类风湿关节炎患者外周血miR-146a、miR-16的表达水平及临床指标与中医证型的关系探讨

目的研究类风湿关节炎(RA)患者外周血miR-146a、miR-16的表达及ESR、CRP、RF、抗CCP抗体与中医证型的关系,为RA辨证分型提供客观依据。方法根据《中药新药临床研究指导原则》有关RA的中医证候诊断标准,主要分为两个证型:风湿夹瘀型(n=20)和肝肾亏损型(n=16);16名健康体检者作为健康对照组。Real-timePCR检测RA患者及健康对照组miR-146a、miR-16的表达,记录ESR、CRP、RF、抗CCP抗体等临床指标。结果风湿夹瘀型miR-146a、miR-16的表达水平高于肝肾亏损型和对照组(P均<0.05),肝肾亏损型miR-146a、miR-16的表达水平与健康对照组相比差异无统计学意义(P均>0.05),风湿夹瘀型RA患者ESR及CRP高于肝肾亏损型(P<0.01和P<0.05),RF低于肝肾亏损型(P<0.05),抗CCP抗体在两种证型之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-146a、miR-16的表达水平和ESR、CRP、RF等临床指标可能为RA风湿夹瘀及肝肾亏损型的辨证分型提供参考。     

益气清络方对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中miR-146a表达的影响

目的:探讨益气清络方对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a表达的影响。方法:纳入56例RA患者和32名健康志愿者。将56例RA患者随机分为治疗组(n=28)和对照组(n=28),所有患者均给予西医常规治疗,治疗组在上述治疗基础上给予益气清络方治疗,疗程为12周。采用RT-PCR法检测RA患者和健康志愿者的PBMC中miR-146a的表达,分析RA患者PBMC中miR-146a表达与C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的关系,比较两组RA患者治疗前后PBMC中miR-146a表达的差异。结果:RA患者的PBMC中miR-146a相对表达量显著高于健康志愿者(P<0.01)。RA患者PBMC中miR-146a的相对表达量与其ESR、CRP水平均呈负相关,相关系数分别为-0.45(P<0.01)和-0.49(P<0.01)。经治疗后,治疗组患者的PBMC中miR-146a相对表达量明显增加(P<0.01),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:PBMC中miR-146a表达对RA疾病活动度的判断有益,益气清络方治疗RA的机制可能与上调RA患者PBMC中miR-146a的表达有关。     

奚氏针法对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中miR-146a表达的影响

  目的：探讨奚氏针法治疗对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中miR-146a表达的影响。  方法：纳入60例RA患者,随机分为治疗组和对照组,每组30例。所有患者均给予西医常规治疗(泼尼松10 mg/d +甲氨蝶呤10 mg/周),治疗组患者辅以奚氏针法治疗,治疗周期为12周。检测并比较两组患者的PBMC中miR-146a的表达及外周血C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)水平。  结果：治疗后,两组患者的PBMC中miR-146a相对表达量较治疗前均明显升高(P<0.01),且治疗组患者的PBMC中miR-146a的相对表达量高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的CRP及ESR水平较治疗前均明显降低(P<0.01),且治疗组患者的CRP及ESR水平低于对照组(P<0.05)。  结论：奚氏针法结合西医常规疗法治疗RA,可明显降低RA的活动度,其机制可能与上调miR-146a表达相关。     

类风湿关节炎患者血浆miR-146a表达及基因高甲基化与疾病活动程度的关系

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者血浆微小RNA(miRNA)-146a表达及基因高甲基化与疾病活动程度的关系。方法:2019年3月至2020年4月在我院临床免疫科招募122例RA患者为RA组,基于血细胞沉降率(ESR)获得28个关节疾病活动评分(DAS28-ESR)测量疾病活动性;另纳入同期健康志愿者141例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血浆miR-146a水平,实时荧光定量甲基化特异性PCR(qMSP)分析甲基化状态。结果:RA组患者血浆miR-146a水平显著高于对照组,miR-146a基因甲基化水平显著低于对照组(P<0.05)。血浆miR-146a水平与miR-146a基因甲基化水平呈负相关(P<0.05)。随疾病活动程度的增加,RA患者血浆miR-146a水平呈升高趋势,miR-146a基因甲基化水平呈下降趋势(P<0.05)。血浆miR-146a水平与DAS28-ESR评分、ESR、C反应蛋白水平、关节肿胀计数、关节压痛计数、患者主观总体评估、医生总体评估、简化疾病活动指数呈正相关(P<0.05);miR-146a基因甲基化水平与上述指标呈...     

