超声波对组织硬结的动物实验和临床疗效观察

超声波对组织硬结的动物实验和临床疗效观察解放军第２５４医院理疗科张玉英，方惠平因长期注射抗生素或刺激性药物致使局部组织吸收不良而形成硬结。我们为探索超声波加中药治疗组织硬结的疗效，进行了动物实验和临床治疗。动物实验材料和方法选用大耳白色成年（１．５～...     

诊断级超声波辐照对人绒毛组织影响——细胞化学观察

本实验对经超声辐照后的人胚胎绒毛组织进行即时及近期超微姑构和过氧化氢细胞化学现察。辐照20分钟后立即取出绒毛组织进行实验，和超声辐照后3天取出绒毛组织进行实验。结果：前组绒毛蛆织有变化，合体滋养细胞线粒体嵴问隙及内质网扩张；过氧化氢细胞化学反应为阳性，合体滋养细胞微绒毛上有致密物沉积。后组超微结构无明显异常；过氧化氢细胞化学反应为阴性。结论：诊断剂量20分钟辐照可造成人绒毛组织有轻度改变，但近期内机体可修复。     

玻璃化保存工程化组织产品的实验与技术

目的:总结近年来玻璃化保存技术的新进展和多种工程化组织玻璃化保存的实验研究。探讨影响工程化组织低温保存的主要因素、评价指标等,以期指导玻璃化保存工程化组织的实验研究。资料来源:应用计算机检索Medline,EBSCO,ScienceDirect Onsite以及google scholar引擎中1980-02/2006-05关于细胞和组织低温保存的文献,检索词“tissue engineering,engineered tissue,cryopreservation,vitrification,ice-free cryopreservation,vitreous cryopreservation”,检索词被分别组合进行检索,限定文献语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1980-02/2006-05关于细胞和组织低温保存的文献,检索词“组织工程,工程化组织,冻存,玻璃化保存”,限定文献语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选出与研究关系密切的文献。纳入标准:研究对象为动物或人,包括基础与临床研究内容。重点选取与玻璃化保存技术基本原理相关以及具体的工程化构建物玻璃化保存相关的文献。排除标准:关于配子,胚胎和植物,食品等的玻璃化保存文章。资料提炼:共检索到122篇关于细胞和组织低温保存的文献,其中与本实验关系密切的文献17篇,间接相关的文献42篇,最终纳入31篇符合标准的文献。资料综合:组织工程产业化要求长期而稳定的保存包含活细胞的工程化组织产品,以及产品中细胞与材料的黏附。相对于传统的低温冻存技术而言,玻璃化保存因在保存过程中无细胞内外冰晶形成,可以改善复温后的细胞活力,并能保护细胞和支架材料之间的黏附。本文从近年来玻璃化保存技术的新进展和多种工程化组织玻璃化保存的实验研究进行综述,分析了玻璃化保存液要求高浓度,对细胞有非特异毒性损伤,对悬浮单细胞的玻璃化保存能得到较高的细胞存活,而与支架材料结合的种子细胞存活除受到冻存试剂和流程的影响外还受到自身结构的影响。结论:玻璃化保存是较好的生物系统保存方法,可以为工程化组织产品提供可靠的保存,但急需发现新的低毒高效的玻璃化试剂以及优化保存流程。     

大鼠断肢保存方法与血管组织病理变化的实验研究

目的 观察断肢不同保存方法与断肢血管病理变化的关系。方法 选用成年标准Wistar大鼠45只，随机分为3组，每组15只。I组：干燥实验组；Ⅱ组：75％乙醇实验组；Ⅲ组：生理盐水实验组。每组又根据实验条件的不同分为3个实验小组，每组5只。各组动物根据正交设计安排实验。结论 实验证实了(1)断肢保存的最佳方法是干燥、低温(0-4℃)、12h以内；(2)用生理盐水、0-4℃，36h的条件保存断肢与干燥、低温(0-4℃)、12h的条件能获得同样的保存效果，且不造成断肢血管明显的病理改变；(3)保存温度与断肢血管组织病理改变的相关性最大，高温是造成断肢血管组织病理改变的首要因素。     

