微柱凝胶技术在输血相关试验中的评价及应用研究

目的 探讨微柱凝胶技术在血型鉴定、交叉配血、抗体效价测定等相关输血试验中的应用,并对其进行方法学评价.方法 对微柱凝胶技术测定的55例Rh D阴性患者中的15例抗-Rh D呈阳性血样及21例正、反定型不符血样、29例交叉配血不合血样综合分析,并与试管抗人球蛋白结果对比.同时,对微柱凝胶技术检测的853例O型孕妇IgG型抗-A或抗-B效价结果进行分析.结果 抗-Rh D的检出率显示,微柱凝胶技术为27.27%(15/55),试管法为21.82%(12/55),效价在1:4以上阳性标本的检出两种方法一致.21例正、反定型不符的标本中,抗原或抗体减弱的11例用微柱凝胶技术检测,显示出反应的不一致性;而用试管法则呈现弱阳性反应.交叉配血中,微柱凝胶技术检出的29例阳性用试管法证实,2例为假阳性.O型孕妇血型效价测定以1:128为界,配偶为A型时,检出率为33.18%(144/434);配偶为B型时,检出率为33.17%(139/419),两者无显著差异.结论 微柱凝胶技术有操作简便、快速、结果客观的优点,但应重视其假阳性和假阴性.出现异常结果时,应将传统的试管法结合显微镜镜检.     

微柱凝胶技术在输血相关试验中的评价及应用研究

目的探讨微柱凝胶技术在血型鉴定、交叉配血、抗体效价测定等相关输血试验中的应用,并对其进行方法学评价。方法对微柱凝胶技术测定的55例RhD阴性患者中的15例抗-RhD呈阳性血样及21例正、反定型不符血样、29例交叉配血不合血样综合分析,并与试管抗人球蛋白结果对比。同时,对微柱凝胶技术检测的853例0型孕妇IgG型抗-A或抗-B效价结果进行分析。结果抗-RhD的检出率显示,微柱凝胶技术为27．27％（15／55）,试管法为21．82％（12／55）,效价在1：4以上阳性标本的检出两种方法一致。21例正、反定型不符的标本中,抗原或抗体减弱的11例用微柱凝胶技术检测,显示出反应的不一致性;而用试管法则呈现弱阳性反应。交叉配血中,微柱凝胶技术检出的29例阳性用试管法证实,2例为假阳性。O型孕妇血型效价测定以1：128为界,配偶为A型时,检出率为33．18％（144／434）;配偶为B型时,检出率为33．17％（139／419）,两者无显著差异。结论微柱凝胶技术有操作简便、快速、结果客观的优点,但应重视其假阳性和假阴性。出现异常结果时,应将传统的试管法结合显微镜镜检。     

新生儿 ABO 血型正反定型及其交叉配血实验结果分析

目的：分析新生儿ABO血型正反定型的符合情况及与异型血交叉配血的试验结果,探讨交叉配血试验在婴幼儿输血时的局限性及保证新生儿安全输血的有效措施。方法对1095例新生儿血液标本用微柱凝胶卡进行 ABO 血型鉴定,并与异型血做交叉配血试验。结果1095例新生儿标本中,弱 A、弱 B 抗原检出率分别为3．99％、17．93％,以弱 B 抗原为主;血型抗体阴性率抗-A 为53．72％,抗-B 为60．70％;与异型血做交叉配血时,主侧未出现预期凝集者占52．87％,弱凝集占33．27％,次侧弱凝集占9．49％。结论新生儿 ABO 抗原抗体成熟度及正反定型符合率均不及成人,依据交叉配血试验结果进行输血有一定局限性,应高度重视新生儿 ABO 血型的正确性,明确新生儿个体输血策略,以免给新生儿误输 ABO 异型血造成溶血性输血反应,保证其输血安全。     

