人粒细胞埃立克体病研究进展

人粒细胞埃立克体病(human granulocytic ehrli-chiosis,HGE)是近年来新发现的蜱媒自然疫源性疾病,为一种危害较大的传染性疾病,初步认为其危害程度仅次于莱姆病,而且其分布与莱姆病亦有某些方面的相似性。自1993年发现本病以来,报告病例逐渐增多,病例分布范围不断扩大,相关研究逐步增多。本文综述国外人粒细胞埃立克体病研究进展。     

查菲埃立克体和人单核细胞埃立克体病研究进展

埃立克体病是由埃立克体属微生物引起的一类人兽共患急性传染病,其特征为高热、头疼、贫血、白细胞减少、消瘦和黄疸等。查菲埃立克体是埃立克体属中代表性的蜱媒人畜共患病病原体,对人、畜均有较强致病性,在人体引起人单核细胞埃立克体病（HME）。本文较为全面地总结了查非埃立克体和HME的病原学、流行病学、临床表现、诊断和防治等方面的研究进展。     

我国南方埃立克体与犬埃立克体病研究近况

埃立克体是一类专性细胞内寄生菌 ,革兰氏染色阴性 ,主要侵害人和动物的各类白细胞、血小板 ,引起埃立克体病。目前的研究结果表明 ,埃立克体病是热带和亚热带为主的全球分布性疾病 ,也是一种人兽共患自然疫源性疾病 ,蜱是主要传播媒介。我国对埃立克体病的研究始于上世纪 90年     

我国埃立克体的研究进展

埃立克体(Ehrlichiae)是一类严格细胞内寄生的革兰氏阴性菌,主要寄生在单核细胞、粒细胞、或血小板内,引起动物和人的感染——埃立克体病(Ehrlichiosis)。埃立克体分为3个基因群,除腺热埃立克体群外,犬埃立克体群和嗜吞噬埃立克体群均是由蜱传播。长期以来人们认为蜱传埃立克体仅感染动物,而不感染人。然而1987年美国首次报     

埃立克体病

埃立克体病(Ehrlichiosis)是埃立克体感染引起的人畜共患的新发现传染病,由蜱叮咬传播,主要表现为发热、血小板和白细胞减少。人埃立克体病(H E)分腺热埃立克体病(Sennetsu热)、人单核细胞埃立克体病(hum an m onoctyic ehrlichiosis,H M E)和人粒细胞埃立克体病(hum an granul     

查菲埃立克体P28蛋白抗原免疫印迹调查犬单核细胞埃立克体病

目的　以查菲埃立克体P2 8蛋白抗原免疫印迹法对犬单核细胞埃立克体病作流行病学调查 ,为该病的防治提供依据。方法　收集广东犬埃立克体病发生地的犬血清 ,用基因工程制备的查菲埃立克体P2 8融合蛋白抗原与犬血清作免疫印迹 ,检测犬血清中的抗P2 8抗体。结果　 2 12份犬血清行免疫印迹 ,89份 (42 % )阳性 ;这些阳性反应的血清绝大部分来自广州市和深圳市的野外工作犬 ,而南海市观赏犬的血清均为阴性。广西省南宁市的野外工作犬的 36份标本仅 3份为弱阳性。高水平的P2 8抗体出现在 4～ 10月 ,与当地蜱的活动期平行。结论　犬单核细胞埃立克体病在我国为局部流行 ,蜱可能是该病的传播媒介     

