阿加曲班对大鼠脑出血模型脑水肿作用的研究

目的 探讨阿加曲班对大鼠脑出血模型脑水肿的作用.方法取雄性SD大鼠40只,体重300～350g,随机分为A、B、C、D、E组,每组8只.大鼠用10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉后,经立体定向分别向右侧尾状核区注入生理盐水60μl、无肝素自体血50μl 生理盐水10μl、无肝素自体血50μl Argatroban生理盐水溶液(0.5μl/ml)10μl、含10U凝血酶生理盐水溶液50μl 生理盐水10μl、含IOU凝血酶生理盐水溶液50μl Ar-gatroban生理盐水溶液(0.5μg/ml)10μl.48h后,断头处死,测定脑含水量,HE染色,观察脑组织病理学变化.结果 C、E两组脑组织含水量降低,与B、D两组比较有明显差别(P<0.05);B组与D组比较脑组织含水量无明显差别(P>0.05).HE染色观察:B组可见血肿周围脑组织水肿,炎症细胞渗出,脑组织疏松,神经细胞呈气球样变、坏死;D组可见注射部位脑组织水肿,脑组织疏松,炎症细胞渗出;C、E两组上述改变减轻;A组未见血肿及局部明显病理学改变.结论阿加曲班可减轻凝血酶造成的脑水肿;可减轻大鼠脑出血后血肿周围脑组织脑水肿     

阿加曲班对大鼠脑出血后脑水肿作用的研究

目的探讨阿加曲班对大鼠脑出血模型脑水肿的作用。方法取雄性SD大鼠32只,体重300~350g,随机分为A、B、C、D,4组,每组8只。大鼠经立体定向分别向右侧尾状核区注入生理盐水60ul、无肝素自体血50ul+生理盐水10ul、生理盐水50ul+阿加曲班生理盐水溶液10ul、无肝素自体血50ul+阿加曲班生理盐水溶液10ul。实验大鼠于术后48小时断头处死,测定脑含水量,HE染色,观察脑组织学变化。结果D组脑组织含水量降低,与B组比较有明显差别(P<0.05);C组脑组织含水量与A组比较无明显差别(P>0.05);HE染色观察:B组可见血肿周围脑组织水肿,炎症细胞渗出,脑组织疏松;D组上述改变减轻;A、C两组未见明显病理学改变。结论阿加曲班可减轻大鼠脑出血后血肿周围脑组织脑水肿。     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠脑水肿及星型胶质细胞的影响

目的 研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿和星型胶质细胞可塑性的影响及神经保护作用.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1h后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 60 μg/kg.3组大鼠于术后6h、24h、48h、72h、7d、10d处死,干湿重法测定脑组织含水量、免疫组化检测血肿周围MMP-9、GFAP的动态变化.结果 模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P＜0.05),造模后48h、72h最明显,与组内6h、24h、7d、10d相比差异显著(P＜0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P＜0.05).模型组各时点MMP-9表达明显高于假手术组(P＜0.05),48h、72h表达最明显,与组内6h、24h、7d、1Od比较差异显著(P＜0.05);治疗组各时点MMP-9表达显著低于模型组(P＜0.05).假手术组脑组织含水量与MMP-9表达无相关性(r＝0.429,P＞0.05),模型组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r ＝0.922,P＜0.05),治疗组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r＝0.844,P＜0.05).假手术组未见GFAP阳性细胞表达;模型组6h出现少量GFAP阳性细胞表达,48h增多,72h大量表达,7d达高峰,10d表达减弱;治疗组GFAP阳性细胞表达6h与模型组相似,24h、48h、72h、7d、10d较模型组明显减少(P＜0.05).结论 ICH后G-CSF可抑制MMP-9表达减轻脑水肿程度,抑制星形胶质细胞过度活化,对出血后脑组织具有保护作用.     

