半夏秫米汤镇静催眠作用的实验研究

目的:观察半夏秫米汤的镇静催眠作用,并探讨量效关系。方法:将40只昆明种小鼠随机分为正常组、地西泮组及半夏秫米汤低剂量组、中剂量组、高剂量组(原方剂量),每组8只。正常组按剂量0.1 mL/10 g给予生理盐水灌胃,地西泮组按剂量0.75 mg/kg给予地西泮水溶液灌胃,其余各给药组按剂量6.75 g/kg、13.5 g/kg、27 g/kg给予半夏秫米汤灌胃,每日1次,连续7 d。末次灌胃给药后以自主活动仪观察小鼠自主站立次数,协同阈下/阈上剂量戊巴比妥钠催眠实验观察小鼠入睡率、睡眠潜伏期及睡眠时间。结果:与正常组比较,半夏秫米汤各剂量组小鼠自主站立次数减少(P0.05或P0.01),且入睡率升高;半夏秫米汤中、高剂量组睡眠时间延长,睡眠潜伏期缩短(P0.05或P0.01)。结论:半夏秫米汤具有良好的镇静催眠作用,呈量效关系,以原方剂量效果最佳。     

交泰丸对睡眠剥夺大鼠血脑屏障P糖蛋白及下丘脑OrexinA的影响

目的探讨交泰丸拆方对睡眠剥夺大鼠模型血脑屏障P糖蛋白(P-gp)及下丘脑促觉醒神经递质orexin A的影响。方法将50只SD大鼠随机均分为5组,即空白对照组、模型组、交泰丸组(2.2g·kg-1·d-1)、黄连组(2g·kg-1·d-1)、地西泮组(0.0005g·kg-1·d-1),每组10只,空白对照组和模型组给予等量生理盐水,采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western-blot)分别检测血脑屏障中P糖蛋白(P-gp)的mRNA和蛋白质水平的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测下丘脑中Orexin A的含量变化。结果交泰丸组血脑屏障P-gp的mRNA水平和蛋白质表达水平,OrexinA 的含量均低于模型组(P0.05)。结论交泰丸中的黄连配伍肉桂增效可能是通过抑制血脑屏障中P-gp的表达,促进黄连主要催眠活性成分透过血脑屏障,抑制促觉醒神经递质Orexin A表达有关。     

半夏秫米汤对痰湿内阻慢性失眠模型大鼠5-羟色胺受体及5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸的影响

目的观察半夏秫米汤对痰湿内阻慢性失眠模型大鼠5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)及5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的影响, 探讨该方化痰通利、引阳入阴安神的作用机制。方法将48只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组, 模型组, 半夏秫米汤低、中、高剂量组, 地西泮组, 每组8只。除正常组外, 其余各组采用"高脂饲料+单平台水环境法"制备痰湿内阻慢性失眠大鼠模型, 半夏秫米汤低、中、高剂量组灌胃半夏秫米汤4.69、9.38、18.75 g/kg, 地西泮组灌胃地西泮水溶液0.52 mg/kg, 1次/d, 连续灌胃2周。正常组、模型组灌胃等体积生理盐水。采用qPCR法检测大鼠脑干5-HT1AR、5-HT2AR mRNA水平, 采用Western blot法检测大鼠中缝核5-HT1AR、5-HT2AR蛋白表达, 采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法检测大鼠脑干5-HT、5-HIAA含量。结果与模型组比较, 半夏秫米汤低、中、高剂量组及地西泮组5-HT1AR mRNA水平升高(P<0.01);半夏秫米汤高剂量组、地...     

