浅谈原核基因工程细胞内不溶性表达产物的下游处理

基因工程或基因重组技术,是将不同生物的基因在体外人工剪切,组合并和载体(质粒、噬菌体、病毒)DNA连接,然后转入微生物或细胞内进行扩增,并使转入的基因在细胞内表达,产生所需要的蛋白质.     

基因工程在医学上的应用

基因工程又称转基因工程或重组DNA技术，即在基因水平上对生物进行操作。它是采用类似工程设计的方法，按照人们的需要将具有遗传信息的基因，在离开生物体的情况下进行剪切、组合、拼装，然后把这种人工重组的基因转入宿主细胞内进行大量复制，使遗传信息在新的宿住细胞或个体中高度繁殖，以创造新的生物。     

脑内糖皮质激素受体与脑水肿的激素治疗

<正> 两类激素受体 根据近廿年来的研究证明,激素之所以能对特定的组织(靶组织或靶细胞)发生效应,是由于其靶细胞内存在着一种高亲和力的,能与激素特异结合的蛋白——激素受体。受体与激素结合后,能将激素的这种特定的“化学讯息”转化为一系列的细胞内生化效应(通过cAMP方式起作用,或通过激活基因,形成某种诱导酶起作用),最终导致该激素的生物效应发     

基因工程在医学上应用

基因工程是指不同生物体的脱氧核糖核酸在体外经过酶切和连接，构成重组脱氧核糖核酸分子，然后转入受体细胞，使外源基因在受体细胞中表达。人类按照这个原理，根据需要，人为地转移和重组遗传基因。基因重组是由一个脱氧核糖核酸片段掺入到另一脱氧核糖核酸分子中，这种外源基因与生物染色体的整合，使此时的外源基     

基因治疗基因转移方法

基因转移是指用适当手段将外源基因导入体外或体内受体细胞中的分子生物学技术。常用方法可概括为物理、化学和生物三大类，前两类是非病毒的方法，生物方法主要指病毒介导的基因转移，包括RNA病毒、DNA病毒两类，物理化学法携带的遗传物质在细胞内易受DNA酶降解，而且不容易稳定地存在细胞基因组中，但是这些方法不存在野生型病毒污染．比较安全．病毒方法的特点是基因转移效率较高，但是安全性问题需要重视。理想的基因转移方法应符合以下要求，(1)高效的转移率；(2)外源基因定向导入受体细胞，且能转导非分裂相的细胞；(3)能稳定地、定点整合到宿主染色体上．最好是同源重组；(4)较高的安全性．对人体不构成较严正重的危害；(5)容易操作．易推广应用。     

糖皮质激素受体基因多态性和动脉粥样硬化及冠心病的关系

糖皮质激素受体(GR)是糖皮质激素(Gc)发挥重要生理作用的中间物，其功能如同一个转录激活因子。自1968年Munk和Shauburg等人应用放射配体结合分析法首次证实大鼠胸腺细胞中存在GR以来，大量研究证实绝大多数动物或人体细胞内均存在GR，GC与GR结合后，在细胞内调节基因表达，进而产生一系列生物效应。现已发现人糖皮质激素受体(HGR)基因结构的多态性与动脉粥样硬化、冠心病密切相关。     

糖皮质激素治疗肾小球疾病的受体机制

一般认为糖皮质激素(GC)治疗肾小球疾病是通过抗炎和抑制免疫途径实现的,但确切的机制并不十分清楚,近年来由于糖皮质激素受体(GR)基础研究的深入,已基本阐明了该作用的受体机制,文献认为[1]:GC与靶细胞胞浆内GR结合是GC发挥效应的先决条件,GC-GR复合物与核内靶基因附近的GC反应元件(GRE)的特定核苷酸顺序结合,使靶基因转录“加速”或“减慢”从而产生特定的“效应蛋白质”发挥生物效应。本文从靶基因转录产物的“增加”或“减少”综述GC治疗肾小球疾病的分子生物学机制。1　GC-GR复合物作用方式1.1　控制基因转录　GRE有增强子…     