不同冷冻方案保存人类卵巢组织的活性比较

背景：卵巢组织冷冻保存被认为是保存女性生殖内分泌功能安全、有效的方法,但目前尚无统一确定的方案。 目的：探讨3种冷冻方案对人类卵巢组织保存冷冻效果及卵泡活性的影响。方法：采用丙二醇慢速程序冷冻法、二甲基亚砜玻璃化冷冻法、液氮直投法对20例人类卵巢组织进行冷冻保存,复苏后采用细胞存活/死亡荧光分析法计数有活性的细胞,体外培养测定培养液雌二醇浓度及各级卵泡计数,判断3种不同冷冻方案对人类卵巢组织活性的影响。结果与结论：不同冷冻方案冻融后卵巢组织块的活性卵泡率均低于新鲜卵巢组（P 〈 0.05）,二甲基亚砜组最低,液氮直投法组与慢速程序冷冻法组差异无显著性意义。体外培养各冷冻组分泌的雌二醇水平比较,第4天时二甲基亚砜组低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组（P 〈 0.05）,至第8天时各冷冻组雌二醇水平与新鲜卵巢组一致。培养14 d组织学观察,各组卵巢组织内生长期卵泡比例增多,始基卵泡仍然占最主要的。新鲜卵巢组织正常卵泡的总数高于冷冻组（P 〈 0.05）,二甲基亚砜组的正常卵泡数低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组（P 〈 0.05）。提示冷冻保存对卵巢组织卵泡有一定的损伤,但仍能保存大部分始基卵泡的活性,经体外培养后可进一步发育并具有分泌功能,在3种冷冻方案中,慢速程序冷冻法和液氮直投法的冷冻效果优于二甲基亚砜玻璃化冷冻法,液氮直投法操作简便,冷冻效果稳定。     

组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的特征

目的：采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞，并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法：实验于2004—02／08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只，体质量150—180g，无菌条件下取全段主动脉中膜组织修剪成1mm&;#215;1mm大小的组织块直接贴壁于一次性塑料培养皿中，组织块间距0．5cm，保证细胞从组织块游出后有足够的生长空间并保持局部细胞密度的均匀，发现漂起的组织块及时清理，于37℃孵箱内放置1．5h左右使组织块与壁贴附后，缓慢加入改良Eagle培养液培养3～5d，待有细胞从组织块周围游出后换液。当细胞长满培养皿时即可传代。采用倒置相差显微镜和透射电镜及抗α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学方法观察主动脉平滑肌细胞的形态。绘制主动脉平滑肌细胞生长曲线，观察各生长时期的变化，并评估其培养方法的优点。结果：30只大鼠全部进入结果分析。①技术方法优点：贴块方便，直接一次性贴壁使污染机会少，随组织块生长随时清理漂起的组织块，可减少对其他组织块的毒性作用，并增加已游离出的细胞生长空间。②原代培养血管平滑肌细胞：光镜观察形态多样，大小略有差异，胞体较小，胞质折光性强。③传代血管平滑肌细胞：光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察：细胞形态不规则，胞浆内有肌丝，纵向平行排列，有密区，具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后可见细胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色，所有细胞均染色，呈阳性。④主动脉平滑肌细胞生长曲线：血管平滑肌细胞生长曲线近似“S”形，传代后第1天细胞数有所减少，经过2d潜伏适应期后进入对数生长期，持续两三天进入平台期。结论：组织块贴壁法培养技术具有操作简便，污染机会少，有足够细胞生长空间的优点，经光镜和电镜观察培养出新的主动脉血管平滑肌细胞具有平滑肌细胞特征，免疫组织化学染色也显示所有细胞均呈阳性。传代培养后第2天进入对数生长期，持续两三天进入平台期，可产生纯度高及数量多的平滑肌细胞。     

