慢性乙型肝炎患者血清TNF_α及IL-6水平与HBV前C区基因变异关系的研究

目的：探讨细胞因子（ＴＮＦα及ＩＬ－６）水平与ＨＢＶ前Ｃ区变异之间的关系。方法：应用ＥＬＩＳＡ法及３′－碱基特异性聚合酶链反应法对４３例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者进行血清ＴＮＦα、ＩＬ－６含量及ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变的检测。结果：ＨＢＶ前Ｃ区突变株，检出率为４８．８％（２１／４３），突变株感染组ＴＮＦα、ＩＬ－６水平明显高于野生株感染组。结论：慢性乙型肝炎患者血清ＴＮＦα及ＩＬ－６水平与ＨＢＶ前Ｃ区基因变异有密切关系，机体免疫压力的增高可能是导致ＨＢＶ前Ｃ区变异的重要原因之一     

乙型肝炎病毒毒株X基因/C基因启动子的热点变异

目的ＨＢＶ／Ｘ基因存在调控ＨＢＶ复制的调节序列,Ｘ基因变异将影响这些调节序列功能,研究中国ＨＢＶ毒株Ｘ基因／Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区的变异情况。方法设计ＢＣＰ下游反义链错配引物,将点突变附近的一个碱基（ｎｔ１７６７）由Ａ→Ｔ,则正好可在ＢＣＰ变异株中引进一个ＢｃｌＩ（Ｔ↓ＧＡＴＣＡ）酶切位点,结合限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）筛检１４３例中国人感染的ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区变异,并与前Ｃ区变异比较。结果１１４例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性ＨＢＶ感染者,ＢＣＰ区和／或前Ｃ区变异者４９例（４３％）,ＢＣＰ变异者３７例（３２％）。ＢＣＰ变异无论在ＨＢｅＡｇ阳性或阴性慢性肝炎病例的发生率均显著高于慢性ＨＢＶ无症状感染者。ＢＣＰ可与前Ｃ终码变异共存或单独出现。结论在中国ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区存在热点变异。ＨＢＶ毒株ＢＣＰ变异可能影响ＨＢＶ前Ｃ基因组ｍＲＮＡ转录,是ＨＢＶ感染持续和肝病变进展的原因之一。     

HBV前C/C基因EB病毒载体的构建及在HepG2细胞中的表达

目的研究ＷＢＶ前Ｃ／Ｃ区基因变异的生物学意义。方法构建ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ区基因ＥＢ病毒表达载体,采用脂质体介导方法将重组质粒转染到ＨｅｐＧ２细胞,并表达ＨＢｅＡｇ。结果重组质粒经ＰＣＲ和酶切鉴定均阳性,转染的细胞目的ＤＮＡ和表达蛋白检测均阳性。结论采用ＥＢ病毒载体构建ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因的表达载体,能在ＨｅｐＧＺ细胞中稳定表达目的蛋白。由于ＥＢ病毒载体以附着体的形式复制,不整合于宿主染色体基因中,拷贝数稳定,适合于体外研究ＨＢＶＣ／Ｃ基因变异的生物学意义。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

慢性乙型肝炎患者血清TNFα及IL—6水平与HBV前C区基因变异关？…

目的：探讨细胞因子（ＴＮＦ，及ＩＬ－６）水平与ＨＢＶ前Ｃ区变异之间的关系。方法；应用ＥＬＩＳＡ法及３‘－碱基特异性聚合酶链反应法对４３例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者进行血清ＴＮＦ，ＩＬ－６含量及ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变的检测。结果：ＨＢＶ前Ｃ区突变株，检出率为４８．８％，突变株感染组ＴＮＦα、ＩＬ－６水平明显主于野生株感染组。结论．：慢性乙型肝炎患者血清ＴＮＦ，及ＩＬ－６水平与ＨＢＶ前Ｃ区     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

PCR检测HBVDNA的初步研究

在我国 ,ＨＢＶ是引起病毒性肝炎的主要病原之一。目前对其感染导致的乙肝特异性诊断仍以ＥＩＡ或ＲＩＡ为主。近年来 ,国内外学者一直尝试利用ＲＣＲ法检测ＨＢＶ。本文设计了一对ＨＢＶ引物 ,并对之检测ＨＢＶ的扩增产物进行了探讨。1　材料与方法1.1　标本来源用于确定ＰＣＲ产物分子量的ＨＢＶ阳性血清(ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＤＮＡＰ、ＨＢＶＤＮＡ均阳性 ) ,及ＨＢＶＤＮＡ阴性血清由北京医科大学肝病研究所惠赠。用于临床考核的ＨＢｅＡｇ阳性血清的来自本院门诊及住院病人 ,阴性血清取自健康献血员。1.2　引物通过计算机检索Ｇｅ…     