6月龄内婴幼儿ABO/RhD的血型结果及两种检测方法的对比分析

目的:应用全自动微柱玻璃珠法与试管法检测不同胎龄和月龄的6月龄内婴幼儿ABO/Rh D血型并对比结果的差异。方法:收集2018年1月-2019年2月患儿血标本896例,同时应用以上两种方法检测ABO/Rh D血型抗原并进行ABO反定型抗体检出率和凝集强度并进行比较分析。结果:两种方法正定型均检出A型标本308例(34.4%),B型标本281例(31.4%),O型标本210例(23.4%),AB型标本97例(10.8%),Rh D血型均为阳性,ABO/Rh D血型抗原的凝集强度无明显差异(P 0.05);除AB型外,B型患儿反定型抗体检出率明显高于A型和O型,反定型A细胞凝集强度均明显高于B细胞(P 0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测A型和O型患儿的反定型抗体检出率及各血型患儿的反定型凝集强度均明显高于试管法(P 0.05)。足月儿组的ABO反定型抗体检出率和凝集强度均明显高于早产儿组(P 0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测两组患儿反定型抗体检出率以及凝集强度均明显高于试管法(P 0.05)。不同月龄4组患儿中,Ⅳ组(4月龄至6月龄)患儿ABO反定型检出率和凝集强度均明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(3月龄以下,P0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患儿反定型抗体检出率及各组患儿反定型凝集强度均明显高于试管法(P 0.05)。结论:大部分婴幼儿可以准确检测出ABO/Rh D血型抗原,而ABO抗体检出率与胎龄和月龄相关。全自动微柱玻璃珠法对ABO血型的反定型抗体检出率及凝集强度均强于试管法,特别对于早产儿以及3月龄以内的患儿更为可靠和敏感。     

小儿检出抗-M17例实验分析

目的分析本院2013年1月-2015年6月间17例小儿检出抗-M的实验结果的特点。方法选取已知抗-M阳性标本17例,回顾性调查比较盐水法与微柱凝胶卡法的ABO血型正反定型、抗筛、抗体鉴定与MNs血型抗原检测结果。结果卡法ABO血型正反不符检出9例、抗筛检出6例、抗体鉴定检出3例,与盐水法比较符合率分别为60%、40%、20%。结论在大多数医院普遍使用微柱凝胶卡法进行ABO血型鉴定、抗筛检测和交叉配血,而不做盐水法时,容易漏检效价不高的盐水反应性抗-M。婴幼儿也应进行ABO反定型检测,多出的异常凝集可以提示我们有盐水反应性抗体存在的可能。     

两种方法鉴定老年人ABO及RH(D)血型的比较

目的比较微柱凝胶法和试管法鉴定老年人ABO血型和RH(D)血型的可靠性。方法选取400例老年人血标本,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型和RH(D)血型鉴定。结果在鉴定老年人ABO血型时,试管法正定型符合率92.0%,反定型符合率89.0%;微柱凝胶法符合率96.0%。RH(D)血型检测结果两法一致。结论微柱凝胶法检测老年人的ABO血型时优于传统试管法,在常规血型检查应推广应用。     

新生儿与ABO异型献血者交叉配血1000例结果分析

目的探讨新生儿与ABO异型献血者的配血结果,探索保障新生儿安全输血的有效措施。方法将A型、B型、O型及AB型新生儿血液标本与献血者血液标本按照ABO血型不同的原则,运用微柱凝胶LISS-coombs卡分别进行主侧和次侧交叉配血,结果分别记录为阴性(-)和阳性:±、1+、2+、3+、4+。分别统计各组阴性和阳性结果例数及阳性结果所占比例。结果共配血1 000例次,其中A型、B型和O型新生儿各300例,AB型100例。因新生儿产生ABO血型规则抗体而出现不和、出现凝集的比例为40%～48%,其中多数为弱凝集。有超过半数ABO血型不合的配血,因新生儿尚未产生ABO血型抗体而出现阴性配血结果(52%～60%)。未发现因新生儿ABO血型抗原表达弱而导致的假阴性配血结果,但有极少部分凝集结果较弱(1%～3%)。结论由于大部分新生儿尚未产生足够强的ABO血型规则抗体,在给新生儿交叉配血时应高度重视ABO血型的正确性,以免给新生儿误输ABO异型血造成溶血性输血反应。     

