化学发光免疫分析检测抗-HCV 抗体与 HCV-RNA 的关联研究

目的：分析实时荧光定量 PCR 检测 HCV-RNA 载量与化学发光免疫分析（CLIA）检测抗-HCV 抗体的相关性。方法抽取 CLIA 法抗-HCV 检测有反应性标本587例,采用实时荧光定量 PCR 进一步检测 HCV-RNA。结果荧光定量 PCR 检测 HCV-RNA,阴性225例,阳性362例,阳性率为61．67％,且阳性标本比例与 CLIA 法 S/CO 比值呈正相关。结论HCV-RNA阳性率与 CLIA 法 S/CO 比值呈正相关,可根据 S/CO 比值预测 HCV-RNA 结果。     

三种国产抗-HCV酶联免疫诊断试剂检测结果与电化学发光法比较

目的探讨A、B和C三种不同国产酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）结果的差异性,并将检测结果与电化学发光法检测结果进行比较。方法随机挑选临床检测样本94例。所有样本再使用B、C和Roche电化学发光法试剂盒进行检测。ELISA试剂都使用各自的试剂盒S/CO值进行阴阳性判断,电化学发光检测结果判断以仪器的COI作为判断标准,结果〉1为检测有反应性。结果 A、B、C和电化学发光检测的阳性率分别为84.04%（79/94）、35.11%（33/94）、25.53%（24/94）和39.36%（37/94）,A试剂显著高于电化学发光法,而C试剂显著低于电化学发光法。A、B、C和电化学发光检测的结果一致性分别为55.32%（52/94）、95.74%（90/94）和86.17%（81/94）。将A试剂盒检测的结果分为阴性组（〈1）、弱阳性组（1~8）、阳性组（〉8）三个组,阴性和阳性组四种试剂检测结果符合率较好,而弱阳性组符合率较低。结论 3种国产试剂对阴性和阳性标本与Roche电化学发光法检测符合率很高,弱阳性标本符合率则存在差异,对于弱阳性标本建议使用确诊试验。     

二种丙型肝炎病毒抗体确证试剂盒检测性能的比较

目的 应用丙型肝炎病毒抗体确证试验检测肝病患者血清抗HCV,进一步确认HCV感染.方法 对北京万泰生物药业股份有限公司初步研制重组免疫印迹法检测抗HCV试剂(简称CWT)与CHIRON RIBA HCV 3.0 Strip Immunoblot Assay进行比较,采用477份血清标本进行检测分析(慢性丙型肝炎病毒感染者血清350份、非甲非戊型肝炎患者血清7份、对照组采用乙型肝炎患者血清30份、戊肝肝炎患者血清30份及正常献血人员血清60份).结果 120份对照组非丙型肝炎患者血清均为抗HCV阴性;350份慢性丙型肝炎病毒感染者血清,国产试剂检出阳性341份,9份不确定;CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA试剂检出阳性343份,不确定7份.7份非甲非戊型肝炎患者血清两种试剂检测均为阳性2份,阴性4份,不确定结果1份.两种试剂比较,检测结果一致率为99.16%(473/477),两者有很强的一致性(Kappa=0.98).结论 两种试剂对丙型肝炎病毒抗体的检测方法具有高度的一致性.特别是对于非甲-非戊型肝炎患者中的HCV感染者更有一定的诊断意义.

Abstract：

Objective To detect anti-HCV in serum of hepatic disease patients by performing the confirmatory test, and further to confirm HCV infection. Methods Two recombinant immunoblot assays (CWT and CHIRON RIBA HCV 3.0 Strip Immunoblot Assay) were used respectively to detect anti-HCV in 477 human serum samples, which comprised 350 HCV-infected patients' specimens, 7 none-A none-E hepatitis specimens, 30 HBV-infected patients' specimens, 30 hepatitis E virus infected patients'specimens, and 60 specimens drawn from blood donors. The latter three groups served as controls. Results A total of 120 control non-HCV-infected patients' specimens were negative when tested by both assays. Among 350 HCV-infected patients, 341 were positive and 9 were indeterminated by CWT assay; 343 were positive and 7 were indeterminated by CHIRON RIBA HCV 3. 0 SIA. Seven none-A none-E hepatitis specimens tested by both assays turned out to be 2 positive, 4 negative and 1 indeterminate. The consistency rate of these two assays was 99. 16% (Kappa=0.98). Conclusion CWT assay is highly coherent with CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA assay in the methodology of anti-HCV antibody detection, which can be applied in the determination of HCV infection among none-A none-E hepatitis patients.     

