罗氏Modular P800型生化分析仪测量总胆红素的方法学性能评价及参考区间的建立

目的 通过对罗氏ModularP800生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)的方法学性能评价和建立参考区间的研究,探讨临床化学定量检测的方法学性能评价方案和实验方法.方法 取罗氏正常水平质控和病理水平质控物,分别进行批内20次和连续20 d总胆红素的检测,统计分析批内变异(CV)和日间CV;将高、低值血清按一定比例混合,检测TBIL,回归分析确定分析测量范围(AMR);将中值血清按一定比例稀释后检测TBIL,分析稀释后样本测量值和预期结果的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);回顾分析376名健康人群血清样本TBIL的检测结果,统计分析建立参考区间.结果 正常水平、病理水平质控批内CV分别为0.63%,0.58%;日间CV分别为2.46%,1.68%;AMR为0.5～741.0μmol/L;CRR为0.5～59 280μmol/L;TBIL的参考区间为2.1～22.3μmol/L.结论 Modular系统检测性能能满足临床要求,评价方案简单易行;参考区间与厂家提供的参数不同,说明厂家提供的参考区间不可直接引用.     

罗氏电化学发光检测系统检测泌乳素的方法学评价及参考范围建立

目的按美国病理家协会（CAP）对实验室的要求,对罗氏电化学发光系统检测泌乳素（PRL）的方法进行评估和建立本实验室的参考区间。方法取中、低值患者混合血清,分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内变异系数（CV）和日间CV;用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,检测PRL,回归分析确定测量范围;将中值血清按一定比例稀释后检测PRL,分析稀释后样本和原始样本结果的符合程度,得出临床可报告范围（CRR）;取292名健康人群样本检测PRL,统计分析建立参考范围。结果中、低值批内CV分别为0.95%、1.16%,日间CV分别为2.39%、3.14%;功能灵敏度为0.065μg/L;分析测量范围（AMR）为0.105-452.88μg/L;CRR为0.065-4 528.80μg/L;本实验室的参考区间男性为3.86-22.80μg/L,女性为4.61-30.74μg/L。结论本系统检测性能符合CAP要求,参考区间上限略高于厂家提供的参数,说明厂家提供的参考区间不可直接引用。     

罗氏电化学发光检测系统检测泌乳素的方法学评价及参考范围建立

目的按美国病理家协会(CAP)对实验室的要求,对罗氏电化学发光系统检测泌乳素(PRL)的方法进行评估和建立本实验室的参考区间。方法取中、低值患者混合血清,分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内变异系数(CV)和日间CV;用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,检测PRL,回归分析确定测量范围;将中值血清按一定比例稀释后检测PRL,分析稀释后样本和原始样本结果的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);取292名健康人群样本检测PRL,统计分析建立参考范围。结果中、低值批内CV分别为0.95%、1.16%,日间CV分别为2.39%、3.14%;功能灵敏度为0.065μg/L;分析测量范围(AMR)为0.105~452.88μg/L;CRR为0.065~4 528.80μg/L;本实验室的参考区间男性为3.86~22.80μg/L,女性为4.61~30.74μg/L。结论本系统检测性能符合CAP要求,参考区间上限略高于厂家提供的参数,说明厂家提供的参考区间不可直接引用。     

颗粒增强透射比浊法测定胱抑素C方法学评价

目的用颗粒增强透射比浊法(PETIA)测定血清中胱抑素C(CysC)水平,评价该法用于检测血清中CysC水平的可行性。方法用PETIA检测试剂盒在Cobas 8000全自动生化分析仪上测定血清CysC水平,对方法的不精密度、灵敏度、线性范围等进行评价,并与CysC颗粒增强散射比浊法检测结果进行相关性分析,同时对其参考区间进行验证。结果低值样本和高值样本的批内不精密度CV分别为3.67%,1.15%,批间不精密度CV分别为4.08%,1.53%;准确度的测定偏差仅为-1.25%;此试剂盒检测CysC灵敏度为0.07mg/L;CysC浓度在0.2~8.0mg/L范围内检测线性良好;与西门子德灵颗粒增强散射比浊法(PENIA)比较有良好的相关性Y=0.945 8 X+0.048 6,r2=0.991 3,r=0.995 6,40例健康体检者样本的检测值仅有2例在厂家提供的参考区间之外,90%以上的观测值在待验证区间之内。结论颗粒增强透射比浊法用于定量检测人血清CysC水平,具有简便易行、快捷价廉、准确可靠的优点,适用于在日常临床检测中推广应用。     

