半边旗抗肿瘤有效成分对HL-60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞周期的影响(英文)

研究半边旗（Ｐｔｅｒｉｓ ｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａ 　Ｌ, ＰｓＬ）有效成分５Ｆ,６Ｆ,Ａ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶活性和细胞周期的影响．方法：应用ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ作为底物测定酶的活性;细胞周期用流式细胞仪测定;应用噻唑蓝（ＭＩＴ）法测定药物对细胞生长的抑制率．结果：５Ｆ,６Ｆ,Ａ均能够抑制ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅰ,Ⅱ的活性,化合物６Ｆ作用细胞２４ ｈ后,可升高 Ｓ期和 Ｇ２／Ｍ期细胞,同时降低Ｇ０／Ｇ１期细胞,低浓度６Ｆ（５７．８和 １１５．６ｎｍｏｌ·Ｌ－１）与金雀异黄素（Ｇｅｎ）合用可增强它对ＨＬ－６０细胞的杀伤作用, ｑ＞１．１５．结论： ５Ｆ, ６Ｆ和 Ａ明显抑制ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶的活性;６Ｆ阻断细胞于 Ｇ２／Ｍ期,增强Ｇｅｎ对 ＨＬ－６０细胞的杀伤作用。     

海南哥纳香醇甲GHM—10对L1210细胞DNA分子结构及拓扑异构酶Ⅱ活性的影响

目的：研究海南哥纳香醇甲（ＧＨＭ１０）抑制癌细胞ＤＮＡ合成的作用机制。方法：用单细胞凝胶电泳法检测ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子的损伤,碱洗脱法测定ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ单链长度的影响,用ＧＨＭ１０对超螺旋ｐＵＣ１８ＤＮＡ的解旋能力测定它对ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ活性的影响。结果：Ｌ１２１０细胞用ＧＨＭ１０（４～１０）μｇ·ｍｌ－１处理４５ｈ后,ＤＮＡ分子受损,表现为电泳后在荧光显微镜下可见彗星状拖尾。ＧＨＭ１０（４～２５）μｇ·ｍｌ－１处理Ｌ１２１０细胞５ｈ,可引起ＤＮＡ单链断裂。Ｌ１２１０细胞或从Ｌ１２１０细胞分离的蛋白质在用ＧＨＭ１０处理后,ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ的活性均被抑制。结论：ＧＨＭ１０可引起Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子损伤;无论在细胞内还是细胞外,ＧＨＭ１０可抑制拓扑异构酶ＩＩ的活性。     

低浓度N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍对HeLa细胞DNA聚合酶及拓扑异构酶Ⅱα mRNA表达水平的影响

利用定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ聚合酶（Ｐｏｌα，β，δ，ε）及拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐⅡα）ｍＲＮＡ表达水平的影响．发现经０．２μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＮＮＧ处理２．５ｈ后，ＨｅＬａ细胞ＰｏｌβｍＲＮＡ水平在６－２４ｈ内升高约１倍，而Ｐｏｌα，δ，ε及ＴｏｐＩαｍＲＮＡ水平则无明显改变．提示ＰｏｌβｍＲＮＡ水平改变可能参与ＭＮＮＧ诱发细胞遗传不稳定的发生．     

Effect of quercetin on activities of protein kinase C and tyrosine protein kinase from HL-60 cells

目的：研究槲皮素（Ｑｕｅ）对ＨＬ６０细胞中细胞溶质和胞膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）、酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响．方法：活细胞数的计数用苔盼兰拒染法；用组蛋白ⅢＳ、［γ３２Ｐ］ＡＴＰ与ＰＫＣ酶液一起保温测定ＰＫＣ活性；用聚谷氨酸·酪氨酸（４∶１）多肽）、［γ３２Ｐ］ＡＴＰ与ＴＰＫ酶液一起保温测定ＴＰＫ活性．结果：Ｑｕｅ对ＨＬ６０细胞的增殖有抑制作用，呈剂量依赖关系，处理４８小时后，其ＩＣ５０为２９（２２－３７）μｍｏｌ·Ｌ－１；在体外，Ｑｕｅ能强烈抑制细胞溶质ＰＫＣ和胞膜ＴＰＫ活性，其ＩＣ５０分别为：３１（２０－４８）μｍｏｌ·Ｌ－１，２４（１３－４５）μｍｏｌ·Ｌ－１，但不影响胞膜ＰＫＣ和细胞溶质ＴＰＫ活性．结论：这为Ｑｕｅ对癌细胞的生长有抑制作用与其抑制ＰＫＣ和／或ＴＰＫ有关提供了直接证据．     