化学发光免疫分析检测丙型肝炎病毒抗体与重组免疫印迹试验确证阳性的关联研究

目的：探讨化学发光免疫分析（CLIA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）与重组免疫印迹试验（RI-BA）确证结果的关系。方法对10309例在山东大学附属省立医院就诊的门诊及住院患者采用 CLIA 法进行抗-HCV 检测，对检测为有反应性的标本通过 RIBA 作进一步确证。结果CLIA 初筛抗-HCV 抗体有反应性的标本共计106例，采用 RIBA 试剂对106例反应性标本进行检测，确认阳性37例、不确定28例、阴性41例，确认阳性比例为34．91％，且确认阳性标本比例与 S/CO 比值呈正相关。确证阳性标本条带检出率有差别，Core 检出率最高，其次依次为 NS3、NS4、NS5。结论确证结果与确证的条带分布有关，可根据 CLIA 法 S/CO 比值预测确证结果，有利于对结果进行正确和合理解释。     

献血者抗-HCV ELISA与RIBA法检测结果比较分析

血站系统检测抗-HCV，使用不同厂家ELISA（酶联免疫吸附试验）法试剂对血样进行2次检测，在日常检测中常出现两种试剂检测结果不一致的情况，为了解这些反应的特异性与非特异性情况，减少血液浪费，笔者对单试剂阳性结果和双试剂结果阳性的标本进行了抗-HCV确证试验，现报告如下。     

不同类型肝病患者血清抗-HCV检测结果分析

目的探讨各种肝病患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性率以及感染状况,研究其临床价值。方法采用酶联免疫吸附法检测1 024例各种肝病患者血清抗-HCV。结果 1 024例肝病患者抗-HCV阳性率为33.59%(344/1024),阳性率由高到低依次为丙型肝炎(65.22%)、乙丙型肝炎(48.89%)、肝癌(35.71%)、肝硬化(32.37%)、慢性乙肝(28.66%)、黄疸型肝炎(19.26%)、重型肝炎(16.67%)、甲型肝炎(8.82%);男性和女性肝病患者抗-HCV阳性率分别为24.86%(176/708)、53.16%(168/316),阳性率差异有统计学意义(χ2=78.47,P<0.05)。结论各种肝病患者均检出抗-HCV,以丙型肝炎、乙型肝炎、肝癌及肝硬化患者阳性率较高;女性肝病患者HCV感染率高于男性。     

广州献血人群抗-HCV ELISA检测S/CO值与确证试验结果的相关性

目的研究广州献血人群抗-HCV ELISA检测试验S/CO值与确证试验(NAT和RIBA)结果的相关性。方法采用进口(Abbot或Ortho)和国产(科华)抗-HCV ELISA试剂对2009年2月～2012年4月广州血液中心采集的无偿献血者血浆标本作抗-HCV检测,从中随机收集664份双试剂呈反应性的血浆标本进一步作确证试验;使用ROC曲线分析3种ELISA试剂的S/CO值与确证试验结果的相关性。结果 ROC曲线分析显示3种ELISA试剂检测的S/CO值与确证试验结果具有相关性:以Youden指数最大时的S/CO值为最佳阈值,Abbot、Ortho及科华试剂分别为3.234、4.460和6.976,均可预测>95%的确证试验阳性结果。结论不同试剂具有各自的最佳S/CO阈值,可以通过S/CO值预测HCV感染确证试验的阳性结果。     

献血者抗-HCV可疑标本的检测分析

丙型肝炎病毒(HCV)是我国输血后肝炎病毒感染的最主要病原体之一.为防止输血后丙肝的发生,国内血站使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测献血员HCV抗体,但由于有部分HCV感染者因所处感染期的不同或由于所使用的检测方法的局限性,抗-HCV检测表现为阴性,但并非为真正的阴性[1].     

