妊娠期糖尿患者的尿液代谢组学研究

目的应用代谢组学研究方法,对妊娠期糖尿病(GDM)患者的尿液代谢物进行差异性筛选,鉴定妊娠期糖尿病的生物标志物。方法采用超高效液相色谱-质谱联用技术对15例妊娠期糖尿患者与15例正常孕妇的尿液进行研究,分析GDM患者的尿液代谢的改变。结果多元统计分析的结果发现,妊娠期糖尿患者的尿液代谢与正常孕妇差异明显,尿液中发现并鉴定出17个差异代谢物及相应的代谢通路,它们分别涉及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢,组氨酸代谢,色氨酸代谢,糖酵解和糖质新生等多个代谢通路。结论这些标志物的发现为深入理解GDM患者发病机制提供理论依据,液相色谱-质谱联用结合多变量分析的尿液代谢组学研究技术在产科疾病的早期诊断以及疾病机制研究中展现了巨大的潜在价值。     

代谢组学检测方法及其在中医药系统的应用

代谢组学是对生物体内代谢物进行定量分析,寻找代谢物与机体生理、病理变化关系的研究模式,是系统生物学的主要组成部分,它能更好地了解生物体中各种复杂体系的相互作用及生物系统对外界的响应,代谢组学的检测技术有核磁共振、气相色谱、高效液相色谱、气质联用、液质联用等。中医药研究在长期实践中积累了深厚的科学内涵,将代谢组学检测技术与中医药研究有机结合,使得代谢组学在中医药研究中发挥巨大潜力,代谢组学能在继承和发扬中医药优势和特色的基础上,研究生物体代谢规律和疾病发病本质,并阐明中药在体内作用环节和药物作用机制。     

医学检验中液相色谱-串联质谱的应用

质谱技术是近年来发展较为迅速的生物分析技术之一,已不再只是有经验的质谱学家才可以使用的工具。随着液质联用技术的迅速发展,特别是液相色谱-串联质谱(liquidchromatography-tandem mass spectrometry,LC-TMS)技术的出现,极大地推动了该技术在临床检验中的应用。1质谱(mass     

糖代谢异常人群血清代谢组学研究

目的通过代谢组学技术分析糖代谢异常人群的血清代谢产物,探讨其可能的代谢机制。方法病例对照研究。口服糖耐量试验正常(NGT)组45例,糖耐量受损(IGT)组43例,2型糖尿病(T2DM)组40例,用超高效液相色谱与质谱联用(UPLC-MS)的代谢组学研究平台筛选血清特征代谢物,用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果构建了主成分分析模型(R2X=45.2%,Q2=17.6%)和正交偏最小二乘聚类分析模型(R2X=49.4%,R2Y=79.2%,Q2=72.7%),并鉴定出7个特征性代谢物质。其中,溶血磷脂酰胆碱类物质在IGT与T2DM组间差异无统计学意义(P0.05),但均低于NGT组(P0.05);甘氨酸、赖氨酸和反式肉桂酸在NGT组、IGT组和T2DM组间差异均有统计学意义(P0.05),且依次下降。结论用代谢组学技术筛选出糖代谢异常人群的特征性代谢物质,可作为潜在的反映疾病状态的标志物在临床作进一步研究。     

基于GC-MS的慢性髓系白血病代谢轮廓分析

目的:应用基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学方法对慢性髓系白血病(CML)患者血浆进行代谢轮廓分析,寻找与疾病相关的潜在标志物,并初步探讨其涉及的相关代谢通路。方法:选取2015年2月至2015年4月在苏州大学附属第一医院初次确诊的26例CML患者,及26例同期异基因造血干细胞供者(健康对照),另取26例经过一代酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后获得最佳疗效的CML患者(治疗后对照)。应用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)方法对三组血浆样本进行代谢物无靶标检测,采集代谢物指纹图谱,结合模式识别分析方法及t检验筛选差异代谢物,通过受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析,评价差异代谢物临床效能,并进行Met PA代谢通路分析。结果:健康人及初诊CML患者血浆代谢表型明显不同。与健康对照组比较,CML组有6个血浆代谢物表现出差异,肉豆蔻酸、甘油丰度均较健康对照组低,而肌醇、半乳糖、乳酸、甘氨酸丰度均较健康对照组高(VIP1,P0.05,AUC0.7),经过TKI药物治疗后获得最佳疗效的CML患者上述差异血浆代谢物均有向正常人水平恢复的趋势。以上CML患者血浆代谢紊乱通路主要与半乳糖代谢、丙酮酸代谢、甘油酯代谢、甘氨酸丝氨酸苏氨酸代谢相关(影响值0.10)。结论:CML患者血浆中代谢物水平出现显著变化,代谢组学结合模式识别分析方法可能成为CML辅助诊断的新方法。     

