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1.
目的采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法血浆样品用乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗后进行分析。使用Agilent C8(75 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱。流动相:A泵:5 mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH值至7.5),B泵:乙腈。线性梯度洗脱,流速0.4 mL/min。采用电喷雾离子源,多反应离子监测。用于定量分析的离子对二甲双胍为130.2/71.1,内标吗啉胍为172.2/60.2。结果线性范围为50~2 000 ng/mL,最低定量限为50 ng/mL,预处理回收率为81.7%~98.0%,二甲双胍的基质效应<9.97%,日内和日间相对标准偏差均<5.2%。结论液相色谱-串联质谱法快速、简便、灵敏度高,是一种适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度研究的方法。  相似文献   

2.
目的建立测定人血浆百草枯浓度的高效液相色谱-串联质谱法并评价。方法用甲醇蛋白质沉淀法对血浆样品预处理后,以乙腈-水(含200 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸)为流动相梯度进样,流速为0.4 mL/min。通过色谱柱(Waters XBridge BEH HILIC,2.5μm,2.1 mm×100 mm)分离样品。以ESI正离子模式、多反应离子监测(MRM)模式监测百草枯(m/z 186.1→171.1作为定量离子对)。用该方法检测临床患者血浆百草枯浓度,用ROC曲线评价血浆百草枯浓度和百草枯中毒严重指数(SIPP)对临床结局的判断价值。结果血浆百草枯浓度在50~10 000 ng/mL时,线性关系良好(R~2=0.997),最低定量下限为50 ng/mL。低(100 ng/mL)、中(2 000 ng/mL)、高(8 000 ng/mL)3个浓度水平质控品的不精密度均符合要求,且无基质效应。处理后样品室温放置6 h内稳定,样本反复冻融3次对结果无影响。31例中毒患者SIPP为17.76(0.30~90.91)h·mg/L,死亡组SIPP高于存活组(P0.05)。SIPP的ROC曲线下面积为0.889,最佳临床临界值为11.679 h·mg/L。结论本法灵敏、准确、快速、特异性好,适用于临床检测百草枯中毒患者。  相似文献   

3.
目的?建立可靠的测定人血浆中异烟肼(INH)和利福平(RFP)浓度的高效液相色谱-串联质谱法,用于研究健康男性体内的药物代谢动力学特征。方法?以稳定同位素作为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白质处理后检测。INH采用Atlantis HILIC(50 mm×2.1 mm,3 μm)色谱柱,以水和5 mmol/L甲酸铵90%乙腈水溶液(均含0.01%甲酸)为流动相;RFP 采用Syncronis C18(50 mm×2.1 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈和50%乙腈水溶液为流动相;二者均为梯度洗脱。使用电喷雾离子源,正离子多反应监测方式进行检测。结果?INH、RFP 分别在5~5 000 ng/mL、10~10 000 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.99)。方法专一性强,精密度以变异系数表示,均小于7%,无明显基质效应。结论?本方法操作简便,特异性高,可用于人体药物代谢动力学及治疗药物监测等研究。  相似文献   

4.
高效液相色谱法测定兔眼房水中环孢霉素A的含量   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的建立房水中环孢霉素A的高效液相色谱测定方法,并测定兔用药后眼房水中的药物浓度。方法采用WatersC18色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-水(66∶25∶20),流速为0.8ml/min,在55℃柱温下,于214nm处检测。结果本方法CsA线性范围10~150ng/ml,最低检测浓度10ng/ml,回收率99.81%,日间和日内RSD均小于8%。结论本法具有简便、灵敏、快速、稳定性好、柱温低的特点,适合用于眼房水中CsA浓度监测。  相似文献   

5.
目的建立高效液相色谱-串联质谱法快速定量检测人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的方法。方法氯吡格雷样本用乙腈沉淀蛋白后,选用Eclipse XDB-C18柱(150.0 mm×4.6 mm×5.0μm),以乙腈-1mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱。氯吡格雷羧酸代谢物样本用乙腈沉淀蛋白后,选用Kromasil-C18色谱柱(50.0mm×4.6mm×5.0μm),以乙腈-1 mmol/L乙酸铵溶液(60∶40v/v)为流动相等度洗脱。选用3200QTrap型液相色谱-串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果氯吡格雷线性范围为:0.01~5.00ng/mL,定量下限为0.01ng/mL。氯吡格雷羧酸代谢物线性范围为:10.0~5 000ng/mL,定量下限为10.0ng/mL。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异系数均小于15%,相对偏差-2.00%~2.65%,稳定性较好。结论本研究建立了快速、灵敏、专属性强、重复性好的方法,适用于临床药代动力学和生物等效性研究。  相似文献   

