低声压级次声对小鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的:研究低声压级次声作用不同时间对小鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:将60只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和次声作用组,次声作用组以Infratonic9次声治疗仪产生的次声(频率为8—12Hz,声强为60—80dB)作用,1h/d,分别作用1d、7d、14d、21d、28d,对照组小鼠除无次声作用,其余处理皆与次声作用组相同。各组小鼠实验结束后取脑,采用免疫荧光化学染色方法观察次声作用不同次数(1d、7d、14d、21d、28d)小鼠海马中GFAP的表达情况。结果:次声作用1d后小鼠海马中GFAP阳性表达无明显变化(62.9±3.0),7d后GFAP阳性细胞数开始减少(60.5±8.0),连续作用21d达到最低值(56.3±5.3()P<0.05),28d回升至正常水平(59.2±9.7()P>0.05)。结论:次声治疗仪产生的低声压级次声作用能抑制小鼠海马星形胶质细胞的活化,这为次声的临床治疗提供了理论依据。     

次声作用对小鼠海马胶质纤维酸性蛋白阳性胶质细胞表达的影响

目的 观察次声作用后小鼠海马内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性胶质细胞表达的变化.方法 将BALB/C小鼠暴露于16 Hz、声压130 dB和90 dB次声,2 h/次*d-1,分别作用1、7、14、21和28 d后,采用免疫组化方法 观察小鼠海马内GFAP阳性胶质细胞表达的变化.结果 次声作用一定时间后小鼠海马内GFAP阳性胶质细胞增多,14 d呈高峰,130 dB组与90 dB组相比差异显著(P<0.01),90 dB组与对照组相比差异显著(P<0.01).结论 在一定强度的次声作用下,GFAP阳性胶质细胞表达在小鼠海马内的变化呈一定的规律性;GFAP参与了次声对脑损害的修复过程.     

次声作用后大鼠海马星形胶质细胞的变化

目的 研究8Hz,90dB和130dB次声作用后不同时间点，大鼠海马中胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化。方法 Hz,90dB和130dB次声作用于大鼠，2h/d，分别作用于1，7，14，21，28d后采用免疫组织化学方法，观察大鼠海马星形胶质细胞GFAP表达的时程改变。结果 130dB组从作用1d开始大鼠海马中GFAP阳性星形胶质细胞数量开始增加，14d达到高潮，21d开始下降，但仍然维持较高水平90dB组大鼠各时间点GFAP反应均比130dB组弱。结论 8Hz,90dB和130dB次声作用可以激活海马大量星形胶质细胞，对神经元具有保护作用。     

次声作用后大鼠海马星形胶质细胞的变化

目的研究8Hz,90dB和130dB次声作用后不同时间点,大鼠海马中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。方法8Hz,90dB和130dB次声作用于大鼠,2h/d,分别作用1,7,14,21,28d后采用免疫组织化学方法,观察大鼠海马星形胶质细胞GFAP表达的时程改变。结果130dB组从作用1d开始大鼠海马中GFAP阳性星形胶质细胞数量开始增加,14d达到高潮,21d开始下降,但仍然维持较高水平;90dB组大鼠各时间点GFAP反应均比130dB组弱。结论8Hz,90dB和130dB次声作用可以激活海马大量星形胶质细胞,对神经元具有保护作用。     

