宁波地区人群肠道菌群的特点及对结直肠癌与癌前病变发生和发展的影响

目的 探讨肠道细菌在健康人类、大肠肿瘤患者和大肠息肉患者之间的差异,分析微生物对大肠息肉及大肠肿瘤的发生、进展的影响。 方法 样本来源于常规做肠镜检查患者的粪便以及术前愿意参加实验的患者,分为3大组:肠镜检查健康组、息肉组和大肠腺癌组,同时以高血压为独立的考察因素,健康组和息肉组又各分为高血压和非高血压2个亚组,样本经过DNA提取后,16SrRNA基因全长扩增和V3、V4区PCR扩增,采用DGGE预评判提取DNA质量,采用高通量测序技术分析各样本中细菌的种类和丰度,并通过主成分分析探讨不同分组患者肠道细菌的多样性和群落结构差异。 结果 不同分组患者的肠道细菌具有较高的多样性,在获得的所有OTUs中,厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门分别占44.9%、28.4%、18.6%和5.5%,这4门的OTUs累计占97.4%。这些构成了大多数样本中的优势菌,但不同样本中优势细菌的组成有显著的区别。各分组的多样性指数统计分析发现,不同组之间的多样性指数差异不显著。健康人肠道细菌群落结构与肿瘤患者有着显著差异,结肠息肉患者的肠道细菌群落结构与健康人群的肠道细菌群落结构差异显著。健康组中非高血压和高血压组的肠道细菌群落结构差异无统计学意义,结肠息肉组中非高血压和高血压组的肠道细菌群落结构差异无统计学意义。 结论 肠道菌群的变化可能影响或导致结肠息肉和结肠肿瘤的发生、发展,观察肠道菌群的变化有助于研究结肠癌发展的微环境及机制,而高血压对健康人和肠道息肉患者的肠道菌群变化的无显著影响。      

产CTX型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌基因分析及耐药特征

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及相应耐药特征。方法 采用双纸片法检测ESBLs, PCR检测blaCTX-M及blaCTX-M-1、-2、-8、-9、25组基因,肉汤稀释法检测抗菌药物MIC值。结果 83株大肠埃希菌中,45株ESBLs表型确证实验阳性,PCR扩增结果显示44株blaCTX-M扩增阳性,其中12株单独检测出blaCTX-M-1组,29株单独检测出blaCTX-M-9组,3株同时具有blaCTX-M-1组和blaCTX-M-9组,未检测出blaCTX-M-2、-8、-25组。所有菌株对亚胺培南皆敏感,对头孢唑林、头孢噻肟、头孢曲松皆耐药。CTX-M-1组菌株对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率皆为91.6%(11/12),氨曲南耐药率为100%,左旋氧氟沙星、庆大霉素耐药率分别为100%和83.3%(10/12)。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟耐药率分别为44.8%(13/29)、41.4%(12/29),氨曲南耐药率为55.2%(16/29),左旋氧氟沙星耐药率为89.7%(26/29)、庆大霉素耐药率为58.6%(17/29)。CTX-M-1、-9两组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 产ESBLs大肠埃希菌基因型以blaCTX-M为主, blaCTX-M-9组在blaCTX-M基因中占优势。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南敏感性高于CTX-M-1组。     

细菌的抗生素耐药：作用靶点的修饰

抗生素作用靶点的改变是产生细菌耐药的共同机制。每一类抗生素都能找到显示耐药的临床菌株，而不管其作用机制如何。靶点的变化经常产生于存在选择性抗生素时细菌染色体上基因的自发突变。包括RNA聚合酶和DNA回旋酶的突变，分别产生对利福霉素和喹诺酮类的耐药。其他产生耐药的情况可能涉及耐药基因的转移。这些机制包括金黄色葡萄球菌中产生编码甲氧西林耐药的mecA基因和产生对糖肽类抗生素耐药的各种van基因。     

ICU耐药基因广谱β-内酰胺酶阳性细菌的监测与干预

目的对ICU耐药基因广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性细菌的分布进行监测和干预,从而降低患者感染的风险。方法采集ICU室内空气、医疗设备表面、室内环境表面以及医护人员手指上的样本,以ESBLs基因引物为模板,通过PCR快速检测方式,或抗生素纸片法对混合菌进行监测,同时比较消毒干预前后ESBLs阳性细菌的检出率。结果PCR快速检测方法对耐药基因ESBLs阳性细菌的检测灵敏度显著高于CLSI推荐的纸片法,ICU室内环境、医疗器械和医护人员手指表面分布有ESBLs基因的耐药菌,消毒后检出率显著降低。结论ICU室内空气、环境中各物体表面及医务人员手指表面均可检出耐药基因ESBLs,医护人员应该加强ICU的消毒和监测工作。     