Cobas c311自建系统测定血清胱抑素C的方法学评价

目的探讨颗粒增强免疫比浊法在罗氏Cobas c311非原装试剂自建系统中测定血清胱抑素C(CysC)的性能评价。方法通过自建测定系统研究血清CysC测定的精密度、回收率、检测限、干扰因素、线性范围,同时与日立7600进行方法学比较。结果自建系统测定CysC批内平均变异系数(CV)为1.79%,检测限为0.04 mg/L,平均回收率101.67%。血红蛋白在6.2g/L以下对测定结果无明显干扰。胆红素小于或等于227.5 mmol/L、三酰甘油小于或等于24.2 mmol/L时,对测定结果无明显干扰。该系统具有良好的线性范围(0.20~5.49 mg/L),与日立7600全自动生化仪比较有良好的相关性,Y=0.112 2+0.801X,r=0.969(P<0.01)。结论该自建系统在罗氏Cobas c311测定血清CysC具有较高的精密度和灵敏度,可以大批量及临床常规使用,有助于改良和简化临床检验过程。     

免疫比浊法检测血清游离轻链的方法学评价

目的对Beckman Immage 800全自动特种蛋白分析仪检测血清游离κ、λ轻链(sFLC)进行方法学评价。方法通过Beckman Immage 800定量测定sFLC,探讨其精密度、正确度、分析测量范围、干扰和携带污染率,同时对其参考区间进行验证。结果κFLC低、高值批内精密度的变异系数(CV)分别为7.84%、2.95%,批间精密度的CV分别为7.38%、5.57%;λFLC低、高值批内精密度(CV)分别为4.59%、3.94%,批间精密度CV分别为3.97%、2.01%;测定κFLC、λFLC定值质控血清与靶值的偏倚小于5%;κFLC、λFLC分析测量范围分别为10.8~128.0 mg/L、10.1~121.0 mg/L时,a值在0.95~1.05,r2≥0.98;κFLC、λFLC携带污染率分别为0.411%、0.216%;干扰试验结果显示游离胆红素≤342.0μmol/L、结合胆红素≤342.0μmol/L、血红蛋白≤5g/L和乳糜≤2 400浊度时,对sFLC结果无明显影响;40例健康体检者中有1例κFLC测定结果超出厂家推荐的参考区间,40例λFLC检测值均在厂家推荐的参考区间内。结论 Beckman Immage 800全自动特种蛋白分析仪检测sFLC的主要分析性能符合质量目标的要求,能够为临床提供科学、准确的诊疗依据。     

电化学发光法和即时检验法测N末端B型利钠肽原的方法学比较和性能评估

目的:评价即时检验(POCT)法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的分析性能,并与电化学发光法进行比较。方法:参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)提供的方法学评价的EP系列文件,研究两台POCT仪器检测NT-proBNP的精密度、线性范围、方法学比对及进行评价血红蛋白、乳糜和胆红素对分析的干扰,且与厂商声明的有关标准进行比较。根据CLSI C28-A2文件,对厂商声明的生物参考区间进行验证,确定其是否适用于本实验室。结果:A仪器检测NT-proBNP的批内变异系数(CV)和总CV分别为6.96%～11.22%和7.54%～11.75%,线性范围为98.0～32 924.5 pg/mL,检测结果与Roche Cobas e411的检测结果间有较好的相关性,对测试产生干扰的干扰物浓度为乳糜浓度≥725.5 FTU、血红蛋白≥2747.7 mg/L、游离型胆红素≥180.8 mg/L、结合型胆红素≥256.9 mg/L。不同年龄组共50名参考个体中除1名的NT-proBNP浓度(127 pg/mL)超出厂商提供的参考区间外,其余均在参考范围内。B仪器检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为10.25%～14.23%和11.46%～14.81%,线性范围为267.82～8627.28pg/mL,检测结果与Roche Cobas e411的检测结果间有细微的差异,对测试产生干扰的干扰物浓度为乳糜浓度≥694.98 FTU、血红蛋白≥3490.9 mg/L、游离型胆红素≥172.2 mg/L、结合型胆红素≥303.1 mg/L。不同年龄组共50名参考个体NT-proBNP浓度除了一个检测值(305.72 pg/mL)超出厂商提供的参考区间外,其余均在参考范围内。结论:A仪器(免疫荧光法)检测NT-proBNP的主要分析性能达到厂商声明的性能及相关质量的要求,B仪器(胶体金免疫层析法)除与电化学发光法的方法学比较上有差异外,其余分析性能也达到厂商声明的性能和有关质量要求。     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析性能评价

