基于人T2DM易感SNP位点筛查食蟹猴T2DM易感SNP标记

2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus ,T2DM）及其并发症的迅速蔓延已经成为严重威胁人类健康的世界性难题。食蟹猴T2DM模型可以模拟人类T2DM发病进程,这对T2DM的预防,治疗和新药开发具有重要意义。本研究以37个与人密切关联的T2DM易感位点为基础,探讨对应食蟹猴同源区域的这些位点与83个食蟹猴个体之间的关联性。研究结果表明：在自发性T2DM组和对照组中,单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms ,SNP）位点SNPmf-66A,SNPmf-66B ,SNPmf-34A,SNPmf-34B, SNPmf-34C,SNPmf-56A,SNPmf-56B和SNPmf-56C的等位基因频率存在显著性差异 （P<0.05）,同时SNPmf-66A,SNPmf-66B,SNPmf-34A,SNPmf-34B和SNPmf-34C与空腹血糖之间也存在显著性关联性 （P<0.05）。因此,我们认为SNPmf-66A,SNPmf-66B ,SNPmf-34A,SNPmf-34B, SNPmf-34C 可能对食蟹猴T2DM动物模型构建具有重要意义。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T和A1298C多态性与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法：选取106例T2DM患者（病例组）和109名健康对照个体（对照组）,采用聚合酶链反应一限制性片段多态性分别检测C677T和A1298C多态位点等位基因频率和基因型并统计分析。结果：2组MTHFR基因C677T和A1298C位点基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）,T2DM发病中2个突变位点之间没有协同作用（P〉0．05）。结论：MTHFR基因C677T和A1298C多态位点与T2DM的易感性无明显的相关性。     

INSIG1基因SNPrs9769506位点的多态性与2型糖尿病的关系

目的：探讨胰岛素诱导基因1（INSIG1）单核苷酸多态性（SNP）rs9769506位点的多态性与2型糖尿病（T2DM）的相关性,以期为 T2DM 的防治提供潜在的分子靶点。方法选择河南省南阳市中心医院2013年1月至2014年3月收治的 T2DM患者98例,另选取体检中心的健康体检者90例作为对照组,INSIG1基因 SNP rs9769506位点多态性检测使用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）Taqman 分析。结果 T2DM 组 rs9769506位点 A 等位基因频率为54．1％,G 等位基因频率为45．9％,对照组 A等位基因频率为47．8％,G 等位基因频率为52．2％,两组之间差异无统计学意义（P ＞0．05）。 T2DM 组患者 rs9769506位点 A/A 、A /G 和 G/G 基因型频率分别为41．8％、24．5％和33．7％,对照组 rs9769506位点 A/A 、A/G 和 G/G 基因型频率分别为32．2％、31．1％和36．7％,A/A 基因型频率在对照组和 T2DM 组之间差异有统计学意义（P＜0．05）,而 A/G 和 G/G 基因型频率在对照组和 T2DM 组之间差异则无统计学意义（P＞0．05）。 T2DM 患者中三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL‐C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL‐C）表达水平在 A /A 、A/G 、G/G 基因型患者之间差异有统计学意义（P ＜0．05）,而 A/G 、G/G 基因型患者之间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 INSIG1基因 SNP rs9769506位点 A/A 基因型在 T2DM 患者中检出率高,对 T2DM 早期筛查及基因治疗具有临床指导意义。     

胞浆型磷脂酶A2基因多态性与2型糖尿病的关系

目的：探讨胞浆型磷脂酶A2（cPLA2）基因多态性与中国北方汉族人群2型糖尿病（T2DM）的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测T2DM患者（病例组121例）和健康对照（对照组142例）3个cPLA2基因（PLA2G4A、PLA2G4B和PLA2G4C基因）的基因型;借助UNPHASED分析平台,利用等位基因条件分析（COA）和基因型条件分析（COG）方法分析基因的联合作用与T2DM的遗传相关性。结果：病例组与对照组中3个基因位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律;病例组和对照组中各基因位点的等位基因及基因型的频数分布比较差异均无显著性（P>0.05）;COA分析表明BanISNP-rs1648833、BanISNP-rs1549637、rs1648833-rs1549637和BanISNP-rs1648833-rs1549637位点间的联合与T2DM不存在关联性（P>0.05）;而COG分析发现,rs1648833-rs1549637联合时与T2DM相关联（P<0.05）,但BanISNP-rs1648833、BanISNP-rs1549637和BanISNP-rs1648833-rs1549637位点间的联合与T2DM无关联（P>0.05）。结论：cPLA2基因多态性与中国北方汉族人群T2DM存在较弱的关联性。     