糖尿病早期大鼠海马和皮质星形胶质细胞的变化

目的：观察链脲佐菌素(streplozotocin，STZ)诱导的糖尿病大鼠早期(6周)海马和皮质星形胶质细胞的变化，探讨星形胶质细胞在糖尿病脑病发病中的重要作用。方法：实验在解放军第四军医大学航空航天医学系病理学实验室完成。在建模前和建模后6周时检测糖尿病大鼠的血糖、尿糖和体质量，应用免疫组织化学方法观察糖尿病组和对照组大鼠海马和皮质星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达情况。结果：对照组大鼠体质量随周龄增加而明显增加；糖尿病组大鼠体质量随周龄的增加不明显。对照组大鼠的血糖始终处于大鼠血糖值正常范围，尿糖检测始终都为阴性，而糖尿病组大鼠的血糖值处于模型要求的标准之上。尿糖自建模后都呈强阳性。GFAP免疫组化标记可见糖尿病大鼠海马和皮质星形胶质细胞明显增生，且增生细胞在CA1区和CA4区最为明显。结论：糖尿病大鼠早期星形胶质细胞增生反映了神经组织对机体糖代谢紊乱的适应性重塑过程，提示神经组织改变在糖尿病脑病的发病中可能起了重要作用。     

亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白表达及超微结构改变的影响

目的研究大鼠全脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达,观察超微结构变化,了解亚低温对其保护作用及影响。 方法制作大鼠全脑缺血模型,将96只大鼠分为常温组、亚低温组和假手术组,每组32只。根据缺血时间不同,每组再分为缺血6 h、12 h、24 h、4 d 4个亚组,每个亚组8只。苏木精-伊红（HE）染色观察海马CA1区细胞形态学改变,免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达,原位氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL检测）及免疫组化双标染色观察海马CA1区星形胶质细胞的死亡方式,投射电镜观察星形胶质细胞超微结构改变,综合以上结果了解亚低温干预的效果。 结果大鼠全脑缺血再灌注后,GFAP表达随时间增加逐渐增强,亚低温组较常温组GFAP表达明显减少,4 d时间点电镜下可见海马CA1区部分星形胶质细胞以胀亡形式死亡。 结论亚低温能明显减少GFAP的表达,对神经元有保护作用,全脑缺血再灌注后星形胶质细胞存在胀亡的死亡方式。     

乙醇灌胃对大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白、S-100B蛋白表达的影响

目的：观察乙醇灌胃致大鼠海马区神经胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白和S-100B蛋白表达的改变。方法：实验于2004—09／2005—09在延边大学医学院附属医院神经内科学教研室完成。选用3月龄Wistar雄性大鼠60只，完全随机分为正常组、灌胃1，2，4，6，8周组6组，每组10只，各灌胃组按8g／（kg&;#183;d）乙醇灌胃，依周数喂养结束后取大鼠脑组织，常规制片，行胶质纤维酸性蛋白和S-100B蛋白的免疫组化染色，光镜下进行形态学观察；采用HPIAS-1000计算机彩色病理图文分析系统对胶质纤维酸性蛋白和S-100B阳性细胞计数行定量分析，进行各灌胃组与正常组的比较。结果：60只Wistar大鼠中灌胃8周组于喂养第7周死亡1只（死亡原因为乙醇误灌入肺内，造成急性肺水肿而死亡），其余各组动物全部进入结果分析。①形态学改变：正常神经胶质细胞胞体轮廓清晰，星状突起纤细，胶质纤维酸性蛋白分布于胞浆及星状突起中。S-100B阳性染色也见于胶质细胞中，均匀分布于胞浆中。随灌胃周数增加，胶质纤维酸性蛋白阳性细胞胞体变大、形态各异，突起增多明显且粗大不规则，S-100B阳性细胞体积有所增大，胞浆丰富显色较深。②灌胃1，2，4，6，8组大鼠胶质纤维酸性蛋白和S-100B免疫反应产物阳性细胞计数值均较正常组显著增高，差异有显著性意义[胶质纤维酸性蛋白阳性细胞计数：（76．49&;#177;6．43），（84．20&;#177;3．17），（92．60&;#177;4．81），（138．20&;#177;5．52），（142．12&;#177;6．41），（29．32&;#177;2．42）个，F=883．62，P〈0．051．IS—100B阳性细胞计数：（196．96&;#177;11．47），（182．22&;#177;17．28），（215．88&;#177;15．50），（239．70&;#177;14．95），（254．92&;#177;23．42），（115．53&;#177;11．62）个，F=99．88，P〈0．051。结论：乙醇使大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白和S-100B的表达增加，增加的程度与乙醇灌胃时间有关。随着灌胃时间的延长，大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白和S—100B的表达增多。     