目的对钒酸盐氧化法测定血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)进行方法学评价.方法系统研究钒酸盐氧化法测定血清胆红素的精密度、灵敏度、稳定性及干扰因素,并比较其与重氮法结果的相关性.结果钒酸盐氧化法测定TBil批内变异系数(CV) 1.67%,批间CV 2.92%,平均回收率99.8%.DBil批内CV 1.25%,批间CV 3.52%,平均回收率99.6%.维生素C(VitC)≤0.5 g/L时对钒酸盐法和重氮法均无干扰.三酰甘油(TG)<6 mmol/L时对钒酸盐法无干扰,对重氮法有明显干扰.血红蛋白(Hb)在4 g/L以下对钒酸盐法无干扰,对重氮法有较大干扰.结论钒酸盐氧化法灵敏度高、重复性好,抗干扰能力强,适用于实验室常规应用.     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析性能评价

目的　对钒酸盐氧化法测定血清总胆红素 (TBil)、直接胆红素 (DBil)进行方法学评价。方法　系统研究钒酸盐氧化法测定血清胆红素的精密度、灵敏度、稳定性及干扰因素 ,并比较其与重氮法结果的相关性。结果　钒酸盐氧化法测定TBil批内变异系数 (CV) 1.6 7% ,批间CV 2 .92 % ,平均回收率 99.8%。DBil批内CV 1.2 5 % ,批间CV 3.5 2 % ,平均回收率 99.6 %。维生素C(VitC)≤ 0 .5 g/L时对钒酸盐法和重氮法均无干扰。三酰甘油 (TG) <6mmol/L时对钒酸盐法无干扰 ,对重氮法有明显干扰。血红蛋白 (Hb)在 4g/L以下对钒酸盐法无干扰 ,对重氮法有较大干扰。结论　钒酸盐氧化法灵敏度高、重复性好 ,抗干扰能力强 ,适用于实验室常规应用。     

PETIA法检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C方法学评价

目的对颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)进行方法学评价。方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A、EP6-A、EP9-A及EP7-P文件对PETIA测定血清Cys C的精密度、可报告范围、方法学比较及干扰实验进行评价和比较。结果PETIA的低水平样本批内变异系数(CV)为1.34%、批间CV为2.19%、日间CV为1.82%、总CV为2.56%;高水平样本批内CV为1.15%、批间CV为1.40%、日间CV为2.23%、总CV为2.58%。可报告范围为0.44~4.46 mg/L。PETIA与颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)呈显著相关[决定系数(r2)=0.997 2,P<0.01]。血红蛋白(Hb)<5 g/L、三酰甘油(TG)<12 mmol/L、总胆红素(TB il)<150μmol/L时,PETIA测定Cys C高、低水平样本的干扰值均在干扰限度值(1.96s)范围内。结论PENIA具有良好的重复性,与PENIA有良好的相关性,抗干扰能力较强。因此PETIA是测定血清Cys C较理想的方法,可应用于临床检测。     

免疫浊度法检测血清胱抑素C在罗氏全自动生化分析仪上的应用评价

目的:探讨免疫浊度法测定血清胱抑素C(CysC)的性能评价.方法:系统研究免疫浊度法测定血清CysC 的灵敏度、精密度及干扰因素.结果:免疫浊度法测定CysC批内平均变异系数(CV)为1.43%,批间平均CV为2.46%,平均回收率99.1%.血红蛋白在2 g/L以下对测定结果无干扰.三酰甘油5.2 mmol/L以下对测定结果无干扰.与日立7170全自动生化仪的免疫比浊法比较有良好的相关性;Y=0.891X+0.21;r=0.912(P＜0.01).结论:免疫浊度法测定血清CysC具有较高的灵敏度和精密度,适于大批量及临床常规使用.     

Delta特定蛋白分析仪检测C-反应蛋白的性能验证

目的对Delta特定蛋白分析仪检测C-反应蛋白(CRP)的性能进行验证。方法参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)和参考区间行业标准(WS/T)文件对Delta特定蛋白分析仪的精密度、携带污染率、准确度、功能灵敏度、临床报告范围、抗干扰能力、参考区间进行验证。结果低、高两个浓度水平样本的批内变异系数(CV)分别为2.43%和2.57%,实验室内总CV分别为3.24%和3.41%,精密度验证均通过厂家声明;携带污染率为0.65%,满足临床要求。两个不同批号仪器校准品的准确度验证相对偏差分别为6.09%和4.87%,参考物质的靶值在95%置信区间内。当功能灵敏度为1.375 mg/L;临床可报告范围为1.375~12 457 mg/L,满足临床需要。干扰试验显示含246.7μmol/L总胆红素的黄疸标本、含4.15 mmol/L三酰甘油的血脂标本和含2.50 g/L血红蛋白的溶血标本对CRP检测的影响度均5%,在可接受范围内;参考区间的验证结果均在厂家提供的范围内。结论 Delta特定蛋白分析仪采用散射免疫比浊法测定CRP的分析性能符合厂商声明的标准,满足临床检测的要求。     

