线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道在未成熟心肌缺血预处理中的作用

目的探讨线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）在未成熟心肌预处理保护中的作用,为未成熟心肌的保护提供依据。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,将24只新生（出生14～21d）日本长耳大白兔按随机数字表法分为4组：缺血／再灌注组（I／R组）,心脏缺血预处理组（E1组）,mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate（5-HD）＋心脏缺血预处理（E2组）,mitoKATP通道开放剂Diazoxide（Diaz）预处理组（E3组）;检测心脏功能恢复率、心肌含水量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷（ATP）含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性（Ca^2＋-ATPase）、心肌线粒体合成ATP的能力;电子显微镜观察心肌超微结构。结果E1组、E3组心功能恢复优于I／R组和E2组,心肌含水量低于I／R组和E2组（P〈0．05）;E1组、E3组三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca^2＋-ATPase活性、心肌线粒体合成ATP的能力均优于I／R组和E2组（P〈0．05）,丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量低于I／R组、E2组（P〈0．05）;E1组、E3组心肌超微结构损伤较I／R组和E2组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过mitoKATP通道的开放起作用。     

高钙预处理对未成熟心肌的保护作用机制

目的 探讨高钙预处理对未成熟心肌保护作用及其可能的机制。方法 采用Langendorff离体心脏灌注模型，24只新生日本长耳大白兔分为对照组（I／R），高钙预处理（HCP）组，多黏菌素B（PMB）组和5-hydroxydecanoate（5-HD）组4组，分别行不同的处理方法。以血流动力学指标、生化指标和心肌超微结构作为观察指标。结果 HCP组心功能恢复优于I／R、PMB和5-HD组（P〈0．05），心肌生化指标优于I／R、PMB和5-HD组（P〈0．01），心肌超微结构损伤较I／R、PMB和5-HD组明显减轻，各指标I／R、PMB和5-HD组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 高Ca^2＋预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用，其机制是可能是通过蛋白激酶C激活和线粒体ATP敏感性钾通道开放起作用。     

下肢缺血预处理对未成熟心肌的保护作用

目的探讨下肢缺血预处理(LIP)对未成熟心肌保护作用的机制。方法采用下肢缺血预处理动物Langendorff离体心脏灌注模型,将30只日本长耳大白兔采用随机数字表法分为5组:缺血-再灌注损伤(I/R)组(n=6),建立灌注模型,灌注KH液15min转为工作心15min,全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;E1组(n=6),动物麻醉后反复3次阻断双下肢血流5min,松开5min,建立模型,灌注15min转为工作心15min,全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;E2组(n=6),双下肢缺血预处理前静脉注射超氧化物歧化酶至双下肢缺血预处理完毕,重复E1组方法;E3组(n=6),静脉注射蛋白激酶C(PKC)阻滞剂polymyxin(PMB),时间10min,重复E1组方法;E4组(n=6),静脉注射三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道(mitoKATP)阻滞剂5-HD,时间10min,重复E1组方法。观察左心室功能恢复、心肌含水量(MWC)、血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织ATP和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、超氧阴离子自由基(O2.-)等指标。结果E1组的左心室功能恢复优于I/R组、E2组、E3组、E4组(P0.05),ATP含量、SOD活性均优于其它各组(P0.05),心肌含水量低于其它各组(P0.05),MDA含量、CK、LDH漏出率低于其它各组(P0.05);I/R组、E2组、E3组、E4组的以上指标比较均差异无统计学意义(P0.05)。预处理前、后E1组、E3组、E4组的O2.-差异有统计学意义(P0.05)。结论下肢缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制是通过PKC通路和mitoKATP通道起作用。     

蛋白激酶C在未成熟心肌预处理中的作用

目的为进一步加强未成熟心肌保护和临床应用的可行性,探讨蛋白激酶C(PKC)在未成熟心肌预处理保护中的作用。方法建立兔Langendorff灌注模型,将24只幼兔随机分为4组:缺血再灌注组(I/R组)、心脏缺血预处理组(MIP组)、PKC阻滞组(CLT组)和PKC激活剂组(PKC组),观察4组幼兔血流动力学、生化、心肌超微结构等指标。结果 MIP组和PKC组心功能恢复、心肌含水量优于I/R组和CLT组(P0.01),三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性、心肌线粒体合成ATP的能力优于I/R组和CLT组(P0.01),丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+含量低于I/R组和CLT组(P0.01),心肌超微结构损伤较I/R组和CLT组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过PKC的激活起作用。     

