介绍一种简便的组织切片脱汞方法

介绍一种简便的组织切片脱汞方法梁英杰，凌启波在进行某些特殊染色和免疫组化染色时，为了更好地保存组织成分或组织抗原，往往需要选择最佳的固定液。常用的固定液如Ｂ５固定液、Ｚｅｎｋｅｒ固定液，因含有汞盐，在染色前需经脱汞处理。本文介绍的方法是将脱汞的操作过...     

免疫细胞化学在细胞病理学中的应用

免疫细胞化学（ICC）在细胞病理学中是一很有用的辅助诊断方法。目前在甲醛固定的石蜡包埋切片和冷冻组织切片中应用的抗体也多数能应用于乙醇或甲醛固定的细胞涂片。免疫细胞化学常用的标本制备方法有4种：直接涂片（CS）法、细胞离心涂片法（cytospin）、细胞块石蜡包埋（CB）法和液基薄层制片法。CS法和细胞离心涂片法由于涂片背景有较多的血细胞、细胞碎片及大量蛋白液,往往出现高背景着色。蛋白质聚集在细胞周围,     

改良神经髓鞘的依来铬氰R染色法

为研究周围神经髓鞘被覆状态 ,我们经常要进行髓鞘染色 ,在实践中 ,我们摸索了一种便捷、有效、经济的染色方法 ,介绍如下。一、材料和方法1.取材、固定、切片 :取大鼠正常坐骨神经组织 ,4%甲醛生理盐水固定。石蜡切片 6～ 10 μｍ厚 ,6 0℃左右烘箱烘 3～4ｄ。2 .试剂配制 :(1)依来铬氰Ｒ液 :依来铬氰Ｒ 0 .2ｇ ,蒸馏水 96ｍｌ,10 %铁明矾液 4ｍｌ,浓硫酸 0 .5ｍｌ。 (2 )苦味酸丽春红Ｓ液 :1%丽春红Ｓ水溶液 10ｍｌ,苦味酸饱和水溶液 86ｍｌ,1%醋酸水 4ｍｌ。3.染色程序 :(1)石蜡切片 ,常规脱蜡水洗 ,吸干或烘干切片。 (2 )依来铬氰Ｒ液染…     

不同pH值甲醛固定液对肾脏标本特殊染色的影响

<正>特殊染色是肾脏病理诊断不可缺少的依据,而特殊染色制片质量是否稳定直接影响到病理诊断的准确性、及时性。制片质量受多种因素影响,其中最关键的是肾脏组织光镜标本的固定,因此固定液的选择至关重要。本文将对配制的三种不同pH值的甲醛固定液用于肾脏组织光镜标本的固定情况进行比较,观察肾脏组织切片六胺银、Masson三色、高     

制作尸体解剖组织切片的质量控制

为了提高解剖学和病理学的尸体解剖组织切片技术和制片质量 ,更好的为教学 ,科研和诊断服务 ,我们在实践中不断地改进方法 ,总结经验 ,取得了较好的效果。1　材料和方法1.1　组织固定液　选用 15%中性甲醛液 ,能够使组织得到充分的固定。1.2　组织固定方法　尸体解剖的全器官和大体标本的实质性组织应切开进行固定 ,通常将标本固定 3～ 5小时 ,转入第二次固定液中 ,待 2 4～ 4 8小时后进行取材 ,固定液的量应大于组织体积 5倍以上 ,才能进行有效的固定。1.3　组织取材与再固定　组织固定后必须及时取材再固定 6～ 12小时左右 ,这样使组织能…     

10%福尔马林与中性福尔马林的比较

传统上我们都采用 1 0 %福尔马林固定组织。福尔马林系甲醛液的俗称 ,是由甲醛 ( Formaldeny de HCHO)气体饱和于水而成。一般市售的福尔马林含甲醛 37%～40 %。配法 :取 40 %甲醛液 1 0 ml与蒸馏水90 ml混合 ,即得 4%甲醛 ,亦即 1 0 %福尔马林。由于福尔马林久存则氧化产生甲酸 ,呈酸性 ,固定标本不适宜 ,特别是需长期固定的组织更不适合 ,故我们主张采用中性福尔马林固定组织标本。其配法如下 :40 %甲醛 1 0 0 ml酸性磷酸钠 (或无水磷酸二氢钾 ) 4.0 g磷酸氢二钠 6 .5 g蒸馏水 90 0 ml因中性福尔马林中加入了磷酸缓冲液 ,不易被氧化 ,能…     