吸氧预处理对大鼠大脑皮质星形胶质细胞的影响

目的 观察吸氧预处理对大鼠大脑皮质内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响，探讨吸氧预处理产生的脑缺血耐受与星形胶质细胞的关系。方法 雄性SD大鼠6只，随机分为两组：吸氧预处理组和对照组各3只。吸氧预处理组大鼠吸入1000ml/L氧气，持续24h。间隔24h后经心脏多聚甲醛灌注，取脑，固定，冷冻切片机冠状切片；对照组大鼠不给予吸氧预处理，吸空气24h，余同吸氧预处理组。用免疫组化法（ABC法）进行免疫组化染色，观察胶质原纤维酸性蛋白在大鼠大脑皮质的表达，比较两组大鼠的表达差异。结果 吸氧预处理组大鼠各部大脑皮质内胶质原纤维酸性蛋白阳性细胞明显增多（P&;lt;0.05），包括枕皮质（t=8.32）、压后部皮质（t=6.l7）、顶皮质（t=4.76）、额皮质（t=4.93)、皮质前（t=6.17）和后肢区（t=7.48）等，细胞分布密集。胶质细胞形态亦与对照组不同：胞体肥大，突起粗而长，染色深。对照组大鼠大脑皮质内GFAP阳性细胞呈散在分布，阳性细胞的胞体小，突起细而短，染色浅淡。结论 吸氧预处理可以明显刺激大鼠大脑皮质GFAP的产生，使星形胶质细胞处于激活状态，与诱导脑缺血耐受的产生有关。     

乙醇灌胃对大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白、S-100B蛋白表达的影响

目的:观察乙醇灌胃致大鼠海马区神经胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白和S-100B蛋白表达的改变。方法:实验于2004-09/2005-09在延边大学医学院附属医院神经内科学教研室完成。选用3月龄Wistar雄性大鼠60只,完全随机分为正常组、灌胃1,2,4,6,8周组6组,每组10只,各灌胃组按8g/(kg·d)乙醇灌胃,依周数喂养结束后取大鼠脑组织,常规制片,行胶质纤维酸性蛋白和S-100B蛋白的免疫组化染色,光镜下进行形态学观察;采用HPIAS-1000计算机彩色病理图文分析系统对胶质纤维酸性蛋白和S-100B阳性细胞计数行定量分析,进行各灌胃组与正常组的比较。结果:60只Wistar大鼠中灌胃8周组于喂养第7周死亡1只(死亡原因为乙醇误灌入肺内,造成急性肺水肿而死亡),其余各组动物全部进入结果分析。①形态学改变:正常神经胶质细胞胞体轮廓清晰,星状突起纤细,胶质纤维酸性蛋白分布于胞浆及星状突起中。S-100B阳性染色也见于胶质细胞中,均匀分布于胞浆中。随灌胃周数增加,胶质纤维酸性蛋白阳性细胞胞体变大、形态各异,突起增多明显且粗大不规则,S-100B阳性细胞体积有所增大,胞浆丰富显色较深。②灌胃1,2,4,6,8组大鼠胶质纤维酸性蛋白和S-100B免疫反应产物阳性细胞计数值均较正常组显著增高,差异有显著性意义犤胶质纤维酸性蛋白阳性细胞计数:(76.49±6.43),(84.20±3.17),(92.60±4.81),(138.20±5.52),(142.12±6.41),(29.32±2.42)个,F=883.62,P<0.05犦;犤S-100B阳性细胞计数:(196.96±11.47),(182.22±17.28),(215.88±15.50),(239.70±14.95),(254.92±23.42),(115.53±11.62)个,F=99.88,P<0.05犦。结论:乙醇使大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白和S-100B的表达增加,增加的程度与乙醇灌胃时间有关。随着灌胃时间的延长,大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白和S-100B的表达增多。     

