荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体结果探讨

分子生物学技术以其高度敏感性和特异性得到大家的公认。但不是所有的检验项目非分子生物学莫属。如临床上淋病奈瑟菌泌尿系感染．则以细菌常规涂片及培养可解决85％以上问题．只有在疑难患者或考虑有衣原体混合感染时，PCR检测才有必要性。为了探讨本地区淋菌和非淋菌感染情况．本文选择了在临床上疑有淋球菌（NG）和沙眼衣原体（Ct）混合感染病例668例。用荧光定量PCR技术检测，其结果如下。     

涂片检查淋球菌及感染分析

近年来,性病在我国又死灰复燃,并迅速蔓延,患者逐年增多。淋病的诊断主要为病史、症状及实验室检查。当前实验室检查主要是直接涂片检查及培养。目前我院仍将直接涂片检查均列为诊断常规项目。鉴于此,现将我院一年来确诊59例急慢性淋病患者情况及实验室检查报告如下。1资料与方     

直接涂片染色法查淋球菌1014例的体会

笔者受聘于深圳市龙岗区医疗保险局医疗部从事检验工作。当地淋病患者较多。从1994年10月1日至1996年1月31日期间，用该法共查淋球菌1014例，阳性者852例，阳性率84．0％。其中男性患者586例，阳性者475例，阳性率81．1％；女性患者428例，阳性者377例，阳性率88．1％。因本法具有快速、简便、直观等优点，较受临床欢迎。故现将应用此法的几点体会作如下介绍。     

PCR法检测淋球菌的临床应用

应用ＰＣＲ法提高了淋球菌阳性检出率并与培养法做比较。１４８例拟诊淋病患者的样本采自尿道分泌的或宫颈分泌物。部份采自前段尿。用双盲法测定。结果表明：阳性出率分别为７９．７％和５７．４％，ＰＣＲ法的阳性检出率明显高于培养法，Ｐ＜０．００５。总阳性符合率分别为９５．２％和６８．５％，ＰＣＲ法显著高于培养法Ｐ＜０．００５。     

应用聚合酶链反应技术检测淋球菌1394例结果分析

性传播疾病是当今世界上广泛流行的传染性疾病,其中以淋病的发生率最高。淋病是由淋病双球菌(淋球菌)引起,由于其临床表现缺乏特异性,传统的实验室检查主要依靠直接涂片镜检和细菌培养,但其影响的因素较多,阳性率也不高,我院于1995年1月以来应用聚合     

取材部位对PCR检测淋球菌的影响

研究了不同部位的取材标本对ＰＣＲ检测淋球菌结果的影响。研究表明男性冠状沟、女性小阴唇处的标本ＰＣＲ检出淋球菌的阳性 高，并且分别显著高于传统检测男性尿道２－４ｃｍ处，女性宫颈处的标本阳性率（Ｐ〈０．０５）。     

淋球菌尿道口涂片和尿淋快速酶检测结果分析

淋病是我国目前最主要的性传播疾病之一，早期诊断主要靠涂片和分离培养，但这些方法有检出率低，操作复杂，周期长等缺点。为提高淋球菌检出率，缩短检测时间，我们采用了尿道口分泌物涂片和尿酶试验同时检测，观察其阳性率，结果报道如下。     

ELISA法检测淋球菌抗原的研究

用淋球菌抗原免疫家兔,制得高效价(1:2560)抗淋球菌血清,经QAE-Sephadex A 50纯化,棋盘法滴定包被抗体及酶结合物的工作浓度分别为12.5μg/ml 和1:1600。ELISA 检测40名正常人,其A 值为((?)+2SD)0.254+0.115=0.37。该方法对淋球菌的最小检出量为1×10~5/ml,阻断试验良好,与脑膜炎双球菌等其它6种细菌无交叉反应,且有较好的重复性。采用本法对80例尿道炎和阴道炎病人标本进行了检测,并与涂片,培养结果进行比较,其敏感性为100%(30/30),特异性为96%(48/50),结果表明,本法可望成为一种特异、敏感、快速诊断淋病的方法。     

PCR杂交梳法与细菌培养法检测淋球菌的对比研究

当今性传播疾病在我国日趋流行,其中尤以淋病的发病率最高,约占60－70％1,而淋病的确诊主要依靠实验室检查,目前主要使用淋球菌分离培养方法,虽然淋球菌的分离培养并不困难,但细菌的生长易受各种条件影响,且对慢性淋病患者的检出率较低,同时其生化鉴定复杂和需时较久,达不到快速检测的目的。近年来分子生物学技术的发展,也使PCR技术能应用于淋菌的检测2,我们曾采用PCR电泳法检测淋球菌,虽说快速敏感,但假阳性率偏高,特异性似乎不足3。近来我们采用PCR杂交技术即杂交梳方法检测淋球菌（NG）4,并与细菌培…     