益气清络方对类风湿关节炎患者miR-146a表达和Th17、Treg水平的影响

目的:探讨益气清络方对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a的表达及辅助性T细胞(Th)17、调节性T细胞(Treg)水平的影响。方法:纳入60例RA患者,随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30),同时纳入30例健康志愿者作为健康对照组。所有患者均给予甲氨蝶呤(MTX)治疗,治疗组患者辅以益气清络方口服,对照组患者辅以安慰剂口服,两组治疗周期均为12周。分别于治疗前后检测所有患者的PBMC中miR-146a的表达及Th17、Treg水平,且采用相同方法检测所有健康志愿者的PBMC中miR-146a的表达及Th17、Treg水平。结果:(1)与健康志愿者比较,RA患者的PBMC中miR-146a的相对表达量和Th17水平均显著升高(P0.05,P0.01),Treg水平明显降低(P0.01)。(2)治疗后,两组患者的PBMC中miR-146a相对表达量及Treg水平较治疗前均明显升高(P0.05,P0.01),Th17水平明显下降(P0.01);且治疗组患者的PBMC中miR-146a的相对表达量及Treg水平均明显高于对照组(P0.01),Th17水平明显低于对照组(P0.01)。结论:益气清络方结合传统西药治疗RA的机制可能与上调miR-146a的表达,调节Th17、Treg水平相关。     

类风湿关节炎患者外周血CXCL16的表达及临床意义

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种主要累及滑膜关节的自身免疫性疾病,其病理改变包括慢性滑膜炎、血管翳形成及软骨和骨破坏等.CXCL16是近几年来新发现的一种趋化因子,除了能影响血脂代谢以外,还发现其在RA发病机制中可能也发挥重要作用[1-2].本文通过采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定RA患者血清CXCL16水平,并与骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者及正常人对照,探讨CXCL16与RA临床及实验室指标的相关性.     

miR-146a与类风湿关节炎患者疾病活动度的相关性研究

目的：通过检测类风湿关节炎(RA)患者血浆中miR-146a的表达,探讨miR-146a与疾病活动度的相关性。方法 RA患者40例,其中活动期20例,非活动期20例,留取血浆提取和纯化miRNA,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-146a的表达,采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果活动期患者血液中炎性指标类风湿因子（RF)、C反应蛋白(CRP)、血沉（ESR)明显增高;受累指关节滑膜增生厚度、miR-146a的表达明显高于非活动期患者,差异有统计学意义(P<0.05);而两组患者的抗CCP抗体、受累指关节滑膜血流分级与滑膜动脉阻力指数(RI)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在RA活动期患者体内,miR-146a与滑膜增生厚度、血流分级、RF均有明显的正相关(P<0.05);而与血液中其他一些炎症指标(ESR、CRP、抗CCP)均无相关性(P>0.05)。而非活动期患者的miR-146a与各项炎症指数均无关联(P>0.05)。结论 miR-146a在RA活动期患者血浆中高表达,且与反映RA患者病情活动度的一些特异性指标相关,而与其他一些非特异性指标无相关,提示血浆miR-146a可以作为RA患者疾病活动度的一个较特异性的预测指标。     

2型糖尿病患者血清miR-146a与糖尿病肾病相关性研究

目的 探讨2型糖尿病患者血清miR-146a及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）与糖尿病肾病的关系。方法 收集2020年12月至2022年1月嘉兴市第一医院内分泌科收治的128例2型糖尿病患者,根据尿白蛋白与尿肌酐比值（urinary albumin-to-creatinine ratio,UACR）将患者分为3组：尿白蛋白正常组（UACR<30mg/g,58例）;微量尿白蛋白组（30mg/g≤UACR<300mg/g,44例）;大量尿白蛋白组（UACR≥300mg/g,26例）。收集患者的基线资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测血清miR-146a的表达水平,酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清TNF-α的表达水平。分析miR-146a及TNF-α与UACR的关系。结果 与尿白蛋白正常组相比,微量尿白蛋白组和大量尿白蛋白组患者的TNF-α水平均明显升高,且随尿蛋白升高递增,差异有统计学意义（P<0.05）。微量尿白蛋白组和大量尿白蛋白组患者的miR-146a水平均低于尿白蛋白正常组,差异有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关分析显示,miR-146a与UACR呈负相关（r=–0.574,P<0.05）,TNF-α与UACR呈正相关（r=0.824,P<0.05）。miR-146a预测糖尿病肾病的敏感度为77.1%,特异性为79.3%（95%CI：71.7%～87.4%,P<0.05）。结论 2型糖尿病患者血清miR-146a及TNF-α可作为预测糖尿病肾病的分子学标志物,有助于糖尿病肾病的早期诊断。     

慢性牙周炎患者唾液中miR-146a的表达及临床意义

目的 通过检测慢性牙周炎患者唾液中miR-146a的表达,以探讨miR-146a在慢性牙周炎发病中的作用及意义.方法 选取2012年1月至2013年8月期间第三军医大学西南医院口腔科收治的48例慢性牙周炎患者(其中男性28例,女性20例,平均年龄42岁).同时选择20名性别、年龄匹配的健康志愿者作为对照组.采用实时荧光定量PCR技术检测上述人员唾液上清中miR-146a的表达水平.对治疗组患者(32例)进行牙周基础治疗,分别记录治疗前和治疗6周后患者的探诊深度(probing depth,PD)、临床附着丧失(attachment loss,AL)及菌斑指数(plaque index,PLI),并检测治疗后唾液上清液标本中miR-146a的表达.结果 慢性牙周炎患者唾液上清液中miR-146a的表达水平(2.52±0.87)显著高于健康对照组(0.81±0.58)(P＜0.01).治疗组患者经过治疗后的牙周临床指数、唾液中miR-146a表达水平均显著降低(P＜0.05).唾液中miR-146a水平与PD(r=0.574,P＜0.05)、AL(r =0.629,P＜0.01)及PLI(r=0.758,P＜0.01)均呈正相关.结论 慢性牙周炎患者唾液上清中miR-146a表达水平明显高于正常人,并在牙周基础治疗后显著下降,提示唾液miR-146可作为牙周病防治及疗效评估的潜在靶分子.     

miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用。方法 SLE患者20例,健康对照组15例。取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNAU6作为内对照,计算标准化后的2-△Ct值表示miRNA的相对表达含量。结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P<0.01)和1.91倍(P=0.056);SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势。     

甲状腺乳头状癌组织及外周血中miR-146a含量变化

目的探讨miR-146a含量变化在甲状腺乳头状癌（PTC）发生发展过程中的作用及意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）检测43例PTC、36例结节性甲状腺肿组织的miR-146a含量变化及32例PTC、23例结节性甲状腺肿患者外周血的miR-146a含量变化,并根据PTC患者主要临床病理参数进行分析。结果①PTC与结节性甲状腺肿组织中miR-146a相对含量分别为0．0280±0．0131和0．0212±0．0111,差异有统计学意义（P〈0．05）;PTC组织的miR-146a含量变化与患者淋巴结转移、肿瘤分期等临床病理参数有明显关系（P〈0．05）,与患者年龄、肿瘤大小等无关（P〉0．05）。②PTC与结节性甲状腺肿外周血中miR-146a相对含量分别为0．0891±0．0419和0．09224-0．0456,2者差异无统计学意义（P〉0．05）;PTC外周血的miR-146a含量变化与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期等无相关性（P〉0．05）。结论miR-146a在PTC中表达升高,与淋巴结转移、肿瘤分期等临床病理参数有明显关系,多见于进展期,提示miR-146a在PTC的发生发展过程中起-定作用。     

miR-146a在食管鳞癌中的表达及意义

目的： 分析食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)组织中miR-146a的表达情况及其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法： 采用茎环结构的逆转录实时定量PCR方法检测50例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织中miR-146a的表达情况,并分析其与临床病理特征间的关系。结果： miR 146a在癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织（Z=-3.162;P<0.01）;miR-146a的高表达分别与食管癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P<0.01）。结论： miR-146a的高表达在ESCC的发生发展中发挥重要作用。     

miR-146a在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的观察microRNA-146a（miR-146a）在乳腺浸润性导管癌及癌旁正常对照组织中的表达,探讨miR-146a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌发生发展的影响。方法采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测65例乳腺浸润导管癌及癌旁正常对照组织中miR-146a的表达。结果乳腺浸润性导管癌miR-146a阳性率低于癌旁正常对照组织（44.6%vs 66.2%,P〈0.05）;乳腺浸润性导管癌中miR-146a的表达与淋巴结转移有关联（P〈0.01）,与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、ER、PR、c-erbB-2、ki67、p53、E-cadherin过表达均无相关性（P〉0.05）。结论 miR-146a在乳腺浸润性导管癌中表达下调,提示其可能作为重要的抑癌因子参与乳腺癌的发生发展过程,并可能成为乳腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。     

miR-203在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-203的表达水平与疾病活动度?肾脏受累情况等临床表现之间的关系,初步探讨miR-203在SLE中的临床意义?方法:收集31例SLE患者?16例健康志愿者外周血标本,根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例?采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quota polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-203表达,比较各组间miR-203表达水平的差异,并分析其与SLE临床指标之间的关系?结果:SLE患者miR-203表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.05);狼疮肾炎组患者miR-203表达低于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.01);SLE患者miR-203表达水平与24 h尿蛋白?肾脏急性指数呈明显负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者PBMCs中miR-203的表达水平降低,表明miR-203在SLE发病机制中可能发挥一定作用;狼疮肾炎患者miR-203的表达降低,提示miR-203可能参与了狼疮肾炎的发病?     

慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

Expression and clinicopathological significance of miR-146a in hepatocellular carcinoma tissues

Background. Aberrant expression of microRNA-146a (miR-146a) has been found in several classes of cancers. However, its expression and clinicopathological contribution in hepatocellular carcinoma (HCC) has not been fully elucidated.

Objective. To explore the clinicopathological significance of the miR-146a level in HCC formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue.

Methods. Eighty-five HCC samples and their para-cancerous normal liver tissues were collected. Total mRNA including miRNA was extracted, and miR-146a expression was determined using real-time RT-PCR. Furthermore, the correlation between the miR-146a expression and clinicopathological parameters was investigated.

Results. MicroRNA-146a expression in HCC tissues was lower compared with that in adjacent non-cancerous hepatic tissues. MicroRNA-146a expression was also related to clinical TNM stage, metastasis, portal vein tumor embolus, and number of tumor nodes.

Conclusions. Down-regulation of miR-146a is related to HCC carcinogenesis and deterioration of HCC. MicroRNA-146a may act as a suppressor miRNA of HCC, and it is therefore a potential prognostic biomarker for HCC patients.