类风湿关节炎患者外周血miR-146a、miR-16的表达水平及临床指标与中医证型的关系探讨

目的研究类风湿关节炎(RA)患者外周血miR-146a、miR-16的表达及ESR、CRP、RF、抗CCP抗体与中医证型的关系,为RA辨证分型提供客观依据。方法根据《中药新药临床研究指导原则》有关RA的中医证候诊断标准,主要分为两个证型:风湿夹瘀型(n=20)和肝肾亏损型(n=16);16名健康体检者作为健康对照组。Real-timePCR检测RA患者及健康对照组miR-146a、miR-16的表达,记录ESR、CRP、RF、抗CCP抗体等临床指标。结果风湿夹瘀型miR-146a、miR-16的表达水平高于肝肾亏损型和对照组(P均<0.05),肝肾亏损型miR-146a、miR-16的表达水平与健康对照组相比差异无统计学意义(P均>0.05),风湿夹瘀型RA患者ESR及CRP高于肝肾亏损型(P<0.01和P<0.05),RF低于肝肾亏损型(P<0.05),抗CCP抗体在两种证型之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-146a、miR-16的表达水平和ESR、CRP、RF等临床指标可能为RA风湿夹瘀及肝肾亏损型的辨证分型提供参考。     

益气清络方对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中miR-146a表达的影响

目的:探讨益气清络方对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a表达的影响。方法:纳入56例RA患者和32名健康志愿者。将56例RA患者随机分为治疗组(n=28)和对照组(n=28),所有患者均给予西医常规治疗,治疗组在上述治疗基础上给予益气清络方治疗,疗程为12周。采用RT-PCR法检测RA患者和健康志愿者的PBMC中miR-146a的表达,分析RA患者PBMC中miR-146a表达与C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的关系,比较两组RA患者治疗前后PBMC中miR-146a表达的差异。结果:RA患者的PBMC中miR-146a相对表达量显著高于健康志愿者(P<0.01)。RA患者PBMC中miR-146a的相对表达量与其ESR、CRP水平均呈负相关,相关系数分别为-0.45(P<0.01)和-0.49(P<0.01)。经治疗后,治疗组患者的PBMC中miR-146a相对表达量明显增加(P<0.01),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:PBMC中miR-146a表达对RA疾病活动度的判断有益,益气清络方治疗RA的机制可能与上调RA患者PBMC中miR-146a的表达有关。     

类风湿关节炎患者血浆miR-146a表达及基因高甲基化与疾病活动程度的关系

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者血浆微小RNA(miRNA)-146a表达及基因高甲基化与疾病活动程度的关系。方法:2019年3月至2020年4月在我院临床免疫科招募122例RA患者为RA组,基于血细胞沉降率(ESR)获得28个关节疾病活动评分(DAS28-ESR)测量疾病活动性;另纳入同期健康志愿者141例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血浆miR-146a水平,实时荧光定量甲基化特异性PCR(qMSP)分析甲基化状态。结果:RA组患者血浆miR-146a水平显著高于对照组,miR-146a基因甲基化水平显著低于对照组(P<0.05)。血浆miR-146a水平与miR-146a基因甲基化水平呈负相关(P<0.05)。随疾病活动程度的增加,RA患者血浆miR-146a水平呈升高趋势,miR-146a基因甲基化水平呈下降趋势(P<0.05)。血浆miR-146a水平与DAS28-ESR评分、ESR、C反应蛋白水平、关节肿胀计数、关节压痛计数、患者主观总体评估、医生总体评估、简化疾病活动指数呈正相关(P<0.05);miR-146a基因甲基化水平与上述指标呈...     

奚氏针法对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中miR-146a表达的影响

  目的：探讨奚氏针法治疗对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中miR-146a表达的影响。  方法：纳入60例RA患者,随机分为治疗组和对照组,每组30例。所有患者均给予西医常规治疗(泼尼松10 mg/d +甲氨蝶呤10 mg/周),治疗组患者辅以奚氏针法治疗,治疗周期为12周。检测并比较两组患者的PBMC中miR-146a的表达及外周血C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)水平。  结果：治疗后,两组患者的PBMC中miR-146a相对表达量较治疗前均明显升高(P<0.01),且治疗组患者的PBMC中miR-146a的相对表达量高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的CRP及ESR水平较治疗前均明显降低(P<0.01),且治疗组患者的CRP及ESR水平低于对照组(P<0.05)。  结论：奚氏针法结合西医常规疗法治疗RA,可明显降低RA的活动度,其机制可能与上调miR-146a表达相关。     