异位妊娠特征性代谢组学的研究

目的:采用超高效液相色谱/飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)联用技术,探索异位妊娠的特征性代谢物,为建立异位妊娠特征性代谢物组诊断模型提供依据,以期早期诊断异位妊娠。方法:本研究初步检测了9例异位妊娠,15例流产及20例正常妊娠患者的血清标本。利用UPLC-Q/TOF MS联用分析技术,比较正常妊娠、流产、异位妊娠的血液全组分代谢组学差异,用SIMCA-P11.0软件进行主成分分析和偏最小二乘法-显著性分析方法对各组代谢指纹数据进行分析,筛选出异位妊娠可能的特异性代谢物。结果:将异位妊娠和正常妊娠,异位妊娠和流产进行疾病聚类分析,发现了13个有可能成为异位妊娠的特征性代谢产物。结论:通过比对异位妊娠与宫内妊娠(包括正常宫内妊娠及宫内妊娠流产)的代谢差异,发现其可能的特征性代谢产物,对于探索异位妊娠的早期诊断有重要意义。     

液相色谱-串联质谱技术的临床应用进展

液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)与免疫学方法相比具有特异性高、灵敏度高、多组分检测能力等方面的优势,已经成为临床检验领域重要的新技术之一。目前LC-MS/MS主要在激素检测、新生儿筛查、治疗药物监测、维生素D代谢物检测、蛋白质与多肽定量等项目应用比较成熟。虽然LC-MS/MS技术凭借其独特的优势,已经在临床检验领域占得一席之地,但也存在自动化及标准化程度低、仪器操作复杂等不足。自动化、标准化、蛋白质定量、高分辨质谱等将是今后LC-MS/MS在临检应用的主要发展方向。     

预测急性心肌梗死患者转归的血清代谢物谱研究

目的采用液-质联用代谢组学研究平台寻找能在急性心肌梗死(AMI)患者入院时即预测患者转归的特异性代谢物。方法运用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)代谢组学研究平台分析48例心绞痛患者、24例AMI好转者、24例AMI死亡者及48名体检健康者(正常对照组)代谢物数据,对代谢轮廓数据的变异性进行分析,构建疾病区分模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估特征代谢物的临床诊断效能。结果成功构建了"正常对照组-心绞痛组-AMI好转组-AMI死亡组"的主成分分析(PCA)模型(R2X=40.2%,Q2=13.9%)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型(R2X=79.0%,R2Y=83.2%,Q2=65.0%)。验证结果显示模型的预测准确度达100%。筛选并鉴定出10种可用于AMI预后判断的代谢物离子,其中4-羟基-6-二十二烷酮、N-乙酰-白三烯、溶血磷脂酰胆碱(LPC)[18:2(9Z,12Z)]、LPC(18:0)、LPC(P-16:0)、LPC[P-18:1(9Z)]、LPC[20:1(11Z)]、LPC[20:2(11Z,14Z)]在AMI死亡患者的血清中水平较低,L-苏氨酸、3-甲基-2-丁烯-1-硫醇水平较高,与AMI好转患者比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论采用代谢组学分析方法找到的特征代谢物具有很好的预测AMI患者预后的能力,可作为潜在的疾病转归标志物进一步研究。     

乳腺癌血清蛋白质组与尿代谢物组协同分析研究

目的 研究血清蛋白质组和尿代谢物组协同分析乳腺癌诊断方法。方法 用双向电泳、高效液相色谱和液质联用技术对7份正常人与14份乳腺癌患者血清蛋白质组和尿代谢物组进行分析，从中寻找差异蛋白和代谢组模式差异。结果 与正常人相比，乳腺癌患者血清中谷胱甘肽S-转移酶M5呈高表达状态，尿中乳清酸核苷、1-甲酰化腺苷、S-腺苷-L-蛋氨酸及N^2-甲酰化鸟苷等4种核苷代谢物组成模式异常。结论 乳腺癌患者体液内化学物质与正常人相比具有特异性模式差异。经肿瘤蛋白质组与代谢物组协同研究，有望建立肿瘤早期诊断新方法，进行肿瘤发病机理研究。     