PCR法检测淋球菌的探讨

性传播疾病是当今世界上广泛流行的传染病，其中淋病的发病率最高，约占70％以上，由于其发病人数的增多和危害性之大，淋病的检测日益被人们重视，特别是快速敏感的检测。淋病的临床表现缺乏特异性，其确诊主要靠实验室检查。传统的检查方法是将临床标本涂片，染色后镜检，在中性粒细胞中找到革兰氏阴性双球菌，即为阳性。该方法简单易行，但灵敏度不高，故WHO推荐使用淋球菌分离培养为诊断方法，但其生化鉴定复杂，需较长时间，因而答不到快速检测目的。近年来，分子生物学技术的发展，基因探针技术、PCR技术应用于淋球菌的检测，实现了快速、特异、敏感的检测和鉴定淋球菌的目的。现就我院门诊拟诊淋病137例检测结果加以总结。     

荧光定量PCR检测抗酸染色涂片刮削物中结核分枝杆菌DNA的可行性

目的:分析荧光定量PCR技术检测抗酸染色涂片刮削物中结核分枝杆菌DNA的检测能力.方法:应用结核分枝杆菌(TB)核酸检测试剂(PCR-荧光探针法)检测80例阴性、25例1-9条/300视野、95例1+、40例2+、21例3+、20例4+抗酸染色显微镜检查结果的涂片刮削物结核分枝杆菌DNA,分析不同阳性等级涂片的靶DNA检出情况,并应用Spearman等级相关分析阳性等级与检出基因拷贝数的相关性.结果:在1-9条/300视野、1+、2+、3+、4+的涂片刮削物中,分别有7、48、31、19、20例结核分枝杆菌DNA检测阳性,阳性检出率分别为28.00％、50.53％、77.50％、90.48％和100.00％,总检出率为62.19％,阳性等级与靶基因拷贝数检测结果呈正相关(r=0.684,P＜0.001);80例阴性涂片刮削物检测结果均呈阴性.结论:荧光定量PCR技术对2+以上的抗酸染色涂片刮削物中的结核分枝杆菌DNA具有较好的检测效能,但对本属于荧光定量PCR技术检测灵敏度范围的1+涂片的低阳性检出率则需更进一步的研究.     

探讨荧光探针定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的临床评价

目的 探讨荧光探针定量(FQ-PCR)法检测三种性病即淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)的临床价值和了解本地区三种性病病原体感染现状。方法 用荧光探针定量(FQ-PCR)法对三种性病病原体DNA进行定量测定。结果 2607例标本其检出率分别为NG 4，6％．CT 7.8％。UU 11.2％，总检出率为43.5％。结论 应用FQ-PCR法具有较高的灵敏度度特异性、且定量准确结果可靠：1例标本可同时检测多种病原体DNA的可靠、准确、敏感的方法。     

SPA法协同凝集试验快速检测淋球菌抗原的应用

淋病是由淋球菌引起的一种急性传染病，患者常以尿急，尿频和排出脓性分泌物为主要症状，严重时可合并其它泌尿生殖系统炎症．近年来淋病广泛发生于世界各地而且发病率逐年上升，传染力很强，尤其是和无症状尚有传染力的病人接触一次即有20％～30％或更高的传染机会，因之对淋病患者及高危人群区的早期诊断，早期治疗将对防治消灭性病起着积极作用。我们根据协同凝集试验的原理采用SPA法进行实验，不仅快速，简便而且特异性强，敏感度高，现报告如下：1材料和方法1．1材料来源本院及宝鸡妇幼保健院门诊病例及正常人查体病例临床上诊断为淋…     

应用PCR法检测淋球菌、沙眼衣原体、脲原体的临床价值

淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CTS)、脲原体(URA)，是导致生殖道感染的重要病原体，我院于1997年5月～1999年12月期间应用聚合酶链反应(PCR)技术对700例生殖道感染的患者同时进行淋球菌、沙眼衣原体、脲原体检测。现将结果报道如下：     

实时荧光定量PCR检测曲霉DNA技术的建立与临床应用

目的 利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于系统性曲霉感染的快速检测.方法 用自行设计的高效率引物对标准菌株和临床疑为系统性曲霉感染患者血标本进行实时荧光定量PCR检测,对方法的敏感度和特异度进行评价,并与半乳甘露聚糖抗原检测比较.结果 琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致,熔解曲线峰值单一,对应温度值与预期值相同.检测97例可疑曲霉感染血标本,27例阳性,其中一次阳性7例,间断阳性14例,连续阳性6例,与临床诊断符合率为90%.结论 荧光定量PCR可敏感、特异地检测曲霉感染,有一定的临床应用前景.