病毒性心肌炎患者外周血miR-146b表达水平与病情及不良预后风险的相关性

目的 探讨病毒性心肌炎(VM)患者外周血miR-146b表达水平与病情及不良预后风险的相关性。方法 选取柳州市工人医院和柳州市人民医院收治的VM患者95例作为病例组,据VM病情严重程度分为轻症组(45例)和重症组(50例),选择同期健康体检者48例作为对照组。采用连续监测法测定入院时血清心肌酶谱(CK-MB、CK、LDH)水平。采用速率散射比浊法测定入院时血清高敏C-反应蛋白。采用酶联免疫吸附试验法测定入院时血清白细胞介素(IL)-18和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。采用RT-PCR法检测外周血miR-146b表达水平。随访观察12个月,将出现死亡、心脏移植、心力衰竭再入院或心肌炎复发等不良事件归为预后不良组,其余归为预后良好组。采用多因素Logistic筛选影响因素,并采用限制性立方样条拟合miR-146b与VM患者预后间的关系。结果 病例组血清miR-146b表达水平高于对照组(P<0.05),其中重症组血清miR-146b表达水平显著高于轻症组和对照组(P<0.05),轻症组血清miR-146b表达水平显著高于对照组(P<0.05)。随访观察12个月,病例...     

慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

RA患者关节滑液及外周血中miR-26a和TLR3的表达

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者关节滑液及外周血中microRNA-26a(miR-26a)和Toll样受体3(TLR3)的表达水平及临床意义。方法选取2016年2月至2017年2月本院住院的RA患者60例,根据欧洲风湿病学会推荐的C反应蛋白(CRP)改良的DAS评分将其分为缓解期组26例和活动期组34例,同期选取30例健康受试者作为正常对照组,分别检测三组受试者生化指标血沉(ESR)、CRP、类风湿因子(RF)等临床指标;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测血清及关节滑液中miR-26a和TLR3的表达水平;并分析血清及关节滑液中miR-26a和TLR3及其与ESR、RF的相关性。结果RA活动期患者病程、关节疼痛个数、关节肿胀个数、晨僵时间以及实验室指标CRP、ESR、PLT、RF等均明显高于缓解期患者(P0.05);RA患者血清CRP、ESR水平明显高于对照组(P0.05);RA组关节滑液及外周血中miR-26a和TLR3表达水平显著高于对照组(P0.05),其中活动期RA患者关节滑液及外周血中miR-26a和TLR3表达水平显著高于缓解期(P0.05);RA患者关节滑液、外周血miR-26a、TLR3表达水平与CRP、ESR、RF均呈正相关(P0.05),RA组关节滑液及外周血中miR-26a和TLR3表达水平呈正相关(r=0.618、0.451,P0.01)。结论RA患者miR-26a和TLR3呈异常高表达,且与临床指标密切相关,提示二者可能参与RA疾病的发生发展。     

外周血miR-197表达水平与子宫肌瘤患者病情及治疗效果的相关性研究

目的:探究外周血miR-197表达水平与子宫肌瘤患者病情及治疗效果的相关性。方法:将100例行子宫肌瘤剔除术的患者作为观察组,选取同期体检的100例健康女性作为对照组,采用RT-qPCR的方法检测两组术前、术后外周血miR-197表达水平,测量子宫体积大小;采用免疫组化染色方法测定观察组患者切除肿瘤组织中雌激素受体(ER)的表达水平,测量肿瘤体积大小;分析患者外周血miR-197水平与ER表达水平、肿瘤大小的相关性。结果:观察组外周血miR-197表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后外周血miR-197表达水平明显高于术前,差异有统计学意义(P<0.05);患者外周血miR-197表达水平与ER表达水平、肿瘤体积大小均呈负相关(P<0.05)。结论:外周血miR-197表达水平在一定程度上可以反映子宫肌瘤患者的肿瘤大小、ER表达水平,且治疗后患者外周血miR-197水平明显升高,是患者病情及治疗的良好观察指标。     

miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用。方法 SLE患者20例,健康对照组15例。取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNAU6作为内对照,计算标准化后的2-△Ct值表示miRNA的相对表达含量。结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P<0.01)和1.91倍(P=0.056);SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势。     

RA患者外周血及关节液中miR-132、miR-140-5p、miR-150及miR-181a表达水平的临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血及关节液中miR-132、miR-140-5p、miR-150及miR-181a的表达水平及其临床意义。方法收集2016年1-12月本院收治的RA患者100例、骨关节炎(OA)患者64例及同期健康体检者64例,采集静脉血及关节液,分离血浆及外周血单个核细胞(PBMC);提取small RNA构建标准曲线;qRT-PCR检测miRNAs的表达量并进行相关性分析;并与类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)及抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)等疾病监测指标进行相关性分析。结果相对于OA组、健康对照组,RA组miR-140-5p、miR-150、miR-181a在血浆、PBMC和关节液中表达上调;血浆中miR-132表达下调,而PBMC和关节液中miR-132表达上调(P0.05)。血浆、PBMC及关节液中miR-132、miR-140-5p、miR-150及miR-181a的表达存在一定程度的相关(P0.05)。RA患者miR-132、miR-140-5p、miR-150及miR-181a的表达水平与外周血RF、ESR、CRP和ACCP呈正相关(P0.05)。结论 RA患者血浆、PBMC及关节液中miR-132、miR-140-5p、miR-150及miR-181a的表达存在显著差异,其表达水平的改变可作为监测RA疾病活动的潜在有效指标,为RA临床诊断提供更为可靠地实验室检测依据。     