异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法75只雄性沙士鼠，随机分5组，每组15只。假手术组（SHAM组）；I／R组：夹闭双侧颈总动脉5min后开放造成缺血再灌注；异氟醚预处理组（ISO组）：缺血前60min吸入1．2％．1．5％异氟醚30min；5．羟葵酸盐组（5-HD组）：缺血前30min腹腔内注射线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂5-HD 10mg／kg；5．HD＋ISO组：腹腔内注射5-HD10mg／kg，30min后同ISO组。再灌注24h，取鼠前脑，透射电镜下观察线粒体超微结构，用荧光分光光度计测定线粒体游离Ca^2＋浓度，用紫外分光光度计测定线粒体通透转运通道（MPTP）开放程度。结果I／R组、5-HD和5-HD＋ISO组线粒体肿胀，嵴断裂、溶解，内呈空泡状，ISO和SHAM组线粒体结构较完整，嵴及内膜间隙仍清晰可见。I／R、5．HD、5．HD＋ISO组线粒体游离Ca^2＋浓度及MFrP开放程度均高于SHAM组，ISO组线粒体游离Ca^2＋浓度及MPTP开放程度低于I/R组（P〈0．05）。结论异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用，可能是通过激活线粒体ATP敏感性钾通道，减轻Ca^2＋超载，从而抑制MPTP开放而产生的。     

PI3K/AKT信号通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K／AKT信号传导通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 成年SD大鼠32只，随机分为4组：缺血再灌注组（I／R组）、异丙酚组（P组）、渥曼青霉素组（W组）和异丙酚＋渥曼青霉素组（PW组），每组8只。建立Langendorff离体心脏灌注模型，灌注压10kPa,灌注速率7．10ml／min，I／R组用K-H液灌注，P组用含50μmol／L异丙酚的K-H液灌注，W组用含100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注；PW组用含50μmol／L异丙酚＋100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注，灌注15min，全心缺血30min，再灌注60min。测定再灌注10、40min时冠脉流出液中心肌肌钙蛋白（cTnI）浓度，再灌注60min时测定心肌组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，电镜下观察心肌细胞超微结构。结果 与I／R组比较，P组再灌注期间cTnI浓度明显降低，心肌组织SOD活性升高，MDA含量降低（P〈0．05），其余2组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与缺血前比较，P组再灌注40min时cTnI浓度升高，其余各组再灌注期间cTnI浓度均升高（P〈0．05或0．01）。P组电镜下心肌超微结构改变减轻。结论 异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤可能通过PI3K／AKT信号传导通路介导。     

蛋白激酶C和线粒体ATP敏感性钾通道在未成熟心肌预处理中的作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)和线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道(mitoKATP)在未成熟心肌预处理保护中的作用。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,30只新生日本长耳大白兔分为5组:缺血/再灌注组(I/R组),心脏缺血预处理组(E1组),蛋白激酶C(PKC)阻滞剂chelerythrine(CLT) 心脏缺血预处理(E2组),mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate(5-HD) 心脏缺血预处理(E3组),mitoKATP通道开放剂Diazoxide(Diaz)预处理组(E4组)。以血流动力学、生化指标、心肌超微结构等作为观察指标。结果E1和E4组心功能恢复、心肌含水量优于I/R、E2和E4组(P<0.05),三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、心肌线粒体合成三磷酸腺苷(ATP)的能力优于I/R、E2和E4组(P<0.01),丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量低于I/R、E2和E4组(P< 0.01),心肌超微结构损伤较I/R、E2和E4组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过PKC的激活和mitoKATP通道的开放起作用。     