醇溶性和水溶性伊红在活检小组织标本预染上的应用比较

正近年各种内镜及细针穿刺活检小组织标本越来越多,由于取材的局限性,取材组织数量少、体积小,给技术员在制片过程中带来困难。目前国内外对于小标本的预处理方法不尽相同,有酸化的伊红液[1]、未酸化的伊红液、伊红-固定液[2]等预染法,均采用水溶性伊红配成的各种预染液。由于试剂配置方法、剂量等均无统一标准,采用常规的伊红滴染法效果不佳。为了增加组织的肉眼识别度,提高包埋、切片的速度和质量,     

恶性黑色素瘤中细胞角蛋白的表达

一、材料和方法１材料：收集本院恶性黑色素瘤（下称恶黑）标本１２例,其中皮肤原发恶黑９例,淋巴结内转移性恶黑３例。无色素性恶黑２例。组织用４％甲醛液固定,石蜡包埋,切片均作ＨＥ染色和细胞角蛋白、波形蛋白、ＨＭＢ４５、Ｓ１００染色。２方法：免疫组化...     

实验动物肝组织制片和胶原纤维染色方法的改进

在组织制片中 ,实验动物免疫损伤性肝纤维模型组织切片难度较大 ,因此我们改变了组织固定、脱水、透明、浸蜡和切片与Ｈ、Ｅ染色 ,提高了制片质量。特别是根据实验病理组织形态变化的要求 ,进行二种特殊对比染色 ,所选用和改进的显示胶原纤维的Ｓｉｒｉｕｓｒｅｄ(天狼星红 ) [1] 和Ｍａｓｓｏｎ三色染色法[2 ] ,已得到了较好的染色效果。1　材料和方法1 1　肝组织采用 1 5 %　中性甲醛固定液 ,得到了较好的固定效果。解剖后的动物大鼠肝脏标本切开 3～ 5块 ,置固定液中 5小时后 ,取材 0 2～ 0 .3ｃｍ厚度 ,再固定 5～ 1 0小时可得到充分…     

石蜡切片显示大脑神经细胞方法探讨

以片显示大脑各种神经细胞一般都是用含有重铬酸钾的固定液固定,用硝酸银浸染的方法进行,所以要想制作大批教学标本只能用传统的方法。而大脑神经细胞的特殊染色,只能用火棉胶切片或冰冻切片制作标本,操作步骤复杂、时间长。为此我们对石蜡切片、镀银染色显示大脑神经细胞的方法进行了探讨。本实验选用小白鼠大脑,组织块大小为2×2cm,勿超过3cm;固定后入1%～1.5%硝酸银水溶液浸染5～7天;蒸馏水洗2分钟;用还原液作用24小时;组织块脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,因低浓度酒精易使组织块退色,因此组织块经还原后在酒精内的脱水时间一定要精确。…     

用于皮肤标本固定的改良AAF液

ＬｉｌｉｅＡＡＦ液为乙醇、醋酸和甲醛混合固定液，改良的ＡＡＦ液增加了水杨酸（Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ），称之为ＡＳＡＦ液。该液对于皮肤标本的固定作用优于通用的醛类、丙酮、醇类和其它混合固定液，作用时间短，组织无变硬，易脱水浸蜡，切片组织结构完整，不...     

甲醛固定石蜡包埋切片经特殊染色后荧光定量聚合酶链反应检测的再利用

结核病是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的特异性炎症,在甲醛固定石蜡包埋组织切片中查见MTB是确诊结核的"金标准".目前,结核病诊断的主要辅助检测方法是特殊染色和qRT-PCR检测.在临床病理诊断中,部分结核病患者由于获取标本困难,穿刺标本微小,病理组织多被用于H...     

硬质酸石蜡包埋组织观察

本实验采用取10％甲醛、Bouin液分别固定新鲜兔的肾上腺和肺，常规脱水。取硬质酸按比例加入石蜡。置入恒温箱内溶解，然后放入彻底脱水组织，取消用二甲苯和石蜡完成对组织透明、浸蜡。用石蜡包埋、常规切片、染色。显微镜下观察；用甲醛固定的组织切片符合教学用片要求，而用Bouin液固定的则存在大量针尖大小的颗粒。     

