Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ_1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ_1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ_1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

地塞米松和淀粉样β蛋白片段25-35对PC12细胞损伤和凋亡的影响

目的探讨地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)联合作用对PC12细胞损伤和凋亡的影响。方法采用单独或联合应用DEX 0.1～10μmol.L-1和Aβ25-35 1～5μmol.L-1作用PC12细胞24 h,MTT法测定细胞活力;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,PI单染流式细胞仪检测细胞凋亡峰;逆转录-PCR检测胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示,与正常对照组相比,DEX 5和10μmol.L-1,Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1,DEX 5+Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1及DEX 10+Aβ25-35 5,10μmol.L-1组均可明显降低PC12细胞存活率,而DEX联合Aβ25-35能明显减少PC12细胞数(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞凋亡率和亚二倍体凋亡峰有一定的增加作用(P<0.05),两者联合作用能明显增加PC12细胞早期和中晚期凋亡率,增加亚二倍体凋亡峰(P<0.01);RT-PCR结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平没有明显影响,它们联合作用能明显增加PC12细胞胱天蛋白酶3mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 DEX和Aβ25-35联合作用能明显增加对PC12细胞的损伤,促进胱天蛋白酶3 mRNA表达,诱导PC12细胞凋亡。     

远志皂苷对β淀粉样蛋白片段1-40诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

目的探讨远志皂苷抑制β淀粉样蛋白片段1-40(Aβ1-40)诱导的PC12细胞凋亡的作用机制。方法采用聚集状的Aβ1-40 25μmol·L-1诱导PC12细胞凋亡,然后将处理后的PC12细胞分为Aβ1-40模型组和远志皂苷50,100和200μmol·L-1组,同时设正常细胞对照组。采用MTT比色法检测细胞存活率;膜联蛋白-Ⅴ和PI双染法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞凋亡基因Bcl-2和Bax及细胞色素c(Cyt c)表达阳性的细胞百分率;Western印迹法检测PC12细胞中Cyt c的表达水平。结果与正常对照组比较,Aβ1-40模型组PC12细胞的存活率明显降低(P<0.01),为(31±7)%;Bcl-2阳性表达细胞率降低(P<0.01),为(23.9±1.9)%;Bax和Cyt c阳性表达细胞率升高(P<0.01),分别为(79.0±3.7)%和(49.2±3.6)%,Bcl-2/Bax阳性表达细胞比值为0.30。与模型对照组比较,远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率分别升高至(51±13)%,(64±7)%和(84±10)%(P<0.01);Bcl-2阳性率升高至(38.7±0.9)%,(53.7±1.6)%和(60.3±0.8)%(P<0.01),Bax阳性率分别降低为(60.8±1.9)%,(41.5±2.2)%和(32.7±1.4)%(P<0.01),Bcl-2/Bax比值亦分别上升为0.64,1.29和1.84;Cyt c阳性率分别降低至(45.4±3.4)%,(30.2±2.2)%和(27.5±1.0)%(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率和Cyt c蛋白表达水平亦明显升高(P<0.01);远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24h,PC12细胞凋亡率和Cyt c表达水平较模型组均降低(P<0.01)。结论远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是抑制Bax和Cyt c表达,增加Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路。     

MCI-186对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞氧化损伤韵神经保护作用

目的 探讨MCI-186(edaravone)对阿尔茨海默病(AD)细胞损伤的保护作用.方法 利用淀粉样β蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导PCI2细胞制备成AD细胞模型;采用MTT法确定Aβ_(25-35)抑制PC12细胞生长的半数抑制浓度(IC_(50))和MCF-186对AD细胞保护作用最强时的浓度;利用邻菲罗啉化学发光法测定羟自由基(.OH)含量,确定MCI-186清除.OH最强作用时的浓度.结果 Aβ_(25-35)诱导PC12细胞的IC_(50)是29.76 μmol/L,此浓度的Aβ_(25-35)对PC12细胞生长的最大抑制率发生在36 h;30 μol/L Aβ_(25-35)诱导PC12细胞36 h可以制成理想的AD细胞模型.20 μmol/L MCI-186清除.OH作用最强,即对AD细胞的保护作用最强.结论 MCI-186可以通过清除Aβ_(25-35)产生的.OH,在AD中发挥其神经细胞保护作用.     

姜黄素对β-淀粉样肽(25-35)诱导去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素(Cur)对β-淀粉样肽(25-35)(βamyloid peptide-25-35,Aβ25-35)诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响.方法PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期,用MTT比色法分析细胞存活率,流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡,Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化.结果用不同终浓度(0,1.25,2.5,5,10,20 μmol·L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h,再用Aβ25-35处理24 h,细胞存活率增加;Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P＜0.01),亚二倍体峰消失;核固缩、碎裂减少;p21 mRNA表达和P21蛋白表达增加.结论Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡,可能与上调p21的表达有关.     

