间充质干细胞及其作用的研究新进展

间充质干细胞(MSCs)可以成功地从所有哺乳动物组织细胞内分离出来,它的多向分化潜能在再生医学中有很大应用潜力.随着对MSCs的生物学特征、MSCs与其周围内环境之间的相互作用、MSCs归巢的分子调节机制及多向分化能力的深入研究,MSCs将作为细胞修复或外源性基因转染和表达的载体在临床试验中发挥重要作用.     

淫羊藿在MSCs成脂分化过程中对PPARγ基因表达影响的实验研究进展

骨髓基质干细胞具有多向分化的能力,研究发现其成脂分化与骨质疏松症存在着不可忽视的关系.PPAR γ是脂肪分化的主要调控因子,已有研究发现其对MSCs分化方向起关键性调控作用.淫羊藿对MSCs成骨分化具有促进作用,但其在MSCs成脂分化过程中对PPAR γ基因表达影响目前尚无研究报道.     

软骨细胞与间充质干细胞诱导成软骨肥大分化的调控机制及策略

软骨肥大分化是应用间充质干细胞( bone mesenchymal stem,MSCs)治疗软骨损伤修复的面临的一个难题.软骨肥大分化在骨关节炎中也经常会出现.如何抑制软骨肥大是应用MSCs进行软骨修复以及治疗骨关节炎亟待解决的问题.MSCs是一种具有多向分化潜能的细胞,能够在体内或体外分化成多种细胞,包括骨细胞、软骨...     

骨髓间质干细胞实验研究有关现状

骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)作为一种具有自我更新和多向分化潜能特性的组织特异性干细胞,在特定诱导条件下具有向不同组织细胞分化的能力,并且MSCs还易于外源基因的转染和表达,所以随着组织细胞工程和基因工程的发展,MSCs因其自我复制、免疫调节、多向分化等潜能而在组织工程、细胞治疗、基因治疗等方面具有广泛的应用前景,但同时研究发现MSCs在应用中也存在一定的问题有待解决.     

脂肪源性干细胞与整形美容医学

1976年Fridenstein等首先报道从骨髓中分离出克隆源性的具有多向分化潜能的基质细胞-骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs).在MSCs被轰轰烈烈地用于治疗血液系统疾病25年后,Zuk等于2001年发现脂肪组织中除了含有已经定型的前脂肪细胞外,也包含一种具有多向分化潜力的细胞群,其性质与MSCs十分相似,但又不完全相同.这些细胞已被证实不仅具有分化成为骨骼、软骨、脂肪、心肌、神经等组织的能力,而且同样具有促进伤口愈合、损伤组织细胞再生和减少瘢痕的能力及抗衰老能力.     

人滑膜间充质干细胞的研究现状

间充质干细胞 (mesenchymal stem cells, MSCs)是指来源于间充质组织,具有高度增殖和多向分化潜能的克隆原细胞 [1, 2].近年来,随着组织细胞工程学和基因工程学的发展,利用 MSCs的多项分化潜能,在组织工程、细胞因子替代治疗、基因治疗及再生医学等方面的应用研究已成为热点.越来越多的研究表明: MSCs除存在于骨髓组织外,还可从滑膜、骨膜、骨骼肌和脂肪组织等成人间充质组织中分离获得,而且不同来源的 MSCs在体内发挥着不同的功能. 2001年, De Bari等 [3]首先报告在成人滑膜组织中可以分离获得 MSCs,即人滑膜 MSCs.     

人脐带间充质干细胞生物学特性的研究进展

间充质干细胞(MSCs)是具有自我更新能力且在适宜微环境下具有多向分化潜能的一种原始细胞.1991年Caplan[1]把骨髓中能黏附于塑料培养板表面,在体外高度扩增并可多向分化的细胞群命名为MSCs;2003年Covas等[2]首次报道脐带中有存在干细胞的可能性;Wang等[3]也证实在脐带的Wharton's jelly区域可分离出具有多种分化潜能的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs).目前发现hUCMSCs有诸多优点,应用潜能较大,现就hUCMSCs生物学特性的研究进展作一综述.     

骨髓基质干细胞的单克隆化培养和多向分化的实验研究

目的通过对骨髓基质干细胞（marrow stromal cells，MSCs）的单克隆化培养、鉴定和扩增，获得从一个单细胞扩增出的大量均质MSCs，并研究其多向分化能力。方法无菌条件下获取大鼠骨髓细胞，在培养的过程中挑出相应的单细胞克隆。将挑出的单细胞克隆与饲养细胞混合培养，快速进行扩增和细胞表面标志的鉴定，并进一步行增殖和细胞分化实验。结果在含有特定饲养层细胞的培养条件下，单克隆来源的MSCs能在抑制分化的状态下大量扩增，并保持细胞的均质性；而且在这种培养条件下，MSCs的增殖能力明显增强，并能成功被诱导向软骨、神经样细胞分化。结论通过骨髓细胞的单克隆培养，获得了均质和多向分化潜能的MSCs，为进一步更精确的研究MSCs的生物学特性提供了基础。     

