR检测各组大鼠肾组织periostin和转化生长因子(TGF) β1的mRNA表达;ELISA检测各组大鼠肾组织periostin、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、TGF- β1的蛋白水平;HE及Masson染色观察肾间质变化;免疫组化检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin、TGF-β1、AngⅡ蛋白表达显著升高(均P＜0.05).与模型组比较,贝那普利组上述蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin和TGF- β1的mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(均P＜0.05),而贝那普利组periostin和TGF- β1的mRNA表达则显著下调(均P＜0.05).肾组织periostin蛋白表达与AngⅡ、TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达以及肾间质纤维化积分均呈正相关(r值分别为0.652、0.781、0.776和0.825,均P＜0.05).结论 梗阻性肾病大鼠肾组织periostin呈高表达,其可能参与了梗阻性肾病肾间质纤维化进程.     

干细胞因子联合粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞促进单侧输尿管梗阻大鼠肾脏损伤的修复

目的 研究干细胞因子（SCF）联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠骨髓干细胞对肾间质中微血管、纤维化程度和肾功能的影响,并探讨其对微血管影响的可能机制。 方法 128只大鼠按数字随机法分为假手术组（Sham组）、SCF联合G-CSF动员组（SCF-G组）、UUO组、UUO+SCF-G组。于实验第 5、14、21、28天每组各随机抽取8只处死,检测Scr、肾间质CD34阳性表达细胞数目和Ⅷ因子阳性表达细胞数目、肾间质纤维化和间质病理损害积分、肾皮质血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和血小板反应蛋白1（TSP-1）mRNA的表达。 结果 (1)UUO组2周时可见到肾间质纤维化伴肾小管周微血管的丢失。（2）UUO+SCF-G组肾间质干细胞归巢数目明显高于UUO组和Sham组（P < 0.05）。（3）UUO+SCF-G组肾小管周微血管指数减少出现的时间晚于UUO组（P < 0.05）。（4）第14、21、28天UUO+SCF-G组间质化纤维程度和肾小管损伤程度均轻于UUO组（P < 0.05）。（5）UUO+SCF-G组术后VEGF mRNA表达下调出现的时间晚于UUO组,且表达均高于同期UUO组 （P < 0.05)。（6）UUO+SCF-G组术后TSP-1 mRNA表达增高出现的时间晚于UUO组,且表达均低于同期UUO组（P < 0.05）。（7）在UUO组和UUO+SCF-G组中,肾小管周微血管指数与Scr、间质纤维化积分和肾小管间质病理积分均呈负相关;肾皮质VEGF mRNA表达与肾小管周微血管指数呈正相关;肾皮质TSP-1 mRNA表达与肾小管周微血管指数呈负相关。 结论 （1）UUO大鼠存在肾小管周微血管丢失,并与肾间质纤维化及间质病理损伤相关。（2）联合应用SCF和G-CSF动员骨髓干细胞可以归巢至受损的肾脏,有助于减少肾小管周微血管丢失,并进而减轻肾间质纤维化和间质损害,保护肾功能。（3）联合应用SCF和G-CSF可以上调肾皮质VEGF mRNA水平和下调TSP-1 mRNA水平,这可能是其促进内皮细胞修复及保护肾间质微血管损伤的机制之一。     

参附注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏肝细胞生长因子表达的影响

目的：探讨单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化发生过程中肝细胞生长因子（HGF）的表达及中药参附注射液对其的影响。方法：采用单侧输尿管结扎（UUO）制造梗阻性肾病模型，将56只大鼠随机分为对照组（假手术组）、手术组（UUO组）和治疗组（UUO＋参附），术后7d、14d观察肾组织病理改变，应用免疫组织化学方法检测肾组织中HGF的表达。结果：与对照组相比，手术组肾间质出现了明显的纤维化，HGF的表达在术后第7天明显增加，第14天较第7天减弱，与手术组相比，治疗组肾间质纤维化明显减轻，而且HGF的表达在术后第7天明显上调，第14天较第7天上调更明显，有统计学差异（P〈0．05）。结论：参附注射液可以上调肾组织HGF的表达，减轻肾小管一间质纤维化，发挥肾保护作用。     