微波二次固定提高肿瘤组织冰冻切片及苏木素—伊红染色质量的研究

冰冻切片质量的好坏直接关系到能否准确及时地作出病理诊断,以指导手术治疗方式,近年来,国内外学者对如何提高冻冻切片及染色质量做了大量工作,但仍然存在着组织结构被冰晶破坏,对比染色差,细胞核着色不清晰等缺点,我们应用微波加热固定液对组织块进行预固定,切片后再次固定的“二次固定技术”处理肿瘤组织,获得了比单纯脱脂固定切片更好的效果.1 材料与方法1.1 材料 选用我院1994～1995年外科送检需要急诊冰冻的乳腺、胃、肠、卵巢、甲状腺及脑等处的肿瘤组织,取材2cm×1.5cm×0.5cm数块.YWY781A型医用微波炉为浙江临安爱迪电子仪器厂产品,有8个功率选择开关,最大输出功率为500W.1.2 方法(1)将肿瘤组织分为不处理和处理组,处理组分别用生理盐水,10%甲醛和Bouin液在80℃恒温水浴固定5min,用微波2档(输出功率250W)固定1min.(2)将上述肿瘤组织用恒冷切片机切成5μm厚的冰冻切片数张,贴片稍于后分成不固定组和固定组,固定组分别用酒精-冰醋酸-甲醛固定液(AAF).改良的     

铺片在结膜杯状细胞研究中的应用

眼结膜杯状细胞对维持视觉功能起着十分重要的辅助作用。由于结膜受损 ,尤其是其中的杯状细胞减少或缺乏 ,将导致干眼症 ,甚至失明。目前 ,有关结膜杯状细胞的研究报道很少。为了解结膜杯状细胞的分布规律和正常生理变化 ,我们采用结膜切片、铺片和特殊染色方法 ,对结膜杯状细胞进行了初步研究。材料与方法 :标本取材于不同年龄的胚胎和成人尸体 ,处理如下 :1切片 :在球结膜和穹窿结膜的四个区域 (鼻、颞、上、下侧 )及上、下睑各取 1～ 3个组织块 ,分别用 1 0 %甲醛和 Carnoy固定液固定 ,常规石蜡包埋 ,切片厚 6 μm,分别用 HE、阿利新蓝…     

Tween-40软化剂在组织切片技术上的应用

在制备临床和科研组织标本时 ,我们常会遇到一种既韧又硬的组织 ,如病变的指甲和眼球中的晶状体。以前对该类组织没有相适宜的技术方法制备组织切片 ,病甲的切片只有放弃 ;全眼切片只能把晶状体从眼球中挑出后进行 ,破坏了眼球的完整结构。这对于该类组织的结构和病变的研究十分不利。笔者参考有关文献[1] ,配制了 10 %～ 2 0 %的Ｔｗｅｅｎ 4 0软化剂 ,可以很好的软化该类组织并制备石蜡组织切片 ,然后进行ＨＥ染色和免疫组织化学染色 ,效果十分满意。一、材料和方法1 指甲 :把病人剪下的指甲 (如灰指甲 )投入 4 %甲醛液中固定 2～ 3ｄ ,置…     

原位恶性黑素瘤细胞色素氧化酶(CYO)组织化学方法

方法１．１取材与制备临床活检恶性黑素瘤组织０．５×０．５ｃｍ,用１０％甲醛固定２４ｈ。常规石蜡包埋,连续切片,厚度６～７μｍ,粘附于涂有铬明矾盖玻片上,然后常规脱蜡,脱苯备用。１．２将连续切片随机分为两组,一组进行常规ＨＥ染色,另一组进行细胞色素氧化...     

简介微波照射对生物标本的固定法

早在1893年Blum就开始应用甲醛作显微镜标本的固定剂,之后已广泛应用于光镜和电镜,至今已有10O年的历史。无论是单一固定剂或是混合固定剂,其浸透组织的速度均较慢,大块组织内部因固定不透而产生自溶现象是常见的。固定的目的是在短时间内,以化学试剂(固定液)与生物细胞组织中的蛋白质和酶相结合,产生不溶性沉淀,以保持组织细胞的生态结构与酶的活性。微波照射(microwave irradiaion,MWI)发热原理就是使照射场中物体(标本)的极性分子产生高速运动,摩擦生热,从而使物品发热,MwI就是以此为特点应用于生物标本固定。Mayers(1970)最先应用     

抗原修复在免疫组化染色中的应用

免疫组织化学染色是利用抗原抗体特异性反应,对组织或细胞内的抗原物质进行定性和定位的标记方法。它对某些抗原物质的定位检测及某些疾病的临床病理诊断具有重要的指导作用。免疫组化染色对已知抗原的检测,其阳性程度不仅取决于抗体的效价及抗体的生物学活性,还取决于组织细胞中抗原决定簇的暴露程度及其稳定性。抗原决定簇是相应的抗体特异性结合的抗原部分。在临床病理诊断中常采用福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片标本,因固定液中所含的甲醛在固定过程中逐渐形成醛键或形成羟甲基,这些化学键可使蛋白与蛋白之间发生交联,从而封闭了抗原…     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…