丙型肝炎病毒抗体筛查阳性结果确证方案的探讨

目的明确抗-HCV酶免检测结果与确证阳性结果之间的相互关系,以期建立简便、经济的血液筛查实验室抗-HCV确证试验方案。方法使用重组免疫印迹试验结合核酸检测方法对134份酶免抗-HCV阳性样本确证,初步探讨2或3种抗-HCV酶免试剂(Ortho、Murex和科华联合复检的S/Co值与阳性预期值的关系及不同试剂组合检测的阳性预期值。结果134份样本中,92份真阳性,5份可疑,其余均为阴性。Ortho和Murex试剂的S/Co与阳性预期值呈正相关,当S/Co≥3.8时,阳性预期值分别可达98.33%和97.78%。Murex联合科华、Ortho联合科华以及3种试剂同时检测为阳性时的阳性预期值为100%;Ortho联合Murex的阳性预期值为98.48%,与上述其它2或3种试剂组合比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论2种或3种酶免试剂联合复检的确证方案优于美国CDC推荐的S/Co≥3.8方案。在常规血液筛查实验室,可以选择3种抗-HCV试剂中的任2种同时复检,先行对抗-HCV阳性标本确证,对无法确证的样本再作重组免疫印迹试验分析。     

免疫印迹法对HCV抗体弱阳性标本的确认价值

O≥     

乙型肝炎病毒e抗原S/CO值与HBV-DNA浓度的关系

目的探讨乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）S/CO值与乙型肝炎病毒（HBV）-DNA浓度的关系。方法采集306例乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性患者的血清样本。采用雅培i2000化学发光免疫分析仪进行HBeAg定量检测,采用ABI7300实时荧光定量PCR仪进行HBV-DNA定量检测。结果 306例HBsAg阳性的血清标本中,HBeAg阳性177例（57.84%）;HBeAg阴性而HBV-DNA阳性24例（7.84%）;HBV-DNA阴性而HBeAg阳性56例（18.30%）。HBV-DNA浓度为103-107 IU/mL,HBeAg与HBV-DNA浓度呈正相关（r〉0.3,P〈0.05）。结论 HBV-DNA与HBeAg联合检测可更好地为临床提供诊疗依据。     

化学发光酶免疫分析法及ELISA检测抗-HCV的结果比较

目的对比化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附试验(ELISA)用于丙型肝炎抗体检测的效果。方法选取丙型肝炎患者140例,抽取血液标本后分别进行丙型肝炎病毒(HCV)相关抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测。结果化学发光酶免疫分析法检出抗-HCV阳性的检出率为98.6%,高于ELISA法的检出率(94.3%),差异有统计学意义(P0.05)。化学发光酶免疫分析法对于抗AMA-M2抗体、抗3E抗体、抗SP100抗体、抗PML抗体、抗GP210抗体的检测阳性率分别为80.0%、73.6%、37.9%、55.7%和47.9%,而ELISA法检测结果分别为12.9%、12.9%、13.6%、10.7%和6.4%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论相对于ELISA法,化学发光酶免疫分析法在丙型肝炎中的应用有较高的检出阳性率,对于相关抗体检测有较高的敏感性,值得推广应用。     

对血液抗-HCV筛查结果的确认分析

目的 探讨对抗－HCV ELISA阳性血液进行确认分析的重要性。方法 用第三代免疫印迹法（RIBA 3．0）对抗HCV ELISA阳性血液进行确认，并对部分样品用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）检测HCV－RNA。结果 80份抗HCV ELISA阳性血样经RIBA确认，其中阳性38份（47．5％），可疑20份（25％），阴性22份（27．5％），c22、c33c的检出率高于c-100和NS5，而且20份RIBA 3．0可疑血样的HCV－RNA为阴性。结论 对抗－HCV阳性血液确认尤为重要，能提高诊断HCV的准确性。     

3组国产ELISA抗-HCV初复检试剂的检测效果评价

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）是我国输血后肝炎（post—transfusion hepatitis,PTH）的主要病因,PTH中90％是丙型肝炎患者,HCV感染常导致肝硬化,其中部分患者可发展为肝细胞癌。选择灵敏度、特异性高、质量稳定的初复检试剂进行血液检测,是有效控制HCV经输血传播的重要手段。为了有效避免抗-HCV阳性血液标本漏检,     