三七总皂苷对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织BMP-7及TGF-β1/samds信号传导通路的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织骨形成蛋白-7(BMP-7)及TGF-β1/Smads信号传导通路的影响。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、肾康注射液组(对照组)、PNS低剂量组(低剂量组)、PNS高剂量组(高剂量组),每组10只,除假手术组,其余各组用UUO法建立肾间质纤维化动物模型,术前1d起各组给予相应浓度和剂量的药物,术后第14天处死所有大鼠,检测大鼠血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)变化,梗阻侧肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数(TII),免疫组化法检测BMP-7、TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达。结果:与模型组相比,PNS和肾康注射液能明显降低UUO大鼠术后14dScr、BUN(P<0.05);对梗阻侧肾组织HE染色、PAS染色进行TII评分发现,2个试验组大鼠肾小管损伤指数显著低于模型组(P<0.01);Masson染色观察发现,2个实验组大鼠肾小管间质病变明显轻于模型组;免疫组化法染色并对其灰度值测定发现,与模型组相比,2个试验组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达下调(P<0.01),BMP-7、Smad7在肾脏组织的表达上调(P<0.01)。结论:PNS可能通过干预BMP-7/Smads/TGF-β1信号转导通路抑制了TGF-β1信号的细胞内转导,而起到抗肾间质纤维化的作用。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对Smad7／转化生长因子β1／整合素连接激酶信号通路的影响

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对大鼠单侧输尿管结扎梗阻致肾间质纤维化的作用及其可能机制。方法54只SD大鼠随机分为假手术对照组（C组）、模型组（M组）和AcSDKP治疗组（T组）,其中M组建立单侧输尿管结扎梗阻致。肾间质纤维化模型,T组并给予AcSDKP治疗。术后第3、7和14天处死各组大鼠,并将肾的1／2制作切片行HE和Masson染色观察肾脏病理学动态改变,免疫组化法检测。肾间质组织内转化生长因子81和Smad7、α-平滑肌肌动蛋白的表达。RTPCR测肾小管上皮细胞整合素连接激酶mRNA。结果HE染色及Masson染色显示,M组术后随时间延长肾小管间质病变加重,程度同期最重,T组病变程度介于同期M组及C组之间。C组基本正常,结果有统计学差异（P〈0．05）。免疫组化及RT-PCR结果：M组转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白和整合素连接激酶mRNA表达随时间延长逐渐上调,程度同期最高。T组蛋白表达程度介于M组及C组之间。C组表达最低,结果有统计学差异（P〈0．05）;同期T组肾间质Smad7表达明显上调,低于同期C组,但高于M组,结果有统计学差异（P〈0．05）。结论AcSDKP对大鼠肾间质纤维化有抑制作用,其机制可能通过增加大鼠UUO模型中Smad7蛋白的表达抑制转化生长因子β1／整合素连接激酶信号转导。     

甘草酸二胺对输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及机制

目的：探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的作用及其机制。方法：以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）为模型，在不同的时间点（7d、14d、28d）观察梗阻侧肾间质纤维化指数；致纤维化的转化生长因子β1（TGF-β1）的表达情况；肾皮质中与肾脏纤维化相关的Smurf2、Smad7信号蛋白等的mRNA及蛋白表达。结果：（1）随着梗阻时间的延长，肾间质纤维化程度逐渐加重，Smurf2基因和蛋白质明显上调，呈时间依赖性（P〈0．01）；Smad7蛋白呈时间依赖性下调（P〈0．01），Smad7基因在各个时间点无明显变化；TGF-β1基因在UUO后第7d达高峰，此后逐渐下降，但仍然高于假手术组（P〈0．01）。（2）甘草酸能改善UUO所致的肾间质纤维化程度（P〈0．01），下调肾脏组织TGF-β1基因的表达（尸〈0．01）；减少Smurf2基因和蛋白质的表达，同时上调TGF-β1信号传导中抑制性因子Smad7的表达（P〈0．01）。结论：甘草酸二胺能保护UUO所致的肾间质纤维化损伤。其可能的作用机制为减少Smurf2核酸和蛋白质的表达，增加抗纤维化作用的Smad7蛋白表达；减少TGF-β1表达，阻止TGF-β1信号传导，从而阻断肾间质的纤维化。     

祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的：观察祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法：将90只雄性Wistar大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、尿毒清组（对照组）、祛毒颗粒低剂量组（低剂量组）、祛毒颗粒高剂量组（高剂量组）,每组18只,除假手术组,其余各组用单侧输尿管梗阻法（UUO）建立肾间质纤维化动物模型,术前1天起各组给予相应浓度和剂量的药物,分别在术后第3天、7天、14天分批处死大鼠,检测大鼠尿N-已酰-β-氨基葡萄糖苷（NAG）酶、血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）变化,梗阻侧肾组织行HE染色和Masson染色,HE染色观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数（tubulointerstitial injuryindex,TII）,Masson染色测定肾间质胶原面积,免疫组化法检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形成蛋白（BMP）-7在肾组织的表达。结果：与模型组及对照组相比,祛毒颗粒能明显降低UUO大鼠术后14d的尿NAG酶、Scr、BUN（P〈0.05）;对梗阻侧肾组织HE染色进行TII评分发现,不同时间点,2个试验组大鼠肾小管损伤指数低于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;Masson染色测定肾间质胶原面积,2个实验组大鼠肾间质胶原面积少于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;免疫组化法染色发现,与模型组和对照组相比,2个试验组大鼠CTGF、ColⅠ在肾组织的表达下调（P〈0.05）,HGF、BMP-7在肾脏组织的表达上调（P〈0.05）。结论：祛毒颗粒具有改善肾间质纤维化的作用,其机制可能与下调UUO大鼠致纤维化因子CTGF、ColⅠ在肾脏的表达,上调抗纤维化因子HGF、BMP-7在肾脏的表达有关。     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型的影响及其可能机制.方法 将30只大鼠随机分为3组,每组10只:假手术组、模型组、姜黄素组.模型组和姜黄素组行右侧输尿管接扎术,假手术组只游离不接扎.术后第14天处死各组中的大鼠,股动脉取血,检测血清肌酐、尿素氮;留取梗阻侧肾脏,Maason染色观察肾间质纤维化程度,免疫组织化学方法测定TGF-β1、CTGF的表达情况,RT-PCR技术榆测肾组织TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA表达.结果 姜黄素降低了BUN、Scr的含量,同时姜黄素显著减少了大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达,并有效改善了肾脏的病理学损伤.结论 姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠有较明显的保护作用,这可能与其能减少大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达有关.     