间充质干细胞分化机制及诱导方法的研究进展

间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）为来源于中胚层间充质、具有多向分化潜能的成体干细胞,广泛存在于骨髓、脐带组织、脐血、外周血、脂肪等组织中,在体内或体外特定的诱导条件下,MSCs不仅可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞等中胚层间质组织细胞,还可跨越胚层界限,分化为外胚层的神经元、     

人脐血间充质干细胞的分离培养及其多向分化潜能的实验研究

目的 研究人脐血间充质干细胞(MSCs)分离培养的生物学特性及其向成骨、成脂诱导分化的能力.方法 从人脐血中分离扩增MSCs,显微镜下观察其形态及生长情况,绘制生长曲线,电镜下观察超微结构,流式细胞仪检测细胞表面标志物;成骨、成脂诱导后以碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色鉴定MSCs成骨分化潜能,油红O染色鉴定成脂分化潜能.结果 人脐血MSCs为成纤维细胞样,漩涡状贴壁生长排列,传至第110代细胞形态无明显变化;电镜下显示为低分化细胞;细胞表面不表达CD34和CD45,强表达CD29、CD44和CD90;成骨诱导后可检测到ALP表达及钙化结节形成;成脂诱导后可检测到脂滴形成.结论 人脐血中可分离出MSCs,与其他来源的MSCs具有类似的生物学特性及多向分化潜能,脐血有可能成为骨组织工程种子细胞的来源.     

间充质干细胞归巢及其在骨科疾病中的研究

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是近些年在骨科研究领域中治疗各种疾病很有吸引力和潜力的种子细胞。因MSCs具有向成骨细胞分化的特性,且前的研究主要集中在MSCs的成骨分化。随着研究的深入,逐渐发现MSCs归巢在骨形成和骨科疾病治疗中也起到重要作用。MSCs归巢是指MSCs离开原有的微环境(主要是骨髓)进入外周血循环,并迁出外周血管至组织损伤处的过程。MSCs归巢是骨形成的前提条件,只有MSCs首先归巢至损伤处后,进而分化为成骨细胞,才能参与骨组织的修复。促进MSCs归巢在骨质疏松症、骨折、骨缺损及颗粒磨损性骨溶解等骨科疾病治疗中已起到积极的作用。因此,进一步研究MSCs归巢将对治疗骨科疾病提供新的思路。     

Mesenchymal stem cells from the bone marrow stroma: basic biology and potential for cell therapy

Mesenchymal stem cells (MSCs) can be isolated from the bone marrow stroma where they constitute an adult somatic stem cell population distinct from hemapoietic stem cells. MSCs are multipotent cells in that they have the capacity to generate progeny that can differentiate into multiple cell lineages. MSCs can be explanted in vitro from bone marrow aspirates and expanded in culture where they can be induced to terminally differentiate into osteoblasts, chrondrocytes, adipocytes, tenocytes and heamapoteic supporting tissue. This ability to differentiate has also been demonstrated in vivo following transplantation into rodents. Recent work has shown that MSCs may have a broader capacity for differentiation than was previously envisioned. In some circumstances, this increased potential for differentiation may make MSCs viable alternatives to embryonic stem cells. Accordingly, the multipotential capacity of MSCs, their accessible origin, and high ex vivo expansive potential, makes these cells attractive as tools for tissue engineering and cell-based therapy. This review will explore the basic biology of MSCs derived from adult tissues and consider their isolation, culture, and differentiation. In addition, we will examine some of the potential clinical applications of these cells and consider the future perspectives of their use.     

骨髓基质细胞基因表达的研究进展

目的介绍骨髓基质细胞(marrow stromal cells，MSCs)基因表达与其生物学特性、诱导分化、基因治疗、造血调控和创伤修复中的炎症反应等方面的研究进展。方法查阅国内外近年有关文献，并做综合分析。结果MSCs不仅能在不同的条件下表达中胚层、内胚层和外胚层的特异性基因，而且能稳定地表达转导的外源基因，并且对造血系统有支持作用，也参加创伤修复过程中的炎症反应。结论MSCs是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞，且体外易于扩增，是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞。     