黄连解毒汤及其有效部位调控星形胶质细胞网络对MCAO大鼠丘脑损伤的保护

目的:观察黄连解毒汤水提物及3个有效部位(总生物碱、总黄酮、总环烯醚萜)对中动脉栓塞(MCAO)大鼠丘脑的保护作用。方法:线栓法建立MCAO大鼠模型,雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、黄连解毒汤水提物(800 mg·kg-1)、总生物碱组(44 mg·kg-1)、总黄酮组(50 mg·kg-1)、总环烯醚萜组(80 mg·kg-1),连续ig给药7 d,每天给药1次。HE染色观察丘脑病理学改变;高效液相-色谱荧光法检测丘脑谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量;免疫荧光单标染色法检测丘脑谷氨酸脱羧酶(GAD65)的表达;免疫荧光双标染色法检测星形胶质细胞纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)表达。结果:中动脉栓塞7 d大鼠丘脑部分神经元变性,和假手术组相比,丘脑Glu,GABA含量降低(P<0.05),GAD65表达减弱(P<0.05),GFAP,Cx43表达增强(P<0.01)。黄连解毒汤水提取物及3个部位均可不同程度减轻丘脑神经元变性程度。总黄酮可明显上调丘脑GAD65表达,降低GFAP,Cx43蛋白表达,差异较模型组明显(P<0.01),促进丘脑Glu,GABA含量恢复至正常水平。黄连解毒汤水提取物、总生物碱组、总环烯醚萜组大鼠丘脑Cx43蛋白表达较模型组明显上调(P<0.01),水提物组大鼠GAD65表达也较模型组明显增高(P<0.05)。黄连解毒汤水提取物、总生物碱组、总环烯醚萜组大鼠丘脑GFAP蛋白表达较模型组没有显著性差异,GABA含量明显低于假手术组(P<0.05)。结论:中动脉栓塞后,丘脑可出现神经细胞变性,递质氨基酸含量减少,星形胶质细胞异常活化,GFAP,Cx43蛋白表达异常。黄连解毒汤总黄酮可减轻脑缺血后丘脑神经细胞损伤,其作用与抑制星形胶质细胞异常活化,调节GFAP,GAD65蛋白表达关系密切。     

艾司唑仑联合黄连阿胶汤加减对脑卒中后失眠血亏阴虚证大鼠的影响

目的研究艾司唑仑联合黄连阿胶汤加减对脑卒中后失眠血亏阴虚证大鼠的影响。方法 75只大鼠随机分为空白组、模型组、联合组[艾司唑仑(2 mg/kg)+黄连阿胶汤加减(18.0 g/kg)]、艾司唑仑组(2 mg/kg)、黄连阿胶汤加减组(18.0 g/kg),除空白组外,其他各组大鼠建立脑卒中后失眠血亏阴虚证模型。治疗14 d后,观察大鼠睡眠时相觉醒期(Wake)、慢波睡眠一期(SWS1)、慢波睡眠二期(SWS2)、快动眼睡眠期(REMS)、总睡眠时间(TST);取脑干和下丘脑,测定谷氨酸脱羧酶(GAD)、谷氨酰胺合成酶(GS)蛋白表达;取下丘脑和动脉血浆,测定5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)水平。结果与模型组比较,联合组SWS1、SWS2、REMS、TST显著延长(P0.05),GAD、5-HT、5-HIAA水平显著升高(P0.05),GS、NA、DA水平显著降低(P0.05)。结论艾司唑仑联合黄连阿胶汤加减可明显延长脑卒中后失眠血亏阴虚证大鼠SWS1、SWS2、REMS、TST,其机制可能与调节脑干和下丘脑GAD、GS蛋白表达,改善血浆和下丘脑中5-HT、NA、5-HIAA、DA水平有关。     

刺人参改善睡眠的有效部位筛选

目的:筛选刺人参改善睡眠作用的有效部位.方法:选用ICR小鼠随机分为空白对照组、地西泮组及7个给药组:刺人参水提液组、刺人参醇提液组、上清液组、沉淀物组、10％乙醇洗脱组、30％乙醇洗脱组、60％乙醇洗脱组.空白对照组和地西泮组给予生理盐水,给药组给予相应药液,各给药组剂量(生药)均为64 g·kg-1,每天ig 1次,ig体积为20 mL· kg-1,连续7d,采用戊巴比妥钠协同小鼠睡眠实验方法,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间.结果:①刺人参水提液协同戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期为(2.82±0.47) min,睡眠时间为(44.5±4.23) min;醇提液协同戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期为(2.87±0.51) min,睡眠时间为(45.24±4.74)min,且与空白对照组睡眠潜伏期(4.63 +0.62) min,睡眠时间(21.47±3.79) min相比均有显著性差异(P＜0.05).②刺人参水提液经过醇沉后,其上清液与空白组比较明显缩短了睡眠潜伏期(2.85±0.43) min和延长睡眠时间(46.25±5.4) min,差异具有显著性意义(P＜0.05).沉淀物与空白组比较没有明显的差异.③60％乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠诱导的小鼠明显的缩短睡眠潜伏期(3.14±0.46) min和延长睡眠时间(45.37±5.22)min,与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:刺人参改善睡眠作用的有效部位是刺人参水提液经醇沉后的上清液60％乙醇洗脱部位.     