癌瘤中许多基因发生改变

癌细胞的形成并不容易。研究人员发现,一个细胞内可能需要积累多达十次突变方能变成癌细胞。这些突变影响细胞的肿瘤基因。使它们活化,因而驱使细胞加快生长和出现癌细胞所特有的其它异常特征。但这些改变显然还不足以使恶性肿瘤充分发展起来。这些改变也包括两三个以至更多的“抑制基因”丢失或失活。这些抑制基因的正常功能大概是抑制细胞生长。发现这么多基因的改变不只有理论意义。研究肺癌基因变化的美国国立癌症研究所的J     

线粒体病

线粒体是存在于每个细胞内的细胞器 ,又称为细胞内的“动力站” ,它通过呼吸链 氧化磷酸化系统合成ＡＴＰ。线粒体为细胞提供进行各种生命活动所需要的能量 ,同时它又是人类细胞中除细胞核外唯一存在ＤＮＡ的细胞器。现已证明线粒体ＤＮＡ(ｍｔＤＮＡ)含有编码呼吸链 氧化磷酸化系统中 13条多肽链的基因以及线粒体蛋白质合成所需要的 2 2个ｔＲＮＡ的基因和 2个ｒＲＮＡ基因。因此 ,ｍｔＤＮＡ突变则影响呼吸链 氧化磷酸化系统功能 ,使ＡＴＰ合成减少 ,一旦线粒体不能提供足够的能量则可引起细胞蜕变甚至坏死 ,导致一些组织和器官功能减退 ,…     

钙拮抗剂在心血管病中的应用

细胞内存有一定量的钙离子，其在生物信息传递和内环境稳定中，起着极重要的作用，但细胞内Ca”过多也是许多病理过程发生的重要环节，如动脉硬化、心律失常高、血压等均与细胞内Ca”过高有关，因此选择性地阻滞Ca”内流，减少细胞内Ca”浓度可治疗或预防某些心血管疾病。ICh‘”桔抗剂的分类1．IFI。kenstein分类：A类：包括异搏定，硫氮革酮，心痛定及其他二氢毗陡类化合物，此类对心肌比“内流选择性高，作用强。B类：包括心可定、沛心达、异博茨，氟桂学等，此类药物钙通道作用弱并有钠通道抑制作用。1．2按受体结合部位分类1．2．…     

基因工程的概念

基因工程(geneticengineering),也叫基因操作、遗传工程,或重组体DNA技术。它是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中,并使之无性繁殖(称之为“克隆”)和行使正常功能(称之为“表达”),从而创造生物新品种或新物种的     

LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP的变化研究

目的研究鼠Leydig细胞膜LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP水平的变化及二者之间的关系。方法应用RT－PCR法，以β-actin为内参照，测定激素刺激后鼠Leydig细胞膜LH受体（LHR）减量调节中LHRmRNA水平的变化，同时应用放射免疫法，分析同一时间细胞内cAMP水平的变化。结果LHRmRNA水平早期有20％的升高，然后逐渐下降50％，与此趋势相同，cAMP水平亦呈现出升高-降低的动态过程，二者在变化上呈“正相关”，并且前者总是“滞后”于后者一段时间。结论LHR减量调节过程中，细胞内cAMP水平可能以“正相关”的方式影响着LHR基因的转录速率。     

基因治疗

迄今为止人类对绝大多数遗传病，尚无有效的治疗方法。但随着DNA重组技术的发展，基因治疗这个前景可观的新概念便应运而生．1基因治疗的设想基因治疗的基本含义是通过直接修复缺陷基因（突变基因）本身，纠正致病基因所导致的病患．而不是治疗突变基因的产物。据此，必须应用遗传工程的手段——其中包括基因替换和基因修正（genecorrection）或修补（geneaugmentation）所发生的遗传饰变［1］。将正常外源DNA序列导人有缺陷基因患者的受体细胞内．基因替换是特异性地除去基因组中突变基因的顺序，用正常基因取而代之，对此目前还很少或…     