6.
目的建立一种简便快速高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)的方法用于测定人血浆和尿液中奈诺沙星药物浓度。方法色谱柱为Waters Symmetry RP1 8柱(50mm×2.1 mmm,5μm),以加替沙星为内标,血浆和尿液样品测定采用0.1%甲酸乙腈混合溶液为流动相,比例分别为82:1 8和85:1 5,流速均为0.2 mL/min。采用蛋白沉淀法处理血浆样品,以液液萃取法清除尿液样品中杂质。ESI源正离子选择性反应临测(SRM),奈诺沙星检测通道:m/z 372.4→m/z354.1,内标检测通道:m/z376.1→m/z 332.2。结果本方法测定血浆和尿液中的奈诺沙星的线性范围均为5~100ng/mL,最低检测浓度均为5ng/mL血浆和尿液的奈诺沙星提取回收率分别为(98.49±4.69)%和(84.92±6.81)%,且血浆和尿液的RSD)分别小于或等于4.31%和9.76%。奈诺沙星血浆样品的方法日内、日间准确度分别为(99.27~103.75)%和(100.40~106.36)%;而尿液样品的方法日内、日间准确度依次为(103.52~11 5.94)%和(9 9.50~1 10.96)%,且基质效应、精密度、稳定性等均通过方法学验证。并已用于该药的人体药动学研究中药物浓度的测定。结论本方法操作简便、迅速,特异性强,灵敏度高,准确性好,符合奈诺沙星人体药物动力学研究中血尿样测定的方法学要求。  相似文献   

7.
目的建立测定慢性粒细胞白血病(CML)患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于临床血药浓度监测。方法血浆经甲醇沉淀蛋白处理,采用内标法定量。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇(0.1%甲酸)和水(0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵),梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,多反应监测模式(MRM)扫描,监测离子对:伊马替尼m/z 494.3→394.1,达沙替尼m/z 488→401,尼洛替尼m/z 530.2→289.2。结果伊马替尼浓度在50~2500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.001 17 X+0.006 17(r=0.999 5);达沙替尼浓度在1~250ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.013 7 X+0.000 435(r=0.999 2);尼洛替尼浓度在50~2 500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=1.1e+0.03 X+1.05e+0.04(r=0.998 5)。日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,相对回收率在90.0%~110.0%。结论该方法前处理简单,检测的特异性及灵敏度高,可适用于CML患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼血药浓度的快速、准确测定。  相似文献   

8.
目的建立高效液相色谱法测定人体内阿奇霉素血药浓度的方法。方法采用高效液相色谱紫外检测-质谱联用法,色谱柱CLC-CN分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:0.1 mol/L磷酸二氢钠-甲醇-乙腈(85∶7∶8,pH调节至6.0),流速1 ml/min,控制柱温为40℃,检测波长为210 nm,定量方法为峰面积外标法。结果阿奇霉素血药浓度线性范围在0.1~4.0μg/ml,r=0.9998,日内精密度1.25%~4.41%,日间精密度2.79%~6.83%。结论高效液相色谱法测定人体内阿奇霉素血药浓度简单快捷、结果准确、灵敏度高、重复性好,值得推广。  相似文献   

9.
目的建立高效、准确的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中5-羟色胺(5-HT)的方法,并应用于临床及科研的生物样本检测。方法该方法采用奥卡西平作为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,用初始流动相稀释后经Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱进行分离,流动相为0.2%甲酸水-乙腈,梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),正离子、多反应监测模式(MRM)进行监测,用于定量分析的离子为质荷比(m/z)177→160。结果 5-HT在10~800ng/mL范围内线性良好(r0.999),定量下限为10.0ng/mL。待测物日内、日间相对标准偏差均小于15%。符合生物样品分析要求。结论本方法适合临床及科研的生物样本中5-HT的快速检测。  相似文献   

10.
目的建立测定血浆泊沙康唑水平的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床治疗药物监测。方法 HPLC色谱柱为Ultimate XB-C18。柱温50℃,流速0.8mL/min,流动相为含0.1%甲酸,以及2mmol/L乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测泊沙康唑m/z 701.5~683.4作为定量离子,内标泊沙康唑-d4m/z 705.4~687.5作为定量离子。结果泊沙康唑水平在0.1~10.0μg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.993 0),日内及日间精密度5%,平均回收率为90%~103%。结论该方法简便、准确、快速,适用于泊沙康唑的血药浓度测定。  相似文献   

