林蛙抗菌肽喷雾剂的制备及体外抑菌活性研究

 目的研究林蛙抗菌肽喷雾剂的制备方法及该制剂的体外抑菌活性。方法采用正交设计方法确定喷雾剂处方,用紫外分光光度法测定制剂中的林蛙抗菌肽含量,杯碟法进行林蛙抗菌肽喷雾剂对铜绿色假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃氏菌及临床多重耐药菌的体外抑菌试验。结果林蛙抗菌肽喷雾剂对上述菌均有抑制作用。结论该制剂制备工艺可行,性质稳定,且抑菌效果良好。     

家蝇幼虫分泌型抗菌肽对细菌感染小鼠的影响

目的:探讨家蝇幼虫分泌型抗菌肽对细菌感染小鼠的影响.方法:选用BALB/c小鼠,随机分为3组:抗菌肽预防性干预组(小鼠感染前3d预防性给抗菌肽10 mg·kg-1·d-1)、治疗性干预组(感染后予抗菌肽10 mg·kg-1)和模型组(感染后予生理盐水),小鼠细菌感染方式为ip大肠杆菌液,给抗菌肽方式亦为ip给药,设正常小鼠为对照.分别检测以下指标:感染后4,12 h各组小鼠腹腔液细菌数量;感染后4,8,12,24 h小鼠外周血内毒素、一氧化氮(NO)含量及鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)等细胞因子水平.结果:预防性给抗菌肽能明显减少小鼠腹腔液的细菌数量,同时小鼠外周血TNF-α,IL-6,NO及内毒素含量均明显低于模型组;治疗性给抗菌肽组小鼠腹腔液细菌数及外周血内毒素含量亦明显低于模型组,但对其他指标的干预作用较预防性给抗菌肽组弱.结论:家蝇幼虫分泌型抗菌肽ip给药对大肠杆菌ip感染小鼠具有一定的抑制作用.     

薄膜分散联合冻融法制备小菜蛾抗菌肽脂质体研究

目的制备小菜蛾抗菌肽脂质体,提高小菜蛾抗菌肽的稳定性。方法采用薄膜分散联合冻融法制备小菜蛾抗菌肽脂质体,最终冷冻干燥成粉末。建立小菜蛾抗菌肽的HPLC含量测定方法,以包封率为主要指标,综合考虑冻融过程对包封率和粒径的影响,采用正交实验进行处方优化。并考察形态、粒径、包封率及不同储存温度下的稳定性。结果通过处方工艺优化制备的小菜蛾脂质体冻干粉呈球形或类球形,平均粒径为(223.1±31.2)nm,包封率为62%。本品在4℃下贮存3个月稳定,粒径及包封率无显著性变化。结论采用薄膜分散联合冻融法制备的小菜蛾抗菌肽脂质体能显著提高其长期贮存稳定性。     

抗菌肽的研究进展

抗菌肽是生物体在抵御病原性微生物时产生的一类防御性小肽,是生物免疫防御系统的重要组成部分.广泛地存在于昆虫、植物、动物以及人体内.抗菌肽具有非特异性抗革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌、病毒的作用以及杀伤肿瘤细胞的作用,但对正常的真核细胞无毒或低毒.目前,抗菌肽广泛应用于动物基因工程、药物开发、工业、农业、畜牧业等多个领域.就抗菌肽的结构、生物活性、抗菌机制以及应用前景等进行综述.     

高效液相色谱-质谱联用法高通量筛选及检测哈茨木霉菌发酵液中peptaibols类抗菌肽

 目的 高通量筛选及检测哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）CGMCC No.1780发酵液中peptaibols类抗菌肽。方法 以4,4′-(对二甲氨基)二苯基甲烷（TDM）特异性显色法做快速定性鉴定,以对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）菌丝生长的抑制作用做活性追踪;采用大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶及高效薄层层析硅胶板分离纯化哈茨木霉菌发酵液中peptaibols类抗菌肽;利用LC-MS/MS分析peptaibols类抗菌肽序列结构。结果 从哈茨木霉菌发酵液中分离出5组peptaibols类抗菌肽,经LC-MS/MS鉴定为20种peptaibols,其中包括5种新的peptaibols。结论 Peptaibols类抗菌肽是哈茨木霉菌主要抗生活性次生代谢产物之一,且种类较多,利用LC-MS/MS可快速有效鉴定哈茨木霉菌发酵液中peptaibols类抗菌肽的序列结构。     

林蛙抗菌肽脂质体处方筛选

目的探索新剂型延长林蛙抗菌肽的药效时间,筛选林蛙抗菌肽脂质体最佳处方。方法采用薄膜分散法制备林蛙抗菌肽脂质体,以包封率为考察指标,使用单因素分析筛选和优化处方。结果处方所制得的脂质体形态均匀,包封率为79.2%,12 h脂质体在皮肤表面的存留率为91.79%。结论筛选所得的林蛙抗菌肽脂质体形态均匀,包封率较高,12 h内皮肤表面存留率较高。     