内蒙古大兴安岭林区人埃立克体病自然疫源地的调查

目的人粒细胞埃立克体病和人单核细胞埃立克体病都是近10年来发现的2种经蜱传播的自然疫源性疾病。这2种病的公共卫生学意义已受到了许多国家的关注。由于病原体是专性细胞内寄生菌,直接培养和纯化较为困难。我们根据这2种埃立克体的16S rRNA基因序列,构建了一系列PCR引物对,对采自我国大兴安岭等北方地区的蜱、动物脏器和人血标本进行PCR扩增,并对扩增出的产物进行DNA序列分析,以期查清有可疑蜱媒地区是否存在埃立克体感染,并通过这次调查为今后进一步开展系统研究提供参考。方法与结果本研究采用半巢式PCR检测蜱标本2种埃立克体的带菌率。结果首次从内蒙古大兴安岭采集的全沟硬蜱和森林革蜱,新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱中扩增出390bp的特异和人单核细胞埃立克体16S rRNA基因片段;同时检测的大兴安岭的嗜群血蜱和北京灵山采集的长角血蜱均未扩增出相应的片段。大兴安岭莫尔道嘎林业局采集的全沟硬蜱携带此基因的阳性率为39.06％(25/64),森林革蜱为 10.00％(7/70),2种蜱的带菌率有显著差异(x~2=15.53,P<0.01)。新疆精河采集的蜱携带EC率也是全沟硬蜱(11组/190,最小阳性率为5.79％)高于森林革蜱(1组/60,最小阳性率为1.67％),但差别不显著(x~2=1.30,P>0.25)。还从大兴安岭林区捕捉的一只大林姬鼠的脏器中检测到这一16S rRNA基因片段。对一只从莫尔道嘎采集的全沟硬蜱蜱标本进行近1500bp的人单核细胞埃立克体 16S rRNA全基因扩增与序列分析,结果扩增出的序列与美国一株人单核细胞埃立克体(GenBank注册号U23503)的相应序列完全相同。同样应用半巢式PCR和序列分析技术,从蜱标本中扩增出441bp的特异的人粒细胞埃立克体16SrRNA基因片段。内蒙古大兴安岭莫尔道嘎采集的全沟硬蜱和森林革蜱人粒细胞埃立克体的阳性率分别是 6.25%(4/64)和 2.86%(2/70);内蒙古大兴安岭乌尔旗汗采集的全沟硬蜱和嗜群血蜱的阳性率分别为3.81％(最小阳性率,8组/210)和2%(1/50);新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱最小阳性率分别为3.16％(6组/190)和1.67%(1组/60)。这是首次在亚洲从蜱标本中检测到人粒细胞埃立克体。同时检测的北京灵山采集的长角血蜱未扩增出相应的片段。对一只从莫尔道嘎采集的全沟硬蜱标本进行近1500bp的人粒细胞埃立克体 16S rRNA全基因分析,结果扩增出的序列与美国一株人粒细胞埃立克体(GenBank注册号U02125)的相应序列完全相同,一个碱基不差。另外还从内蒙古大兴安岭采集的森林工人血标本中扩增出特异的EC和人粒细胞埃立克体16SrRNA基因片段。这是首次在亚洲从人血中扩增出人埃立克体DNA。对一份人血标本进行近1500bp的人粒细胞埃立克体 16S rRNA全基因分析,结果仅在第81位与美国这株人粒细胞埃立克体差一个碱基,相差的位置正好位于高变区。结论根据检测结果,本研究建立的系列半巢式PCR扩增方法可以快速、灵敏地检测蜱、脏器、血等标本中的EC和人粒细胞埃立克体,并能较快地分析出其16S rRNA全基因。据报道,莱姆病的流行区往往也是人埃立克体病的流行区。为此我们在大兴安岭林区进行了人埃立克体病和莱姆病的流行病学调查。血样检测发现了人粒细胞埃立克体和 EC 16S rRNA基因阳性的病例共6名,病例均有近期蜱咬史,有埃立克体病的临床表现,潜伏期也相符;血清抗体检测发现检测人群中有HGE阳性抗体。2种病例的发现均为亚洲之首次。通过莱姆病螺旋体感染流行因素的单因素和多因素Logistic回归分析,发现在调查的流行因素中,职业和蜱咬史是影响该疫区人群感染莱姆病螺旋体的主要危险因素。这一调查结果也为该地区人埃立克体病和其他蜱传病的防治提供了参考。     

广东部分县市犬埃立克体抗体调查

埃立克体是一类专性细胞内寄生的革兰氏阴性球菌 ,能感染人和多种动物 ,引起埃立克体病。蜱是埃立克体的主要传播媒介。犬埃立克体病曾在世界上多个国家发生流行 ,造成大批军警犬死亡。 1998年广州市郊某养犬基地发生犬埃立克体病流行 ,2 0多条成年工作犬染病 ,死亡 6条〔1〕。 1999年广州市内另一警犬繁殖场暴发犬埃立克体病 ,36条 1～ 2月龄小犬染病 ,死亡 2 4条 ,经济损失很大。为了解犬埃立克体在我省的感染情况 ,及时控制该病的暴发流行 ,1999年 4月起 ,我们对广州周边几个县市部分犬场犬血清抗体进行调查 ,现将结果报告如下。1　材料…     

用查菲埃立克体P28融合蛋白作免疫印迹诊断犬埃立克体感染

目的 建立以查菲埃立克体P28融合蛋白为抗原的诊断犬埃立克体感染的免疫印迹。方法 诱导PinPoint^TMXa-3/P28重组质粒在E coli细胞内高效表达查菲埃立克体P28融全蛋白,以该重组蛋白作抗原与犬血清行免疫印迹。结果 P28融合蛋白与书籍的3份犬埃立克体感染血清呈阳性反应,与正常犬血清反应为阴性,在165份来自犬埃立克体病疫区的待检犬血清中有43份（26%）与P28反应阳性。结论 查菲埃立克体P28融合蛋白可作为犬埃立克体感染的特异性诊断抗原,以其建立的免疫印迹可用于犬埃立克体病的诊断。     