细菌抗生素耐药性：耐药机制与控制策略

细菌对抗生素的耐药性尤其是多重药物耐药性已成为全球关注的医学与社会问题,严重地威胁着感染性疾病的治疗,如常见于ESKAPE病原菌（源于肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠道杆菌属6种（类）细菌的英文缩写）的高度多重抗生素耐药性。这些细菌包括＂超级细菌＂,因其本身基因结构的多样性和可移动性使其进化产生了多种耐药机制以对抗抗生素的作用。耐药细菌呈现的对多类不同化学结构抗生素的高度耐药性,使抗感染治疗的药物选择极其困难。耐药性基因可由细菌染色体或质粒携带,并编码介导产生抗生素灭活酶（如最近广为报道的属于金属β-内酰胺酶的NDM-1碳青霉烯酶）、改变或保护抗生素作用靶位、降低抗生素进入细菌胞内和（或）增强抗生素主动外排泵系统活性将药物排至胞外。目前研发用于临床的新型抗生素极为有限,促使重新研究优化现有抗生素。人类迫切需要同时采取多种有效措施控制抗生素耐药性,合理控制各类抗生素使用,以最大限度减少抗生素耐药性发生与传播,进而延长抗生素的有效时间,仍然是人类所面临的长期挑战。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况. 方法:用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其基因型;用微量液体稀释法做药敏实验. 结果:将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证,用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs (58.1%);而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株. PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 19株、SHV型8株、CTX-M型36株、OXA型11株. 结论:近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带多种耐药基因;亚胺培南仍为首选药物, 头孢哌酮/ 舒巴坦、哌拉西林/ 他唑巴坦为候选药物.     

幽门螺杆菌临床分离株多重耐药研究

目的探讨幽门螺杆菌（HP）临床分离株多重耐药特点。方法将不同患者胃镜活检标本进行HP菌株培养,经氯霉素进行诱导,筛选出多重耐药株,应用实时定量PCR检测菌株主动外排泵的结构基因,再进行基因敲出,测定基因敲出前后菌株对抗生素的敏感性。结果筛选出的多重耐药株具有相似的多重耐药性,6株多重耐药株外排泵基因水平显著高于敏感株,成功进行基因敲出后,对4种抗生素的敏感性明显增加。结论主动外排泵系统在HP多重耐药机制中起重要作用。     

多重耐药大肠埃希菌基因分型及其与耐药表型的关系

目的分析福州地区临床分离的多重耐药大肠埃希菌的基因型及其与细菌耐药表型的关系。方法收集临床分离的多重耐药大肠埃希菌88株,采用K—B法进行药敏试验。多重PCR法进行基因分型。结果多重PCR法可将大肠埃希菌分为4个基因型,其中检出D型42株,B2型17株,A型17株,B,型12株。4组基因型对阿米卡星、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和妥布霉素的耐药率差别有统计学意义（P〈O．05）。结论多重耐药大肠埃希菌对多种抗生素具有很高的耐药性。基因分型以致病性较强的B2型与D型为主,应采取相应措施预防院内感染。     

肠道菌群及耐药基因组与抗生素之间关系的研究进展

肠道菌群携带的基因被认为是人类的“第二基因组”,肠道菌群也是抗生素耐药基因（ARG）的储存库。肠道菌群组成和功能的紊乱与多种疾病有关。而抗生素的使用打破了肠道菌群原有的稳态,加剧了ARG的传播和扩散,增加了特异性ARG的丰度,对临床治疗造成不良影响。本文就肠道菌群及耐药基因组与抗生素之间的关系做一综述,并对未来研究方向进行展望,以期为肠道耐药基因组的研究提供新思路,同时为临床上合理使用抗生素提供理论依据。     

淋病奈瑟菌耐药性与耐药基因的研究进展

随着抗生素的广泛使用,淋病奈瑟菌对常用的抗生素产生了不同程度的耐药。现综述近年淋病奈瑟菌的耐药性及耐药基因的研究进展,包括:改变PBPs的胞内作用靶位,导致对青霉素类抗生素的耐药,gyrA基因、parC基因和norm基因的突变,导致对氟喹诺酮类抗生素的耐药,药物外排机制引起多重抗生素的通透性降低,teM-1基因和tetM基因编码的胞质蛋白抑制了四环素类药物对细菌的毒性作用,阿奇霉素和大观霉素耐药与作用靶位的改变等。     

下呼吸道肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌耐药特点及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率、基因型特点.方法收集下呼吸道标本中分离出的肺炎克雷伯菌,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并使用对CTX-M型ESBLs基因特异的引物,pCR扩增产酶菌的ESBLs基因.结果下呼吸道产ESBLs肺炎克雷伯菌占25%.ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌.35株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,16株携带CTX-M型基因.结论该院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率、耐药性高,CTX-M型基因的出现应引起临床医生的足够重视.     