蜂眠宁胶囊对D-半乳糖小鼠抗衰老作用的实验研究

目的观察蜂眠宁胶囊对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用,为蜂眠宁胶囊预防和治疗老年痴呆症提供临床依据。方法用D-半乳糖制备小鼠衰老模型,采用Morris水迷宫进行定位航行试验、空间搜索试验,测定各组小鼠的逃避潜伏期及穿越平台次数;并测定各组小鼠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,蜂眠宁胶囊低剂量组(0.6g·kg-1·d-1)、高剂量组(0.9g·kg-1·d-1)逃避潜伏期均明显减少(P0.05),且穿越平台次数均显著增多(P0.05,P0.01);蜂眠宁胶囊高剂量组(0.9g·kg-1·d-1)能显著提升D-半乳糖所致衰老小鼠脑组织中SOD、GSH-Px的活性,降低脑组织中MDA的含量。结论蜂眠宁胶囊能改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力,抑制其脑组织脂质过氧化,具有抗衰老作用。     

双夏秫米汤对大鼠睡眠改善作用的研究

目的 探讨双夏秫米汤(半夏、夏枯草、薏苡仁1∶2∶1)对动物睡眠的改善作用。方法 (1)采用回流提取法制双夏秫米汤浸膏,配置成高、中、低剂量(248.5、497、994 mg/kg)的混悬液,阳性药选用地西泮(0.9 mg/kg)首先分别以高、中、低剂量进行协同阈上剂量的戊巴比妥钠(35 mg/kg)翻正实验,观测不同剂量的双夏秫米汤对大鼠睡眠时长以及睡眠潜伏期的影响;(2)腹腔注射400 mg/(kg·d)对氯苯丙氨酸(P-chlorophenylalanine, PCPA)复制失眠模型大鼠。模型复制成功后分别予以高、中、低剂量的双夏秫米汤混悬液连续给药7天,治疗结束后采用协同阈上剂量的戊巴比妥钠翻正实验观测不同剂量的双夏秫米汤对失眠大鼠的睡眠时长和睡眠潜伏期的影响,再通过旷场实验分别记录各组大鼠在5分钟内的移动距离、穿格数、中央区停留时间、直立次数、修饰次数;(3)使用脑电图结合肌电图的方法分析大鼠灌胃高剂量双夏秫米汤后8小时内的睡眠结构,分别观测大鼠的睡眠潜伏期,苏醒时长、总睡眠时长、非快眼动睡眠时长、快眼动睡眠时长。结果 (1)在协同阈上剂量的戊巴比妥钠翻正实验中双夏秫米汤高剂...     

补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障通透性的影响

目的探讨补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障通透性的影响及其机制。方法雄性小鼠随机分成对照组、模型组、治疗组(吡拉西坦0.62g·kg-1·d-1)、补阳还五汤高剂量组(37.06g·kg-1·d-1)、补阳还五汤中剂量组(18.53g·kg-1·d-1)、补阳还五汤低剂量组(9.26g·kg-1·d-1),连续治疗28d后取材。检测小鼠脑组织含水量、EB含量。采用双抗体夹心法测定脑组织IL-6水平。结果与对照组比较,模型组小鼠脑组织含水量、EB含量和IL-6含量明显升高(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组脑组织含水量、EB含量和IL-6含量明显降低(P0.05)。结论补阳还五汤可以有效降低阿尔茨海默病模型小鼠血脑屏障破坏的程度。     