HEK293细胞—— 一种研究受体Ca~(2+)调控功能的理想模型

目的了解ＨＥＫ２９３细胞Ｃａ２＋代谢的生物学特性。方法用Ｆｕｒａ－２荧光探针双波长测定细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）方法，观察多种能改变细胞内Ｃａ２＋代谢的药物对天然的和转染了α１Ｂ肾上腺素受体ｃＤＮＡ的ＨＥＫ２９３细胞［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果在含１．５ｍｍｏｌＬ－１ＣａＣｌ２的缓冲液中，ＫＣｌ５０ｍｍｏｌＬ－１和ＢａｙＫ８６４４１０μｍｏｌＬ－１不影响ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ；ｃｙｃｌｏｐｉａｚｏｎｉｃａｃｉｄ（ＣＰＡ０．０１，０．１，１０μｍｏｌＬ－１）能浓度依赖性地引起ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ呈双相升高，其中的Ｃａ２＋内流相不受ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０μｍｏｌＬ－１）的影响；但可被１ｍｍｏｌＬ－１ＮｉＳＯ４完全抑制。在无Ｃａ２＋的缓冲液中，咖啡因２０ｍｍｏｌＬ－１和ｒｙａｎｏｄｉｎｅ１μｍｏｌＬ－１均不影响ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ。先用ＣＰＡ（３０μｍｏｌＬ－１）耗竭ＨＥＫα１Ｂ细胞内Ｃａ２＋贮存池后，肾上腺素１０μｍｏｌＬ－１能进一步升高［Ｃａ２＋］ｉ。在有Ｃａ２＋或无Ｃａ２＋的缓冲液中，肾上腺素均可引起ＨＥＫα１Ｂ细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高。结论ＨＥＫ２９３细胞?     

（Sp）－8－氯腺苷－3＇，5＇－环磷酸辛酯对人白血病HL－60细胞的诱导分化作用

（Ｓｐ）－８－氯腺苷－３＇，５＇－环磷酸辛酯（Ｓｐ－ｏｃｔｙｌ８－ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ３＇，５＇－ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＯＣＣ）对人白血病ＨＬ－６０细胞有生长抑制和分化诱导作用，该作用与ＯＣＣ浓度和处理时间呈正相关，为不可逆性。流式细胞光度术发现，ＯＣＣ阻断ＨＬ－６０细胞周期于Ｇ１期。参入实验证实，ＯＣＣ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ合成有显著抑制作用，但不影响ＲＮＡ和蛋白质合成。ＯＣＣ能直接激活ＨＬ－６０细胞浆中提取的蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ），并抑制它与ｃＡＭＰ的结合。经ＯＣＣ处理的ＨＬ－６０细胞浆中ＰＫＡ活性明显升高，说明ＯＣＣ能与ｃＡＭＰ竞争ＰＫＡ的结合并激活ＰＫＡ。     

半边旗抗肿瘤有效成分对HL—60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞 …

目的；研究半边旗有效成分５Ｆ，６Ｆ，Ａ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶活性和细胞周期的影响。方法：应用ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ作为底物测定酶的活性；细胞周期用流式细胞仪测定；应用噻唑蓝法测定药物对细胞生长的抑制率。结果：５Ｆ，６Ｆ，Ａ均能够抑制ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅰ，Ⅱ的活性。     

有机锡化合物抗肿瘤生物活性研究

有机锡（ＩＶ）化合物能明显地抑制大鼠脑组织中ＰＫＣ活性和肿瘤细胞增殖，且两者之间存在着相关性。抗肿瘤活性的构效关系是：（１）有机基团Ｒ决定整个化合物的生物活性，Ｐｈ＞Ｅｔ＞ｎ－Ｂｕ；（２）卤素的电负性影响化合物活性的大小。抗肿瘤活性可能通过［ＳｎＲ２］２＋实现。并能部分地阻断ＨＬ－６０细胞周期中的Ｇ１期向ｓ期的移行。［ＳｎＰｈ２Ｆ２］，［ＳｎＰｈ２（ＣｙｓＯＳ）］ＨＯ２和［ＳｎＰｈ２Ｃｌ２·ｐｈｅｎ（ＣＨ３）２］对ＰＫＣ的ＩＣ５０值分别为２５，１５和２０μｍｏｌ·Ｌ－１，对ＨＬ－６０细胞的ＩＣ５０值分别为０．５，４．０和０．３μｍｏｌ·Ｌ－１。但它们无诱导分化ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的作用。     