大鼠心肺复苏后海马CA1区胶质纤维酸性蛋白和S100β蛋白的表达

目的动态观察大鼠心肺复苏后海马CA1区胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S100β蛋白表达的变化。方法成年雄性SD大鼠80只。随机分为对照组和复苏组。再分别按气管切开后或自主循环恢复（ROSC）后0．5、3、6、12、24h分为5个亚组，每组8只。建立窒息型大鼠心肺复苏模型，各亚组分别于各时间点取样，以干湿比质量法测定脑组织含水量；以免疫组化方法测定海马CA1区GFAP和S100β蛋白的表达。结果与对照组比较，复苏组ROSC后各时间点海马CA1区S100β蛋白的表达随脑水含量的上升而增加（P〈0．01），且两者呈正直线相关（P=0.016）；复苏组ROSC后海马CA1区GFAP表达于6h开始逐渐增加。至24h表达量显著增加水平（P=0.003）。结论大鼠心肺复苏后海马CA1区S100β蛋白和GFAP表达均增加，但S100β蛋白增加出现早于GFAP，并且与脑水肿程度密切相关；星形胶质细胞增殖活化所致的S100β蛋白和GFAP在不同时序表达增加，可能分别与复苏后的神经元功能损伤或修复密切相关。     

中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠脑海马齿状回及CA1区和CA3区一氧化氮合酶的影响

目的：观察中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠记忆改善的影响，并以依地酸钙钠做标准对照。方法：实验于2001-11／12在湖南师范大学生命科学院动物实验室完成。①选用健康SD大鼠60只，随机分成6个组，每组lO只。阴性对照组、阳性对照组、驱铅灵（由党参15g、鸡血藤15g等组成）3．3g／（kg&;#183;d）组、驱铅灵6．6g／（kg&;#183;d）组、驱铅灵13．2g／（kg&;#183;d）组、依地酸钙钠组。②阳性对照组、依地酸钙钠组、驱铅灵各组均用20g／L的醋酸铅溶液以10μ／g体质量的剂量灌胃，1次／d，第11天停染1d，共3周。③停止染毒后第2天，驱铅灵各组分别用相应剂型的中药复方驱铅灵10μ／g体质量灌胃，1次／d，第11天停1d，共3周。④依地酸钙钠组用5g／L依地酸钙钠溶液以10μL／g体质量的剂量（50mg／kg）腹腔注射，1周注射4d，停3d，共3周。⑤阴性对照组、阳性对照组用蒸馏水灌胃，1次／d，第11天停染1d，共3周。⑥观察驱铅灵制剂对铅染毒大鼠脑海马组织结构的改善以一氧化氮合酶阳性细胞数目的多少及阳性细胞产物平均吸光度的大小作为评价指标，对大鼠海马结构形态学损伤以一氧化氮合酶阳性产物吸光度表示。结果：纳入60只，均进入结果分析，无缺失值。①铅染毒大鼠脑齿状回阳性产物吸光度情况：驱铅灵33g,6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组显著大于阳性对照组[（0．0692&;#177;0．0043），（0．0707&;#177;0．0022），（0．0645&;#177;0．0027）．（0．0720&;#177;0．0037），（0．0538&;#177;0．0068）A，（F=12．383，P〈0.01）]。②铅染毒大鼠脑CA1区阳性产物吸光度变化：驱铅灵3．3g，6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组的阳性产物吸光度显著大于阳性对照组[（0．0638&;#177;0．0033）。（0．0648&;#177;0．0027），（0．0613&;#177;0．0029），（0．0655&;#177;0．0037）。（0．0605&;#177;0．0026），（F=10．585，P〈0．01）]。③铅染毒大鼠脑CA3区阳性产物吸光度变化：驱铅灵33g，6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组在脑CA3区显著大于阳性对照组[（0．0682&;#177;0．0044），（0．0702&;#177;0．0047），（0．0630&;#177;0．0044）．（0．0733&;#177;0．0051），（0．0545&;#177;0．0027）。（F=18．867．P〈0．01）]。结论：中药复方驱铅制剂低、中、高各剂量组均能改善铅染毒大鼠脑海马结构的形态学损害，改善铅致学习记忆的损害，其效果与依地酸钙钠相似，不同剂量的驱铅制剂作用效果比较无显著差别。     