抗菌肽cecropin B和兔NP-1融合基因转化鱼腥草的研究

目的:将抗菌肽cecropin B和兔NP-1(CN)融合基因转入鱼腥草,培育鱼腥草基因工程新品种。方法:设计并合成抗菌肽融合基因CN,构建重组质粒pBI121-CN,并转入农杆菌LBA4404,以农杆菌介导法转化鱼腥草外植体,将卡那霉素筛选获得的再生抗性植株以快速筛选PCR法进一步筛选阳性植株,再提取基因组DNA进行PCR-Southern鉴定,RT-PCR分析目的基因在鱼腥草中的表达,以大肠杆菌K12抑菌圈实验和立枯丝核菌感染实验分析转基因鱼腥草抗菌能力。结果:抗菌肽基因已整合到转基因鱼腥草基因组中并表达,表现出抗菌能力增强的性状。结论:以抗菌肽融合基因CN转化鱼腥草,初步获得抗菌活性提高的转基因植株。     

高效液相色谱法测定小菜蛾中抗菌肽CA含量

 目的 建立小菜蛾抗菌肽CA的高效液相色谱测定方法。方法 色谱柱为Agilent Alltima C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇-乙腈-0.05%三氟乙酸溶液（2.5∶2.5∶95）,检测波长为275 nm,柱温为25 ℃,流速为1.0 mL·min^-1。结果 小菜蛾抗菌肽CA的线性范围为0.08～0.800 μg（r=0.999 4,n=6）,平均回收率分别为99.69%,RSD为1.20%（n=6）。结论 本法快速、简便、准确,重现性好,可用于小菜蛾抗菌肽CA的定量分析和质量控制。     

抗菌肽的药物开发与临床应用

抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的小分子多肽,具有抗细菌、真菌、霉菌、病毒、原虫、癌细胞等多种活性,对多种癌细胞及动物实体瘤有明显杀伤作用.并具有抗菌广谱、作用强而迅速,是机体免疫防御的重要组成部分,不易产生耐药等众多优点.随着患者多耐药菌临床感染的日趋加重,抗菌肽成为一类潜力巨大的新型抗感染制剂.     

抗菌肽在中药生物工程中的应用前景

中药栽培中的病害问题以及农药的施用都对中药品质造成不良影响。抗菌肽是具有广谱抗微生物活性的小分子肽,已成为植物基因工程抗病育种研究的热点,并在多种植物中实现了表达,获得了抗菌性增强的植株。将外源抗菌肽基因转入中药植株中,增强其抗微生物活性,在中药的种植和中药新品种的开发上展现出诱人的前景。     

航天诱变凤仙花种子抗菌肽的分离纯化及抗菌活性研究初报

抗菌肽(Antimicrobial Peptides,AMPs),是生物界中广泛存在的一类生物活性小肽,具有抗细菌或真菌作用,有些还具有抗原虫、病毒或肿瘤细胞的功能[1].     

中华大蟾蜍皮肤Cathelicidin家族新型抗菌肽的鉴定及其抗菌活性

对中华大蟾蜍皮肤转录组进行了测定,通过对得到转录组数据的组装、注释和序列比对得到1个新型Cathelicidin家族前体c DNA。按照Cathelicidin家族抗菌肽的加工方式,推导出该前体可能编码2个成熟的中华大蟾蜍Cathelicidin家族抗菌肽,命名为BG-CATH25,BG-CATH29。圆二色散测定了合成BG-CATH25,BG-CATH29的二级结构特征,结果揭示BG-CATH25,BG-CATH29在不同缓冲体系中以无规则卷曲的构象为主。对实验所用4种细菌的抗菌活性研究表明BG-CATH25,BGCATH29对嗜水气单胞菌有较强的抑菌活性,MIC分别为1.25,10 mg·L-1。     

蜂毒素的研究新进展

蜂毒素是一种昆虫抗菌肽,具有抗菌、消炎、抗辐射,抗关节炎及对心血管方面等作用,论述了近年来在研究蜂毒素的结构、构效关系及抗肿瘤、抗病毒作用等诸方面的最新进展。     

基于人抗菌肽LL-37探索溃结宁方治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的:探讨基于人抗菌肽LL-37在溃结宁方治疗溃疡性结肠炎中的作用机制。方法:选择我院2012年1月~2014年6月收治的溃疡性结肠炎患者30例作为观察组,分析患者使用中药后LL-37指标的变化,分析患者人抗菌肽LL-37治疗溃疡性结肠炎的作用机制。结果:治疗前UC患者结肠黏膜中LL-37、TNF-α、IL-1β、IL-4等水平相对较高,治疗后患者LL-37水平为(4.97±6.95)、TNF-α为(97.04±23.74)、IL-1β为(72.98±38.03)、IL-4为(26.04±12.47),均明显低于治疗前(P0.05)。结论:LL-37在UC患者的结肠黏膜中表达增强,能够作为溃疡性结肠炎患者的治疗指标。     