槲皮素对HL—60细胞中蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶活性的影响

目的：研究槲皮素（Ｑｕｅ）对ＨＬ－６０细胞中的细胞溶质和胞膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。方法：活细胞数的计数用苔盼兰拒染法，用组蛋白ⅢＳ，（γ＾３２Ｐ）ＡＴＰ与ＰＫＣ酶液一起保温测定ＰＫＣ活性，用聚谷氨酸．酪氨酸（４：１）多肽），（γ＾３２Ｐ）ＡＴＰ与ＴＰＫ酶液一起保温测定ＴＰＫ活性，结果：Ｑｕｅ对ＨＬ－６０细胞的增殖有抑制作用，呈剂量依赖关系，处理４８小时后，其ＩＣ５     

十四酰佛波乙酸酯抑制三尖杉酯碱诱导的人白血病HL—60细胞凋亡

目的：研究十四酰佛波乙酸酯（ＴＡ）预处理后，三尖杉酯碱（Ｈａｒ）和喜树碱（Ｃａｍ）诱导人白血病ＨＬ－６０细胞凋亡的变化。方法：染色质凝集观察，流式细胞术，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳和点杂交。结果：ＴＡ２００ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１预处理ＨＬ－６０细胞６ｈ，明显抑制Ｈａｒ０．１ｍｇ·Ｌ＾－１作用３ｈ诱导的细胞凋亡，但只部分抑制Ｃａｍ０．２ｍｇ·Ｌ＾－作用３ｈ诱导的细胞凋亡。ＴＡ预处理ＨＬ－６０细胞明显降低ｃ－ｍ     

Inhibition of haringtonine-induced apoptosis by tetradecanoylphorbol acetate in human leukemia HL-60

目的：研究十四酰佛波乙酸酯（ＴＡ）预处理后，三尖杉酯碱（Ｈａｒ）和喜树碱（Ｃａｍ）诱导人白血病ＨＬ６０细胞凋亡的变化．方法：染色质凝集观察，流式细胞术，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳和点杂交．结果：ＴＡ２００ｎｍｏｌ·Ｌ－１预处理ＨＬ６０细胞６ｈ，明显抑制Ｈａｒ０１ｍｇ·Ｌ－１作用３ｈ诱导的细胞凋亡，但只部分抑制Ｃａｍ０２ｍｇ·Ｌ－１作用３ｈ诱导的细胞凋亡．ＴＡ预处理ＨＬ６０细胞明显降低ｃｍｙｃ基因的表达．结论：ＴＡ明显抑制由Ｈａｒ和部分抑制由Ｃａｍ诱导的ＨＬ６０细胞凋亡，而且ＴＡ预处理的细胞中ｃｍｙｃ基因表达明显下降，这可能导致了对诱导细胞凋亡的抑制．     

Effect of quercetin on cell cycle of HL-60 cells

本文报道了槲皮素对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０细胞的增殖和细胞周期的影响．结果表明槲皮素能抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，呈剂量依赖关系，当槲皮素作用２４，４８，７２ｈ后，其ＩＣ５０分别为４６．６，２８．７，１４．９μｍｏｌ·Ｌ－１．流式细胞仪分析表明，槲皮素能明显增加ＨＬ－６０的Ｇ２－Ｍ期细胞，而相对减少Ｇ０／Ｇ１细胞之百分比，且呈剂量依赖关系，当去除槲皮素时，该作用是可逆的．结果表明槲皮素对肿瘤细胞的生长抑制作用可能与其对细胞周期的影响有关．     