中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠脑海马齿状回及CA1区和CA3区一氧化氮合酶的影响

目的:观察中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠记忆改善的影响,并以依地酸钙钠做标准对照。方法:实验于2001-11/12在湖南师范大学生命科学院动物实验室完成。①选用健康SD大鼠60只,随机分成6个组,每组10只。阴性对照组、阳性对照组、驱铅灵(由党参15g、鸡血藤15g等组成)3.3g/(kg·d)组、驱铅灵6.6g/(kg·d)组、驱铅灵13.2g/(kg·d)组、依地酸钙钠组。②阳性对照组、依地酸钙钠组、驱铅灵各组均用20g/L的醋酸铅溶液以10μL/g体质量的剂量灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。③停止染毒后第2天,驱铅灵各组分别用相应剂型的中药复方驱铅灵10μL/g体质量灌胃,1次/d,第11天停1d,共3周。④依地酸钙钠组用5g/L依地酸钙钠溶液以10μL/g体质量的剂量(50mg/kg)腹腔注射,1周注射4d,停3d,共3周。⑤阴性对照组、阳性对照组用蒸馏水灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。⑥观察驱铅灵制剂对铅染毒大鼠脑海马组织结构的改善以一氧化氮合酶阳性细胞数目的多少及阳性细胞产物平均吸光度的大小作为评价指标,对大鼠海马结构形态学损伤以一氧化氮合酶阳性产物吸光度表示。结果:纳入60只,均进入结果分析,无缺失值。①铅染毒大鼠脑齿状回阳性产物吸光度情况:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组显著大于阳性对照组犤(0.0692±0.0043),(0.0707±0.0022),(0.0645±0.0027),(0.0720±0.0037),(0.0538±0.0068)A,(F=12.383,P<0.01)犦。②铅染毒大鼠脑CA1区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组的阳性产物吸光度显著大于阳性对照组犤(0.0638±0.0033),(0.0648±0.0027),(0.0613±0.0029),(0.0655±0.0037),(0.0605±0.0026),(F=10.585,P<0.01)犦。③铅染毒大鼠脑CA3区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组在脑CA3区显著大于阳性对照组犤(0.0682±0.0044),(0.0702±0.0047),(0.0630±0.0044),(0.0733±0.0051),(0.0545±0.0027),(F=18.867,P<0.01)犦。结论:中药复方驱铅制剂低、中、高各剂量组均能改善铅染毒大鼠脑海马结构的形态学损害,改善铅致学习记忆的损害,其效果与依地酸钙钠相似,不同剂量的驱铅制剂作用效果比较无显著差别。     