血管紧张素Ⅱ对骨髓间充质干细胞定向诱导为角质形成细胞调控作用的实验研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为角质形成细胞的可能性及在此过程中血管紧张素Ⅱ （AngⅡ）对其的调控作用.方法：抽取Wistar大鼠的骨髓,经全骨髓法分离、纯化MSCs,鉴定后建立MSCs细胞模型,用成胶质细胞诱导培养基诱导其为角质形成细胞,显微镜下观察其形态学变化.以添加了AngⅡ 的成角质形成细胞诱导培养基组与单纯成角质形成细胞诱导培养基组在诱导MSCs 7天、10天后行角蛋白10（CKP10）免疫组织化学染色及流式细胞仪检测,并进行对比观察分析.结果：培养的MSCs具有成脂、成骨分化的能力.MSCs可以成功诱导为角质形成细胞,添加Ang Ⅱ的诱导组与对照诱导组CKP10免疫组化染色均有阳性表达,但添加AngⅡ组阳性细胞数高于对照组.流式细胞仪检测显示CKP10阳性细胞百分率,AngⅡ组为80.62％,对照组（32.46％）,两者相差显著（P＜0.05）.结论：MSCs可以诱导分化为角质形成细胞,ANGⅡ对MSC的成角质形成细胞分化有显著的促进作用,这一作用可能是AngⅡ 促进创面愈合的机制之一.     

正常成人和非霍奇金淋巴瘤患者的骨髓间充质干细胞生物学特性的比较

目的比较研究非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者和正常成人的骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性及分化能力,为临床细胞移植提供实验依据。方法获取并分离正常成人和NHL患者的骨髓MSCs,用低血清培养液培养、传代,观察MSCs的形态和生长特性,以流式细胞仪检测其免疫表型和细胞周期,体外诱导MSCs向脂肪和骨分化,行MSCs的染色体分析,电镜观察其超微结构。结果正常成人和NHL患者的骨髓MSCs具有相似的细胞形态、生长特性和免疫表型,而且都可以向骨和脂肪分化;NHL来源的MSCs具有正常的核型和超微结构,超过90%的细胞处于静止期,未发现肿瘤细胞的特征性结构。结论从NHL患者骨髓中获取的MSCs经培养传代,与正常成人骨髓MSCs一样,具有在体外大量扩增并保持低分化状态和多向分化的能力。     

Bone marrow stem cells for urologic tissue engineering

OBJECTIVES: Experiments in rats and dogs have demonstrated the potential of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) for urinary tract tissue engineering. However, the small graft size in rats and a failure to identify the MSCs in engineered tissues made it difficult to assess the true potential of these cells. Our goals were to characterize MSCs from pigs, determine their ability to differentiate into smooth muscle cells (SMCs) and use them in an autologous augmentation cystoplasty. METHODS: MSCs were isolated from pigs and analyzed for common markers of MSCs by flow cytometry. SMC differentiation was determined by immunoblotting. MSCs were isolated, genetically labeled, expanded in vitro, seeded onto small intestinal submucosa (SIS) and used for autologous bladder augmentation. RESULTS: Porcine MSCs are morphologically and immunophenotypically similar to human MSCs. Culturing MSCs at low density enhances proliferation rates. MSCs consistently differentiate into mature SMCs in vitro when maintained at confluence. Labeled MSCs grew on SIS over one week in vitro and survived a 2-week implantation as an autologous bladder augment in vivo. Some label-positive cells with SMC morphology were detected, but most SMCs were negative. Notably, many cells with a urothelial morphology stained positively. CONCLUSIONS: Porcine MSCs have similar properties to MSCs from other species and consistently undergo differentiation into mature SMC in vitro under specific culture conditions. Labeled MSCs within SIS may assist tissue regeneration in augmentation cystoplasty but may not significantly incorporate into smooth muscle bundles.     

不同方法分离的大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和成脂分化能力的比较

目的：通过比较密度梯度离心和贴壁筛选两种方法所获MSCs的增殖活性和成脂分化能力，探索MSCs体外分离和纯化的较好方法。方法：应用密度梯度离心和贴壁筛选两种方法分离纯化骨髓MSCs，并通过MTT法检测其增殖活性，用第三代MSCs进行成脂诱导，以观察两种方法所获MSCs的成脂分化能力。结果：密度梯度离心法所获MSCs纯度高，呈纺缍形或小三角形，增殖快，约7～10天融合；贴壁筛选法分离的原代细胞中红细胞。破骨细胞等杂质细胞较多，增殖速度相对较慢，且经数次传代仍有较多杂质细胞存在，经成脂诱导后，两种方法所获MSCs表现出相似的成脂能力，油红O染色细胞计数值与光密度值比较两组无显著差异（P值〉0．05）。结论：密度梯度离心法是体外分离和纯化MSCs较好的方法，所获细胞增殖活性高，与贴壁筛选法所获MSCs具有相似的成脂分化能力。     

体外人骨髓间充质干细胞向汗腺细胞表型转化的实验研究

目的:研究骨髓间充质干细胞(MSCs)向汗腺细胞分化的可行性.方法:体外分别分离培养、扩增并鉴定MSCs和汗腺细胞,将汗腺细胞置于47℃环境中1 h建立汗腺细胞体外休克模型,继续孵育3～5 d,收集上清液作为条件培养基对MSCs分化诱导,应用免疫组织化学和流式细胞仪法检测对比共培养10 d后MSCs细胞表型的改变.结果...