姜黄素对β-淀粉样肽（25-35）诱导去血清培养PC12

目的：探讨姜黄素（Cur）对β-淀粉样肽(25-35)（βamyloid peptide-25-35，Aβ25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响。方法：PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率，流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡，Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变，RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化。结果：用不同终浓度(0，1.25，2.5，5，10，20 μmol&#8226;L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h，再用Aβ25-35处理24 h，细胞存活率增加；Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少，凋亡率明显降低(P<0.01)，亚二倍体峰消失；核固缩、碎裂减少； p21 mRNA表达和P21 蛋白表达增加。结论：Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡，可能与上调p21的表达有关。     

马尾松针叶聚戊烯醇对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞损伤的保护作用

<正>阿尔采末病(Alzheimer’s disease,AD)是一种神经系统的退行性疾病,AD的主要病理特征之一是在大脑皮层和海马出现β-淀粉样蛋白(amyloid beta-protein,Aβ)聚积形成的老年斑[1]。针叶聚戊烯醇是从松科植物针叶不皂化的脂溶     

异黄酮活性成分对Aβ_(1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨异黄酮活性成分对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法从大豆中提取纯化异黄酮活性成分,以Aβ1-42诱导PC12细胞损伤为细胞模型,采用细胞形态学方法、MTT法、LDH法观察不同剂量的异黄酮活性成分对PC12细胞损伤的保护作用。结果异黄酮活性成分能有效地改善PC12细胞的形态,提高细胞存活率(P<0.05),保护组LDH活性低于损伤组(P<0.05)。结论大豆异黄酮活性成分对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

积雪草苷对Aβ25～35诱导PC12细胞凋亡的影响

目的:探讨积雪草苷对Aβ25～35诱导PC12细胞凋亡的影响。方法:Aβ25～35 20μmol.L-1刺激PC12细胞,同时分别给予积雪草苷160,80,40,20μg.mL-1,CCK-8法检测细胞活力,Annexin-V/FITC双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态,Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果:与模型组比较,积雪草苷剂量依赖性地提高Aβ25～35诱导的PC12细胞存活率,增加Bcl-2的表达,降低PC12细胞的凋亡率,差异有统计学显著性(P<0.05)。结论:积雪草苷对Aβ25～35诱导的PC12细胞凋亡有保护效应,可能与增加Bcl-2表达有关。     

一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及芍药苷的保护作用

目的:探讨一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及芍药苷保护作用的可能机制.方法:MTT和乳酸脱氢酶活性测定细胞存活率,DNA凝胶电泳观察DNA的断裂情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率、检测线粒体跨膜电位.结果:500 μmol·L-1 硝普钠(SNP)可诱导PC12细胞凋亡,细胞线粒体跨膜电位明显下降.预先经过 0.1、1和10 μmol·L-1 等浓度芍药苷处理后, SNP诱导的PC12细胞凋亡明显减少,同时明显减弱一氧化氮对线粒体跨膜电位的影响.结论:芍药苷可抑制一氧化氮诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位有关.     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

β-淀粉样蛋白对神经干细胞致凋亡作用研究

目的观察β-淀粉样蛋白(Aβ)能否诱导体外培养的大鼠神经干细胞凋亡。方法取孕13d的胎鼠大脑,体外进行培养、传代、鉴定后,加入Aβ,利用细胞计数观察细胞增生,利用琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪观察凋亡情况。结果当Aβ浓度>25μmol/L时,能明显抑制神经干细胞的增生,同时引起神经干细胞的明显凋亡。结论Aβ抑制神经干细胞的增生并可致神经干细胞凋亡,可能与阿尔茨海默病的发病有关。     

海风藤对氯化钴诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的研究海风藤对氯化钴(CoCl2)诱导的PC12细胞凋亡的分子机制,从而确定海风藤对缺氧诱导的神经细胞凋亡的保护作用。方法设立海风藤保护组,CoCl2诱导组和正常细胞对照组;倒置相差显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率,分光光度法检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)含量和活性氧(ROS)生成量水平变化;化学发光法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)生成量和Caspase-3表达量的变化;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-xl的表达。结果海风藤预保护的PC12细胞在CoCl2诱导后,与CoCl2诱导组相比,细胞形态有明显改善,细胞存活率显著上升,由28.7%变为65.1%(P<0.01);培养基中LDH含量和ROS生成量明显下降,相应吸光度分别由29.8和18.3变为18.33及7.8(P<0.01);细胞ATP释放量明显增加,保护组为诱导组的1.2倍(P<0.01);基因bcl-xl表达上升;Caspase-3在细胞凋亡中的活性被抑制,保护组为诱导组的81%(P<0.01)。结论海风藤能通过抑制氧化应激损伤对线粒体功能破坏,增强bcl-xl的表达,抑制Caspase-3激活等机制提高细胞存活率,达到抑制CoCl2诱导PC12细胞凋亡作用。     