改良后的长春恒晓脂蛋白相关磷脂酶A2活性检测试剂性能验证

目的评价改良后的长春恒晓脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)活性检测试剂在Beckman AU5800自动生化分析仪上的分析性能。方法收集2017年9~10月北京协和医院110例患者及40例表观健康人临床检测剩余血清,分别用于Lp-PLA2方法学比对及参考区间验证。参考CLSI相关文件,评价精密度、线性范围及常见干扰(结合胆红素、游离胆红素、血红蛋白和乳糜)。结果 Lp-PLA2活性测定试剂重复性CV(%)和实验室内不精密度CV(%)分别为1.2%~4.4%和1.5%~5.1%;线性范围为40~550U/L,相关系数(r)为0.998。低Lp-PLA2活性混合血清在试验浓度内的四种干扰物(乳糜≤1 000FTU,游离胆红素≤40mg/dl,结合胆红素≤40mg/dl,血红蛋白≤8g/L)对该试剂无干扰;高Lp-PLA2活性混合血清在试验浓度内的三种干扰物(乳糜≤3 220FTU,游离胆红素≤38.2mg/dl,结合胆红素≤38.2mg/dl)对该试剂无干扰。方法学比对中回归方程的决定系数R2为0.995,相关系数(r)为0.997。该实验室初步临床评估建立的LpPLA2活性的参考区间为68~374U/L。结论改进后的Lp-PLA2活性测定试剂的基本性能明显提高。     

免疫比浊法测定尿液游离血红蛋白的方法学研究

目的在全自动生化分析仪上建立胶乳增强免疫比浊法测定尿液游离血红蛋白的方法学,并进行方法性能评价。方法使用抗人血红蛋白HBA0抗体(8.5mg/ml),80nm聚苯乙烯羧基胶乳微球(estapor,纳米微球)等材料制备检测试剂;在东芝TBA120全自动生化仪上设置项目参数并进行校准;方法学性能评价包括准确度、精密度、线性范围、灵敏度、特异度等性能指标;建立该地区健康人群尿液游离血红蛋白的生物参考区间并验证。结果项目参数建立后定标通过,各测定点与拟合的校准曲线未呈现明显偏离,定标液浓度值与吸光度值经相关性分析,r=0.980 7,r~2=0.961 8;回收试验中低值样本S_低加入浓度为100mg/L和500mg/L的标准液后回收率分别为95.3%和102.7%,高值样本S_高加入浓度为100mg/L和500mg/L的标准液后回收率分别为104.2%和103.5%;精密度试验中低值样本S_低和高值样本S_高的总不精密度CV分别的6.52%和4.18%;线性范围为0~1 100mg/L;分析灵敏度为2.8mg/L;干扰试验显示当样本中游离胆红素、结合胆红素、维生素C、动物血红蛋白分别小于342μmol/L,342μmol/L,0.03g/L和500mg/L时对该试验结果无明显干扰,当乳糜浓度870FTU时对该试验结果有显著干扰;该研究建立的健康人群生物参考区间男性为0~13.3mg/L、女性为0~17.1mg/L,两组参考区间经t检验无显著性差异(P0.05)。结论研究表明该方法学性能具备检测临床尿液标本,解决了化学法潜血试验特异性不够的问题,并实现了数值化检测,该研究也为其他类型临床标本的检测提供了思路。     

PETIA法检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C方法学评价

目的对颗粒增强透射免疫比浊法（PETIA）测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）进行方法学评价。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP5-A、EP6-A、EP9-A及EP7-P文件对PETIA测定血清Cys C的精密度、可报告范围、方法学比较及干扰实验进行评价和比较。结果PETIA的低水平样本批内变异系数（CV）为1.34%、批间CV为2.19%、日间CV为1.82%、总CV为2.56%;高水平样本批内CV为1.15%、批间CV为1.40%、日间CV为2.23%、总CV为2.58%。可报告范围为0.44-4.46 mg/L。PETIA与颗粒增强散射免疫比浊法（PENIA）呈显著相关[决定系数（r^2）=0.997 2,P〈0.01]。血红蛋白（Hb）〈5 g/L、三酰甘油（TG）〈12 mmol/L、总胆红素（TB il）〈150μmol/L时,PETIA测定Cys C高、低水平样本的干扰值均在干扰限度值（1.96s）范围内。结论PENIA具有良好的重复性,与PENIA有良好的相关性,抗干扰能力较强。因此PETIA是测定血清Cys C较理想的方法,可应用于临床检测。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对，分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％，批间CV为2．94％；血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％，批间CV为2．7％；平均回收率TBil为101．1％，DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰，三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