CHANGES IN URINARY ISOLATES AND THEIR ANTIBIOTIC RESISTANCE PATTERN

A total of 338 urinary isolates were studied at AFMC, Pune during 1998 for species identification and antibiotic resistance. Out of 145 community isolates E coli were 67% followed by Staph aureus (11%). The hospital isolates of E coli and Proteus spp showed higher resistance to ampicillin (81% and 89% respectively) than to cefotaxime (23% and 22% respectively). K pneumoniae showed relatively higher resistance to cefotaxime i.e. 54% for community strains and 75% for hospital strains. Proteus spp showed higher resistance to fluoroquinolones i.e. 78% for norfloxacin and 82% for ofloxacin as compared to other coliforms and Pseudomonas aeruginosa. Among aminoglycosides bacterial resistance to amikacin is less than to commonly used netilmicin and gentamicin. Hospital isolates of K pneumoniae are 100% resistant to sulphamethoxazole and to trimethoprim. Susceptibility testing is emphasized as a must both for hospital and community isolates, but when empirical treatment is contemplated for community isolates nitrofurantoin, nalidixic acid, amikacin, cefotaxime, gentamicin and piperacillin are recommended as first line choices and for hospital isolates amikacin, cefotaxime and netilmicin are recommended until susceptibility report is available.     

头孢吡肟治疗社区获得性重症肺炎44例临床观察

目的 观察头孢吡肟治疗社区获得性重症肺炎的临床疗效及安全性评价.方法 将86例确诊社区获得性重症肺炎患者随机分为两组,在常规治疗基础上,治疗组44例,采用头孢吡肟(2 g静滴 1次/12 h);对照组42例,采用头孢噻肟(3 g 静滴 1次/8 h),两组疗程均为7～14 d.结果 头孢吡肟对G 球菌及G-杆菌感染均有良好的疗效,对部分耐第一、二、三代头孢菌素药物的菌株亦能起到较好的抗菌作用,头孢吡肟组治愈率86.4%,有效率93.2%,头孢噻肟组对部分耐药G 球菌及G-杆菌感染治疗效果差,治愈率64.3%,有效率76.2%,两组比较有显著性差异(P＜0.01).结论 头孢吡肟体外抗菌活性强于头孢噻肟,是一种安全、广谱、有效的经验性治疗重症社区获得性肺炎的抗生素.     

Screening of clinical, food, water and animal isolates of Escherichia coli for the presence of blaCTX-M extended spectrum beta-lactamase (ESBL) antibiotic resistance gene loci

A small study was carried out in order to examine the molecular presence of bla CTX-M gene phylogenetic groups in E. coli (n=263) isolated from food (n=54), water (n=7), animal sources (n=69), using consensus bla CTX-M primers and PCR, in addition to human faecal isolates (n=69) and VTEC O157:H7 (n=64). None of the clinically significant faecal VTEC O157:H7 isolates were shown to carry blaCTX-M type phylogenetic groups, nor were such phylogenetic groups observed in any of the food, water and animal isolates. One community faecal isolate (1/69; 1.4%), dating from 1997, carried this phylogenetic group. As recent work has indicated that a significant proportion of such phylogenetic groups are carried in community isolates of E. coli with little or no hospital contact, it is important that surveillance is increased to identify potential source(s) and reservoirs of such resistance in the community. Further prospective surveillance is thus required to help elucidate the origins of such phylogenetic group in the community. The significance of this study is that the ESBL-producing E. coli associated with local hospital outbreaks is not commonly found in local food, water or animal sources. In addition, given that ESBL-producing E. coli is now a significant organism, both in hospitals and nursing homes in Northern Ireland, this report demonstrates that such organisms were present in the community, as early as 1997.     