瑞舒伐他汀对急性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及海马区MG的影响

目的通过观察瑞舒伐他汀对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑含水量及海马区小胶质细胞(microglia,MG)影响,探讨其脑保护作用机制。方法将96只SD大鼠,随机分为4组:正常大鼠为A组,假模型组为B组,模型组为C组,干预组为D组。应用改良的Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,应用免疫组化法观测大鼠海马区MG改变,采用干湿重法观测脑含水量变化。利用HE染色观察海马区神经元的变化。结果 A、B组不同时间点脑含水量、MG表达无明显改变。C、D组大鼠的脑含水量、MG的表达在24 h开始增高,72 h时达到峰值,7 d开始下降,14 d明显下降,与A、B组相比较,差异明显(P0.05)。D组与C组脑含水量、MG表达相比,24 h及72 h差异不明显(P0.05),7 d及14 d,D组的组脑含水量、MG表达较C组下降明显,差异具有统计学意义(P0.05)。结论瑞舒伐他汀能明显降低急性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及MG的表达,抑制神经元过度凋亡,具有脑保护作用。     

实验性脑出血后脑组织核因子-κB表达和含水量的变化及其相关性

目的 研究实验性脑出血(ICH)后血肿周围脑组织核因子-κB(NF-κB)表达和脑组织含水量的改变及其相关性.方法 采用自体不凝血注人大鼠尾状核制备ICH模型;用免疫组化法检测血肿周围脑组织NF-κB表达;用干湿重法测脑组织含水量.结果 与对照组相比,ICH 6h组血肿周围脑组织NF-κB表达开始明显增加,ICH 48h组达高峰,并持续到ICH 1周(P＜0.01～0.05);脑组织含水量ICH 12h组开始增多,24h组显著增高,72h组达高峰;NF-κB表达和脑组织含水量ICH 24h～1周组与假手术组之间差异有统计学意义(均P＜0.01);ICH后NF-κB阳性细胞数与脑组织含水量呈正相关(r=0.644,P＜0.01),NF-κB表达从开始到高峰均早于脑组织含水量的变化.结论 ICH后脑组织NF-κB表达增加,NF-κB可能通过炎性机制参与了ICH后继发脑水肿的形成.     

促红细胞生成素对急性脑损伤的保护作用

目的观察重组人促红细胞生成素(r-Epo)对大鼠急性脑损伤后脑细胞凋亡及脑水肿的影响。方法30只大鼠分为A、B、C 3组,B、C 2组用自由落体打击器制作脑外伤模型,C组r-Epo预处理,48 h后断头取脑。制作石蜡切片,TUNEL法检测细胞凋亡,同时用干湿重法测定各组大鼠脑组织含水量。结果与B组比较,C组外伤侧脑组织含水量明显降低(P<0.01),细胞凋亡数明显减少(P<0.01)。结论r-Epo能显著降低急性脑损伤后脑水肿,减少水肿区神经细胞凋亡,对急性损伤后脑组织有良好的保护作用。     

颅脑创伤后期大鼠代谢型谷氨酸受体5表达变化及牛磺酸治疗作用

目的探讨颅脑创伤后期(第7天)大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)表达变化,以及牛磺酸治疗作用。方法液压脑损伤打击仪制备液压打击颅脑创伤大鼠模型,采用随机数字表法将30只无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、颅脑创伤组和牛磺酸治疗组(各10只),干湿重法检测大鼠脑组织含水量,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting法检测水通道蛋白4(AQP4)和m Glu R5 m RNA和蛋白表达变化。结果与对照组相比,颅脑创伤组大鼠脑组织含水量(t=4.893,P=0.002)、AQP4 m RNA(t=6.523,P=0.000)和蛋白(t=4.366,P=0.008)表达水平升高,m Glu R5m RNA(t=5.776,P=0.001)和蛋白(t=3.945,P=0.014)表达水平降低;经牛磺酸治疗后,大鼠脑组织含水量(t=2.151,P=0.140)、AQP4 m RNA(t=1.144,P=0.432)和蛋白(t=0.367,P=0.804)降至正常水平,m Glu R5 m RNA(t=1.824,P=0.216)和蛋白(t=1.185,P=0.414)升至正常水平。相关分析显示,脑组织含水量与m Glu R5 m RNA(r=-0.617,P=0.014)和蛋白(r=-0.665,P=0.007)呈负相关,与AQP4蛋白呈正相关(r=0.658,P=0.008)。结论牛磺酸可以升高颅脑创伤后期(第7天)大鼠脑组织m Glu R5表达水平,降低脑水肿和脑组织含水量,具有抑制性神经递质作用。     