甲基莲心碱对氧自由基损伤血管内皮细胞的保护作用

研究了甲基莲心碱（Ｎｅｆ）对外源性氧自由基损伤兔胸主动脉内皮及培养牛胸主动脉内皮细胞的保护作用．结果发现兔胸主动脉环暴露于Ｈ２Ｏ２（０．８ｍｍｏｌＬ－１）／ＦｅＳＯ４（０．２ｍｍｏｌＬ－１）系统３０ｍｉｎ后，乙酰胆碱（ＡＣｈ），二磷酸腺苷及Ａ２３１８７诱导的内皮依赖性舒张反应显著减弱，而硝酸甘油诱导的非内皮依赖性舒张反应不受影响．Ｎｅｆ依剂量性对抗氧自由基所致ＡＣｈ诱导的内皮依赖性舒张反应减弱．培养牛胸主动脉内皮细胞暴露于黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶系统４８ｈ后，内皮细胞的生长被抑制６２％，Ｎｅｆ（０．１２５μｍｏｌＬ－１）可使之降为４９％．结果表明Ｎｅｆ对氧自由基所致的血管内皮细胞损伤具有保护作用．     

α－双炔失碳酯诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究α双炔失碳酯（Ａｎｏ）的抗肿瘤作用．方法：形态学研究分别应用光学显微镜和电子显微镜．细胞膜完整性检测用台盼蓝排除法．用流式细胞仪及琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂．结果：Ａｎｏ２５－５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞４８ｈ，细胞生长被明显抑制，５０μｍｏｌ·Ｌ－１时抑制率达６７％．细胞主要阻滞在Ｇ１期．处理后的细胞染色质凝缩，核断裂，体积缩小，呈典型的凋亡改变．Ｋ５６２细胞经Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理２４－４８ｈ后，提取细胞ＤＮＡ进行电泳，呈现典型的“ｌａｄｄｅｒ”带型．流式细胞仪检测约有７０％细胞发生凋亡，Ｓ期细胞比较敏感．此时，虽然发生广泛的ＤＮＡ断裂，但细胞膜仍然完整，排除台盼蓝．Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞８ｈ即能诱导部分细胞发生凋亡．结论：Ａｎｏ能诱导Ｋ５６２细胞凋亡．     

茵陈素减弱顺铂导致原代兔肾小管上皮细胞DNA链间交联和DNA—蛋？…

目的 研究顺铂与肾近端小管ＤＮＡ的作用机制,和茵陈素的干预作用。方法 原代培养兔肾近端小管细胞（ＰＴＣ）,溴乙锭荧光测ＤＮＡ链间交联,＾１２５Ｉ标记测ＤＮＡ－蛋白交联,顺铂与ＰＴＣ保温２４ｈ,茵陈素与ＰＴＣ提前２４ｈ保温后,加入顺铂２６μｍｏｌ．Ｌ＾－１再保温２４ｈ结果：顺铂１３到７８μｍｏｌ．Ｌ＾－１和２６到７８μｍｏｌ．Ｌ＾－１可使ＰＴＣ形成ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ－蛋白交联。茵陈素（０．４,４     

一种新二萜类化合物的体外抗肿瘤研究

目的研究一种新二萜类化合物凤厥内酯Ａ（Ｆ－Ａ）的抗肿瘤活性。方法采用体外培养的人癌细胞株——早幼粒细胞白血病ＨＬ－６０和红白细胞白血病Ｋ５６２作对象，观察Ｆ－Ａ对其抑瘤活性、诱导分化、细胞周期的影响。结果Ｆ－Ａ对ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞２４ｈ的半数抑制浓度ＩＣ５０分别为７．６ｍｇｇ－１和９．１ｍｇｇ－１，在４ｍｇＬ－１时即明显抑制ＨＬ－６０细胞的对数生长；对３Ｈ－ＴｄＲ参入作用在培养４８ｈ后有一定抑制作用；透视电镜显示肿瘤细胞有损伤表现；细胞周期分析显示Ｇ２＋Ｍ期细胞增多；ＮＢＴ还原反应试验阴性。结论Ｆ－Ａ明显抑制ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞生长，抗肿瘤活性强，对细胞周期的影响提示Ｍ期阻滞，研究初步提示Ｆ－Ａ不具细胞诱导分化作用。     