缺血预处理对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响

目的研究缺血预处理（IPC）对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响。方法SD大鼠72只，随机分为4组（n=18）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）和5-羟葵酸（5-HD）拮抗IPC组（5-HD＋IPC组）。采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，IPC组在全心停灌前，给予2次缺血预处理，每次缺血5min，间隔5min；5-HD＋IPC组预处理前灌注5-HD 10min。各组于平衡末、缺血前、再灌注30min各取6个心脏，分离心肌线粒体并测定线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（ADP／O2）、NADH氧化酶（NADH-OX）、琥珀酸氧化酶（SUC-OX）、细胞色素C氧化酶（CYTC-OX）的活性。结果与CON组比较，IR组、IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min RCR、ADP／O2、NADH-OX、SUC-OX和CYTC＋OX的活性降低（P〈0．05）；与IR组比较，IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标升高（P〈0．05）；与IPC组比较，5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标降低（P〈0．05）。结论缺血预处理可改善大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的功能，其机制与mitoKATP的激活有关。     

非创伤性双下肢缺血预处理对兔肺缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨非创伤性双下肢缺血预处理（N-WIP）对兔肺缺血／再灌注（I／R）损伤的保护作用。方法采用N—WIP及经典缺血预处理（C-IP）的动物模型，比较两种预处理方法对肺I／R损伤的保护效应。将40只兔随机分4组：对照组（C）、I／R组、C—IP组和N-WIP组，每组10只。对比观察各组血氧分压、肺湿／干重比、血清及肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性，丙二醛（MDA）含量。结果再灌注后I／R组血氧分压呈进行性下降，尤以再灌注30min内明显；N—WIP组和CIP组血氧分压、SOD活性均优于I／R组（P〈0．01），肺湿／干重比和MDA含量均低于I／R组（P〈0．05,P〈0．01），MPO活性较I／R组明显降低（P〈0、05）；N—WIP组和C-IP组与C组之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论N-WIP与C-IP可通过减轻肺毛细血管的通透性，抑制缺血再灌注时中性粒细胞的浸润、激活，提高机体抗氧自由基的能力，同等强度的减轻I／R损伤，起到保护肺脏的作用。     

家兔未成熟心肌摄钙功能的实验研究

目的：从亚细胞水平研究未成熟心肌缺血－再灌注损伤中肌浆网（Sarcoplasmic reticulum,SR)摄钙功能和mRNA的表达。方法：将18只幼兔和18只成年兔随机分为4组，进行离体心灌注。测定各组心功能、冠状动脉流出液血气，单细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2 ]i)，肌浆网钙离子－三磷酸腺苷酶（Sarcoplasmic reticulum Ca^2 -adenosine triphosphatase,SR Ca^2 -ATPase)活性，肌浆网^45Ca^2 (SR^45Ca^2 )摄取，并用斑点杂交（dot blot)检测SR Ca^2 -ATPase mRNA表达。结果：缺血－再灌注后，成熟与未成熟心肌均发生钙超载（P＞0．05）。未成熟心肌SR Ca^2 -ATPase活性恢复率明显高于成熟心肌（P＜0．01），SR^45Ca^2 摄取恢复率高于成熟心肌（P＜0．05），SR Ca^2 - ATPase mRNA表达上调低于成熟心肌（P＜0．01）。结论：未成熟心肌缺血－再灌注损伤钙超载中，SR^45Ca^2 摄取功能不起主要作用。     

肾缺血预处理对肾小管上皮细胞内钙超载的影响

目的：通过观察肾缺血预处理（IPC）和缺血再灌注（I/R）过程中血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）含量的变化,进一步探讨肾IPC的保护机制。方法：将雄性SD大鼠88只随机分为11组,摘除右肾,分离并夹闭左肾动脉制备肾I/R和缺血预处理后缺血再灌注（IPC-I/R）动物模型。Ⅰa～Ⅴa（I/R）组为缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Ⅰb～Ⅴb（IPC-I/R）组为缺血预处理后缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Sham组为假手术组。比色法测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、SOD、MDA含量,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞内[Ca^2＋]i水平,TUNEL原位标记法观察细胞凋亡情况。结果：除0h组外,IPC-I/R与I/R各组比较肾功能损害、细胞凋亡均明显减轻,SOD升高,MDA降低,[Ca^2＋]i水平下降;两种模型中均以再灌注24h组损伤最严重,Scr、BUN、MDA和[Ca^2＋]i水平最高,SOD水平最低,细胞凋亡最多;再灌注24h前损伤呈加重趋势,24h后逐渐减轻;组间比较,[Ca^2＋]i与血清SOD水平呈负相关,与MDA呈正相关。结论：肾IPC可以减轻I/R过程中膜脂质过氧化损伤和细胞内钙超载,从而减轻肾脏形态及功能损伤;膜脂质过氧化和细胞内钙超载相互作用,共同发挥对肾I/R损伤的保护作用。     