罗氏ModularDDP全自动生化分析仪检测血清铁的方法学评价及参考区间建立

目的对罗氏ModularDDP全自动生化分析仪血清铁(SI)的检测进行方法学评价,并建立本实验室的参考区间。方法用FerroZine法检测SI,依据美国临床实验室标准化委员会EP文件要求验证精密度、准确度、线性范围、检测限(检出限)、抗干扰试验,并取240例健康体检者样本,建立本实验室的参考区间。结果经检测显示:本实验室SI检测的精密度小于2%,准确度97.93%～103.48%,线性范围0.95～184.40μmol/L,最低检出限为0.28μmol/L;血红蛋白浓度小于2.88g/L,三酰甘油浓度小于72.45mmol/L时无明显干扰;本实验室血清铁参考区间为男:7.14～35.66μmol/L;女:5.94～27.40μmol/L。结论本系统检测性能符合美国病理学家协会(CAP)要求,参考区间与《全国临床检验操作规程》(第3版)血清铁测定的参考区间有明显差异,说明该参考区间不可直接引用,也说明了进行方法学评价的重要性。     

颗粒增强透射免疫分析法测定血清胱抑素C方法学评价

目的在HITACHI7600-010生化分析仪上采用颗粒增强透射免疫分析(PETIA)法测定血清胱抑素C(CysC),评价其方法的性能指标。方法建立分析参数,评价性能指标。结果血清4℃保存稳定7天,-20℃和-70℃保存至少稳定5周。检测限为0.12mg/L,线性范围:0~8.11mg/L。1.08、1.68、2.78mg/L混合血清批内CV分别为:2.6%、3.9%、1.7%;批间CV分别为:3.9%、4.6%、2.2%;总CV分别为:4.1%、4.7%、2.3%。平均回收率为:96.3%,低(1.26mg/L)、高(4.27mg/l)两个水平质控物测定均值(n=30)在允许误差范围内(靶值±靶值×15%)。Hb<10.8g/L、胆红素≤945μmol/L、TG<12.87mmol/L无干扰。不考虑性别和年龄的参考范围为:0.51~1.27mg/L。结论在生化分析仪上采用PETIA法测定血清CysC具有较好的性能指标,很方便和其他相关项目建立组合试验,更好地评估肾小球滤过率。     

血气分析仪快速测定血钾

目的对血气分析仪快速测定血钾进行应用与评价。方法在ROCHE OMNIC血气分析仪上测定血钾,并同时在VITROS-250干式生化分析仪上检测。结果血钾检测限为0.5～18mmol/L;高、中、低浓度的批内CV分别为4.6%,3.7%和4.2%,批间CV分别为4.7%,3.8%和5.0%;回收率为95.5%～104.8%;与VITROS-250干式生化分析仪(X)相关系数r=0.995,相关方程Y=1.011X-0.08;胆红素浓度340μmol/L以下,三酰甘油浓度8.8mmol/L以下,对该法测定基本无干扰,而肝素有明显的负干扰,溶血有显著的正干扰。结论此法测定血钾简便、快速、准确可靠,适用于急诊检测。     

电化学发光免疫分析仪检测TSH的性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析仪的系统性能。方法以促甲状腺激素(TSH)检测为例,参考美国临床实验室标准化协会(NCCLS)文件,制定了一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、干扰能力、参考范围等方面进行验证。结果批内不精密度(CV)1.44%～1.84%、批间CV2.01%～2.44%;正确度相对偏倚为4.60%～4.73%;分析灵敏度0.017μIU/mL;线性范围0.017～92.04μIU/mL;干扰:血红蛋白小于或等于24.00mg/mL、三酰甘油小于或等于4.2mg/mL、总胆红素小于或等于0.50mg/mL;参考范围0.27～4.21μIU/mL。结论 Roche Cobas e411精密度好、分析灵敏度高、线性范围宽、正确度高,其参考区间大致与厂家提供的一致;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过。