11.
目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血清万古霉素浓度的方法。方法人血清样品用乙腈蛋白沉淀后,通过色谱柱Acquity UPLC~?BEH C18(1.7 μm IVD 2.1 mm×50.0 mm),以流动相(A:含0.1%甲酸的水溶液,B:含0.1%甲酸的甲醇溶液)梯度洗脱,用电喷雾离子源,正离子方式,扫描方式为多反应监测(MRM),用于监测的离子反应为m/z 725.6→144.1(万古霉素)和m/z 1 145.0→100.2(万古霉素杂质C)。考察该方法的专属性、稳定性、精密度与回收率、标准曲线与定量下限、携带污染。结果万古霉素在1.5~60.0 mg/L内线性关系良好(r~2=0.999 2),标准曲线方程为Y=2.12×10~(-1)X+2.29×10~(-3),日内精密度和日间精密度均小于10%,高、中、低3个浓度质控的回收率分别为100.30%、100.28%、95.00%,稳定性均良好。结论该方法专属性好,灵敏度高,操作便捷,可用于人血清中万古霉素血药浓度的测定。  相似文献   

12.
采用通过式固相萃取技术,建立动物性食品中氟虫腈及其代谢物的同位素内标-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。样品采用含1%(体积分数)甲酸的乙腈提取,加入同位素内标,PRiME HLB柱净化,以BEH C18为分离柱,用甲醇-1 mmoL乙酸铵(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,在负离子多反应监测模式下内标法定量。结果表明氟虫腈及其及其代谢物在0.05~20μg/L浓度范围内线性呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999,方法的检出限和定量限分别为0.2μg/Kg和0.7μg/Kg。在鸡蛋和鸡肉中氟虫腈及其代谢物的回收率为3.3%~7.8%,相对标准偏差(RSD)为3.3%~7.8%。该方法快速、灵敏度高、准确度好,有效消除基质效应,适合动物性食品中氟虫腈及其代谢物的同时检测。  相似文献   

13.
目的建立测定骨髓移植患者全血他克莫司(FK506)血药浓度的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法,探索HPLC-MS/MS法与羧基金属免疫分析(CMIA)法和化学发光微粒免疫(Elecsys)法在FK506血药浓度检测中的关系,为临床合理选用FK506血药浓度监测方法提供可靠依据。方法采用子囊霉素作内标,全血样品经合内标甲醇沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C_(18),柱温65℃,流动相为含0.1 g/dl甲酸和2 mmol/IL乙酸铵的水和含0.1ml/dl甲酸的甲醇,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测FK506 m/z 821.5~768.5,子囊霉素m/z809.4~756.4。选取部分骨髓移植患者全血FK506样本,分别用HPLC-MS/MS法,CMIA法和Elecsys法进行检测,对各种检测方法所检测的FK506浓度值进行比较。结果建立的HPLC-MS/MS法检测FK506血药浓度在0.5~50 ng/ml范围内线性关系良好,Y=0.228X-0.003 08(r=0.999 0)。HPLC-MS/MS法与CMIA法和Elecsys法检测FK506血药浓度结果相关性较好,差异无统计学意义。结论建立了检测FK506血药浓度的HPLC-MS/MS法,该法可用于临床骨髓移植患者全血FK506浓度的监测。  相似文献   

14.
目的 建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法 血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]+为:那格列奈318.2,代谢物M1 334.1,非那西丁180.1。结果 标准曲线线性范围为0.0625~8μg/mL那格列奈,M1为0.0313~4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论 本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。  相似文献   

15.
目的 建立同时测定N6-甲基腺嘌呤核苷(m6A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m6A甲基化水平。方法 HepG2和L02细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C18柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m6A和A的浓度,计算细胞m6A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m6A和A的浓度分别在0.15~50.00 ng/ml和1.50~500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %~101.10 %,回收率为91.46 %~97.60 %,基质效应为90.26 %~99.27 %,样品稳定性良好。HepG2和L02细胞m6A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m6A甲基化水平。  相似文献   

16.
目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI~+)(m/z:271.5204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1~20 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 2),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N10)。异欧前胡素浓度在0.05~10 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 9),定量下限0.05 ng/mL(S/N10),基质效应为94.89%~110.70%,方法学回收率为94.3%~104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别4.91%、5.26%,期间CV分别16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。  相似文献   

17.
目的建立测定血液病患者血浆Venetoclax浓度的HPLC-MS/MS法。方法患者血浆经甲醇(含内标Venetoclax-d8)沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate@XB-C18(4.6×50 mm,5μm),柱温60℃。流动相为含0.1%甲酸和2 mmol·L-1乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,流速0.7 m L·min-1,梯度洗脱。Venetoclax与Venetoclax-d8质谱检测方式均为电喷雾正离子模式,多反应监测(MRM),同时监测Venetoclax m/z 868.5~321.7(定量离子),Venetoclax m/z 868.5~177.6(定性离子)及Venetoclax-d8m/z 876.6~329.4(定量离子)。以Venetoclax和Venetoclax-d8峰面积比为定量依据,计算血浆Venetoclax浓度。并对该方法进行性能评价。结果Venetoclax在10~2 000 ng·mL-1范围内线性良好,三批回归方程进行线性拟合后的标准曲线方程为Y=0.001 87 X+0.003 15,r=0.996 7;携带污染、重复性、实验室内精密度、回收率、基质效应和稳定性均符合性能验证要求。结论所建立的HPLC-MS/MS方法可准确、灵敏、快速地检测血液病患者血浆Venetoclax浓度,可应用于Venetoclax治疗药物监测及其体内药动学分析。  相似文献   