查菲埃立克体致病机制研究进展

查菲埃立克体(Ehrlichia chaffeensis)是一种侵染人单核细胞的专性细胞内寄生的革兰氏阴性菌。其所致疾病为人单核细胞埃立克体病(Human Monocytotropic Ehrlichiosis, HME),是一种经蜱传播的人兽共患病。查菲埃立克体通过受体介导的吞噬作用侵入宿主细胞,在细胞质空泡中生存和繁殖。其缺乏编码肽聚糖和脂多糖生物合成的基因,影响多种促炎细胞因子的产生,从而抑制宿主的天然或获得性免疫应答。其通过抑制吞噬体溶酶体融合、抑制宿主细胞凋亡、逃避宿主自噬清除、参与蛋白质翻译后修饰等多种方式逃避宿主杀伤而导致持续感染。本文对查菲埃立克体致病机制研究进展进行综述,为进一步了解其与宿主相互作用模式、持续感染机制提供新的研究思路。     

广州市郊鼠中检出埃立克体样微生物

目的　了解曾经两次暴发犬埃立克体病流行的广州市郊某养犬基地野生啮齿动物感染埃立克体情况。方法　用 16SrRNA基因埃立克体属特异引物对抓捕的动物全血及脾脏样本进行PCR检测 ,阳性样本克隆测序 ,所得序列与Gen Bank中注册的核苷酸序列进行比较。结果　在所抓捕的 2 6只野生啮齿动物中 ,3份褐家鼠全血样本和一份脾样本检出埃立克体特异阳性带。序列测定结果显示 ,这 3只鼠所携带的埃立克体样微生物基因完全一致。该基因与核酸数据库中的埃立克体Schotti株有最大同源性 (99 0 4 % )。结论　此次发现的埃立克体与该基地流行的犬埃立克体Gzh982株和扁平埃立克体Gzh981株有很大差异。该菌在流行病学上的意义有待进一步研究。     

江西省赣州市蜱携带立克次体和埃立克体的调研

目的 了解江西省赣州市蜱的种类及其携带的病原体,为蜱传疾病的防控提供科学依据方法 在野外用布旗法和在动物体表采集蜱,进行种类鉴定。用PCR法扩增立克次体(Rickettsia sp.)gltA基因和埃立克体(Ehrlichia sp.)16S rRNA基因片段并测序,进行系统进化分析结果 江西省赣州市4县采集的395只蜱的种类包括2属4种,分别为血蜱属的长角血蜱(Haemaphysalislongicornis)、嗜群血蜱(H. concinna)、具角血蜱(H. cornigera)和扇头蜱属的微小扇头蜱(Rhipicephalus microplus)。395只蜱分为43批检测立克次体和埃立克体,共有18批阳性。系统进化分析显示,龙南县22批蜱中检测到16批阳性,来源于具角血蜱的LN1615株与扇头蜱立克次体(R. rhipicephali)处于同一分支,来源于微小扇头蜱的LN1620株与马赛立克次体(R. massiliae)处于同一分支,其余的12株来源于具角血蜱和2株来源于微小扇头蜱,与日本立克次体(R. japonica)处于同一分支。崇义县CY1602株来源于嗜群血蜱与R. raoultii处于同一分支。于都县YD1606株为来源于长角血蜱的埃立克体,与2010年Yonaguni206(HQ697589)、Yonaguni138(HQ697588)和2009年HLAE178(GU075695)处于同一分支。安远县微小扇头蜱检测均为阴性结论 本文对江西省赣州市采集的蜱进行了鉴定,首次在江西省赣州市的蜱中检测到日本立克次体、扇头蜱立克次体、马赛立克次体、R. raoultii和埃立克体,为江西省蜱种类的调查及其传播疾病的预防控制提供根据。     

我国南方蜱样本中发现犬埃立克体DNA

目的 调查我国南方蜱样本埃立克体感染情况。方法 用已发表的埃立克体１６ＳｒＲＮＡ基因的属特异引物和自行设计的犬埃立克全种特异引物，对广东，广西和海南部分地区采集的蜱样本进行ＰＣＲ检测，并将阳性ＰＣＲ产物克隆测序，结果通过Ｉｎｔｅｒｎｔ提交到美国国立医学图书馆／国家健康研究所的站点，利用ＢＬＡＳＴ对核酸数据库进行同源性检索。结果 从广东采集的血红扇头蜱和广西要的微小牛蜱样本中扩增出埃立克体４２５ｂｐ     

立克次氏体传染病

宁德市恙虫病地理流行病学调查——袁高林等(福建 宁德市卫生防疫站消杀科352100)；《中国媒介生物学及控制杂志》，2003，14(5)：372—374[目的：对宁德市的恙虫病进行地理流行病学调查，为今后防制提供依据。方法：捕获农田活鼠捡恙螨，分析宿主动物及媒介昆虫的种群     