内质网应激相关凋亡途径参与单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

目的 探讨内质网应激（ERS）相关凋亡途径在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化发生、发展中的作用。 方法 健康雄性Wistar大鼠25只,按随机数字表法分为UUO模型组（n=18）和假手术组（n=7）,UUO模型组行左侧输尿管结扎术,假手术组仅分离输尿管不结扎,分别于术后3 d、7 d、14 d处死各组大鼠,行HE和Masson染色,观察肾脏病理变化;比色法测定肾组织羟脯氨酸（HYP）含量;免疫组化法检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）;原位末端标记法（TUNEL）与DNA电泳观察肾小管间质细胞凋亡情况;RT-PCR法检测梗阻侧肾组织ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78（GRP78）mRNA表达变化;Western印迹法分析凋亡相关蛋白半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）和GRP78的蛋白表达变化。 结果 与假手术组比较,UUO模型组肾脏病理改变加重,肾间质纤维化程度随梗阻时间延长逐渐加重,肾组织HYP含量显著升高（P < 0.05）,肾组织α-SMA也在肾小管间质细胞广泛表达,TUNEL染色及DNA琼脂糖凝胶电泳提示大量的肾小管间质细胞凋亡。UUO模型组GRP78 mRNA表达于术后3 d即发生显著上调,而蛋白表达在术后7 d开始出现显著变化,与假手术组差异均有统计学意义（均P < 0.01）;在此后观察期间内GRP78 mRNA和蛋白均持续高水平表达。模型组大鼠肾组织caspase-3的蛋白表达在UUO术后3 d即有显著上调（P < 0.05）,且随着梗阻时间延长进行性升高,于术后7 d、14 d增多更为显著,与假手术组差异均有统计学意义（P < 0.05）。相关分析显示GRP78蛋白表达与肾组织HYP含量和caspase-3蛋白表达均呈正相关（r = 0.657,P < 0.01;r = 0.714,P < 0.01）。 结论 UUO早期即可诱导ERS标志蛋白表达变化,触发ERS。长期ERS可诱导肾小管间质细胞凋亡;caspase-3介导的ERS相关凋亡途径可能参与了肾间质纤维化过程。     

低氧诱导因子1α／结缔组织生长因子在肾间质纤维化中的表达及关系

目的探讨低氧诱导因子1α与结缔组织生长因子致肾间质纤维化的作用及关系。方法应用单侧输尿管结扎手术建立单侧输尿管结扎模型,将32只健康成年的雄性SD大鼠随机分为2组,假手术组（Sham组,n=16）、模型组（n=16）。分别于术后第7天、第14天处死大鼠,留取肾组织行HE染色并观察病理变化。应用原位杂交检测低氧诱导因子1a、结缔组织生长因子在肾小管间质中的表达,并检测二者之间的相关性。结果与7天对照组比较,7天模型组肾间质面积明显增加（P〈0．01）。与14天对照组比较,14天模型组肾问质面积也明显增加（P〈0．01）。与7天模型组比较,14天模型组大鼠肾脏间质纤维化显著增加（P〈0．05）,肾间质面积（0．51±0．04）、（0．82±0．06）,表明梗阻性肾病大鼠肾脏组织形态学呈进行性损害。7天模型组肾间质HIF1α及CTGFmRNA的表达较7天对照组均显著增加（均P〈0．01）。14天模型组肾间质HIF1αmRNA的表达明显增加（P〈0．05）,为（19．69±4．11）、（30．45±6．27）,CTGFmRNA的表达亦明显增加（P〈0．05）,分别为（21．38±4．26）、（37．18±7．52）,且HIF1αmRNA的表达与CTGFmRNA的表达在第7天、14天均呈正相关（分别为r=0．697,P〈0．01;r=0．715,P〈0．01）。结论低氧诱导因子1α及结缔组织生长因子促进了肾间质纤维化发生和发展的过程,二者之间相关性显著。     

NGAL、MMP-9及TIMP-1在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达

目的：动态观测单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中中性粒细胞相关脂质运载蛋白（NGAL）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP—1）的表达变化,探讨NGAL分子在肾小管间质纤维化发展中的作用机制。方法：将48只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组及假手术（SOR）组,每组24只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第1、4、7、14天分别处死每组6只大鼠,取左肾行HE＆Masson染色,并用免疫组化EI,iVision‘M1plus法检测肾组织NGAL、MMP-9及TIMP-1的表达。结果：HE、Masson染色切片示：UUO组间质损伤指数在术后各时间点高于SOR组（P〈0．05）。免疫组化结果显示：UUO组术后各时间点NGAL表达高于SOR组（P〈0．05）,与肾小管损伤指数呈明显负相关;MMP-9在uu0术后早期（1～7天）有所上升,随着病程进展,7～14天表达有所下降;TIMP1在UUO术后表达逐渐增强;NGAI。与MMP-9／TIMP-1比值呈明显正相关。结论：NGAL在肾间质纤维化早期发挥负向调节作用,对调节MMP-9／TIMP-1的平衡亦发挥重要作用。