生物进化中的DNA变化

生物进化中 DNA 变化的本质是“封闭状态下老基因变为新基因”还是“开放状态下增加了新基因”,或二者兼有?进化过程中,生物的 DNA 含量有规律地增加。愈是高等生物,DNA 含量愈高,对这一规律最有说服力的解释是物种以微生物为媒介、转导、交流别的物种基因及整合病毒基因而增加了新基因,即基因的横向交流规律决定了 DNA 变化规律。请看事实:腺病毒所改变的哺乳类细胞含有20～80个病毒 DNA 的复本,而这种 DNA 最高可有5％成为细胞内 MRNA 的模板。以噬菌体的转导作用,一个菌株是 Phe~-Try~-Tyr~-     

甾体类激素非基因效应机制研究进展

甾体类激素通常被认为必须依赖细胞内的核受体,通过基因效应机制来发挥作用,即激素通过与相应核受体的结合来实现对相关靶基因的转录调控,进而产生一系列生物学效应.但是,这种经典的依赖核受体的基因效应作用机制并不能很好地解释甾体类激素在生物体内所产生的许多快速反应.近年来有许多证据表明,除了传统的核受体信号转导途径以外,甾体类激素还可以通过非基因效应机制起作用,尤其是一些快速的生物学效应.文章就迄今为止有关甾体类激素非基因效应信号途径的研究进展作一综述.     

甾体类激素非基因效应机制研究进展

甾体类激素通常被认为必须依赖细胞内的核受体,通过基因效应机制来发挥作用,即激素通过与相应核受体的结合来实现对相关靶基因的转录调控,进而产生一系列生物学效应.但是,这种经典的依赖核受体的基因效应作用机制并不能很好地解释甾体类激素在生物体内所产生的许多快速反应.近年来有许多证据表明,除了传统的核受体信号转导途径以外,甾体类激素还可以通过非基因效应机制起作用,尤其是一些快速的生物学效应.文章就迄今为止有关甾体类激素非基因效应信号途径的研究进展作一综述.     

Wnt途径的组成调控及在肿瘤发生中作用机制的研究

细胞信号传导途径异常与肿瘤发生、发展密切相关。细胞外各种刺激通过相应介质与细胞膜上相应受体结合后诱发细胞内一系列级联反应，使细胞增殖分化或周期停滞等，由此构成细胞信号传导系统。在此系统中，癌基因激活和抑癌基因的失活刺激细胞加速增殖与无限生长或凋亡抑制，导致肿瘤发生。Wnt途径作为细胞信号传导系统之一参与肿瘤发生     

生物传感器在医学中的应用

生物传感器是以化学物质为检验对象,以生物或生物成份为受体(敏感“元件”),使它与被感知的化学物质反应,并将反应物或生成物的量转换成电信号的装置。     

低密度脂蛋白受体的变异与家族性高胆固醇血症

低密度脂蛋白受体主要功能是摄取血中的胆固醇至细胞内，家族性高胆固醇血症与患者低密度脂蛋白受体的缺陷有关，低密度脂蛋白受体基因的不同突变可突变可造成受体的不同缺陷，故对家族性高胆固醇血症患者可进行基因诊断和基因治疗。     

消息

我校东方肝胆外科医院生物信号转导研究室主任王红阳院士长期从事肿瘤学和分子生物学的基础与临床研究，在肿瘤信号转导方面有重要贡献。由她带领的课题组对“恶性肿瘤磷酸化调控的信号转导”进行研究，发现和鉴定了一组具有恶性肿瘤磷酸化调控功能的重要基因，包括抑制性受体SIRPα1、肝癌癌蛋白p28、新的受体酪氨酸磷酸酶PCP-2、可结合SH3结构域的新基因HCCA1和HCCA2、具有磷酸酯酶活性的抑癌基因PTEN等，阐明了其作用机制，确定了其在恶性肿瘤，