探究半夏不同炮制方法对半夏秫米汤治疗失眠的影响

目的:基于半夏不同炮制方法探究半夏秫米汤治疗失眠的效果,筛选出最佳疗效品种及剂量,并探究其作用机制。方法:实验分2轮进行,均采用对氯苯丙氨酸腹腔注射法复制大鼠失眠模型,后予以中药干预。第1轮实验结束后通过翻正实验筛选出最优疗效组进行第2轮实验,第2轮实验结束后检测翻正实验,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、白介素-1β(IL-1β)的浓度。结果:第1轮筛选实验结果显示,雌雄大鼠体质量阳性组和姜半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。睡眠潜伏期缩短时间及睡眠持续时间方面,雌性大鼠阳性组、姜半夏组、生半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜半夏组>生半夏组。雄性大鼠阳性组、姜半夏组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜半夏组。第2轮剂量实验结果显示,雌性大鼠体质量阳性组、姜高组、姜中组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,阳性组、姜高组、姜中组可明显缩短大鼠睡眠潜伏期,延长睡眠持续时间,升高5-HT、IL-1β水平,降低NE水平,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其中阳性组>姜高组>姜中组。结论:高剂量姜半夏组成的半夏秫米汤治疗失眠效果最优,其机制可能是通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴通路上神经递质的含量发挥作用。     

10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃黏膜组织病理学的影响

目的： 观察干姜、肉桂、丁香、吴茱萸、小茴香、高良姜、荜茇、荜澄茄、花椒、胡椒10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃黏膜组织病理学的影响,以期观察温中散寒药的温胃、护胃作用,探讨温中散寒药的作用机制与药效本质。 方法： SD雄性大鼠分为15个组：空白组、模型组、附子组、干姜组、肉桂组、丁香组、吴茱萸组、小茴香组、高良姜组、荜茇组、荜澄茄组、花椒组、胡椒组、石膏组、黄连组。灌服知母水提液17.5 g·kg^-1,2次/d,连续2 d建立大鼠胃实寒证模型。附子组13.5 g·kg^-1,干姜、胡椒组8.1 g·kg^-1,肉桂、吴茱萸组4.1 g·kg^-1,丁香、荜茇、荜澄茄组2.7 g·kg^-1,小茴香、高良姜、花椒组5.4 g·kg^-1,石膏组54 g·kg^-1,黄连组4.5 g·kg^-1,2次/d,连续3次。肉眼观察胃黏膜变化,光镜下观察胃黏膜组织病理学改变并根据胃组织病理改变的评分标准进行评分。 结果： 肉眼观察,与空白组比较,模型组胃黏膜表面颜色灰暗、皱缩、无光泽,有大小不等的出血点;与模型组比较,10个温中散寒药组的胃黏膜均有所改善。光镜下观察,与模型组比较,除高良姜组外其余9个组均能明显减少炎细胞浸润（P<0.05或P<0.01）;10个温中散寒药组均能明显减少胃黏膜腺体的破坏（P<0.01）。 结论： 10味温中散寒药通过改善大鼠胃黏膜的破坏从而发挥其治疗胃实寒证的药效。     

阿胶酶解液相对分子质量分布及其补血升白作用

目的:研究阿胶酶解液的相对分子质量分布及其补血、升白的作用。方法:采用TSK-GEL G2000SWXL色谱柱(7.8 mm×300 mm,5μm),流动相0.1 mol·L~(-1)NaCl+0.05%NaN_3+0.1 mol·L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH 6.7),流速0.5 m L·min~(-1),检测波长280 nm,对阿胶原液、阿胶仿生酶解液、阿胶胰蛋白酶酶解液进行相对分子质量分布的测定;采用放血法致小鼠血虚模型及环磷酰胺致小鼠白细胞减少模型,观察阿胶酶解液的补血升白作用。结果:阿胶所含蛋白及多肽的相对分子质量6.64×10~4Da,胰蛋白酶酶解液及仿生酶解液的相对分子质量主要集中在3.7×10~3Da左右;阿胶仿生酶解液及胰蛋白酶酶解液可使血虚模型小鼠血红蛋白(Hb),红细胞计数(RBC)水平显著提高,使白细胞减少模型小鼠的白细胞计数(WBC),RBC和Hb水平显著提高。结论:阿胶经酶解后相对分子质量减小且具有显著的补血升白作用,胰蛋白酶酶解与仿生酶解效力大致相当。     