液相色谱串联质谱技术平台在临床代谢组学研究中的应用

代谢组学是研究生物体内源性代谢物质的整体及其随内因和外因变化的科学分支,是系统生物学的一个重要组成部分.代谢组学是继基因组学、蛋白组学之后又一热点学科.本文着重介绍液相串联质谱和其统计分析软件在代谢组学中的应用,和目前临床生物标志物发现上取得的成果.     

液相色谱串联质谱法分析激素代谢谱在肾上腺疾病诊断中的应用进展

<正>大气压离子化技术在20世纪80年代被科学家首次发明,它的出现进一步推动了液相色谱和质谱联用技术的迅速发展^[1]。近年来随着液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术的不断进步,其被应用于食品、医药、化工、环境等各行各业,特别是在临床检验诊断方面,其发展的速度尤为迅猛^[2],已逐渐由科研应用转变为用于临床检测和辅助诊断,为精准医疗提供服务。自2010年以来,在内分泌领域涉及LC-MS/MS技术的临床研究文献每年增加超过100篇,     

基于质谱技术对森林脑炎患者血清代谢组学的研究

目的 利用代谢组学技术对森林脑炎致病机制进行可视化分析,寻找与疾病发生发展相关的生物标志物.方法 利用高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术,对59例森林脑炎患者与39例健康人群进行对比分析,结合多元统计分析方法 进行标志物筛选.结果 共筛选得到144种差异代谢物,通过代谢通路富集分析发现,差...     

液相色谱-质谱联用技术及其在医院药学中的应用

液相色谱-质谱联用 （liquid chromatography -mass spec- trometry, LC-MS）技术是当代最强有力的分离和鉴定分析系统之一。近年来,LC-MS技术在医院药学领域得到了广泛应用,本文就LC—MS技术的特点及其在医院药学工作中的应用作一简要综述。     

液相色谱串联质谱在检验医学中的应用

尽管色谱和质谱技术已经成为生物医学中的重要技术,但是其在临床实验室中的应用仍然比较少,一般只在少数专业实验室中进行。这是因为与现在普遍应用的临床化学和免疫学分析方法相比,这些技术要求非常熟练的操作,而且经常会出现复杂的故障。随着液相色谱串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-TMS)技术的出现,该技术在临床检验医学工作中的应用不断扩展。1液相色谱—质谱(liquid chrematography-mass spectrometry,LC-MS)70年代后期及80年代早期HPLC技术的发展,推动了质谱技术的发展。然而,LC-MS的临床应用仍然…     

基于UPLC-MS/MS的去白细胞的悬浮红细胞不同储存阶段代谢特征研究

目的:采用代谢组学的研究方法,分析红细胞在MAP保存液中不同储存阶段的代谢特征,探索红细胞在MAP保存液中的代谢标志物。方法:运用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测10袋MAP去白细胞的悬浮红细胞在制备当天(d 0)、储存第14 d(d 14)、储存期末(d 35)等3个不同储存阶段红细胞内和上清液中的代谢物变化情况,采用主成分分析法(PCA)分析不同储存时间的红细胞差异性特征离子和代谢标志物。结果:红细胞内和上清液中提取物在存储初期、中期和末期3个储存阶段检测到的特征离子数能够得到明显区分。乳酸、烟碱胺、葡萄糖、5-羟脯氨酸和苹果酸等5种红细胞代谢相关物质在3个储存阶段水平差异均有统计学意义,可以作为红细胞储存期内的代谢标志物。结论:UPLC-MS/MS方法结合多变量数据统计分析可用于红细胞代谢特征研究,红细胞在不同储存阶段的差异性代谢物质可作为红细胞储存期质量检测标志物,本研究结果为研究红细胞储存期质量变化提供依据。     