黄芪甲苷对脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用及occludin蛋白表达的影响

目的探讨黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用及occludin蛋白表达的影响。方法SD大鼠72只,随机等分为4组,每组18只。A组为假手术组;B组为生理盐水对照组;C组为小剂量黄芪甲苷治疗组,D组为大剂量黄芪甲苷治疗组。采用干湿重法、分光光度计法及免疫组化法分别检测各组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量及occludin蛋白的表达水平。结果与A组相比,B组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量明显增多,occludin蛋白的表达明显减少(P0.01);与B组相比,C组和D组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量显著减少,occludin蛋白的表达显著增加(P0.05;C组与D组相比,大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量及occludin蛋白的表达无显著差异(P0.05)。结论黄芪甲苷对脑缺血再灌注后血脑屏障具有保护作用,这可能与黄芪甲苷上调occludin蛋白的表达有关。     

脑心通对大鼠局灶性脑缺血脑组织补体C3的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织补体C3表达的影响。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组、生理盐水组、大剂量脑心通组、中剂量脑心通组、小剂量脑心通组,分别给予不同剂量药物,于术后6h,24h,48h,72h和7d进行神经功能评分(NDS),处死后取脑组织观察脑含水量的变化,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定补体C3的动态变化。结果:脑心通治疗组的神经功能评分均降低,病理损伤均减轻,大、中剂量脑心通组治疗后脑水肿明显减轻(P<0.05),补体C3的表达明显减少(P<0.05)。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内补体C3的表达对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

依达拉奉对局灶性脑缺血大鼠脑组织水通道蛋白-9mRNA表达的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血后脑内水通道蛋白-9（AQP-9mRNA）表达与脑水肿动态变化的关系,评价依达拉奉的干预作用。方法216只雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分为3组：假手术组（A组,6只）,生理盐水组（B组,大脑中动脉阻断后6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d7个时点,各6只）,依达拉奉处理组（C组,同B组）,术后即刻予以依达拉奉干预。分别测定脑组织含水量;实时荧光定量PCR（realtime quantitative polymerase chain reaction,RT—PCR）法检测mRNA表达;用HE染色方法观察病理形态学改变。结果B组大鼠MCAO后脑组织含水量呈上升趋势,48h达高峰,各时点均高于与A组（P〈0．05）。同时,AQP-9mRNA表达量与脑含水量呈相同趋势改变,相关性分析表明AQP-9mRNA表达量（r=0．788,P〈0．05）与脑组织含水量呈正相关。B组与C组相比,各时点脑组织含水量明显下降（P〈0．05）;AQP-9mRNA表达显著下调（P〈0．05）;组织病理提示脑水肿及神经元损伤程度减轻。结论大鼠脑缺血后脑内AQP-9mRNA表达与脑水肿变化呈正相关,提示AQP-9可能参与大脑中动脉阻断后的脑水肿形成。依达拉奉干预可减少AQP-9mRNA的表达,从而减轻大鼠大脑中动脉阻断后脑水肿,减少神经元坏死,改善神经功能预后。     