当今人兽共患病病原体分类

根据《Risk factors for human disease emergence》（Louise H．Taylor,2001）和《Host range and emerging and reemerging pathogens》（Mark E．J Woolhouse,2005）两文献所提供的868种人兽共患病病原体,我们以此为基础,利用我们现有的资料进行补充。例如：将原有埃立克体由5种增至10种;原只1种羊布鲁氏菌,现增加了牛布鲁氏菌,猪布鲁氏菌和犬布鲁氏菌;还将SARS和Henipavirus等列入。由于受条件和时间限制,难免出现差错。还有一些来不及列入,今后将继续补充和修改。     

福建西北林区人单核细胞埃立克体病分子流行病学调查研究

目的 了解福建西北林区人单核细胞埃立克全病的存在情况。方法 评价以查菲埃立克体16S rRNA基因序列高变区构建引物进行的半套式PCR的敏感性和特异性，并用此种半套式PCR技术检测从福建武夷山市和宁化县采集的蜱类、野生动物内脏和血液及人群血液标本中的查菲埃立克体DNA，对有代表性的阳性标本的扩增产物进行克隆和序列测定，并与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较。应用以16S rRNA基因构建的特异和通用引物进行PCR，从越原血蜱及黄毛鼠标本中分段扩增查菲埃立克体DNA，进行克隆和序列测定，分别将其连成完整序列，与已知所有埃立克体及近缘菌的16SrRNA基因序列进行最大同源性比较，用Clustal X(1.8)软件对同源位碱基作聚类分析，应用“Tree View”程序得出遗传发育树图。结果 这种半套式PCR检测方法具有很高的特异性，仅能扩增查菲埃立克体DNA，而对其它蜱媒病病原体，如斑点热立克次体、菜姆病螺旋体的DNA及人粒细胞埃立克体病病原体的16S rRNA基因都不能扩增，同时，用有限稀释法以含EC 16S rRNA基因的质粒为模板评价其敏感度，结果显示：最低能检测到4个拷贝的查菲埃立克体DNA。用此半套式PCR法从该地区的越原血蜱、粒形硬蜱，鼠类（褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、神鼠、小家鼠）和野兔的脾脏和/或血块中均扩增出了查菲埃立克体的特异DNA片段。检测越原血蜱成蜱283组（659只），25组阳性，最小阳性率为3.8%。粒形硬蜱4只，1只阳性。野鼠脾脏、血块及野兔血块的阳性率分别为56.4%（22/39）、38.7%(12/31)和18.2%(2/11）。同时检测的其它蜱种、狐狸血块、野猪血块及人血块中均未发现查菲埃立克体DNA。越原血蜱和野鼠代表性标本的390bp的PCR产物经克隆、测序后，发现其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置分别一致和相差一个核苷酸。从越原血蜱和黄毛鼠扩增来的全序列与美国查菲埃立克体分离株的16S rRNA基因序列分别相差6个和2个核苷酸，同源性分别为99.6%和99.9%；与犬埃立克体（E.cn-is）、 尤菌氏埃立克体（E.ewingii）、鼠埃立克体（E.muris）之间的同源性为97.6%～98.0%，属于近缘种；与其它埃立克体种的同源性在83.0%～92.4%之间。结论 上述研究结果提示福建西北部地区可能存在人单核细胞埃立克体病的自然疫源地。越原血蜱和粒形硬埤为其潜在传播媒介，鼠和野兔可能为其贮存宿主。实践证明，半套式PCR及序列分析技术可作为检测蜱和动物标本中查菲埃立克体的一种敏感、特异的方法，适用于现场流行病学调查。本研究首次测定我国南方蜱及啮齿动物中埃立克体的16S rRNA全基因序列，为进一步开展疫源地调查奠定了基础。     

立克次氏体传染病

我国恙虫病流行病学及其传播媒介研究进展（综述），儿童恙虫病28例临床分析，恙虫病16例临床分析。[编按]     

山东省首例实验室诊断人单核细胞埃立克体病调查

目的 报告山东省首例人单核细胞埃立克体病的发现、诊治经过及其实验室检测.方法 对该疑似病例开展流行病学调查并填写个案调查表,采集其血标本,套式-PCR技术检测血液中嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体特异性16S rRNA基因.结果 患者为不明原因发热,伴WBC和PLT减少.嗜吞噬细胞无形体特异性核酸检测阴性,查菲埃立克体特异性核酸检测阳性.PCR扩增阳性产物进行测序并与GenBank中注册的已知序列进行比较分析,显示与查菲埃立克体的同源性＞99％.结论 山东省存在查菲埃立克体感染病例,进一步开展自然疫源地调查十分必要.