人神经干细胞移植治疗重度新生儿一氧化碳中毒一例

目的探讨人神经干细胞移植治疗新生儿重度一氧化碳中毒(COP)的可行性。方法1例生后18d的新生儿重度COP急性期患儿,肌张力异常,原始反射减弱,NBNA评分15分。取孕12周胚胎前脑细胞体外培养扩增11d,获取人神经干细胞(NSCs)球,经患儿脑室穿刺注入。结果移植后28d,患儿肌张力、原始反射明显改善,NBNA评分35分。移植后9个月Peabody量表,0～6岁儿童神经心理检查量表评估,患儿运动、智力、语言发育正常。结论本例人胚胎来源NSCs移植治疗急性期新生儿重度COP,临床疗效显著。最终的疗效还需更多病例的进一步观察。     

人神经干细胞移植治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病一例

目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞（neural stem cells,NSCs）,并经患儿脑室穿刺注入。结果移植28天后患儿不仅肌张力显著改善,智力运动发育迅速追赶、接近正常同龄水平。PET显示顶颞叶放射性增加,细胞代谢明显增强,提示植入的细胞存活。结论本例人胚胎来源NSCS移植治疗重度新生儿HIE后遗症,近期临床疗效显著,远期疗效有待进一步观察。     

人神经前体细胞移植治疗新生儿获得性脑损伤的临床观察

目的 观察人神经前体细胞(human neural precursor cells,hNPCs)移植治疗新生儿获得性脑损伤的临床疗效.方法 6例重度获得性脑损伤新生儿行人hNPCs移植.其中1例为生后5 d一氧化碳中毒导致的极重度脑损伤;1例是低血糖脑损伤;其余患儿均为出生前后窒息缺氧导致重度缺氧缺血性脑病(HIE),Apgar评分5 min≤5分,临床表现、体征及辅助检查均符合重度HIE诊断.在医院伦理学委员会通过及患儿家长知情同意的情况下,于生后第4～20天行神经前体细胞移植治疗;神经前体细胞取自孕12周自然流产胚胎的前脑细胞,经体外培养扩增为hNPCs球,并经侧脑室穿刺注入患儿脑室.结果 移植后第2天,所有患儿的吸吮、吞咽反射逐渐恢复,肌张力开始恢复,惊厥缓解;3例28 d时新生儿行为神经测定(NBNA)评分恢复止常水平,术后12个月的随访结果显示,4例恢复正常,2例出现后遗症表现,诊断脑性瘫痪.结论 人hNPCs移植对重度新生儿获得性脑损伤患儿有治疗作用,能明显减低其致残率.

Abstract：

objective To analyze the therapeutic effect of human neural precursor cells transplantation in treatment of neonates with severe brain injury.Method The transplantation was performed on 6 newborns, one of them was diagnosed as extremely severe carbon monoxide poisoning at 5th day after birth;one of them was diagnosed as severe hypoglycemia;the others had asphyxia at birth with Apgar scores from 1 to 3 and were diagnosed as severe neonatal asphyxia,severe hypoxic ischemie encephalopathy according to images,electroencephalogram,biochemical examination and clinical manifestation.With the approval of hospital ethics committee and informed consent of the family members.the newborns received human neural precursor cells transplantation at the 4th to 20th day after birth.With the agreement of a pregnant woman,forebrain cells were obtained from the forebrain of her 12-week old fetus after spontaneous abortion.The cells from the fetal brain were amplified into human neural precursor cells in vitro and were injected into the cerebral ventricle of the patients. Result On the 2nd day after transplantation,sucking and swallowing reflexes gradually appeared in all the patients,muscular tension was also improved.and convulsion stopped.NBNA scoring in 3 of the patients reached normal level on the 28th day after birth.The 6 patients were followed up for 12 months.Four patients were norlnal in psychomotor development and scores of each SCale reached normal level.Two patients have cerebral palsy.Conclnsion hNPCs transplantation is safe and effective in treatment of severe neonatal brain injury.More clinical trials and further observation arc needed.     