钙预处理对未成熟心肌的保护作用

目的 观察钙预处理对未成熟心肌的影响.方法 采用Langendorff离体灌注模型,分为3组,缺血再灌组(I/R):离体心脏灌注10 win、工作心15 min后停灌45 min恢复灌注15 min,转为工作心模型30 min;心脏缺血预处理组(IPC):离体灌注10 min转为工作心15 min,反复2次缺血5min/再灌5min,停灌45min后恢复灌注15min,转为工作心模型30min;钙预处理组(CP):离体心脏灌注10 min、工作心15 min后,反复3次45 s无钙KH液灌流/5 min KH液灌流,停灌45 min后恢复灌注15 min,转为工作心模型30 min.以血流动力学指标、生化指标和心肌超微结构作为观察指标.结果 IPC与CP组比较,血流动力学指标、生化指标和心肌超微结构等方面均无明显差异;CP、IPC与I/R组比较,左心室功能恢复、三磷酸腺苷含量(ATP)(11.53±1.85、13.40±1.96比4.27±0.83,P＜0.01)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(230.47±11.72、236.28±12.69比124.17±6.20,P＜0.01)、心肌线粒体Ca2+ATP酶活性(17.86±1.39、16.38±1.27比6.78 ±0.64,P＜0.01)和心肌线粒体合成ATP的能力(104.29±9.60、102.43±9.53比50.83±4.75,P＜0.01)明显增强,在心肌含水量(75.32±1.25、73.29±1.26比84.23±2.03,P＜0.01)、丙二醛含量(1.32±0.12、1.23±0.11比2.61±0.37,P＜0.01)、肌酸激酶(53.17±5.32、57.47±5.62比123.65±9.63,P＜0.01)和乳酸脱氢酶漏出率(32.16±3.23、34.48±3.43比85.43±5.93,P＜0.01)、心肌细胞内(2.54 ±0.32、2.17±0.22比4.48±0.74,P＜0.01)和心肌线粒体Ca2+含量(35.91±4.01、36.85±3.97比68.29±6.90,P＜0.01)明显减少;CP、IPC组心肌超微结构损伤较I/R组明显减轻.结论 钙预处理对未成熟心肌具有明显保护作用

Abstract：

Objective To investigate the protective effects of Ca2+ preconditioning on isolated immature myocardium.Methods Isolated working rabbit heart model was used,and 18 rabbits were randomly divided into 3 groups:ischemic/reperfusion (I/R) group receiving 45 min ischemia followed by 45 min reperfusion;myocardial ischemic preconditioning (IPC) group receiving 5 min ischemia and 5 min reperfusion 2 times before 45 min ischemia followed by 45 min reperfusion;Ca2 + preconditioning (CP)group receiving no-Ca2 + preconditioning before 45 min ischemia followed by 45 min reperfusion.The hemodynamics,biochemistry and myocardial ultrastructure were tested.Results The hemodynamics,biochemistry and myocardial ultrastructure had no significant diferrence between CP group and IPC group.As compared with I/R group,in CP and IPC groups,the left ventricular function recovery,adenosine triphosphate content (ATP) (11.53 ± 1.85,13.40 ± 1.96 vs 4.27 ±0.83,P＜0.01),superoxide dismutase (SOD)activity (230.47± 11.72,236.28 ± 12.69 vs 124.17 ±6.20,P＜0.01),Ca2+-ATPase activity of mitothondia ( 104.29 ± 9.60,102.43 ± 9.53 vs 50.83 ± 4.75,P＜0.01 ) and synthesized ATP activity of mitochondria ( 104.29 ±9.60,102.43 ±9.53 vs 50.83 ±4.75 ,P ＜0.01 ) were improved,and myocardial water content ( 75.32 ± 1.25,73.29 ± 1.26 vs 84.23 ± 2.03 ,P＜0.01 ),malondialdehyde content ( 1.32 ± 0.12,1.23 ± 0.11 vs 2.61 ± 0.37 ,P＜0.01 ),the dehydrogenase (32.16 ± 3.23,34.48 ± 3.43 vs 85.43 ± 5.93,P ＜0.01 ) and creatine kinase leakage (53.17 ±5.32,57.47±5.62 vs 123.65 ±9.63 ,P ＜0.01 ),myocardial cell Ca2+ content (2.54 ±0.32,2.17 ±0.22 vs 4.48 ±0.74 ,P ＜0.01 ) and mitochondrial Ca2+ content(35.91 ±4.01,36.85 ±3.97 vs 68.29 ±6.90,P ＜0.01 ) were reduced.The ultra.structure injury was milder in CP group and ICP group than in I/R group.Conclusion CP has signifcantly protective effects on immature myocardium.     