组织工程化肌腱的实验研究与临床应用

学术背景:肌腱损伤的治疗方法由于供体肌腱缺乏或免疫排斥反应等因素,使肌腱移植受限,随着细胞培养技术和移植技术的发展以及生物材料科学的发展,一种伞新的理想肌腱替代物--组织工程化人工肌腱将最终解决缺损肌腱的修复问题.目的:总结目前组织工程人工肌腱的研究历程和最新成果.检索策略:应用计算机检索PubMed数据库1994-01/2007-12的相关文献,检索词"tissue engineering,artificial biocompatibletendon",限定文章语言种类为English.同时计算机检索万方数据库1994-01/2007-12的相关文献,检索词"组织工程,肌腱",限定文章语言种类为中文.共检索文献80篇,中文55篇,英文25篇.纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章.②观点明确,分析全面的文章.③文献主体内容与此课题联系紧密的文章.排除因研究目的与本综述无关者8篇,内容重复件的研究40篇.文献评价:最终纳入符合标准的文献32篇.其中动物实验和在体、离体、细胞学实验10篇,综述、述评、讲座类文献12篇,临床研究10篇.资料综合:肌腱损伤后若未予以及时修复常会导致肢体功能障碍,组织工程化人工肌腱修复缺损肌腱可对肌腱缺损进行形态修复和功能重建,并达到永久性替代.目前,组织工程学研究进展迅速,但要真正应用于临床仍存在一些问题.首先,种子细胞的来源不能仪限丁自体肌腱细胞,其次,如何对材料进行合理改进,使其成为理想的塑造器官形状的三维支架材料,最重要的是如何模拟体内环境,在体外成功构建肌腱组织.结论:在体外利用生物反应器模拟体内环境,进行组织工程化肌腱的构建,将是未来的研究方向.     

组织细胞移植治疗中枢性瘫痪的实验与临床

目的：探讨中枢神经系统损伤所致瘫痪的治疗现状和进展水平。资料来源：计算机检索Medline2000-01／2005-01与中枢性瘫痪相关文章，检索词“Central nervous injury，paralysis，cell transplantation，therapy”，限定文章语言种类为英文。光盘检索中国生物医学文献数据库2000-01／2005-01期间的相关文章，限定文章语言种类为中文，检索词“瘫痪、治疗”。资料选择：对资料进行初审，选取有关中枢神经系统损伤所致瘫痪的临床和／或实验研究的文献，包括中西医治疗的各种措施，特别是国外有关神经干细胞移植治疗的最新进展。资料提炼：共收集有关的随机与非随机临床和／或实验的研究300余篇，其中密切相关的40余篇。资料综合：①研究中西结合的临床康复是目前国内常用的治疗方法，但缺乏严格的随机对照。②国外文献报道表明仅靠促进内在神经再生和消除外在抑制因素难以解决中枢神经系统损伤后的再生与功能恢复问题。③神经干细胞移植是目前的研究热点。胚胎组织来源的神经干细胞移植涉及伦理道德、免疫排斥反应等一系列问题，因此只能限于动物实验研究。成体非神经组织来源的神经干细胞包括自体骨髓基质细胞移植为中枢性瘫痪的治疗带来了新的希望。结论：脑和脊髓组织有自我修复的潜能，但临床常用的康复方法和中西药治疗收效甚微，而细胞移植将有可能成为中枢性瘫痪较理想的治疗方法之一。     

Parents' experiences of living through their child's suffering from and surviving severe meningococcal disease

The aim of this study was to describe the lived experience of parents whose child had suffered from and survived severe meningococcal disease. A Heideggerian phenomenological approach was used within the study and data were collected from long focused interviews. In total, eight parents took part in the study; one was a woman recruited as a pilot interview and the other seven were recruited for the main study. The data were analysed using Colaizzi's (1978) method. Eleven themes emerged: (1) complications/side effects; (2) emotional turmoil; (3) child's physical appearance; (4) family disruption; (5) fear of death; (6) loss of parenting role; (7) need for support and understanding; (8) need and value of communication, information and publicity; (9) parental intuition; (10) technological interventions and (11) the impact of care delivery. A review of the literature arising out of the data was undertaken, and a final synthesis statement as perceived by the parents was achieved. Living through this experience is perceived as a major emotional stressor, and although health professionals have some insight into the experience, they are largely naive to the enormity of the situation.     