人神经前体细胞移植治疗新生儿获得性脑损伤的临床观察

目的 观察人神经前体细胞(human neural precursor cells,hNPCs)移植治疗新生儿获得性脑损伤的临床疗效.方法 6例重度获得性脑损伤新生儿行人hNPCs移植.其中1例为生后5 d一氧化碳中毒导致的极重度脑损伤;1例是低血糖脑损伤;其余患儿均为出生前后窒息缺氧导致重度缺氧缺血性脑病(HIE),Apgar评分5 min≤5分,临床表现、体征及辅助检查均符合重度HIE诊断.在医院伦理学委员会通过及患儿家长知情同意的情况下,于生后第4～20天行神经前体细胞移植治疗;神经前体细胞取自孕12周自然流产胚胎的前脑细胞,经体外培养扩增为hNPCs球,并经侧脑室穿刺注入患儿脑室.结果 移植后第2天,所有患儿的吸吮、吞咽反射逐渐恢复,肌张力开始恢复,惊厥缓解;3例28 d时新生儿行为神经测定(NBNA)评分恢复止常水平,术后12个月的随访结果显示,4例恢复正常,2例出现后遗症表现,诊断脑性瘫痪.结论 人hNPCs移植对重度新生儿获得性脑损伤患儿有治疗作用,能明显减低其致残率.     

高压氧为主抢救重度一氧化碳中毒一例

患儿，男，7．5岁，因一氧化碳中毒，急送当地县医院抢救。县医院先后予以清理呼吸道、吸氧、人工呼吸、纳洛酮、甘露醇、脑活素、胞二磷胆碱、ATP、细胞色素C、皮质激素等多种方法和多种药物抢救治疗，昏迷不见改善，而转入我院。[第一段]     

新生儿一氧化碳中毒11例临床分析

一氧化碳是一种无色、无臭、无刺激性气体,含碳物质不完全燃烧可产生,吸入过量一氧化碳后可发生急性一氧化碳中毒。新生儿一氧化碳中毒基本为生活性中毒,临床上少见。我院自1985年至今共收治11例急性一氧化碳中毒患儿,报告如下。     

一氧化碳中毒的临床治疗体会

目的　探讨一氧化碳中毒的早期临床治疗中甘露醇和氟美松的作用。方法　对我院2 0 0 0年1月～2 0 0 2年1月期间收治的5 0例一氧化碳中毒患儿早期使用大剂量甘露醇和氟美松静脉治疗作临床分析。结果　全部病例存活,无1例后遗症发生。结论　一氧化碳中毒是临床儿科ICU的一个急重症。因其缺氧而产生一系列的临床症状体征。对中枢神经系统损害引起脑水肿所致的抽搐、昏迷及脑疝,我们早期应用大剂量甘露醇和氟美松静推,可以使脑水肿很快的得到纠正,加速患儿的苏醒。     

新生动物及其缺血性脑损伤神经干细胞移植的研究现状

新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)是导致脑性瘫痪(脑瘫)的主要原因,至今缺乏有效疗法。近年有关缺血性脑损伤以及新生动物神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植的实验研究为治疗新生儿HIE带来了新的希望。现有研究表明在移植条件相同的情况下,受者年龄、脑发育成熟度、脑内微环境是NSCs移植成功的决定因素。     

粒细胞集落刺激因子对人神经干细胞移植后新生大鼠体内神经元分化的影响

目的 观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对移植的人神经干细胞(hNSCs)新生大鼠体内神经元分化的影响.方法 出生1周的Wistar大鼠建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,建模后分成2组:NSC移植组(N组,n=17)和NSC移植+G-CSF治疗组(NG组,n=16).NG组大鼠建模后1 h即皮下注射G-CSF,50 μg·kg-1,1次·d-1,移植前后连续5 d注射G-CSF.2组大鼠均于建模后第2天经脑室移植hNSCs.移植后1周、2周采用免疫荧光法观察2组植入细胞在皮质、海马部位神经元分化情况.结果 移植后1周,分化神经元主要分布于大鼠损伤侧海马、皮质;移植后2周,神经元分化数量增多,并发出细长分枝.NG组海马各区神经元分化存活数量较N组多,差异有统计学意义(Pa<0.01);NG组皮质神经元分化存活数量在移植后2周时较N组多,差异有统计学意义(P<0.001).结论 G-CSF有利于植入大鼠脑内的hNSCs的存活,并促进植入hNSCs向神经元分化,因此联合G-CSF可能有助于进一步提高hNSC移植的疗效.     