阿胶DNA提取方法优化

目的:优选阿胶DNA的提取方法和效率,为其他高蛋白含量产品中DNA的提取提供参考。方法:采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取阿胶DNA,针对阿胶产品的自身特性,优选SDS法中蛋白酶K作用时间和蛋白洗脱步骤。结果:在同等条件下,SDS法较CTAB法对阿胶DNA的平均提取量高0.022 g·L-1。优化的SDS法为蛋白酶K作用时间1.5 h,使用酚-三氯甲烷-异戊醇洗脱阿胶中蛋白质,重复3次;阿胶DNA的纯度较原工艺提高了48.3%。结论:采用SDS法对阿胶中蛋白的清除作用较CTAB法效率高,优化的SDS法对阿胶DNA的提取适用性较强,为阿胶中动物来源分子生物学检测提供条件。     

补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用与紧密连接蛋白的关系

目的: 探讨补阳还五汤对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)致动脉粥样硬化(AS) 的保护作用与紧密连接蛋白表达的关系. 方法: 将40只雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠随机分为模型组、补阳还五汤低、中、高剂量组,Rho激酶抑制剂Y-27632组.以正常雄性C57BL/6J小鼠设正常组,每组8只动物.模型组和治疗组均采用0.1 g·kg^-1·d^-1的Hcy造模,造模同时,治疗组分别补阳还五汤(5,10,20 g·kg^-1·d^-1)组,Y-27632 50 mg·kg^-1组,ig.8周后采用Western-blot检测主动脉组织claudin蛋白的表达变化和反转录PCR(RT-PCR)检测连接蛋白包括咬合蛋白(occludin)、闭合蛋白(claudin)、带状闭合蛋白(zonula occludens, ZO)、连接黏附分子(junction adhesion molecule, JAM)的mRNA的表达变化. 结果: 与正常组对比,Western-blot检测模型组AS病变明显,模型组与正常组比claudin蛋白表达明显减少,RT-PCR检测模型组与空白组相比,claudin,JAM,Zo,Occludin的mRNA的表达明显降低,不同剂量的补阳还五汤改善AS病变的同时上调血管组织中Claudin,JAM,Zo,Occludin的表达水平. 结论: 补阳还五汤能显著的增加血管组织中Claudin,occludin,JAM,Zo表达量,说明补阳还五汤抗hcy所致的AS与增强血管组织中紧密连接蛋白有关.     

厚朴醇提物与远志醇提物配伍对大鼠粪便代谢物的影响

目的:考察厚朴醇提物、远志醇提物及二者配伍对大鼠粪便代谢物的影响,分析其潜在的代谢通路,为探索厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的机制提供实验依据。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为空白组,厚朴醇提物组(3. 50 g·kg~(-1)),远志醇提物组(1. 75 g·kg~(-1)),配伍组(3. 50 g·kg~(-1)+1. 75 g·kg~(-1)),连续灌胃给药3 d,收集大鼠末次给药24 h内的粪便,采用UPLC-Q-TOF-MS采集粪便代谢物数据,流动相乙腈(A)-0. 1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～0. 5 min,3%A;0. 5～12. 5 min,3%～70%A; 12. 5～13 min,70%～90%A; 13～16 min,90%～97%A; 16～17 min,97%～100%A; 17～22 min,100%A; 22～23 min,100%～3%A),电喷雾离子源,正、负离子模式数据采集范围m/z 50～1 200;借助Progenesis QI v2. 0,SIMCA-P 14. 0,SPSS 20. 0,MetaboAnalyst 4. 0等软件进行多元分析,筛选特征代谢标志物并分析其相关代谢通路。结果:共筛选出5-亚胺甲基四氢叶酸,L-3-羟基犬尿氨酸,7,8-二氢蝶酸等17个特征代谢标志物,其相关代谢通路为不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢、维生素B_6代谢、叶酸生物合成等。结论:厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的作用机制可能与嘌呤代谢、叶酸生物合成、色氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成有关。     