肝病患者血清中AFP,HBV—DNA,抗—HcV存在状况的研究

本检测２０３例肝病患血清中ＡＦＰ，ＨＢＶ－ＤＮＡ和抗－ＨＣＶ，其阳性结果为：ＡＦＰ４２．４％，ＨＢＶ－ＤＮＡ６７．９％，抗－ＨＣＶ２３．６％，在８７例ＡＦＰ阳性血清中，ＨＢＶ－ＤＮＡ和抗－ＨＣＶ阳性率分别为７２．４％和３５．８％，其中：ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性抗－ＨＣＶ阳性率４５．８％，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性抗－ＨＣＶ阳性率３１．７％，结果表明，ＨＢＶ与ＨＣＶ感染与原发性肝癌（ＰＨＣ）的发生，关系十     

乙型肝炎病毒前C区1896位点突变的PCR分析法

目的 分析乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区突变与ＨＢＶ感染患者肝脏病变的关系，建立ＨＢＶ前Ｃ区１９８６位点突变的ＰＣＲ分析方法。方法 根据ＨＢＶ前Ｃ区ＤＮＡ序列，采用３′－碱基特异性聚合酶链反应分析ＨＢＶ第１８９６位核苷酸的突变，并检测了１２６例临床血清标本。结果 成功分析了ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变，１２６例临床标本突变株检出率为４７．２％。结论 本法操作简单，重复性好，为临床ＨＢＶ的研究和病情分     

HBV,HCV,HGV重叠感染的回顾性研究

目的 了解１０年前我国ＨＢｓＡｇ阳性献血员ＨＢＶ,ＨＣＶ,ＨＧＶ重叠感染状况。方法 采用逆转录套式ＰＣＲ技术检测血清中ＨＢＶＲＮＡ、ＨＧＶＲＮＡ、免疫ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ。结果 发现在ＨＢｓＡｇ阳性献血员中,ＨＢＶＤＮＡ阳性率９０％,ＨＣＶＲＮＡ阳性率２０％,ＨＧＶＲＮＡ阳性率６％,三重感是性率３％。结论ＨＢｓＡｇ阳性献血员吸较高比例的双重感染,且以ＨＣＶ感染为主。     

慢性乙型肝病患者血清抗HBs阳性临床意义再评价

对１０２例抗ＨＢｓ阳性慢性乙肝病进行临床分析，发现抗ＨＢｓ与其他血清ＨＢＶ标志物同时检出者以抗ＨＢｓ，抗ＨＢｓ／抗ＨＢｃ同时阳性多见（３２．４％），其次为抗ＨＢｓ与ＨＢＶＤＮＡ或ＨＢｓＡｇ共存（２４．５％，１３．７％），推测这些患者可能有ＨＢＶ前Ｓ／Ｓ区基因变异株感染。资料显示，抗ＨＢｓ阳性ＣＨＢ患者肝功能损害程度相对较轻，但外周血淋巴细胞亚群分布及肝纤维化指标测定值，与抗ＨＢｓ阳性对照组相比差异     

慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变与临床的关系

目的：探讨慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区基因变异与临床的关系。方法：应用３′－碱基特异性ＰＣＲ法（３′－ＢＳ－ＰＣＲ）。结果：５５例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者中检出突变株２５例。突变株的检出主要集中在抗－ＨＢｅ阳性患者中，并随肝损害加重而增加，重型肝炎患者突变株检出率最高。ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染者高于ＨＢＶ单纯感染者。结论：突变株感染者病情较重，预后差；抗－ＨＢｅ的出现并不完全意味着病情的缓解；ＨＣＶ的重叠感染可能是导致ＨＢＶ前Ｃ区基因突变的原因之一。     

血液透析患者庚型、丙型及乙型肝炎病毒感染的检测及意义

目的 评价血液透析患者庚型肝炎,乙型肝炎,丙型肝炎感染状况及对肝功能的影响。方法 采用逆转录聚合酶链反应法对６８例血液透析患者血清标本进行检测。结果 ６８例患者中血清中有６例ＨＧＶ ＲＮＡ阳性。这６例患者同时重叠ＨＣＶ感染,其中２例ＨＢＶ,ＨＣＶ,ＨＧＶ重叠感染。１３例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性,９例ＨＢＶ ＤＮＡ阳性。结论血透患者是ＨＧＶ感染的高危人群,输血中血透患者感染ＨＧＶ,ＨＣＶ,ＨＢＶ的主要途径     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