Three patients with carbon monoxide poisoning treated with hyperbaric oxygen therapy

The clinical management of three patients (two children, one adult) with carbon monoxide poisoning is presented. Treatment included hyperbaric oxygen therapy with a good outcome in two of the three patients. The pathophysiology of carbon monoxide poisoning and the benefits of treatment with hyperbaric oxygen therapy are reviewed.     

一氧化碳和一氧化氮在新生儿缺氧缺血性脑病发病中的作用

目的：探讨一氧化碳（ＣＯ）和一氧化氮（ＮＯ）在新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）中的作用。方法：对２８例新生儿ＨＩＥ血浆ＣＯ和ＮＯ水平进行检测，并与３０例正常新生儿对照组比较。结果：与正常对照组比较，２８例新生儿ＨＩＥ患儿血浆ＣＯ、ＮＯ水平显著增高；与轻、中度新生儿ＨＩＥ患儿比较，重度者血浆ＣＯ、ＮＯ水平显著增高；ＣＯ和ＮＯ呈显著正相关。结论：ＣＯ和ＮＯ在新生儿ＨＩＥ的发病过程中具有重要意义。     

Pulmonary excretion of carbon monoxide in the human infant as an index of bilirubin production

A total of 45 infants, including 20 appropriate-size-for-gestational-age infants (AGAs), 19 large-size-for-gestational-age infants (LGAs) and 6 infants of diabetic mothers (IDMs), had determinations of their pulmonary excretion rate of carbon monoxide (Ve_CO) in the first postnatal week as an index of bilirubin production. We calculated a ratio (Rw) of birth weight to ideal weight (50th percentile for gestational age) as a relative measure of infant size. We also measured maternal glycosylated hemoglobin (Hb A_Ic) in the postpartum period as a reflection of the time-integrated blood glucose level over the weeks preceding delivery. Mean values for maternal Hb A_Ic in the postpartum period, infant Rw, and Ve_CO were all significantly increased for the LGAs and IDMs compared to the normal AGAs. Nine LGAs had mothers whose Hb A_Ic levels were >2 S.D. higher than the mean Hb A_Ic level for mothers of normal AGAs. The infants whose mothers had the highest Hb A_Ic levels were not always the ones with the highest bilirubin production rates. These findings suggest that maternal Hb A_Ic in the postpartum period, infant size, and bilirubin production are associated phenomena, but that a postpartum time-integrated measure of blood glucose level over the weeks preceding parturition may not reflect changes in other associated factors which can affect infant erythropoiesis. The LGAs are not a homogeneous group, and some may have mothers with missed abnormalities of gestational glucose metaoblism.This investigation was supported in part by grants from the General Clinical Research Program of the Division of Research Resources, National Institutes of Health (RR-00081), the Thrasher Research Fund, the United States Public Health Services (AM-25603), the National Institutes of Health (HD-14426), and by the National Institutes of Health Biomedical Research Support Grant (5S01RR05583)     