降脂抗氧化合剂对ApoE-/-小鼠5-脂氧化酶通路表达的影响

目的:探讨降脂抗氧化合剂对ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)5-脂氧化酶(5-LO)通路表达的影响。方法:采用高脂饲料连续喂养12周ApoE-/-小鼠,建立动脉粥样硬化动物模型,将已经形成动脉粥样硬化的ApoE-/-小鼠分为模型对照组、降脂抗氧化合剂低剂量组、降脂抗氧化合剂高剂量组、阳性药(辛伐他汀)对照组,每组10只。同时选用同遗传背景正常C57BL/6J小鼠10只,作为正常对照组,予饲喂普通饲料。阳性药(辛伐他汀)对照组以0.05 g·kg-1·d-1ig,降脂抗氧化合剂低、高剂量组分别含生药17.41,69.66 g·kg-1·d-1ig,正常对照组及模型对照组分别给予同体积的蒸馏水,连续ig 28 d后,心脏取血用于酶联免疫测定,取腹主动脉,采用HE染色对腹主动脉的形态学改变进行观察;提取腹主动脉RNA,进行RT-PCR检测5-LO基因的表达量;同时采用ELISA方法检测血清中白三烯B4(LTB4)及白三烯D4(LTD4)的蛋白含量。结果:与正常组比较,模型组的动脉硬化病变、组织5-LO、血清LTB4及LTD4水平都有明显加重或升高(P<0.01)。与模型组比较,高剂量的降脂抗氧化合剂较低剂量的降脂抗氧化合剂可以更显著下调5-LO的基因表达量(P<0.01),病理切片HE染色显示给药降脂抗氧化合剂后,高剂量给药组血管的组织形态较模型组有明显改变,和阳性药组结果类似,显示出药物对动脉粥样硬化具有较好的治疗效果;血清ELISA法结果显示高剂量的降脂抗氧化合剂可以显著降低血液LTB4及LTD4水平,与模型组间比较差异显著(P<0.01)。结论:降脂抗氧化合剂可降低组织5-LO的水平,改善动脉粥样硬化血管组织形态,减少脂质沉积,还可以降低血清LTB4及LTD4水平,改善炎症,达到治疗动脉粥样硬化的目的。     

朱砂安神丸、朱砂、硫化汞、氯化汞、甲基汞对小鼠肾转运体基因表达的影响

目的:探讨朱砂安神丸、朱砂、硫化汞(Hg S)、氯化汞(Hg Cl2)和甲基汞(Me Hg)对小鼠肾转运体基因表达的影响。方法:将健康雄性小鼠分别ig等量生理盐水、朱砂安神丸1.8 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、朱砂0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、高剂量朱砂2 g·kg-1(含汞1.7 g·kg-1)、Hg S 0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、Hg Cl20.032 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1)、Me Hg 0.026 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1),每天1次,连续30 d,记录小鼠体重变化。30 d后处死取肾脏,双道原子荧光光度法检测小鼠肾组织汞蓄积量,RT-PCR方法检测小鼠肾组织有机阴离子转运体基因(Oat1,Oat3,Oat2)、多药耐药相关蛋白基因(Mrp2,Mrp4)、尿酸转运体基因(Urat1)的表达。结果:与正常组相比,Hg Cl2组和Me Hg组小鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.05),其余各组肾汞蓄积量与正常组无显著差异;Hg Cl2组和Me Hg组Oat1,Oat2表达显著降低(P<0.05);Me Hg组Mrp2基因的表达显著升高(P<0.05);Hg Cl2组和Me Hg组Mrp4基因表达显著升高(P<0.05);Me Hg组Urat1基因表达显著降低(P<0.05)。结论:Hg Cl2组和Me Hg组小鼠肾汞蓄积量、肾转运体基因表达与正常组有显著差异,其余各组各项检测指标与正常组小鼠相比无显著差异。与Hg Cl2和Me Hg相比,朱砂及其复方对小鼠造成的肾毒性相对较低。     