ROC曲线对ECLIA法预测HCV感染的最佳S/CO值的确定和分析

目的应用受试者工作特征(ROC)曲线分析丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性预测值≥95%的最佳S/CO值,以此临界值来限制临床上需要进行确证试验的患者数量。方法收集2017年2月至2018年6月该院门诊和住院患者经过电化学发光免疫分析(ECLIA)法初筛检测有反应性标本(S/CO≥1)167份,阴性标本(S/CO<1)10份,并进行HCV RNA和重组免疫印迹试验(RIBA)的补充确证试验,得到临床上可信的真阳性及假阳性标本,经ROC曲线分析得出结果。结果将初筛结果为1≤S/CO<10的54份标本进行双重确证试验后得到阳性标本17份(34.0%),阴性标本33份(占66.0%),不确定的4份标本(定期随访)。当S/CO≥10,经HCV RNA及RIBA双重确证后得到的结果均为阳性。经ROC曲线分析,得到曲线下面积(AUC)为0.971,此时的最佳诊断临界值为8.83。结论若ECLIA法检测结果显示"1≤S/CO<8.83",应提示为"有反应性标本",并注以阳性预测值≤95%,建议1个月后复查或进一步确证检测。     

ELISA试剂检测抗HCV反应性结果分析

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)进口酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在血液筛查中的效果及与国产试剂、重组免疫印迹试验(RIBA)确证检测的相关性。方法用RIBA确证试剂及国内销量前2名的国产抗HCV ELISA试剂对56例进口抗HCV ELISA试剂检测呈反应性的标本进行检测分析。结果 56例标本经RIBA确证结果为阳性12例,不确定18例,阴性26例。3种试剂均为反应性的9例标本中,确证阳性7例,不确定1例,阴性1例。结论目前市售的丙型肝炎ELISA试剂均存在较大的生物学假阳性,不同试剂间检测结果仍存在一定差异。为确保输血安全,建议有条件的采供血机构实验室抗HCV检测时以国产和进口试剂联合检测为佳。     

酶联免疫吸附法检测抗-HCV结果不确定度的评估

目的利用单边检测原理,对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的结果不确定度进行评定,降低假阴性或假阳性结果判定的风险。方法应用抗-HCV酶联免疫吸附法诊断试剂盒,对样本中抗-HCV检测结果的不确定度进行评定。结果 1号样本检测结果有62.70%的可能性为阴性,37.30%可能性为假阳性。而3号样本有86.41%的可能性为阳性,13.59%的可能性为假阴性。结论用包含有检测不确定度的结果对检测结果进行完整表述,可评价出现假阴性或假阳性检测判定结果的风险大小,值得临床推广应用。     

110例丙肝患者HCV-RNA载量及抗-HCV与肝功能指标的相关性研究

目的 研究丙型病毒性肝炎(简称丙肝)患者血清HCV-RNA含量及抗-HCV与ALT、AST浓度的关系.方法 采用实时荧光定量PCR法检测110例患者的血清HCV-RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪检测ALT、AST.结果 丙肝患者抗-HCV滴度显著高于健康对照组,大部分患者的ALT、AST水平均有显著性上升;HCV-RNA含量与ALT、AST水平有显著相关性,而与抗-HCV的S/CO值无显著相关性.结论 HCV-RNA和抗-HCV检测与肝功能指标各有利弊,三者结合起来在早期准确诊断及监测疗效中具有重要意义和价值.     

青岛市无偿献血者ALT、HBsAg、抗-HCV和抗-TP检测结果分析

为了解近年来青岛市无偿献血传染性指标流行趋势,笔者对2006—2011年599240人份血液ALT、HBsAg、抗-HCV和抗-TP检测结果进行分析,现报告如下。     

慢性丙型肝炎患者血清HCV-RNA水平与抗-HCV抗体和肝纤指标水平相关性分析

目的探讨丙型肝炎患者RNA水平与抗-HCV抗体和肝纤指标水平的关系。方法收集96例慢性丙型肝炎患者的血清,实时荧光定量PCR测定HCV-RNA和ELISA法检测抗-HCV抗体。化学发光法检测LN、PCⅢ、CⅣ及放免法检测HA。并对抗-HCV抗体、HCV-RNA水平与血清肝纤指标之间的关系进行分析。结果本研究的96例抗-HCV抗体阳性的慢性丙型肝炎患者中,HCV-RNA阳性52例,阳性率为54.2%。随着抗-HCV抗体的S/CO值升高,HCV-RNA检出率也在增高,分别为9.5%、37.1%和92.5%。高病毒载量组与低病毒载量组比较,血清HA、LN、PCⅢ及CⅣ水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论慢性丙肝患者HCV-RNA阳性检出率与抗-HCV抗体的S/CO值有关,S/CO值越高,HCV-RNA阳性率越高。而RNA水平与肝纤指标水平没有相关性。