非靶向代谢组学方法探究母体羊水中先天性心脏病差异代谢物及相关代谢通路

摘要:目的?通过非靶向代谢组学方法探究先天性心脏病(congenital heart disease，CHD)差异代谢物和代谢通路。方法?采用病例-对照研究，以78例CHD胎儿母体羊水样本作为CHD组，126例非CHD胎儿母体羊水样本作为对照组。应用气相色谱飞行时间质谱(GC-TOF-MS)检测2组代谢物。采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行建模，通过多维和单维统计分析寻找差异代谢物。KEGG数据库进行代谢通路富集分析，R语言绘制ROC曲线。结果?CHD组与对照组间存在明显分离趋势，2组间共发现43种差异表达的代谢物(P<0.05)，主要涉及谷氨酸和精氨酸等多条代谢通路。苏氨酸和核糖醇在室间隔缺损(VSD)及法洛四联症(TOF)之间存在差异(P值分别为0.018和0.037)。苯丙氨酸检测VSD敏感性最高(100%)，谷氨酸/焦谷氨酸比值检测VSD特异性最高(97.5%)；尿酸和天冬酰胺检测TOF敏感性最高(100%)，谷氨酸/焦谷氨酸比值检测TOF特异性最高(82.5%)。结论?羊水代谢组学分析证实CHD存在多种代谢物的变化，且多条代谢通路被扰动。     

重视液相色谱-质谱临床检测中分析批的规范化设置

液相色谱-质谱（LC-MS）技术在临床精准化医疗中发挥着日趋重要的作用。医学检验人员应重视LC-MS技术在质量管理中的普适性和特殊性。美国临床实验室标准协会CLSI发布的C62-A指南中“额外质量保证”环节—分析批设置值得我们借鉴,应建立适应我国临床医学检验实验室的分析批规范化设置的具体方案,保证LC-MS临床应用检测...     

液相色谱串联质谱技术在载脂蛋白E室间质量评价中的应用

目的探讨液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)在载脂蛋白E(apo E)室间质量评价中的应用。方法分别将5份混合人血清样品冷链运送到76家实验室,用免疫比浊法(ITA)进行单次检测。以同位素标记精氨酸的肽段为内标,对标本进行变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理,液相色谱部分采用SB-C18色谱柱分离,质谱部分采用正离子模式和多反应监测定量。JMP13.0软件分析不同方法分组所对应的相对偏倚。结果对于所有样品,ITA检测apo E的方法组内不精密度在1.7%至20.4%之间。总不精密度在8%左右(s B~s E样品)。5个样品相对偏倚的均值分别是(按照样品浓度由低到高排列):-34.2%、-9.4%、-9.8%、-2.7%和-2.1%。高浓度样品比低浓度样品更接近LC-MS/MS检测结果。结论 LC-MS/MS检测apo E可评价免疫法的准确性,为临床应用提供帮助。     

亚低温对心脏骤停后大鼠心肌保护的代谢组学研究

目的基于超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术寻找CA后大鼠心肌损伤的潜在生物标志物,初步揭示亚低温对心肌保护作用的机制。方法建立窒息性CA模型,将20只自主循环恢复后的SD大鼠随机分为常温组、亚低温组,ROSC后24h收集心肌组织样本进行代谢组学检测,采用SIMCA-P 14.1和MetaboAnalyst 4.0对预处理后的数据进行代谢轮廓分析,筛选差异代谢物,将内源性代谢物进行代谢通路分析。结果成功制作了大鼠窒息性CA模型,心肌HE染色显示,常温组大鼠心肌结构紊乱,心肌纤维断裂,间质充血,细胞核染色不均匀,亚低温治疗后改善了心肌损伤程度;代谢组学检测结果显示,常温组和亚低温组心肌代谢指纹不同,共筛选出20种差异代谢物,代谢通路分析提示嘌呤代谢、缬氨酸/亮氨酸/异亮氨酸代谢在亚低温干预后显著改变。结论亚低温治疗在一定程度上减轻CA后心肌损伤程度,嘌呤代谢和氨基酸代谢参与了亚低温对心肌的保护。     

液相色谱与串联质谱技术在临床上的应用

液相色谱串联质谱（LC—MS／MS）是一种高效能、高选择性、高灵敏度的分离分析方法。LC-MS／MS结合了色谱和质谱二者的优点，使样本的分离、定性和定量成为连续的过程。该技术与传统检测方法相比具有样品用量少、分析速度快、检测范围广等优点。LC-MS／MS已广泛应用于新生儿遗传疾病筛查、激素水平检测、药物分析及微生物鉴定等各个方面。现就液相色谱串联质谱在临床上的应用作一综述。