非心脏缺血预处理对兔未成熟心肌的保护作用

目的　研究非心脏缺血预处理 ( IP)对未成熟心肌的保护作用 ,探讨未成熟心肌的保护方法。　方法　采用心脏缺血预处理 ( MIP)、双下肢缺血预处理 ( DL IP)和肾缺血预处理 ( RIP)兔 L angendorff灌注模型 ,比较 3种方法对缺血 -再灌注 ( IR)未成熟心肌损伤的效应。将 2 4只兔分为 4组 ,IR组 ,MIP组 ,DL IP组和 RIP组 ,每组 6只。测定左心室功能恢复、心肌含水量 ( MWC)、乳酸脱氢酶 ( L DH)漏出量、血清肌酸激酶 ( CK)漏出量、心肌三磷酸腺苷 ( ATP)、丙二醛( MDA)含量和超氧化物歧化酶 ( SOD)活性等指标。　结果　 MIP组、DL IP组和 RIP组左心室功能恢复指标、ATP含量和 SOD活性优于 IR组 ( P<0 .0 5 ) ,MWC低于 IR组 ( P<0 .0 5 ) ,L DH、CK漏出率和 MDA含量均低于 IR组 ( P<0 .0 1)。　结论　非心脏 IP对未成熟心肌具有明显的保护作用 ,与 MIP相同 ,可诱发同等效应的心肌保护作用。     

七氟烷预处理通过激活胞外信号调节激酶诱发兔脊髓缺血再灌注的急性耐受

背景七氟烷预处理对脊髓缺血再灌注损伤（I/R）的保护效应尚不明确。本研究拟通过短暂兔脊髓缺血模型来研究七氟烷预处理是否能够诱导脊髓急性缺血耐受,同时探讨胞外信号激酶（ERK）在其中的作用。方法为了研究七氟烷（Sev）预处理是否能够诱发急性缺血耐受,将新西兰大白兔随机分为三组。Sev组接受30分钟的3．7％七氟烷（1．0最低肺泡麻醉浓度）复合96％O2预处理;氧气（O2）组吸入30分钟的96％O2做为对照;假手术组接受相同的麻醉和手术,但不进行预处理或脊髓I／R。为了评估ERK在七氟烷预处理中的作用,大白兔被随机分为4组。在U0126＋O2、U0126＋Sev两组中,于预处理前20分钟静脉给予ERK抑制剂U0126;二甲基亚砜（DMSO）＋02、DMSO＋Sev两组在同一时点给予DMSO。预处理后1小时．阻断肾下腹主动脉施行脊髓I／R。再灌注后48小时采用改良Tarlov标准进行评估,取脊髓（k）节段进行组织病理学检查、TUNEL染色,蛋白印迹法检测磷酸化ERKI／2。结果与O2组比较,Sev组动物神经学评分高、正常运动神经元多（每一项比较P〈0．01）。-tDMSO＋Sev比较,U0126＋Sev组神经学评分较差、活力神经元减少、神经元凋亡增多、磷酸化ERKl／2减少（每一项比较P〈0．01）。DMSO＋02、U0126＋02、U0126＋Sev组间结果差异无显著性。结论本研究表明七氟烷预处理可诱导兔脊髓对I／R的急性耐受,这一作用可能与ERK激活有关。研究数据表明七氟烷预处理可能成为围术期脊髓I／R损伤的新保护措施。     

七氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤与黄嘌呤氧化酶

目的：探讨七氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注（I／R）损伤中黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XO）含量变化的意义。方法：40只SD大鼠,随机入假手术（Sham）组、缺血-再灌注（I／R）组、七氟烷后处理（PostS）组．IR＋别嘌醇（Adenock A,I／R＋A）组。各10只。大脑中动脉线栓（MCAO）法建立大鼠局灶性脑缺血损伤模型。观察缺血前、再灌注后各组血清XO．超氧化物岐化酶（SOD）活性．丙二醛（MDA）含量及脑组织Na^＋-K^＋-ATP酶（Na^＋-K^＋-ATPase）活性变化。实验结束后,处死大鼠。取脑组织经HE．TTC染色,观察各组脑组织梗死体积。结果：再灌注24h末,Sham组血清XO活性,MDA含量低于其它三组（p〈0．05）。SOD及脑组织Na^＋-K^＋-ATPase活性高于其它三组（p〈0．05）：I／R组与Posts组、I／R＋A组比较．XO活性升高（p〈0．05）,MDA含量增加（p〈0．05）,SOD、Na＋^-K^＋-ATPase活性降低（p〈0．05）;S组SOD、XO以及Na^＋-K^＋-ATPase活性均高于IR＋A组（p〈0．05）．MDA含量低于IR＋A组（p〈0．05）。结论：下调XO活性。可能是七氟烷后处理有效减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤重要途径之一。     

缺血后处理对缺血-再灌注心肌的保护作用及其与线粒体ATP敏感性钾通道的关系

目的探讨缺血后处理（IPo）的心肌保护作用及与心肌线粒体三磷酸腺苷（ATP）敏感性钾通道（mitoKATP）的关系,为药物后处理的研发提供依据。方法40只Wistar大鼠,建立大鼠离体心脏Langendorff灌注模型,采用随机数字表法分为5组,每组8只,正常对照组（NC组）：用K-H液持续灌注100min,不做任何处理;缺血-再灌注（I/R）组：全心缺血40min,再灌注60min;IPo组：全心缺血40min,再灌注10s,缺血10s,反复6次,然后持续再灌注58min;5-羟基癸酸（5-HD）组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注15min,再用不含5-HD的K-H液再灌注45min;IPo＋5-HD组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注10s,缺血10s,反复6次,再用含5-HD的K-H液持续灌注13min,然后用不含5-HD的K-H液再灌注45min。观察比较各组心功能、冠状动脉流量（CF）、冠状动脉流出液中心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量、心肌梗死（AMI）面积和心肌细胞超微结构改变。结果再灌注末IPo组左心室发展压（74.3±3.3mmHgvs.57.1±3.3mmHg,t=13.00,P=0.000）、＋dp/dtmax（1706.6±135.6mmHg/svs.1313.3±96.2mmHg/s,t=6.28,P=0.000）、-dp/dtmax（1132.8±112.1mmHg/svs.575.7±67.7mmHg/s,t=13.48,P=0.000）、CF（6.49±0.30ml/minvs.3.70±0.24ml/min,t=28.60,P=0.000）与I/R组比较均升高;左心室舒张期末内压（10.9±1.7mmHgvs.26.2±1.5mmHg,t=-19.21,P=0.000）,冠状动脉流出液中cTnI含量（0.62±0.01ng/mlvs.0.71±0.01ng/ml,t=-12.00,P=0.000）均降低,AMI面积与I/R组比较减少20.8%（P〈0.05）。IPo＋5-HD组对心肌的保护作用与IPo组相似,但作用轻于IPo组。电子显微镜观察结果表明,IPo和IPo＋5-HD可减轻I/R引起的心肌纤维和线粒体损伤。结论IPo对I/R心肌有保护作用,其作用与mitoKATP的激活有关。     