TNFRSF4基因 rs17568多态性与2型糖尿病的相关性

目的：探讨四川南充地区汉族人 TNFRSF4基因 rs17568多态性与2型糖尿病（T2DM ）的相关性。方法应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性技术检测186例健康体检者和220例 T2DM 患者 rs17568多态性。酶法测定血糖（Glu ）、血清甘油三酯（TG ）、总胆固醇（TC ）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL‐C ）。结果TNFRSF4基因 rs17568位点等位基因频率和基因型频率分布均符合 Hardy‐Weinberg 平衡定律。rs17568多态位点G等位基因频率为28.2％。两组rs17568位点G等位基因的频率差异无统计学意义（ P＞0.05）。rs17568多态位点在T2DM组和对照组中,GG、AG基因型携带者血清 HDL‐C水平较 AA基因型携带者明显升高（P＜0.05）。结论 TNFRSF4基因 rs17568多态性与T2DM无关联,但其G等位基因与血清HDL‐C水平密切相关。     

Betatrophin基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的: 探讨Betatrophin基因rs2278426多态性与2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法: 分别选取T2DM患者(T2DM组)和健康者(对照组)各200例,采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR RFLP)技术,对Betatrophin基因rs2278426多态性进行检测。结果： T2DM组Betatrophin基因rs2278426位点C/T+T/T基因型及T等位基因的频率明显高于对照组（P<0.05）。C/T+T/T基因型携带者空腹血糖及120 min OGTT血糖(2hPG)明显高于C/C基因型携带者（P<0.05）。Logistic回归分析显示,Betatrophin基因rs2278426 T等位基因相对于C等位基因,增加T2DM的发病风险。 结论： Betatrophin基因rs2278426多态性可能与T2DM的发生有关,T等位基因可能增加T2DM的发病风险。     

叉头蛋白p3基因rs3761548多态性与1型糖尿病的相关性

目的 探讨川北地区汉族人群调节性T细胞(Treg)转录因子叉头蛋白p3(Foxp3)基因rs3761548多态性与经典1型糖尿病(T1DM)的相关性。方法 回顾性分析2012年4月～2020年9月我院内分泌科收治的180例经典T1DM患者（T1DM 组）及同期本地186名无血缘关系的我院健康体检者（对照组）为研究对象。利用聚合酶链反应和质谱法对Foxp3基因rs3761548位点进行基因分型。酶法检测空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2 h PG)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);化学发光法检测空腹C肽(FCP)、餐后2小时C肽(2 h CP);液相色谱法检测糖化血蛋白A1c(HbA1c)。结果 Treg细胞转录因子Foxp3基因 rs3761548多态性位点等位基因频率和基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg 平衡定律。rs3761548多态位点A等位基因频率为18.7%。T1DM组和对照组之间rs3761548 多态位点A等位基因的频率差异无统计学意义( 19.2% vs18.3%, P＞0.05)。T1DM患者rs3761548多态位点A等位基因携带者的LDL-C水平更高,而FCP、2 h CP水平更低(P＜0.05)。结论 Foxp3基因 rs3761548多态性A等位基因与川北地区汉族T1DM患者LDL-C水平及FCP、2 h CP水平密切相关。     