CD4~+Foxp3~+T淋巴细胞新功能亚群在系统性红斑狼疮中的分布和意义

目的:检测人外周血CD4+Foxp3+T淋巴细胞新的功能亚群,并分析其与系统性红斑狼疮(SLE)的关系。方法:以Foxp3-FITC、CD45RA-PE、CD3-ECD、CD4-PC7、CD25-PC5抗体组合采用五色流式细胞仪检测21例活动期SLE患者和22例健康体检者(正常对照组)外周血CD4+Foxp3+T淋巴细胞亚群。根据CD45RA和Foxp3的不同表达强度将CD4+Foxp3+T淋巴细胞亚群划分为3个不同的细胞亚群,并统计分析其在SLE中的分布情况。结果:根据Foxp3表达强度和CD45RA的表达差异可将CD4+Foxp3+T淋巴细胞分成3个亚群,CD45RA+Foxp3low(Ⅰ区)、CD45RA-Foxp3high(Ⅱ区)和CD45RA-Foxp3low(Ⅲ区)。SLE患者CD4+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T细胞的百分率为(9.805±5.331)%,高于正常对照组(5.717±2.689)%(P<0.01),其中主要是CD45RA-Foxp3low(Ⅲ区)细胞较正常对照组增多[(6.848±4.625)%比(4.013±2.246)%,P0.05)。SLE患者Foxp3mRNA水平较正常对照组有轻度升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。用CD45RA+Foxp3low(Ⅰ区)和CD45RA-Foxp3high(Ⅱ区)细胞来界定SLE患者的Treg细胞,其比率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人外周血CD4+Foxp3+T细胞具有异质性,利用流式细胞仪结合CD45RA和Foxp3的不同表达强度,能清晰区分CD4+Foxp3+T细胞的3个不同表型的功能亚群。对CD4+Foxp3+T细胞的准确划分对于评价SLE等疾病中Treg细胞的分化、功能具有重要意义。     

类风湿性关节炎患者淋巴细胞CD45RO、CD45RA的表达及临床意义

目的检测类风湿性关节炎（RA）患者CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO和CD45RA亚群的变化并探讨其临床意义。方法采用双色流式细胞术（FCM）检测28名正常人外周血、43例RA患者外周血和15例关节液的CD4^＋、CD8^＋细胞CD45RO、CD45RA的表达。结果RA患者关节液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于RA患者外周血和正常人外周血（P〈0.01）;RA患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于正常人外周血（P〈0.01）。活动期RA患者血液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于非活动期RA患者（P〈0.05,P〈0.01）。结论CD45RO^＋淋巴细胞是参与RA病理过程的主要淋巴细胞。     

丰富环境及居住方式对快速老化小鼠认知功能和海马CA1区N-甲基-D-天门冬氨酸受体1的影响

目的:观察不同环境和居住方式对快速老化(SAMP8)小鼠认知功能和海马CA1区N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR1)的影响,探讨环境及社会支持系统提高认知功能延缓衰老的可能机制。方法:健康雄性6月龄SAMP8小鼠32只,随机分为丰富环境+群居组(A组)、丰富环境+独居组(B组)、普通环境+群居组(C组)和普通环境+独居组(D组)。环境和居住方式干预2个月后通过Morris水迷宫实验测定小鼠的认知功能,免疫组织化学方法测定海马CA1区NMDAR1免疫反应性的表达。结果:Morris水迷宫结果:随训练天数增加,各组潜伏期均有缩短;A组潜伏期明显短于其他各组(P0.05),空间探索试验中跨越平台次数最多(P0.05)。B组和C组两者相比无明显差异,但都优于D组(P0.05)。抗NMDAR1免疫组化染色结果:D组免疫反应产物表达最少,染色最淡;A组可见NMDAR1蛋白免疫反应产物表达较多,细胞排列紧密,染色较深。光密度值分析显示A组光密度值最高,D组光密度值最低。结论:丰富环境和群居能改善SAMP8小鼠的学习记忆及认知功能;增加海马CA1区NMDAR1的蛋白含量;但环境和居住方式是SAMP8小鼠认知功能和海马的独立性保护因素,二者无交互作用。     