MiR-342-3p在类风湿关节炎患者中低表达并促进滑膜成纤维细胞的炎症和迁移

目的 探究类风湿关节炎(RA)患者miR-342-3p的表达,及其对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞细胞（RA-FLS）炎症和迁移的影响。方法 收集正常人30例、RA患者50例外周血单个核细胞（PBMCs）,检测PBMCs中miR-342-3p的表达,并研究其与临床指标RF、ESR、anti-CCP、hs-CRP、C3、DAS-28、SAS、SDS的相关性。建立RA-FLS细胞系,20 ng/mL TNF-α刺激细胞,构建mimics-miR-342-3p和inhibitor-miR-342-3p及空转组,转染至RA-FLS中;实验分为6组：RA-FLS组,TNF-α+RA-FLS组,mimics-NC组,mimics-miR-342-3p组,inhibitor-NC组和inhibitor-miR-342-3p组;采用定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-342-3p的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。CCK8检测细胞活力。Transwell小室检测滑膜细胞...     

系统性红斑狼疮患者血浆miRNA-23a表达的检测及意义

目的：分析miR-23a在系统性红斑狼疮（SLE）患者血浆中的表达及临床意义。方法：收集54例SLE患者、16例类风湿性关节炎（RA）患者和20例健康对照血浆标本,抽提血浆小RNA,反转录后,以cel-miR-39为外参,通过定量PCR检测血浆miR-23a的表达,统计分析miR-23a表达水平与临床资料的相关性。结果：miR-23a在SLE患者、健康对照和RA患者血浆中的相对表达量差异具有统计学意义（x2=39.199,P＜0.001）。与RA患者及健康对照比较,SLE患者血浆中miR-23a表达水平明显下调（P＜0.05）。受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析显示,血浆miR-23a区分SLE患者和健康对照以及RA患者的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.931和0.884。血浆miR-23a表达水平以19.22临界值区分SLE患者和健康对照的特异性和敏感性达74.5%和88.9%;以30.98临界值区分SLE与RA患者的特异性和敏感性达73.3%和86.3%。血浆miR-23a的表达水平与SLE临床检测指标的相关性分析显示,血浆miR-23a的表达水平与抗核抗体（ANA）滴度水平及血白细胞计数（P＜0.05）相关。结论：SLE患者血浆中下调表达的miR-23a可能与其发病和病情进展相关,是SLE临床诊断一个新的生物学指标。     

miR-203在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-203的表达水平与疾病活动度?肾脏受累情况等临床表现之间的关系,初步探讨miR-203在SLE中的临床意义?方法:收集31例SLE患者?16例健康志愿者外周血标本,根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例?采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quota polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-203表达,比较各组间miR-203表达水平的差异,并分析其与SLE临床指标之间的关系?结果:SLE患者miR-203表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.05);狼疮肾炎组患者miR-203表达低于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.01);SLE患者miR-203表达水平与24 h尿蛋白?肾脏急性指数呈明显负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者PBMCs中miR-203的表达水平降低,表明miR-203在SLE发病机制中可能发挥一定作用;狼疮肾炎患者miR-203的表达降低,提示miR-203可能参与了狼疮肾炎的发病?     

慢性HBV感染者外周血单个核细胞中miR-194-5p和MagT1表达水平检测及其意义

目的：检测慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者外周血单个核细胞（PBMCs）中miR-194-5p和镁离子（Mg²⁺）转运蛋白1（MagT1）表达水平,阐明其可能的临床意义。方法：收集40例健康体检者（健康对照组）、40例HBV携带者（HBV携带组）、40例轻中度慢性乙型肝炎（轻中度CHB组）和40例重度慢性乙型肝炎（重度CHB组）患者的临床资料。采集各组研究对象外周血并利用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PBMCs,采用RT-PCR法检测各组研究对象PBMCs中miR-194-5p及MagT1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象PBMCs中MagT1蛋白表达水平,检测各组研究对象外周血和PBMCs中Mg⁺水平,流式细胞术检测各组研究对象PBMCs中CD8+T淋巴细胞表面分子程序性死亡受体1（PD-1）和自然杀伤细胞受体2群D分子（NKG2D）表达水平。在293T细胞中分别转染miR-194-5p mimic质粒（miR-194-5p mimic组）和miR-NC质粒（miR-NC组）,应用双荧光素酶报告基因实验检测2组293T细胞中荧光素酶活性。结果：与健康对照组比较,HBV携带组、轻中度CHB组和重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均明显降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。与HBV携带组和轻中度CHB组比较,重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T细胞表面分子PD-1表达水平降低（P<0.05）。与HBV携带组比较,轻中度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验,MagT1是miR-194-5p靶基因。结论：miR-194-5p可能通过靶向下调MagT1表达,引起MagT1介导的Mg²⁺内流障碍,造成CD8+T淋巴细胞免疫活性降低,导致乙型肝炎慢性发展。     