大鼠液压脑损伤后皮层微血管改变与脑水肿的关系

目的探讨大鼠液压脑损伤后皮层微血管损伤情况及其与伤后脑水肿的关系。方法成年SD大鼠30只,随机分为正常组（n=6）、假手术组（n：6）、损伤组（n=18）,其中损伤组分为伤后6h、24h、72h三亚组,每亚组6只。利用液压冲击法建立大鼠颅脑损伤模型,显微镜下观察直接损伤侧和非直接损伤侧皮层微血管损伤隋况,CD34标记血管内皮细胞评价血管密度改变,干湿重法检测脑组织含水量的变化。结果大鼠皮层微血管损伤后6h可见血管支行迂曲、扩张、充血,伤后24h可见少量血栓形成,损伤后72h可见有较多血栓形成。损伤组CD34阳性细胞数明显低于假手术组和对照组（P〈0．05）,而脑组织含水量明显高于假手术组和对照组（P〈0．05）,而后两组无统计学差异（P〉O．05）。损伤组直接损伤侧皮层微血管损伤较非直接损伤组严重,而且伤后24h较伤后6、72h严重。结论颅脑损伤后脑微血管损伤为全脑性血管损伤,这可能是伤后脑水肿形成的机制之一。     

高血压脑出血患者血肿周围水肿组织中水通道蛋白-4表达及意义

目的研究高血压脑出血患者血肿周围水肿组织中水通道蛋白-4(aquaporin 4,AQP4)表达及其意义。方法收集2009～2010年高血压脑出血患者血肿周围水肿组织28例,按照脑出血时间分为四组,如<12h,≥12h且<24h,≥24h且<48h和≥48h且<72h,以脑外伤患者术中急性脑膨出行内减压而切除的正常脑组织作为对照,应用Western-Blot方法,以GAPDH为内参,分别检测血肿周围水肿组织及正常脑组织中AQP4的表达水平。结果脑出<12h,≥12h且<24h,≥24h且<48h和≥48h且<72h患者脑内血肿周围水肿组织AQP-4的表达水平明显高于对照组(P<0.05),72h内AQP-4的表达逐渐升高。结论高血压脑出血患者脑内血肿周围水肿组织AQP4的表达增多与脑水肿的形成和发展密切相关。     

环氧合酶-2抑制剂对脑外伤大鼠大脑皮质水通道蛋白9表达的影响

目的 探讨环氧合酶-2抑制剂（塞来昔布）对脑外伤大鼠大脑皮质水通道蛋白9（AQP9）表达的影响.方法 SD大鼠150只,随机分为假手术组、脑外伤组和塞来昔布组,各50只.采用Feeney＇s自由落体法制作脑外伤模型,采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化和Western blot方法检测大鼠大脑皮质水通道蛋白9的表达.结果 脑外伤后3h含水量明显上升,6h时皮质含水量最高,24 h明显下降,而相同时间点的塞来昔布组大鼠含水量则明显较低（P＜0.05）.免疫组化和Western blot结果显示,相同时间点的脑外伤组大鼠大脑皮质AQP9蛋白表达量明显高于假手术组（P＜0.05）,而给予塞来昔布处理后AQP9蛋白的表达明显降低（P＜0.05）.结论 塞来昔布能够通过降低AQP9蛋白表达参与脑外伤水肿的调节.     

盐酸纳美芬对大鼠颅脑损伤后脑水肿的影响

目的探讨盐酸纳美芬对大鼠颅脑损伤后脑水肿的影响。方法将54只Wistar大鼠按随机数字表法随机分为假手术组、颅脑损伤组及纳美芬治疗组。采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型,分别于伤后6 h、1 d、3 d、7 d,采用干湿重法检测脑组织含水量,应用免疫组织化学法检测损伤脑组织中水通道蛋白4（AQP4）的表达。结果与假手术组比较,颅脑损伤组和纳美芬治疗组的脑组织含水量及AQP4水平明显升高（P〈0.05）;与颅脑损伤组相比,纳美芬治疗组脑组织含水量及AQP4表达水平明显降低（P〈0.05）。通过相关性分析发现,大鼠颅脑损伤后脑组织AQP4表达水平与脑含水量呈明显正相关性（r=0.676,P〈0.01）。结论盐酸纳美芬可能通过抑制AQP4表达,减轻脑水肿,发挥神经保护作用。     