奥丹西酮片在8例老年肺癌患者中的药物动力学

目的：观察奥丹西酮在老年人体内的药物动力学特性。方法：８名接受顺铂化疗的老年原发性肺癌患者单次和多次口服奥丹西酮后，用高效液相色谱法测定血浆药物浓度，用ＰＫＢＰ－Ｎ１药动学程序拟合计算。结果：奥丹西酮口服后在老年人体内表现为二房室模型。单剂量和多剂量给药时主要药动学参数为：Ｔ１／２β为４．５±０．５ｈ和５．９±０．７ｈ，Ｃｍａｘ为２０．３±１．８μｇ·Ｌ－１和２４．７±２．２μｇＬ－１，Ｔｍａｘ为１．９±０．２ｈ和１．８±０．１ｈ，ＡＵＣ０～２４为３１６±４０μｇ·ｈ·Ｌ－１和４０７±４５μｇ·ｈ·Ｌ－１，积蓄因子为１．３。结论：老年患者多次口服奥丹西酮后与单次口服相比，体内消除能力明显下降     

氯丙烯对神经细胞内Ca~(2 ),游离钙调蛋白,环腺苷酸含量和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

用培养的鸡胚脑神经细胞研究了１．０２和２．０４ｍｍｏｌ·Ｌ－１氯丙烯作用２４ｈ后细胞内Ｃａ２＋，游离钙调蛋白（ＣａＭ）和环腺苷酸（ｃＡＭＰ）含量及钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ）活性的改变．结果显示，随着氯丙烯浓度的增加，细胞内Ｃａ２＋分别增加了４．２和６．２倍，ｃＡＭＰ含量增加了２２％和３９％，Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ活性增加了２．８和５．０倍（Ｐ＜０．０１）；而游离ＣａＭ含量则分别减少了５５％和６９％（Ｐ＜０．０１）．结果提示氯丙烯引起病理性神经轴浆内微管和神经微丝堆积与细胞内Ｃａ２＋增加有关．这可能由于细胞内Ｃａ２＋增加，激活ＣａＭ，继而激活Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ，催化微管相关蛋白２和ｔａｕ－蛋白磷酸化，抑制微管组装，使解聚的微管堆积在轴浆内．     

Studies on the Antitumour Activities of 8-Chloroadenosine

（Ｓｐ）－８－氯腺苷３′，５′环磷酸辛酯（ＯＣＣ）是８－氯腺苷３′，５′环磷酸的新衍生物，对人白血病细胞ＨＬ－６０有很强的抑制作用和诱导分化作用。用细胞流式光度术发现ＯＣＣ阻断ＨＬ－６０细胞周期于Ｇ１期。ＯＣＣ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ合成有显著抑制作用，但不影响ＲＮＡ和蛋白质合成。ＯＣＣ能激活ＨＬ－６０细胞浆中蛋白激酶Ａ。８－氯腺苷是ＯＣＣ的活性代谢产物，能在体外和体内实验中明显抑制肿瘤的生长。８－氯腺苷也能诱导人胃癌ＭＧｃ８０－３细胞分化和人Ｔ淋巴母细胞ＭＯＴＬ－４的凋亡。本文讨论了８－氯腺苷抗肿瘤作用的机理。     

高糖增强兔血管平滑肌细胞对内皮素-1的增殖反应性(英文)

观察高糖对内皮素－１（ＥＴ－１）促兔主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响．方法： ＶＳＭＣ分别培养于含正常葡萄糖、高糖或高渗（５．５，２５，葡萄糖 ５．５＋甘露醇 １９．５ ｍｍｏｌ·Ｌ－１）的培养基中［３Ｈ］胸腺嘧啶掺入法检测ＤＮＡ合成速率，蛋白质印迹法检测磷酸化 ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ的表达．结果：在 １０至 １０－８ｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内， ＥＴ－１以浓度依赖方式增加 ＶＳＭＣ的［３Ｈ］胸腺嘧啶掺入及磷酸化ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ的表达，从 １０－１１到 １０－８ｍｏｌ·Ｌ－１，培养于高糖的 ＶＳＭＣ对相同浓度 ＥＴ－１的增殖反应性高于正常糖或高渗培养条件下的ＶＳＭＣ（Ｐ＜ ０．０５，或 Ｐ＜ ０．０１），而在后两种条件下，ＶＳＭＣ对ＥＴ－１的增殖反应无显著差别．同样，在高糖条件下，ＥＴ－１诱导的ＶＳＭＣ磷酸化ｐ４４／４２ＭＡＰＫ的表达较正常糖和高渗ＶＳＭＣ增加 ６０％－６５％结论：高糖增强ＶＳＭＣ对ＥＴ－１的增殖反应性，可能与磷酸化的 ｐ４４／４２ ＭＡＰＫ高表达有关