对氧磷酶启动子基因多态性与2型糖尿病合并冠心病的关系

目的探讨中国人对氧磷酶（PON1）基因-108C／T遗传多态性与2型糖尿病（T2DM）合并冠心病（CHD）的关系。方法应用多聚酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性（RFLP）法分析PON1基因-108C／T遗传多态性在T2DM合并CHD组、单纯T2DM组、正常对照组的基因频率。结果中国人群PON1-108C／T基因位点C、T等位基因频率分别为0．477和0．523，是一个普遍多态性，T2DM合并CHD组患者T等位基因频率明显高于单纯T2DM组、正常对照组（P〈0.05）。结论PON1-108C／T多态性位点T等位基因与2型糖尿病合并冠心病相关联。     

CAPN10基因单核苷酸多态性与西南地区人群2型糖尿病的相关性研究

目的：探讨calpainl0基因单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）与西南地区汉族人群2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）遗传易感性的关系。方法：采用病例一对照研究设计,对144例T2DM患者和98例正常对照者采用双向等位特异性PCR技术（Bi—PASA）,检测calpain10基因SNP43MG位点、SNPddC／T位点和SNP56A／G位点的基因型,并进行关联分析。结果：与对照组相比,病例组SNP43的G／G等位基因型频率、SNP44的C／T等位基因型频率和SNP56的A／A等位基因型频率显著升高（分别为86．11％,73．5％;36．8％,19．36％;38．0％,9．8％）。SNP43的G等位基因频率、SNP44的C等位基因频率和SNP56的A等位基因频率在西南地区T2DM人群中显著升高（分别为93．06％,86．22;19．1％,9．69％;60．07％,44．96％）;单体型ATG、GCA、GTG频率在病例组与对照组的分布具有显著差异。结论：calpain10基因可能为西南地区汉族人群T2DM的易感基因。     

利用全基因组SNP芯片筛查2型糖尿病患者大血管病变易感基因

目的分析筛查2型糖尿病(T2DM)患者早期大血管病变的易感基因和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点。方法利用ILLUMINA人类全基因组SNP芯片(HumanCytoSNP-12 v1.0 DNA Analysis BeadChipKit),对在经多因素干预下仍出现大血管病变的34例T2DM病例及同样条件下未发大血管病变的52例对照进行SNP扫描分型;通过全基因组关联分析,筛选T2DM早期大血管病变的易感基因和遗传标记。结果通过PLINK软件对芯片结果进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),筛选出在病例组和对照组间有显著差异(P<0.01)的SNP位点总计452个,其中处于T2DM大血管病变主要代谢通路相关基因内或者附近的SNP位点37个,通过这些SNP位点锁定T2DM患者大血管病变易感基因30个。结论 T2DM大血管病变受遗传多态性影响,可能与多个基因以及位点相关。     

胰岛素抵抗与绝经后2型糖尿病患者股骨颈强度指数的相关性分析

目的 研究胰岛素抵抗（IR）与绝经后T2DM患者股骨颈强度指数的相关性。方法 选取2017年9月—2020年12月在南京医科大学附属常州第二人民医院内分泌科住院的绝经后T2DM患者217例,收集患者一般资料、生化指标、左侧股骨颈骨密度（BMD）、几何结构参数,计算稳态胰岛素评价指数（HOMA-IR）、左侧股骨颈强度指数等,并按HOMA-IR数值分为低、中、高IR组。结果 ①与低IR组相比,中、高IR组BMI升高（P <0.05）,糖尿病病程缩短（P <0.05）,CSI、BSI降低（P <0.05）。②HOMA-IR与BMI呈正相关（r =0.233,P <0.05）,与糖尿病病程、糖化血红蛋白呈负相关（r =-0.315和-0.143,均P <0.05）。③在校正糖化血红蛋白和糖尿病病程前后,HOMA-IR与CSI、BSI、ISI均呈负相关（r =-0.238、-0.237、和-0.189,均P <0.05）。④在校正了糖化血红蛋白、糖尿病病程、BMI后,HOMA-IR与CSI、BSI的相关性减弱,但仍呈负相关（r =-0.135和-0.155,均P <0.05）,HOMA-IR与ISI无相关性（r =-0.081,P >0.05）。⑤空腹C肽与CSI、BSI、ISI呈负相关（r =-0.192、-0.210和-0.960,均P <0.05）。在校正了糖化血红蛋白、糖尿病病程、BMI后,空腹C肽仅与BSI呈负相关（r =-0.148,P <0.05）。结论 绝经后T2DM患者IR与股骨颈强度指数低有关,尤其是股骨颈对弯曲的抵抗力。该研究为评估绝经后T2DM、IR患者个体的骨骼健康提供了一个新的思路。     