18.
目的建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测血浆百草枯浓度的方法。方法选用Phenomenex Kinetex 2.6μm HILIC色谱柱(100.0 mm×2.1 mm),以1%甲酸水溶液(含250 mmol/L甲酸铵)为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,进样量为10μL,柱温为40℃;使用电喷雾电离(ESI)源,采用正离子条件下多离子反应监测扫描模式。百草枯和内标乙基百草枯的离子对分别为质/荷比(m/z)92.7→171.0和m/z 107.0→185.1。对建立的HPLC-MS/MS进行方法学评价(线性范围、定量下限、准确度、精密度、选择性和基质效应、稳定性),并检测75例百草枯急性中毒患者的血浆百草枯浓度,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆百草枯浓度对临床结局的判断价值。结果 HPLC-MS/MS检测百草枯浓度在54.28~13 190.00 ng/mL范围内具有良好线性关系(Y=0.000 1X+0.011 6,r2=0.998 3)。定量下限处的批内平均准确度为96.31%~120.04%,批间准确度为104.43%;高、中、低浓度批内和批间检测值与理论值的偏差均在±15%范围内;高、中、低浓度及定量下限处的批内和批间相对标准偏差(RSD)均15%。随机选择6份空白基质考察方法的选择性和基质效应,结果表明百草枯出峰位置无干扰,方法选择性好;高、低浓度处经内标归一化的基质因子的变异系数均15%,基质效应符合要求。样本室温放置可稳定1 d,2~8℃放置可稳定1周,-80℃冻存可稳定1个月,反复冻融处理3次对结果无影响。75例百草枯中毒患者的血浆百草枯浓度为2 820(0~22 200)ng/mL,死亡组血浆百草枯浓度明显高于存活组(P0.05)。ROC曲线分析显示血浆百草枯浓度判断临床结局的ROC曲线下面积为0.855,最佳临界值为2 431 ng/mL。结论建立的HPLC-MS/MS方法可用于临床血浆百草枯浓度的常规检测。  相似文献   

19.
目的 基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术建立快速检测血液、尿液中6种蘑菇毒素的分析方法,并将其应用于临床实际中毒案例。方法 将0.1 mL血液、尿液经蛋白沉淀、氮吹复溶、超声过滤后用ACQUITY UPLC HSS T3液相色谱柱分离,质谱检测采用多反应监测模式(MRM)。结果 该分析方法经过验证,符合方法学验证要求,其定量结果准确可靠,并于9例患者血液和(或)尿液样品中检出目标毒素,血液样品中浓度为1.12~5.63 ng/mL,尿液样品中浓度为1.01~9.27 ng/mL,检出物多为γ-鹅膏毒肽(γ-AMA)。新鲜蘑菇样品中检出目标物浓度为1.48~41.54 ng/mg,两份新苦粉孢牛肝菌样品中均检出羧基二羟基鬼笔毒肽(PCD)16.51~41.54 ng/mg。结论 本研究中建立的LC-MS/MS方法前处理过程简单快速,具有较高的灵敏度,能同时检测多种蘑菇毒素类化合物,可为临床毒蕈中毒快速诊断提供策略和参考。  相似文献   

20.
目的 建立液相色谱串联质谱法定量分析血清中脂溶性维生素的方法,并进行性能分析评价以及初步临床应用。方法 采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素含量,并检测2022年11月至2023年11月在苏州大学附属第一医院产科门诊产检的1 113例孕妇血清中的脂溶性维生素。参照《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》进行血清中脂溶性维生素高效液相色谱串联质谱检测方法的方法学验证。结果 液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素,包括维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3、维生素K1,线性范围分别为40~4 000 ng/mL、0.5~50μg/mL、2~200 ng/mL、5~250 ng/mL、0.1~10 ng/mL,检出限分别为2.50 ng/mL、0.10 ng/mL、0.40 ng/mL、1.00 ng/mL、0.02 ng/mL,定量下限分别为10.00 ng/mL、0.50 ng/mL、1.00 ng/mL、5.00 ng/mL、0.10 ng/mL,批内变异系数(CV)和批间CV均小于15%,回收率分别为91.25%~107.18%、90.00%~105.51%...  相似文献   

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