小菜蛾抗菌肽聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及体外评价

目的制备小菜蛾抗菌肽(CA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒(CA-PLGA-NPs),并对其理化性质及体外释放度进行研究。方法采用S/W/O/W复乳法结合高压均质法制备CA-PLGA-NPs,对其纳米粒的形态、粒径、多分散指数(PDI)、载药量、包封率和体外释放度进行研究。结果 CA-PLGA-NPs呈球形或类球形,粒径、PDI、载药量、包封率分别为(358.76±22.51)nm、0.168 1±0.012 2、(10.50±0.28)%、(60.92±1.58)%,突释现象不明显,2~10 d内达到释药稳定期。结论 S/W/O/W复乳法结合高压均质法制备CA-PLGA-NPs工艺可行,为小菜蛾抗菌肽给药提供了制剂学基础。     

改良3′cDNA末端快速扩增PCR法筛选扇贝抗菌肽基因

目的 应用改良3′cDNA末端快速扩增PCR法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)筛选扇贝抗菌肽基因.方法设计M13和T7启动子分别修饰的基因特异性引物(gene special primer,GSP)、锚定引物,提取扇贝血淋巴总RNA进行改良3′RACE和5′RACE,获得cDNA准全长序列并在GenBank中进行同源性比较.结果 从扇贝血淋巴中获得3个cDNA的3′端序列基因和1个准全长cDNA (544 bp),在GenBank中未发现与之高度同源的基因.结论从扇贝血淋巴中获得的1个准全长cDNA、3个cDNA的3′端序列可能属于新基因.应用改良3′RACE能钓取含抗菌肽保守序列的新基因片段,该方法可行.     

刺五加提取物对果蝇免疫功能的影响

目的 研究刺五加提取物对果蝇天然免疫和肠道免疫功能的影响.方法 用含或不含刺五加根或果实提取物的细菌或真菌生物溶液感染果蝇,观察刺五加根和果实提取物对感染细菌或真菌以及对热刺激果蝇生存率的影响;果蝇肠道组织免疫染色,荧光显微镜观察肠壁细胞凋亡情况;提取被真菌孢子感染的果蝇总RNA,检测抗菌肽表达量.结果 刺五加根和果实提取物能提高细菌感染后果蝇的生存率,缓解肠壁细胞凋亡,也可提高经真菌孢子感染后果蝇的生存率,使体内部分抗菌肽出现高表达,也能提高经热刺激处理果蝇的生存率.结论 刺五加根和果实提取物能显著提高果蝇机体免疫功能.     

农杆菌介导的抗菌肽基因转化阳春砂愈伤组织的研究

目的确定遗传转化条件,将抗菌肽CN基因转入阳春砂愈伤组织。方法以阳春砂愈伤组织为受体材料,以农杆菌EHA105/pCAMBIA1305.2-CN工程细胞介导抗菌肽CN基因转化阳春砂,设计正交实验,通过分析gus报告基因的瞬时表达比较转化影响因素,并对目的基因CN进行PCR检测。结果农杆菌浓度、侵染时间、共培养温度、共培养时间及乙酰丁香酮浓度对转化率的影响有显著差异性。阳春砂愈伤组织遗传转化的最佳条件组合是:农杆菌浓度为OD600=0.5,侵染时间10 min,共培养温度24℃,共培养时间4 d,共培养培养基添加乙酰丁香酮200μmol.L-1。gus基因瞬时表达呈阳性的愈伤组织DNA经目的基因CN的PCR检测可见清晰的目的条带。结论建立了农杆菌介导的阳春砂愈伤组织的转化条件,目的基因CN已转入阳春砂愈伤组织。     

浅谈卫气与防御素的关系及干预措施

卫气属中医正气之一,具有护卫肌表,防御外邪侵入,温养脏腑、肌肉、皮毛等组织器官,调节腠理的开合与汗液的排泄等作用。防御素是一类阳离子抗菌肽,具有天然的抗菌活性、调节机体的免疫炎症反应和修复创伤作用。本文浅谈卫气与防御素的关系,以及提出通过益气温阳护卫法干预防御素的可行性。     

活性肽构效关系的研究进展

文章主要综述了活性肽物质结构与功效关系的研究进展,为定向合成、改造、开发具有相关生物活性的多肽类产品提供依据。通过查阅整理相关文献报道,阐述了血管紧张素转化酶抑制肽、抗氧化肽和抗菌肽的构效关系的研究进展。活性肽蕴藏着巨大的开发潜力,是一类重要的新药来源,活性肽构效关系的研究对其发展至关重要。