滋阴安神方对实验性更年期模型大鼠的影响

目的:观察滋阴安神方对实验性更年期模型大鼠及正常小鼠的影响,为滋阴安神方的临床应用提供实验依据。方法:采用摘除卵巢的方法建立更年期大鼠模型,随机分为更年期模型组、滋阴安神方高、中、低剂量(10,5,2.5 g·kg~(-1))组、戊酸雌二醇(0.09 mg·kg~(-1))组、更年安片(0.48 g·kg~(-1))组,另设假手术组,每组12只。连续灌胃给药30 d,放射免疫法测定大鼠血浆促卵泡生成素(FSH),黄体生成素(LH),雌二醇(E_2),孕酮(P)含量,光镜下测量大鼠子宫内膜厚度。雌性ICR小鼠随机分为正常组、滋阴安神方高、中、低剂量(16.69,8.34,4.17 g·kg~(-1))组和地西泮(0.001 g·kg~(-1))组,每组12只。灌胃给药7 d,腹腔注射戊巴比妥钠(0.03 g·kg~(-1)),记录翻正反射消失的小鼠数及入睡潜伏期。雌性ICR小鼠随机分为正常组、滋阴安神方高、中、低剂量(16.69,8.34,4.17 g·kg-1)组和百忧解(0.03 g·kg~(-1))组,每组12只。灌胃给药7 d,进行悬尾实验,记录小鼠后4 min的累计不动时间。结果:与假手术组相比,模型组大鼠血浆FSH显著升高(P0.01),E_2明显降低(P0.05),子宫内膜厚度显著下降(P0.01);与模型组相比,滋阴安神方各组、戊酸雌二醇组及更年安片组大鼠血浆中E_2水平及子宫内膜厚度都有一定程度升高,且滋阴安神方高、中剂量能降低血浆FSH水平。小鼠行为学实验中,滋阴安神方高剂量及地西泮可显著提高与阈下剂量戊巴比妥钠协同催眠小鼠的入睡率(P0.05,P0.01);同时滋阴安神方低剂量及百忧解可显著缩短悬尾试验小鼠累计不动时间(P0.05,P0.01)。结论:滋阴安神方可提高更年期大鼠血浆E_2水平,降低FSH水平,增加子宫内膜厚度,并具有一定的催眠及抗抑郁的作用。     

定心方上调ApoE-/-小鼠PTEN表达抑制动脉粥样硬化形成的分析

目的:探讨定心方(DXR)对Apo E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠人第十号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同系物(PTEN)的影响,以及DXR抗AS的可能机制。方法:将50只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组,辛伐他汀组,DXR低、中、高剂量组,另取10只C57/BL6J小鼠作为正常组。分别给予DXR低、中、高组按剂量9.25,18.59,37.18 g·kg-1·d~(-1)DXR药液ig,辛伐他汀组按剂量0.005 g·kg-1·d~(-1)ig辛伐他汀,高脂饲料喂养16周后处死,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块面积,检测小鼠血脂以及血清中丙二醛(MDA),总超氧化物歧化酶(T-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),总抗氧化能力(T-AOC)水平。蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测胸主动脉PTEN蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血脂及MDA明显升高(P0.05),T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平降低,胸主动脉PTEN蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,DXR中、高剂量组能明显降低ApoE~(-/-)小鼠血脂水平,升高T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平,并降低MDA水平(P0.05),且能上调ApoE~(-/-)小鼠主动脉PTEN蛋白表达水平(P0.05)。DXR各剂量组斑块面积较模型组明显缩小(P0.05)。结论:DXR可通过调节ApoE~(-/-)小鼠血脂代谢,抑制氧化应激,上调PTEN蛋白表达,进而抑制ApoE~(-/-)小鼠AS的发生发展。     

六味地黄丸对APP/PS1小鼠学习记忆能力及胆碱能系统的影响

目的:探讨六味地黄丸对APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力以及胆碱能系统的影响。方法:将40只APP/PS1双转基因小鼠随机分为APP/PS1模型组,六味地黄丸低、中、高剂量(0.59,1.18,2.36 g·kg^-1·d^-1)组,西药布洛芬(0.04 g·kg^-1·d^-1)组,每组8只。相匹配的3月龄野生型(WT)小鼠8只,作为正常组。ig给药3个月,通过Morris水迷宫检测学习记忆能力。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠大脑皮层乙酰胆碱(ACh)含量,乙酰胆碱转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果:与正常组相比,APP/PS1模型组小鼠在各时期找到平台所需的时间(潜伏期)均延长(P<0.05),在平台所在象限停留时间,百分比,穿越平台次数均降低(P<0.05),ACh含量及ChAT活性均降低(P<0.05)。六味地黄丸低、中、高剂量组和布洛芬组与APP/PS1模型组相比潜伏期缩短(P<0.05),在平台所在象限停留时间,百分比,穿越平台次数均增高(P<0.05),ACh含量及ChAT活性均增高(P<0.05),AChE活性无统计学差异。结论:不同剂量的六味地黄丸可通过提高脑内ChAT活性,增加ACh含量影响中枢神经胆碱能系统,从而改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力。