雌二醇对大鼠海马CA3区长时程增强诱导的影响

目的:应用细胞外电生理记录方法,来探讨17β-雌二醇对大鼠海马CA3区长时程增强(LTP)诱导阶段的影响并探讨其可能的机制。方法:应用细胞外电生理技术,刺激大鼠海马穿通纤维,在CA3区记录群体锋电位(populationspike,PS),通过在CA3区分别急性注射17β-estradiol,电压敏感性钙通道(voltage-sensitiveCa2+channels,VSCCS)拮抗剂尼非地平(Nifedipine),和三氯化铝(Alcl3)来观察不同的药物在给予动物高频刺激诱导出的LTP中PS幅值的相应变化。结果:高频刺激前5min给予不同浓度雌激素能抑制海马CA3区LTP的诱导过程:1pmol/L的雌激素使海马CA3区LTP的诱导减弱,药物在1min内开始起作用,持续整个诱导阶段,并且当浓度的加大为10pmol/L和100pmol/L,抑制作用加强,3种浓度雌激素PS的幅值抑制峰值分别是基础值的(118.56±11.97)%,(90.82±9.23)%和(68.10±10.37)%。选择性钙通道阻断剂Nifedipine也明显抑制LTP诱导过程,(112.24±7.59)%,50min时抑制作用达峰值,为基础的(78.92±11.69)%,与雌激素有相互加强的作用。结论:雌激素对诱导阶段LTP抑制作用至少部分的与细胞钙水平降低有关。小剂量的Alcl3(0.25mol/L)对LTP的诱导无明显抑制作用,此剂量与中等浓度(10pmol/L)的雌激素共同作用时有部分增强效应,提示两者可能的共同作用     

Comparison of 5-hydroxytryptamine1A-mediated hyperpolarization in CA1 and CA3 hippocampal pyramidal cells.

5-hydroxytryptamine (5-HT) hyperpolarizes hippocampal pyramidal cells in both areas CA1 and CA3 through an increase in potassium conductance. The receptor mediating the hyperpolarization in CA1 has been characterized as the 5-HT1A receptor, but has not been identified in area CA3. Intracellular recording techniques were used to record from CA1 and CA3 pyramidal cells in a hippocampal slice preparation. 5-HT agonists and antagonists were applied in known concentrations by bath perfusion. Antagonists were tested alone and for their ability to block the hyperpolarization elicited by 5-HT. The 5-HT1 agonist 5-carboxyamidotryptamine and 5-HT were full agonists and the 5-HT1A-selective ligand 8-hydroxydipropyl-aminotetralin hydrobromide was a partial agonist in both CA3 and CA1. The rank order potency was 5-carboxyamidotryptamine > 8-hydroxydipropyl-aminotetralin hydrobromide > 5-HT for both regions. The agonists were a half-log unit less potent and the maximum response elicited by 5-carboxyamidotryptamine and 5-HT was greater in area CA3 than in area CA1. The selective 5-HT1A antagonist BMY 7378 and the 5-HT1A/2 antagonist spiperone were competitive in area CA1, but insurmountable in area CA3. Other 5-HT antagonists that were not effective in blocking the 5-HT-mediated hyperpolarization included ketanserin, odansetron and BRL 24924. Based on these results, we conclude that the hyperpolarization elicited by 5-HT in areas CA1 and CA3 is mediated by the 5-HT1A receptor. However, there are significant differences in the nature of the 5-HT1A receptor-mediated hyperpolarization that may be attributed to differences in receptor-effector number, receptor-effector coupling and/or the structure of the recognition site.     

玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CD45RO的表达

目的：观察玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CD45RO的表达情况，探讨玫瑰糠疹的发病机制。方法：免疫组化SP法检测30例玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CDRTRO的表达，取10例正常人躯干部皮肤作对照。结果：玫瑰糠疹患者皮损中CD45RO的表达明显高于正常对照组（P〈0．01），CD45RA的表达和正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：玫瑰糠疹患者皮损真皮中浸润的淋巴细胞以记忆性T淋巴细胞为主，推测细胞免疫在玫瑰糠疹的发病中起主要作用。     