乙型肝炎病毒前S基因产物及相应抗体临床应用的研究进展

乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)外膜主要含有3种蛋白质,由Ｓ基因编码的主要外膜蛋白,即ＨＢＶＨＢｓＡｇ,由Ｓ基因与前Ｓ1区共同编码的外膜中蛋白前Ｓ2蛋白以及由Ｓ基因、前Ｓ2区与前Ｓ1区共同编码的前Ｓ1蛋白。目前临床除检测传统ＨＢＶ五项指标、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶＤＮＡ多聚酶外,国内外相继开展了ＨＢＶ前Ｓ1抗原、前Ｓ2抗原及相应前Ｓ2抗体检测,为进一步研究ＨＢＶ感染后增殖、传染、愈后和转归提供了新的指标。但由于所用方法敏感性差异,Ｓ基因及前Ｓ区表达产物及抗体的临床意义,与ＨＢＶ五项指标及ＨＢＶＤＮＡ的相互关系报道各异。本文拟就…     

应用多重套式PCR同时检测病毒性肝炎患者血清中HBV DNA和HCV RN …

目前国内外虽已有对ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ用ＰＣＲ方法一次性同时检测技术,但由于广泛昨杂,易污染,费用高,在基层医院难以开展,笔者根据ＨＢＶＤＮＡ在血清中含量较多,易于提取的特点,将ＨＢＶ的引物用量由两次扩增减为一次扩增,并将蛋白酶Ｋ改为异硫氰酸胍一饱和酚抽提,使反应时间有所缩短,又使成本费减少近３０％,经对９２例患者血清的检测,结果发现与同份血清单一ＰＣＲ方法检测ＨＢＶ和ＨＣＶ感染阳性的总符合     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV.DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性率分别为７６．７％和４５％，尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳性或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ．ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高血清，提示ＨＢＶ．ＤＮＡ普遍存在乙肝患者甚至ＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病病变反复活动及病毒重复感染的来源。因此也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传     

斑点杂交法检测银屑病皮损中的HBV DNA

用斑点杂交法检测了２０例银屑病皮损中ＨＢＶＤＮＡ的存在情况，并与血清中ＨＢＶＤＮＡ及其表达产物进行对比研究，结果显示，２０例中６例皮肤员ＨＢＶＤＮＡ阳性，其中４例血清斑点杂交及ＨＢＶ感染标志阴性，提示银屑病发病可能和ＨＢＶ感染有关。     

乙型肝炎病毒前C区基因变异的研究

作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ｅ系统阳性的慢件乙型肝炎（乙肝）患者血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，筛选出乙肝ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性／乙肝ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阴性和ＨＢｅＡｇ阴性／抗—ＨＢｅ阳性各２０份ＰＣＲ阳性血清，分别用人工合成的ＨＢＶ前Ｃ区基因寡核苷酸探针Ｍ０（无突变），Ｍ１（１点突变），Ｍ２（２点突变）进行斑点杂交，结果发现ＨＢｅＡｇ阴性／抗—ＨＢｅ附性慢性乙肝患含有１７例（占８５％）在１８９６位核苷酸发生点突变，形成终止密码，其中１０例（占５０％）发生２点突变。选突变ＰＣＲ产物直接测序，同样证实点突变的存在。提示乙肝患含ＨＢｅＡｇ阳性自然转换为抗—ＨＢｅ阳性、并不一定是病毒复制减弱，而可能足ＨＢＶＤＮＡ前Ｃ区发生了基因变异。     

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎血清HBV-DNA定量检测及意义

目的　为探讨ＨＢｅＡｇ 阴性ＣＨ－ Ｂ 患者血清ＨＢＶ－ ＤＮＡ 定量检测的意义。方法　应用定量ＰＣＲ法对经肝穿活检确诊的５２ 例ＨＢｅＡｇ 阴性,３３ 例ＨＢｅＡｇ 阳性ＣＨ－ Ｂ 血清进行了ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量检测,并将ＨＢｅＡｇ 阳性与阴性患者ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量、ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平与低水平患者肝脏病理损害分别进行了比较。结果　ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量ＨＢｅＡｇ 阳性患者显著高于阴性患者,ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平患者肝脏病理损害明显重于低水平患者（ 均Ｐ＜ ００５） 。结论　提示血清ＨＢｅＡｇ 阳性;确为判断ＨＢＶ 复制的良好指标; ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平者,尤以重视,及时给予抗病毒等治疗实属必要。