Caspase-1抑制剂对大鼠外伤性脑损伤后脑水肿、神经细胞凋亡和IL-18表达的影响

目的研究天冬氮酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）抑制剂对大鼠脑损伤后脑水肿、细胞凋亡和IL-18表达的影响。方法雄性sD大鼠170只，随机分为正常组、损伤组、治疗组。用改良的Feeney方法制备损伤模型。治疗组分别于损伤前后30min经右侧脑室注射Caspase-1抑制剂——z-YVAD—fmk。损伤组与治疗组分别于脑损伤后6、24、72、168h点断头取脑。检测脑组织含水量、Caspase-1与IL-18表达及细胞凋亡。结果伤后6、24、72及168h，损伤组脑损伤周围皮质组织含水量、Caspase-1与IL—18的表达及细胞凋亡较正常组明显增多（P〈0．05），但伤后6、24及72h，治疗组脑损伤周围皮质组织含水量、Caspase—1与IL-18的表达及细胞凋亡虽明显高于正常组，但与损伤组相比则明显降低（P〈0．05）。结论Caspase-1及其激活的细胞因子IL—18在创伤性脑损伤后脑水肿和细胞凋亡中起重要作用，Caspase-1抑制剂对脑创伤后神经细胞损害具有保护作用。     

不同剂量乌司他丁预处理对小鼠创伤性脑水肿的影响

目的 探讨乌司他丁(UTI)预处理对小鼠创伤性脑水肿潜在的治疗作用及其机制.方法 BALB/c小鼠38只,随机分为生理盐水对照组(control组)和乌司他丁预处理组(UTI组).采用测干湿重法检测不同剂量UTI预处理对小鼠脑组织含水量的影响和Western -blot检测脑组织中水通道蛋白4(AQP4)蛋白表达情况.结果 与生理盐水对照组比较,UTI能明显减轻神经功能障碍,干湿重法检测结果显示,随着UTI剂量的增大小鼠脑组织含水量明显降低,Western-blot结果提示UTI下调AQP4蛋白的表达,不同组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 乌司他丁预处理能减轻创伤性脑水肿,具有显著的神经保护作用,可能是通过调控AQP4而减轻脑组织水肿.     

缺氧预处理对创伤性脑损伤大鼠 Claudin5 表达及血脑屏障通透性的影响

目的探讨缺氧预处理对创伤性脑损伤大鼠脑组织紧密连接蛋白Claudin-5的表达及血-脑屏障通透性的影响。方法204只大鼠随机分为创伤性脑损伤组（T组）96例,缺氧预处理后脑损伤组（H组）96例及对照组12例。T组行自由落体撞击法建立大鼠创伤性脑损伤模型,H组给予3d缺氧预处理后,同法致脑损伤,两组大鼠于伤后1h、4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d断头处死。采用干湿重法测脑组织含水量：Real—timePCR和Westernblot检测各组大鼠挫伤区周围脑组织Claudin-5mRNA及蛋白表达变化;IgG法检测血一脑屏障通透性变化。结果T组和H组伤后1hClaudin-5mRNA及蛋白表达开始降低,8～12h降至最低点,1d开始上升,直至伤后14d渐趋于对照组水平;其中H组各时间点Claudin-5mRNA及蛋白表达均高于T组。T组各时间点血一脑屏障通透性及脑组织含水量均明显高于H组（P〈0．05）,且两组均高于对照组（P〈0．05）。结论缺氧预处理可在创伤性脑损伤早期上调紧密连接蛋白Claudin-5的表达,维持血-脑屏障完整性,减轻脑水肿。