慢性应激大鼠海马CA3区锥体细胞树突超微结构的改变

目的:观察慢性应激大鼠海马CA3区锥体细胞树突超微结构特别是微管形态的改变,探讨慢性应激后产生的学习记忆及情绪障碍的可能机制。方法:实验于2003-01在汕头大学医学院进行。取健康清洁级雄性SD大鼠30只,随机分为对照组15只,应激组15只。应激组完成强迫游泳4周,对照组在笼中饲养4周后,测定两组大鼠海马CA3区锥体细胞一级树突的长度及直径,观察海马CA3区锥体细胞树突的超微结构。结果:慢性应激大鼠海马CA3区锥体细胞树突纵切面微管断裂,平行微管间距离变宽;横切面微管环不完整,单体分布不均匀;线粒体嵴模糊,偶可见空泡样变性。应激组大鼠海马CA3区锥体细胞一级树突的长度及直径分别为(98.51±17.48),(6.41±0.94)μm,对照组为(125.35±18.69),(5.67±0.83)μm,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:慢性应激可导致大鼠海马CA3区锥体细胞树突骨架尤其是微管的损害,并直接导致一级树突变短、变粗。     

氟哌利多对大鼠脑缺血海马CA1区锥体细胞持续钠通道电流的影响

背景脑缺血后离子通道通透性的异常和神经细胞内外离子平衡的紊乱是缺血性脑损伤的重要因素,钠通道激活引起的去极化是脑缺血损伤的始动环节.目的采用膜片钳技术测定氟哌利多对脑缺血海马CA1区锥体细胞持续性钠通道电流的影响,分析氟哌利多是否对脑缺血损伤产生保护?设计随机对照动物实验.单位上海交通大学附属第六人民医院麻醉科,上海交通大学附属第一人民医院麻醉科.材料实验于2002-04/2003-04在上海交通大学附属第一人民医院麻醉实验室完成.选择出生10～14 d未断乳的SD大鼠14只,每只鼠各选择2个海马CA1区细胞,共28个细胞,随机分为4组缺血对照组、氟哌利多3 μmol/L组、氟哌利多10 μmol/L组、氟哌利多30μmol/L组,7个/组. 方法酶消化法急性分离全部大鼠脑海马CA1区锥体细胞,通过低氧和无糖法制备神经元缺血模型.选择贴壁良好、呈三角形或星形、胞体较亮,折光性良好、突起明显、胞浆均匀一致、核仁明显的细胞用于实验.采用"Y-tube"系统快速给药,氟哌利多3,10,30 μmol/L组各自给予氟哌利多3,10,30μmol/L,缺血对照组不给药.全细胞膜片钳技术记录各组持续钠电流的基础值以及缺血3 min和5 min时钠通道电流的变化.主要观察指标①脑海马CA1区神经元正常持续钠电流的记录.②脑缺血时海马CA1区神经元持续性钠电流的记录.③不同浓度氟哌利多对脑缺血时持续性钠电流的影响.结果实验选用14只大鼠脑海马CA1区的28个细胞,全部进入结果分析.①脑海马CA1区神经元正常持续钠电流的记录使用钙通道阻滞剂CdCl2 0.5 mmol/L及钾通道阻滞剂TEA 20 mmol/L,在钳制电压-105 mV、刺激电压-30 mV下给予长为400 ms的方波刺激,可记录到一个较小的、激活较晚且持续时间较长的内向电流,经河豚毒素阻断证实为持续性钠电流.②脑缺血时海马CA1区神经元持续性钠电流的记录缺血对照组缺血3 min时持续钠电流增加为正常情况的(1.60±0.21)倍,缺血5 min时持续钠电流增加为正常情况的(2.87±0.45)倍,差异显著(P＜0.05).③不同浓度氟哌利多对脑缺血时持续性钠电流的影响缺血对照组、氟哌利多3,10,30 μmol/L组持续钠电流的基础值分别是(77.42±15.17)pA,(87.44±21.56)pA,(84.13±20.06)pA,(80.22±19.30)pA,组间比较差异无显著性意义.缺血5min后氟哌利多3,10,30μmol/L组持续性钠电流分别为(105.36±17.16)pA,(94.74±18.88)pA,(84.88±13.94)pA,明显低于缺血对照组(218.31±29.34)pA.结论在钳制电压-105mV、刺激电压-30mV条件下,脑缺血损伤时持续性钠电流增加,氟哌利多可能通过抑制持续性钠电流的增强而发挥神经元保护作用.