鉴定婴儿ABO血型的方法学比较

目的评估婴儿ABO血型的鉴定方法,找出一种更适宜的鉴定方法。方法采用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法对本院2009年10月～2010年1月60名婴儿全血标本做ABO血型鉴定,同时比较60名标本抗体检出率在血型和年龄分布中的差异。结果用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法鉴定时,正定型结果一致,反定型时,抗体检出率分别为70％、91．67％、81．67％,三种方法在婴儿抗体检出率中差异有统计学意义;在血型为A型、年龄小于4个月的婴儿中抗体检出率差异也有统计学意义。结论抗人球蛋白卡在检测弱抗体时灵敏度更高。     

微柱凝胶卡漏检B_w03亚型分析——附2例报告

目的对2例微柱凝胶卡漏检B_w03亚型标本血型血清学特点及其分子遗传背景进行系统分析,以期为临床安全输血提供帮助。方法分别应用试管法和微柱凝胶卡法进行血型正反定型;应用PCR-SSP方法对ABO血型基因进行初步分型;并进一步应用直接测序和单体型序列分析法对ABO基因第6、7外显子进行分析以确定其基因型。结果标本1:试管法结果疑似B亚型,凝胶卡结果正定为O型反定为B型,基因检测结果为B_w03。标本2:试管法结果疑似AB亚型,凝胶卡结果正定为A型反定为AB型,基因检测结果为AB_w03。结论微柱凝胶卡能漏检B_w03亚型,应采用多种方法进行血型鉴定以减少临床血型鉴定错误及相关输血反应的发生。     

微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血中的应用

目的分析微柱凝胶法在输血科的应用,以更好、安全、有效地指导临床输血。方法分别采用微柱凝胶法,抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）进行血型鉴定2025人次,微柱凝胶卡氏法、聚凝胺法交叉配血1220人次,进行比较分析。结果在血型鉴定中有8例假阳性,假阳性率为0．39％。在交叉配血中有12例假阳性,假阳性率为0．74％。结论微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血上灵敏度高,用血量少,操作简便,结果易于保存时间长,使临床输血更安全、有效。     

用分子生物学技术鉴定新生儿脐血ABO疑难血型

目的用分子生物学技术对新生儿脐血ABO疑难血型鉴定。方法新生儿产出后断脐带时留取脐血血样,先用传统的试管法对脐血标本作ABO血型鉴定,不能定出血型的标本用微柱凝胶技术鉴定,仍不能定出血型者再用分子生物学方法(聚合酶链反应-序列特异性引物分析PCR-SSP)作进一步鉴定。结果传统的试管法仅能对83.98%(4561/5431)的脐血血样正确定出ABO血型,用微柱凝胶技术仍有1.77%(96/5431)的标本不能定出ABO血型,对以上疑难标本用分子生物学技术容易地定出了ABO血型。结论微柱凝胶技术敏感,应取代试管法ABO血型定型方法,分子生物学技术鉴定新生儿脐血ABO疑难血型是一种有效的手段。     

罕见B(A)血型的分子遗传学研究

目的以核苷酸序列分析鉴定出血型血清学分型困难标本的ABO血型基因型。方法对常规血清学方法难以做ABO血型准确定型的3例被捡血样,采用PCR方法扩增其ABO等位基因的第6、7外显子,PCR产物采用直接测序和克隆测序的方法,以确定其基因型。结果 3例被检血样的血型血清学结果相似:红细胞与抗-A弱凝集,与抗-B强凝集,不与抗-A1凝集,其血清中存在抗-A,初步定型为AWB;经直接测序和克隆测序发现:3例被检血样都含有O等位基因,且它们的B等位基因在第7外显子都存在700CG突变,证实其为B(A)02等位基因。结论核苷酸序列分析证实这3例血清学表现为AWB亚型个体均为B(A)表现型,基因型均为罕见的B(A)02/O型。     