神经营养因子与神经干细胞移植联合治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的 观察神经营养因子与神经干细胞(NSCs)联合移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的治疗效果.方法 取新生24 h的Wistar大鼠海马NSCs进行培养、鉴定.选7日龄Wistar大鼠制备HIBD动物模型,7 d后行损伤侧侧脑室移植.将实验大鼠随机分为9组正常组、模型组、磷酸盐缓冲液移植组、NSCs移植组、BDNF组、BDNF NSCs移植组、NT-3组、NT-3 NSCs移植组、BDNF NT-3 NSCs移植组.移植4周后进行功能实验,取脑组织进行免疫组化及免疫荧光检查.结果 从新生大鼠海马可成功培养出NSCs,并表达NSCs的标志物神经巢蛋白(neuroepithelial stem cell protein,Nestin),NSCs可分化为神经元及星形胶质细胞.Y迷宫实验NSCs移植组达到学会的次数(163±11.60)n,正确记忆次数(5.00±1.13)n;BDNF组(150.00±8.94,5.17±1.47)n;BDNF NSCs移植组(111.25±13.56,6.23±1.60)n;NT-3组(153.56±10.35,5.07±1.03)n;NT-3 NSCs移植组(117.27±11.4,6.30±1.1)n;BDNF NT-3 NSCs移植组(110±11.55,6.30±1.1)n.悬吊实验NSC移植组平均(30.10±11.8)s;BDNF组(36.25±10.98)s;BDNF NSCs移植组(43.6±10.56)s;NT-3组(34.95±10.15)s;NT-3 NSCs移植组(40.64±10.6)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(42.20±6.25)s.斜坡试验NSCs移植组平均(20.3±8.25)s;BDNF组(14.33±2.88)s;BDNF NSC移植组(11.17±2.48)s;NT-3组(15.26±2.98)s;NT-3 NSC移植组(12.8±3.65)s;BDNF NT-3 NSCs移植组(12.9±5.18)s.说明各联合移植组大鼠学习记忆能力及神经功能与NSCs移植组比较,明显改善(P＜0.05),而NSCs组大鼠学习记忆能力及神经功能与HIBD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各联合移植组损伤侧皮层、海马存活的NSCs数量(BDNF NSC移植组9.31±0.71个,10.10±1.65个;NT-3 NSCs移植组6.18±1.83个,8.18±3.06个;BDNF NT-3 NSCs移植组为9.58±1.61个,11.45±1.36个)与NSCs组(3.33±0.24个,4.22±0.33个)比较明显增多(P＜0.05),且NSCs分化为神经元的比例明显增多,与NSCs移植组比较,有统计学意义(P＜0.05),但双因子联合移植组与其单因子移植组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BDNF、NT-3与NSCs联合移植是治疗HIBD的有效方法.     

三种途径注射神经干细胞治疗缺氧缺血性脑损伤可行性比较

目的 比较三种神经干细胞(NSCs)移植方法 的可行性,尝试建立一种创伤小、疗效好的神经干细胞移植方法 .方法 生后3～4 d的新生猪在缺氧缺血性脑损伤造模后被分为静脉NSCs移植组、颈内动脉NSCs移植组、腰穿NSCs移植组,每组各5只;术后2 h分别通过腋静脉、颈内动脉和腰穿途径注射2×106个绿色荧光蛋白标记的NSCs.术后24 h处死实验动物,取海马、侧脑室前角、侧脑室后角层面进行病理切片,400倍镜下计数荧光染色的神经干细胞.结果 400倍荧光显微镜视野(HP)下,静脉NSCs移植组、颈内动脉NSCs移植组、腰穿NSCs移植组的阳性细胞分别为(53.80±8.78)/HP、(69.80±11.90)/HP、(265.00±29.65)/HP.其中腰穿NSCs移植组进入脑组织的NSCs细胞显著多于其他两组,差异有非常显著性(P<0.01).结论 本实验证实了腰穿途径治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤的可行性,且较静脉及颈内动脉途径优越.     

大鼠胚胎神经干细胞移植治疗类脊髓栓系综合征的实验研究

目的将胎鼠的神经干细胞移植到脊髓栓系综合征大鼠的病变脊髓中，观察治疗效果。方法从孕17d大鼠胚胎脊髓中分离、培养神经干细胞并诱导分化，通过免疫组化技术研究证实其特性。制作大鼠脊髓栓系模型，3d后将未分化的神经干细胞注人病变脊髓内，2个月后观察大鼠的运动功能，处死大鼠，研究移植后的干细胞在体内存活、迁移及分化情况。结果实验中分离、培养的神经干细胞能够被诱导分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。脊髓栓系大鼠移植干细胞后运动功能改善，神经元数目增多，显著好于未移植组。免疫组化方法证实移植后的干细胞在体内可以存活、迁移、分化成神经细胞。结论大鼠胚胎神经干细胞体内、体外均具有多向分化潜能，移植神经干细胞是治疗脊髓栓系神经变性的一种有效途径。