新生儿科产ESBLs大肠埃希菌的基因型研究

目的分析我院新生儿病房分离的大肠埃希菌产ESBLs基因型,为临床合理用药提供依据。方法ESBLs表型筛选、确证试验采用K—B法,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果90株产ESBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增,TEM型引物扩增阳性79株,占87．8％;SHV型引物扩增阳性76株,占84．4％;CTX—M型引物扩增阳性90株,占100％;OXA型引物扩增阳性7株,占7．8％。而72株同时产TEM型、SHV型CTX—M型3种酶。结论在本院新生儿科分离的大肠埃希菌中流行ESBLs的基因型主要是CTX—M型,且同时存在产3种酶,应引起临床重视。     

单次静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠注射液人体耐受性试验

目的:在中国健康志愿者中评价单剂量静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠的安全性、耐受性. 方法:根据新药临床试验指导原则, 将经体检及实验室检查,各项指标均在正常范围内的30名健康成人随机分配至低剂量为3.0 g(头孢噻肟钠2 g和舒巴坦钠1 g),中剂量为4.5 g(头孢噻肟钠3 g和舒巴坦钠1.5 g);高剂量为6.0 g(头孢噻肟钠4 g和舒巴坦钠2 g)的3个剂量组,每组10名受试者,男女各半,年龄30～39岁. 观察指标为临床症状、生命体征、心电图、血常规、尿常规、肝功能、肾功能、电解质等. 结果:单次静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠3～6 g,志愿者体温、脉搏、呼吸频率、血压、心电图、血常规、肝功能、肾功能、电解质等各项指标测定值均在正常范围内,用药前后比较差异无统计学意义(P＞0.05), 所有受试者均无不良反应发生. 结论:单次静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠最大剂量至6 g比较安全、耐受性较好.     

头孢噻肟钠静脉滴注时细菌内毒素检查实验研究

目的：探讨头孢噻肟钠静滴用药时细菌内毒素检查的方法多方法按照中国药典2000版二部方法进行实验。结果：结合临床实际应用情况将头孢噻肟钠内毒素限值确定为0．08EU．mg^-1较为合适。结论：可为该药静滴时采用的细菌内毒素检查提供参考依据。     

儿童社区获得性肺炎病例肺炎链球菌分离株的耐药分析

目的 分析昆明地区社区获得性肺炎住院病例中肺炎链球菌感染的耐药状况.方法 对2007年1月至2010年12月间年龄28d～8岁的4 780例诊断为社区获得性肺炎(CAP)住院患儿进行痰培养,采用链球菌细菌鉴定板鉴定,并行药敏试验.结果 从所检测CAP患儿痰液中培养分离出344株肺炎链球菌,它们对青霉素不敏感率为45.6％; 2007年至2008年肺炎链球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松、氧氟沙星的耐药率分别为38.5％、38.3％、4.8％、16.0％、16.4％、3.6％; 2009年至2010年SP对上二述药物的耐药率分别为60.9％、68.0％、42.6％、36.7％、32.3％、3.1％;未检出对万古霉素耐药的菌株.青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)对红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松、氧氟沙星的耐药率均高于青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP).结论 CAP患儿住院病例中分离到的肺炎链球菌对万古霉素、氧氟沙星的敏感性极高,对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率出现逐年增加的趋势.     

肺感方及其联合头孢噻肟对肺炎克雷伯菌生物被膜的体外干预作用

目的：探讨肺感方单用及联合头孢噻肟对肺炎克雷伯菌（ KP）生物被膜的体外抑制作用。方法二倍稀释法测定肺感方及头孢噻肟对KP标准菌株的最低抑菌浓度（ MIC）。制备KP菌悬液及灭菌载体,将灭菌载体放入含有菌悬液的无菌24孔板内37℃恒温培养以建立体外生物被膜模型。实验分为模型组（灭菌生理盐水）、1／4 MIC 肺感方组、1／4 MIC头孢噻肟组、1／4 MIC头孢噻肟＋1／4 MIC肺感方组。每组均在建模时、建模第3天和第7天加入相应干预药物,在建模第3天和第7天银染法鉴定生物被膜,并采用连续稀释法行活菌计数。结果受试菌株建模3 d时可形成生物被膜,7 d时可形成较稳定生物被膜。在建模第3天及第7天,1／4 MIC头孢噻肟组、1／4 MIC肺感方组、1／4 MIC头孢噻肟＋1／4 MIC肺感方组的生物被膜菌丝粘连及细菌团块形成依次减少;建模第7天,模型组、1／4 MIC肺感方组、1／4 MIC头孢噻肟组、1／4 MIC肺感方＋1／4 MIC头孢噻肟组生物被膜活菌数依次减少（P＜0．05）。结论1／4 MIC肺感方可抑制肺炎克雷伯菌生物被膜形成,并可破坏已形成生物被膜,联合1／4 MIC头孢噻肟时作用更为显著,两药具有协同杀菌作用。