83例疑难ABO血型鉴定及分析

目的检测和鉴定ABO疑难血型,为安全输血提供质量保障。方法采用血型血清学方法进行盐水介质正、反定型;对盐水介质正、反定型不合者使用聚凝胺法检测和不规则抗体检测;采用吸收试验和放散试验进行ABO血型的检测,以准确鉴定ABO疑难血型。结果 83例标本ABO血型检测结果为,AB亚型9例、B亚型1例、弱A抗原7例、弱B抗原6例、低抗-A效价2例、低抗-B效价3例、不规则抗体阳性7例、无抗体O型4例、低抗-B效价O型2例、无抗-B抗体A型5例;37例标本经盐水介质和Polybrine法检测,正、反定型结果符合。结论用聚凝胺法、吸收试验和放散试验进行ABO疑难血型检测,能准确、及时鉴定ABO疑难血型。     

抗A和抗B血型定型试剂稳定性观察及对亚型检测的影响

目的检测国产单克隆抗A(B)试剂质量,观察对ABO亚型检测的影响。方法测定四个厂家"单抗A、抗B"试剂效价、亲和力等,并检测稀有的ABO亚型红细胞与单克隆试剂反应情况,同时用人源抗A、抗B试剂作对照。结果所有厂商的试剂均符合国家标准,单克隆抗体仍有漏检ABO亚型现象。结论目前市场销售的单克隆抗A、抗B血型定型试剂,质量基本可靠,但应定期测定其效价、亲和力,受检者ABO血型检测必须用ABO反定型试验复核。     

人血液经56℃孵育处理后溶血率及血型抗原抗体变化

目的 为降低传染风险,对疑似或确诊新型冠状病毒(SARS-Cov-2)患者血样,部分实验室采用56℃孵育30分钟后再进行血型血清学检测,该处理方法对输血前检测的影响未见评估研究.本研究对血液样本经56℃孵育后的溶血率、红细胞A、B、D抗原凝集强度及其抗体效价进行评估.方法 从上海地区随机抽取正常献血者A型20例,B型2...     

Nondeletional ABO*O alleles frequently cause blood donor typing problems

BACKGROUND: Difficulties in the demonstration of expected isoagglutinins is a common problem in ABO reverse typing. Some nondeletional ABO*O alleles have been shown to encode for the expression of minimal amounts of A antigen, resulting in very weak anti-A activity in some cases. It is unknown whether minor problems with ABO reverse typing are related to specific ABO*O alleles. STUDY DESIGN AND METHODS: Among 2196 blood group O red cell (RBC) donations, the ABO alleles of those donations in which the isoagglutinins were incorrectly identified were analyzed with an autoanalyzer. The presence of nondeletional ABO alleles was determined by sequence-specific priming and sequencing. RESULTS: Fifty (2.3%) of the group O RBC donations tested had to be typed manually because of isoagglutinin detection problems in automated typing: reduced anti-A activity was observed in 45 cases, reduced anti-B activity in 4 cases, and variably reduced isoagglutinin activity in 1 case. The nondeletional ABO*O alleles ABO*O03 and ABO*Aw08 were implicated in 38 of these 50 cases (1.7% of all blood group O donors). The remaining samples, including those with reduced anti-B activities, were homozygous for deletional ABO*O alleles. CONCLUSION: Nondeletional ABO*O alleles are the most frequent cause of isoagglutinin detection problems in blood group O donors.     