糖尿病ZDF大鼠早期微血管并发症的生化指标及病理组织学变化

目的观察自发性2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)ZDF大鼠早期微血管并发症的生化指标及病理变化。方法取6只7~8周龄的雄性ZDF大鼠适应性饲养3 d后,开始饲喂Purina#5008饲料,另取8只同周龄的雄性ZL大鼠为正常对照组,饲喂普通饲料。在12、14、16周龄时检测血糖(GLU)、血清胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超敏C反应蛋白(hs CRP)、糖化血红蛋白(Hb A1c),16周龄时处死,并对眼球、肾、心、脑组织进行病理学检查。结果 ZDF大鼠GLU、CHOL、TG、HDL-C、LDL-C、hs CRP水平逐渐升高。16周龄时,ZDF大鼠RBP、m ALB、TRF含量显著高于ZL大鼠(P0.01)。肾小球、视网膜、心肌、脑部出现不同程度的微血管病变,肾小球部分血管基膜增厚,视网膜内皮细胞增多,血管壁增厚,心脏出现少量心肌纤维化,海马区神经元异常。结论 ZDF大鼠在16周龄时出现T2DM早期微血管并发症,其中T2DM早期肾病、视网膜病变、心肌病变较为突出,脑神经元轻微病变。     

2型糖尿病与非酒精性脂肪肝、脂肪细胞因子相关性研究

目的研究2型糖尿病（T2DM）、非酒精性脂肪肝（NAFLD）与脂肪细胞因子的相关性。方法对健康对照组（A组）、NAFLD组（B组）、T2DM组（C组）及T2DM伴NAFLD组（D组）肝功能、血脂、血糖、胰岛素水平、血尿酸、脂联素（ANP）、肿瘤坏死因子（TNF—α）进行测定。结果与A组相比,B、C、D组ANP明显下降（P〈0．01）,TNF-α明显升高（P〈0．01）,D组与B、C组相比,ANP下降（P〈0．01）,TNF-α上升（P〈0．01）。结论脂肪细胞因子参与T2DM、NAFLD病理生理过程,恢复脂肪细胞因子的水平是非常有意义的。     

华北地区CYP1A2基因常见SNP位点的分布

目的 建立CYP1A2基因-3860G >A、-3113G >A、-2467delT、-739T >G、-163C >A、2321G >C、5347C >T等7个SNP位点的检测方法,探讨7个SNP位点在华北地区人群中的分布。方法 选取健康受试者,提取全血样本DNA,以Primer Premier 5软件自设计引物及探针,采用扩增阻滞突变系统（ARMS）结合TaqMan探针技术（ARMS-TaqMan法）建立CYP1A2基因7个SNP位点基因分型方法。结果 -3860G >A、-3113G >A、-2467delT、-739T >G、-163C >A、2321G >C、5347C >T7个SNP位点的突变等位基因频率分别为0.292、0.078、0.524、0.078、0.657、0.148、0.127。结论 成功建立7个SNP位点的ARMS-TaqMan基因分型方法,该方法具有准确、操作简单、高通量等优势。     

2型糖尿病患者抵抗素基因-420C/G位点多态性与高血压相关性研究

目的探讨2型糖尿病患者抵抗素基因-420C/G位点多态性与高血压的相关性.方法选取正常对照组72例,2型糖尿病组40例,2型糖尿病合并高血压组患者40例,利用PCR—限制性内切酶消化的方法检测抵抗素基因-420C/G位点多态性,比较和分析各组间基因型频率和等位基因频率及其与高血压危险因素的相关性.结果 （1）酶切后可见3种带型：CC型,CG型,GG型;（2）2型糖尿病合并高血压组C/G等位基因频率及基因型分布与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）2型糖尿病组C/G等位基因频率及基因型分布与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;（4）2型糖尿病合并高血压组抵抗素基因SNP-420C〉G多态性与高血压危险因素相关指标的比较结果：舒张压、年龄水平在含G等位基因组明显高于C等位基因组（P〈0.05）.结论 2型糖尿病患者抵抗素基因-420C/G位点多态性与高血压具有一定相关性.     