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型microRNA-26a（miR-26a）及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮（SLE）的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-26a、外周血单个核细胞（PBMC）中PTEN 的表达,统计分析miR-26a、PTEN 与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为miR-26a 的靶基因。结果SLE 患者血清miR-26a mRNA 的表达高于健康人群（P <0.05）,PBMC 中PTEN mRNA 的表达低于健康人群（P <0.05）。SLE 患者miR-26a、PTEN 的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。miR-26a 转染BaF3 细胞后,PTEN 表达下调,PI3K 表达上调,转染组荧光素酶活性下降（P <0.05）。结论SLE 患者血清中过表达的miR-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。     

miR-146a基因rs2910164位点基因多态性与慢性阻塞性肺疾病风险相关性

<正>慢性阻塞性肺病(COPD)是一种进行性疾病,其中慢性中性粒细胞炎症的发生与肺实质(肺气肿)和小气道疾病的破坏有关,导致气流受限和肺功能下降[1-2]。吸入有害物质如香烟烟雾等是COPD发生的常见危险因素,然而并不是所有的吸烟者都会患COPD,表明COPD的发生具有遗传性[3]。mi RNAs是由大约19-25个核苷酸组成的小型非编码RNA,通     

MiR-146b在急性Stanford A型主动脉夹层患者外周血清和 主动脉组织中的表达及其临床意义

目的：研究miR-146b在急性Stanford A型主动脉夹层(Stanford type A aortic dissection,TAAD)患者外周血清及 主动脉壁组织中的表达,探讨miR-146b在TAAD发病中的意义及机制。方法：将研究对象分为对照组(n=23)和TAAD 组(n=27),收集所有研究对象的外周血清、术中主动脉壁组织和临床资料。运用实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,qRT-PCR)检测各组外周血清及主动脉壁组织中miR-146b的表达水平。比较不同主动脉夹层风险级别的miR- 146b水平,对miR-146b水平与TAAD患者主动脉夹层破裂风险进行相关性分析。运用DIANA LAB-TarBase 6.0数据库及 TargetScan靶基因预测软件预测miR-146b相关靶基因。结果：TAAD组外周血清和主动脉壁组织中miR-146b表达水平均 较对照组增高(P<0.001);中度风险和重度高危的TAAD患者外周血清和主动脉壁组织中miR-146b的表达水平较轻 度风险患者明显增高(P<0.05);TAAD外周血清和主动脉壁组织中miR-146b差异表达与主动脉夹层高危风险呈正相 关(r=0.862,0.872;P<0.05)。核因子κB1(nuclear factor kappa B1,NF-κB1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、基质金属蛋白酶-16(matrix metalloproteinase 16,MMP16)和肌动蛋白2(actin alpha 2,ACTA2)为miR-146b的靶基因。结论：TAAD患者外周血清和主动脉壁组织中miR-146b表达升高可能与TAAD发 病及病情严重程度相关。     

血清miR-146a在脓毒症早期诊断中的价值

目的 评价血清miR-146a在脓毒症早期诊断中的价值。方法 采集2012年1月至2013年2月山东大学齐鲁医院重症监护病房内脓毒症患者45例(A组)、普通外科术后出现全身炎症反应综合征(SIRS)的患者30例(B组)及同期内在体检中心接受查体的健康人员20例(C组)的血样,并记录各研究对象的年龄、性别等一般信息,采用Taqman探针法实时定量PCR检测其血清miR-146a的表达水平,ROC曲线法分析其对脓毒症的诊断性能。结果 与C组比较,A、B两组患者血清miR-146a表达水平明显降低(P＜0.05),且A组患者血清miR-146a表达水平较B组患者亦降低(P＜0.05);血清miR-146a诊断脓毒症的敏感性及特异性分别为99.0%、68.0%,其ROC曲线下面积为0.82。结论 血清miR-146a作为脓毒症早期诊断指标具较高的特异性与敏感性,且可较好区分脓毒症与SIRS。