Anti-A and/or anti-B is not detectable in some patients who underwent ABO-incompatible bone marrow transplantation

BACKGROUND: Recently, anti-A and/or anti-B produced by B cells from donor marrow could not be detected for more than 20 weeks in some patients who had undergone ABO-incompatible bone marrow transplantation (BMT). STUDY DESIGN AND METHODS: Twelve to 72 weeks after 11 patients underwent ABO-incompatible BMT, titers of anti-A and anti-B were assayed, A and B antigens were identified by routine methods and flow cytometry, direct and indirect antiglobulin tests were performed, and the red cell antibody was eluted. RESULTS: In some patients who underwent ABO-incompatible BMT, anti-A and/or anti-B produced by the B cells from the donor marrow could not be detected after BMT when red cells taken from the patients before BMT carried the corresponding antigen–that is, when hematopoiesis had already changed the cells to the donor's type according to ABO blood typing. Furthermore, some blood samples from those patients gave positive results in direct antiglobulin tests. Blood typing of patients after BMT showed mixed- field agglutination. In one patient, the half-life of red cells assayed with 51Cr was 22.4 days (30.0 +/− 4.0 days for normal controls). CONCLUSION: Although many hypotheses could be considered to explain the present data, the possibility is proposed that anti-A and/or anti-B in the sera must have been consumed in some patients who underwent ABO- incompatible BMT. This may lead to problems such as difficulty of ABO typing, positive direct antiglobulin tests, and a relatively short life span of red cells.     

通用O型全血的初步研究

目的探讨冰冻干燥红细胞膜的制备技术及通用O型去除血型抗体全血的可行性。方法将A型及B型红细胞膜经过冰冻干燥处理后，加入O型全血中，经反应后测定血浆中血型抗体效价，并检测红细胞结构及功能，检测血浆中凝血因子活性变化。结果经过冰冻干燥处理后，红细胞膜仍具有抗原性，可有效降低血浆中的血型抗体效价，而全血中红细胞的变形指数、ATP含量与反应前差异无显著性，反应前后均在正常参考范围内；全血血浆中各种凝血因子活性在吸附前后比较，差异无显著性。结论尽管红细胞膜在体内是否产生大量抗体及其清除过程等尚需进行动物实验确定，但使用冰冻干燥红细胞膜制备通用型血液过程简便易行，具有进一步的研究价值。     

自身免疫性溶血性贫血患者的血型检定研究

为了观察自身抗体对ABO和RhD血型检定的干扰，对38例自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia，AIHA)患者血液标本进行ABO和RhD常规定型，氯奎放散试验后定型及基因定型。结果表明：38例AIHA患者中，ABO血型难定者11例(31.6％)，均为间接抗球蛋白试验阳性及正反定型不合。RhD(-)误定RhD( )1例，并含抗-D。采用氯奎放散试验后血型皆正确检定。结论：AIHA患者的自身抗体干扰血型检定，必须采用多种技术才能正确检定血型，确保安全输血。     

Blood group specific properties of leucocyte nuclei (author's transl)]

The absorbing and precipitating capacity of leucocyte nuclear suspensions derived from conserved blood of various blood groups was examined with anti-A-, anti-B-, anti-H, anti-M-, anti-N-, and anti-CDE-, and anti-D-sera as well as with anti-AHP- and Evonymus-extracts. Nuclei of blood group A absorbed anti-A, but not anti-B; nuclei of blood group B absorbed anti-B, but not anti-A. Nuclei of blood group 0 absorbed anti-H, but neither anti-A nor anti-B. Anti-M-, anti-N-, anti-CDE-, and anti-D-sera showed no absorption effect after incubation with leucocyte nuclei of corresponding blood groups. A nuclei were strongly precipitated by anti-AHP; B- and 0-nuclei were markedly precipitated by Evonymus-extract. B- and 0-nuclei showed only a weak precipitation with anti-AHP-extract; A-nuclei were only slightly precipitated by Evonymus-extract. Hence, leucocyte nuclei possess blood group specific properties, which, according to the present studies, are limited to certain blood group systems.