云南彝族Fetuin A基因多态性与2型糖尿病合并下肢动脉硬化的相关性研究

目的 研究云南彝族人群中Fetuin A基因rs4917、rs4918、rs1071592、rs2248690单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）的基因型、等位基因频率分布特征,及其与2型糖尿病合并下肢动脉硬化的相关性。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和等位基因特异引物-聚合酶链反应（ASP-PCR）技术检测120例健康对照组、61例2型糖尿病组、67例糖尿病合并下肢动脉硬化组Fetuin A基因4个位点的SNP。结果 Fetuin A基因rs1071592（C/A）位点的C/C型基因频率及C等位基因频率在2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化组高于健康对照组（P<0.01）;rs4917（C/T）、rs4918（C/G）、rs2248690（A/T）在3组中其基因型及等位基因频率差异无统计学意义（P>0.05）。Logistic回归分析显示糖尿病下肢动脉粥样硬化的发生与Fetuin A基因rs1071592位点CC基因型相关。结论 在中国楚雄地区彝族中存在Fetuin A基因rs4917（C/T）、rs4918（C/G）、rs1071592（C/A）、rs2248690（A/T）多态性。在云南彝族人群Fetuin A基因rs1071592位点CC基因型可能是糖尿病下肢动脉粥样硬化的危险因素。     

汉族人群NOS2 C-1173T、G-954C单核苷酸多态性及其等位基因频率与组合分布特征研究

目的:分析中国汉族人群诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区C-1173T、G-954C单核苷酸多态性及其等位基因频率与组合分布特征.方法:获取选择自然人群个体565人(男314例,女251例)血白细胞基因组DNA,利用嵌套式等位基因特异性引物PCR技术检测NOS2 C-1173T、NOS2 G-954C SNP.结果:NOS2 C-1173T SNP基因型分布CC、CT、TT分别为66.73%、26.37%、6.90%,C、T等位基因频率分别为79.88%、20.12%.NOS2 G-954C SNP基因型分布GG、GC、CC分别为61.77%、37.88%、0.35%,G、C等位基因频率分别为80.71%、19.29%.研究发现了NOS2基因在2位点的SNP前5种组合基因型分布:NOS2 C-1173C G-954G 233例(41.24%),NOS2 C-1173C G-954C 143例(25.31%),NOS2 C-1173T G-954G 89例(15.75%),NOS2 C-1173T G-954C 59例(10.44%),NOS2 T-1173T G-954G 27例(4.78%).结论:本研究揭示了中国汉族人群NOS2基因的2位点的SNP基因型及其组合分布特征,为研究该基因SNP与其生理功能和疾病的关系提供实验基础.     

全胃切除消化道重建术对胃癌合并Ⅱ型糖尿病血糖的影响

目的研究全胃切除加消化道重建术对胃癌合并Ⅱ型糖尿病(T2DM)术后血糖的影响。方法将胃底贲门癌合并T2DM患者25例行全胃切除加Roux-Y吻合术(A组);选取同期的远端胃癌合并T2DM患者25例行毕Ⅱ式手术(B组)作为对照组;比较两组术后第一个月及半年的血糖、C肽、糖化血红蛋白变化,采用t检验。结果①A组手术前后血糖、糖化血红蛋白及C肽改善无显著性差异(P>0.05),B组手术前后血糖、糖化血红蛋白及C肽的变化有显著性差异(P<0.05)。②两组间术后对比差异有显著性(P<0.05)。结论①全胃切除加Roux-Y吻合术对术后近期血糖无明显影响。②毕Ⅱ式术后近期血糖有明显改善,该术式对糖尿病有治疗作用。③胃与术后糖尿病改善有密切关系。④迷走神经肝支可能影响肠-胰岛轴。