臭氧氧化预处理在肾缺血再灌注损伤中对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法 38只8周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为4组.（1）假手术组（n＝8）：仅切除右肾;（2）缺血再灌注组（n＝10）：切除右肾、游离左肾后夹闭左肾动、静脉45 min再开通;（3）臭氧氧化预处理组（n＝10）：与缺血再灌注组建模方法一致,但在建模前15 d起每天1次经直肠灌注法吹入氧气和臭氧的混合气体5~5.5 mL;（4）氧气预处理组（n＝10）：与臭氧氧化预处理组建模方法一致,但经直肠仅吹入氧气（13 mg/kg）.建模后24 h检测各组大鼠血清肌酐、血尿素氮和血清一氧化氮浓度;48 h后采用免疫组织化学法和逆转录PCR法检测各组大鼠肾组织eNOS表达;蛋白质印迹法检测肾组织胞浆eNOS含量.结果 建模后24 h,缺血再灌注组大鼠血清肌酐为（117±20）μmol/L,血尿素氮为（32.8±7.6）mmol/L,血清一氧化氮为（58±12）μmol/L,均高于假手术组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组血清肌酐为（63±16）μmol/L,血尿素氮为（17.4±5.2）mmol/L,低于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）;血清一氧化氮为（84±14）μmol/L,均高于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组肾组织学Paller评分（41±6）低于缺血再灌注组（62±9）,eNOS灰度值（163±15）高于缺血再灌注组（126±18）,差异有统计学意义（均P〈0.05）.假手术组大鼠肾组织内有微量eNOS mRNA表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS mRNA表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS mRNA表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.假手术组无明显eNOS蛋白表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS蛋白表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS蛋白表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.结论 臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其诱导eNOS合成增多、一氧化氮产生增多有关.     

肢体远隔缺血后处理联合吗啡后处理增强对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 评估联合应用肢体远隔缺血后处理(remote ischemic postconditioning,RIP)和吗啡后处理能否获得增强的心肌保护作用. 方法 采用大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)模型,采用随机数字表法将60只大鼠分为6组(每组10只):空白对照组(Sham组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R组)、缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)组(IPC组)、肢体RIP组(RIP组)、吗啡后处理组(M组)以及联合应用肢体RIP和吗啡后处理组(M+RIP组).实验中连续监测心律失常情况,计算缺血期和再灌注早期的心律失常评分,检测血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB,CK-MB)和心脏肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)浓度,并采用伊文蓝和氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)双重染色法测定心肌梗死面积. 结果 I/R组、IPC组、RIP组、M组和M+RIP组的心肌梗死面积分别是(56.0±9.1)％、(23.9±5.5)％、(40.4±11.1)％、(47.7±9.3)％和(27.2±6.7)％.与I/R组比较,M+RIP组再灌注早期心律失常发生率和心律失常评分、血清CK-MB和cTnⅠ浓度以及心肌梗死面积均明显降低(P＜0.05);这些参数在IPC组和M+RIP组之间差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 在大鼠在体心肌I/RI模型,联合应用肢体RIP和吗啡后处理可获得增强的心肌保护作用,其心肌保护作用类似于IPC.     

七氟烷预处理对心肌缺血／再灌注损伤大鼠心肌NF—κBp50活性表达的影响

目的观察七氟烷预处理对心肌缺血／再灌注大鼠心肌核因子-κB（NF-κB）p50表达的影响,进而探讨NF-κB在七氟烷预处理保护机制中的作用。方法SD雄性大鼠70只,随机分为7组。空白对照组;单纯缺血组;七氟烷组于吸入2．4％七氟烷30min,继之15min药物排出后进行心肌缺血／再灌注;七氟烷对照组吸入七氟烷30min后停止吸入165min;小白菊内酯（parthenolide,PTN）组于缺血前15min腹腔内注射NF-κB特异性抑制剂PTN500μg／kg;PTN＋七氟烷组于七氟烷预处理前15min腹腔内注射PTN500μg／kg;七氟烷＋PTN组于预处理后即刻腹腔内注射门N500μg／kg。建立大鼠心肌缺血,再灌注损伤的在体模型,阻断左冠状动脉前降支30min,再灌注120min,分别于大鼠心肌缺血／再灌注前、后或相应时间点取心肌标本。采用western blot法测定NF-κBp50的蛋白表达。结果缺血前七氟烷组较空白对照组NF-κBp50蛋白表达明显上调（P〈0．05）;缺血后与空白对照组比较,单纯缺血组、七氟烷组NF-κBp50蛋白表达显著增多（P〈0．05）;与单纯缺血组比较,七氟烷组NF-κBp50蛋白表达显著减少（P〈0．05）;缺血后七氟烷组较缺血前七氟烷组NF-κBp50蛋白表达显著减少（P〈0．05）.结论七氟烷预处理期间NF-κBp50大量激活,抑制了心肌缺血／再灌注后期NF-κBp50蛋白的表达,该作用被PTN所阻断,NF-κBp50可能参与了七氟烷预处理的心肌保护机制。