引导组织再生术后屏障膜留置时间与牙周组织再生量的关系

目的:观察引导组织再生术(guidedtissueregeneration,GTR)后不同时期牙周组织的再生情况,以确定达到最大牙周组织再生量时屏障膜留置体内的合适时间。方法:将6只杂种狗的下颌双侧第二、三、四前磨牙制备慢性II度根分叉病变模型,一侧进行GTR治疗,另一侧只进行翻瓣术治疗,分别于术后第4,6,8周进行形态学和组织学观察。结果:GTR治疗组牙周组织再生量明显多于对照组,且GTR治疗后6周牙周组织再生量明显高于GTR术后4周(P<0.01),GTR治疗后第6周和8周之间差异无显著性意义。结论:GTR技术治疗II度根分叉病变患牙时,为达到最大牙周组织再生量所需要屏障膜的作用时间至少要6周。     

常规乳腺癌保乳术与射频消融术后患者生活质量的比较

目的 比较常规乳腺癌保乳术与射频消融术后患者生活质量及精神心理健康的差别,旨在探讨影响乳腺癌患者术后身心状况及生活质量的因素.方法 对该院乳腺甲状腺外科2010年5月～2015年1月期间收治乳腺癌患者,分为射频组(87例)和保乳组(145例).比较两组患者的人口学资料、肿瘤组织病理数据,采用自我形象量表、生活质量测定量表、术后外形满意度调查表等进行问卷调查,总结两组患者术后生活质量及心理健康状况.结果 两组患者的人口学资料、肿瘤病理学数据及肿瘤特征无统计学差异(P>0.05);自我形象得分总分统计学上有显著性差异(P<0.05),其中在功能受限性和患臂关注度上差异无统计学意义(P>0.05),而在疾病易感性、身体羞耻感、身体关注度和透视度,两组患者间的差异有显著性意义(P<0.05);两组患者功能维度中的性功能、症状维度中的对脱发担忧两个维度,无显著性差异(P>0.05),其余六个维度在统计学上均有显著性差异(均P<0.05);外形满意度方面,在术后对双侧乳房形状、乳房大小和术后疤痕等满意度方面,两组患者之间有显著差异(P<0.05);在术后乳头乳晕位置和形状方面两组间满意度则无显著性差异(P>0.05).结论 射频消融术后行保乳术患者有着更好的生活质量和心理卫生健康水平,其在自我形象评价、生活质量、术后外形满意度方面均优于单纯保乳术患者.     

Imaging with second-harmonic radiation probes in living tissue

We demonstrate that second-harmonic radiation imaging probes are efficient biomarkers for imaging in living tissue. We show that 100 nm and 300 nm BaTiO(3) nanoparticles used as contrast markers could be detected through 50 μm and 120 μm of mouse tail tissue in vitro or in vivo. Experimental results and Monte-Carlo simulations are in good agreement.     

Caring for newborns in a NICU: dealing with the fragility of living/surviving in the light of complexity

The objective of this study was to understand the meaning of being a nurse and providing care in the Neonatal Intensive Care Unit (NICU) of a general hospital in Southern Brazil, developing an explanatory theoretical model. The Grounded Theory and the Complexity Paradigm were used to develop the Theoretical Model: Caring for newborns in the NICU: Dealing with the fragility of living/surviving in the light of complexity. Data was collected from 11 subjects through an open interview, and organized using NVIVO software. A central category was identified: Dealing with the fragility of living/surviving: a care that is highly complex, sensitive, unique and shared. Care in the NICU, valuing the everyday interrelationships, aims to address all domains of complex health care, integrating and applying scientific knowledge. It is necessary to practice the strengths already inherent to nursing professionals, in addition to pursuing new strengths, an invitation to new models of care for newborns, their family, and the members of this complex system.