雌激素对培养大鼠皮质神经元细胞β淀粉样蛋白(25-35)损伤的保护作用

目的:研究雌激素对β淀粉样蛋白(βamyloidprotein,Aβ)诱导的大鼠神经细胞损伤的影响。方法:通过相差倒置显微镜、Giemsa染色及乳酸脱氢酶(lactatedehydrohenase,LDH)释放率的测定。观察17β雌二醇(17βestradiol,17βE2)对Aβ(2535)诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤的影响。结果:Aβ(2535)可以诱导大鼠皮质神经元细胞损伤,17βE2预处理48h显著抑制Aβ(2535)诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤。结论:Aβ对大鼠皮质神经元细胞有毒性作用,雌激素可以抑制Aβ诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤,雌激素具有神经保护作用。     

吡格列酮对淀粉样β蛋白片段25-35致大脑皮质神经元损伤的保护作用

目的观察吡格列酮(Pio)对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)所致培养皮质神经元损伤是否具有保护作用。方法培养7 d的乳大鼠大脑皮质神经元,先加入Pio0.01,0.1,1和10μmol.L-1作用1 h,然后加入Aβ25-3520μmol.L-1作用24 h;或先加入GW9662 10μmol.L-1作用30 min后,加入Pio1μmo.lL-1作用1 h,然后加入Aβ25-35作用24 h。MTT法测定细胞存活率;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变及细胞凋亡率;Western印迹法检测磷酸化丝裂原激活蛋白激酶的激酶4(MKK4)水平、磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)水平和Bcl-2蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,Aβ25-35可使体外培养神经元存活率明显降到(66.8±1.2)%,Pio 0.1,1和10μmol.L-1可明显对抗Aβ25-35诱导的培养神经元存活率下降,分别为(81.2±2.9)%、(87.9±2.2)%和(98.1±1.9)%,且呈明显浓度依赖性;GW9662能部分拮抗Pio的这种抑制作用。Hoechst33258核染色结果显示,正常培养神经元细胞核荧光染色均匀,只见到极少量细胞出现核固缩,凋亡率为(11.8±1.1)%。Aβ25-35作用24 h后,神经元出现核固缩或核碎裂的数目明显增多,凋亡率增加到(64.6±2.3)%,Pio 0.1,1和10μmol.L-1可明显抑制Aβ25-35引起的培养神经元凋亡率增加,凋亡率分别为(58.3±1.2)%、(52.6±1.3)%和(41.5±1.5)%。Western印迹结果显示,与正常对照组相比,Aβ25-35可使神经元Bcl-2蛋白表达水平明显降低,磷酸化MKK4表达及磷酸化JNK1表达水平明显增加,Pio能上调Bcl-2的表达水平,对抗Aβ25-35诱导的磷酸化MKK4和磷酸化JNK1表达水平增加。结论 Pio能够明显抑制Aβ25-35引起体外培养神经元的损伤作用,这种作用可能与激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ、上调Bcl-2蛋白表达和抑制MKK4/JNK信号转导通路有关。     

白藜芦醇调控RAGE/LRP1通路改善β-淀粉样蛋白对PC12细胞神经毒性作用研究

目的:探究中药活性单体白藜芦醇对β-淀粉样蛋白(amyloid-beta,Aβ)诱导PC12细胞损伤的保护作用及对相关蛋白表达调控的影响。方法:用不同浓度(1,5和10μmol·L^-1)白藜芦醇处理Aβ_1-42诱导的PC12细胞,应用MTT法检测PC12细胞增殖情况,ELISA法检测PC12细胞内Aβ_1-42含量变化,qPCR法检测晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (low-density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)在基因水平的变化,应用Western Blot法检测RAGE和LRP1在蛋白水平的变化。结果:白藜芦醇对PC12细胞增殖的IC₁₀值是11.2μmol·L^-1。白藜芦醇能够改善Aβ_1-42诱导的细胞增殖活力下降,同时白藜芦醇能够降低Aβ_1-42在...     

超氧化物歧化酶对浓缩铀诱发PC12细胞凋亡的保护作用

目的 研究超氧化物歧化酶（SOD）对浓缩铀诱导PC12细胞凋亡的保护作用。方法 在PC12细胞中加入浓缩铀DMEM／F12工作液，计算PC12细胞的内照射吸收剂量。结果 SOD可抑制浓缩铀诱发细胞迅速下降及DNA链断裂，同时提高细胞内游离精脒含量。结论 研究表明外源性SOD在清除自由基、抑制凋亡、保护细胞抗浓缩铀诱发损伤中有着重要作用。