表面应用FK506对全角膜移植免疫排斥的预防和治疗作用

目的探讨FK506（他克莫司）滴眼液对全角膜移植免疫排斥的预防和治疗作用。方法对全角膜和亚全角膜受损毁的50眼进行全角膜移植。术后病人分两组,0.05%FK506滴眼液联合0.1%地塞米松滴眼液的FK506治疗组和1%环孢霉素A（cyclosporine A,CSA）滴眼液联合0.1%地塞米松滴眼液的CSA治疗组,比较它们预防和治疗移植排斥的疗效。结果平均随访18.6m±6.2m（6～27m）。总的眼球保存率96%,角膜植片总透明率42.9%。术后,23眼视力超过0.02,3眼视力超过0.3,最好视力1.2。FK506组与CSA组相比,明显降低和推迟移植排斥（P=0.005和P=0.036）。FK506组最终视力和术后植片透明率均高于CSA组（P=0.001和P=0.017）。FK506组术后6m和12m的植片透明率分别是74.1%和60.5%,而CSA组分别是42.1%和24.1%。结论通过早期联合表面应用FK506和皮质类固醇,后期单独表面应用FK506,全角膜移植不仅可以挽救角膜和眼前段严重受损的眼球,而且使多数病人获得较好的视力。     

FK506滴眼液联合角膜移植术治疗复发性蚕蚀性角膜溃疡

目的：观察FK506滴眼液联合角膜移植术治疗复发性蚕蚀性角膜溃疡的疗效。方法：采用FK506滴眼液联合角膜移植术治疗复发性吞蚀性角膜溃疡患者9例（15只眼），对其中角膜溃疡＜2个象限角膜缘的2只眼，采用局部滴用0．1％，FD506滴眼液：角膜溃疡＞2个象限角膜缘的13只眼中，12只眼行球结膜切除及板层角膜移植术，1只眼因角膜溃疡穿孔，行穿透性角膜移植术，待术眼角膜上皮愈合后，局部滴用0．1％，FK506滴眼液，观察其疗效，同时对术中获取的角膜，结膜组织及房水，用酶联免疫分析法测定0．1％，FK506滴眼液在角膜，结膜组织及房水中的含量，对照组为板层角膜移植术联合0．1％地塞米松滴眼液治疗的12例复发性吞蚀性角膜溃疡患者。结果：滴用0．1％ FK506滴眼液后，角膜和结膜组织中FK506的含量为30－350ng/g，房水中未检测出FK506。9例（15只眼）吞蚀性角膜溃疡患者滴用0．1％，FD506滴眼液或联合角膜移植术治疗后，角膜溃疡均愈合，随访观察12－17个月，角膜溃疡无复发。视力提高＞2行者5只眼，对照组中，有7只眼的角膜溃疡复发，结论：局部应用0．1％ FK506滴眼液联合角膜移植术是治疗复发性吞蚀性角膜溃疡的有效方法。     

FK506抑制兔同种异体角膜缘移植免疫排斥反应的实验研究

目的 探讨FK506滴眼液对同种异体角膜缘移植术后排斥反应的免疫抑制作用。方法 新西兰兔48只48眼建立角膜缘缺陷症动物模型。随机分为FK506组、环孢霉素A组及生理盐水对照组3组，每组16眼。1个月后实施同种异体角膜缘移植术，眼表观察10周。结果 术后10周，对照组、环孢霉素A组、FK506组角膜新生血管指数平均秩分别为15．50、8．00、5．00。对照组角膜新生血管指数较其他2组高（P＝0．00）；而FK506组与环孢霉素A组间无显著差异（P＝0．12）；对照组上皮排斥反应发生最早，环孢霉素A组次之，FK506组最晚；术后10周，对照组、环孢霉素A组、FK506组移植排斥反应指数平均秩分别为13．67、8．07、4．58，对照组排斥反应指数较FK506组（P＝0．02）和环孢霉素A组（P＝0．00）高；环孢霉素A组移植排斥反应指数显著高于FK506组（P＝0．04）。同种异体角膜缘移植术后眼局部应用FK506滴眼液可延迟排斥反应发生，其免疫抑制效果优于环孢霉素A。     

雷帕霉素缓释膜治疗兔高危角膜移植排斥反应实验研究

目的 探讨局部应用雷帕霉素(RAPA)缓释膜抑制兔高危角膜移植免疫排斥反应的机制.方法 将角膜新生血管白兔68只分为4组,每组17只,行穿透性角膜移植术,供体为健康灰兔.A组为未治疗组;B组术中前房植入空白缓释膜;C组术后每天1%RAPA滴眼液滴眼3次共28天;D组术中前房植入RAPA缓释膜.术后隔天用裂隙灯显微镜观察植片免疫排斥反应发生的时间;用CD.和CD8单克隆抗体行免疫组织化学染色,观察各组T淋巴细胞的迁移和数量. 结果兔角膜植片存活时间:D组(44.89±8.95)d,较A组(11.11±1.69)d、B组(11.56±2.70)d、C组(17.78±8.41)d明显延长(P＜0.01).免疫组化检查:术后14 d,B、c组植片中聚积了大量CD4和CD8 T淋巴细胞,并随时间延长而增加.D组药物治疗后期,植片仅见少量CD4 和CD8 细胞浸润;当RAPA缓释膜消失后,CD4 和CD8 T淋巴细胞开始聚集.结论 RAPA缓释膜能显著延长兔高危角膜移植植片存活时间,减轻全身用药可能引起的并发症.     

环孢素A不同给药方式抑制兔眼穿透角膜移植术后免疫排斥反应的研究

背景环孢素A（CsA）是治疗角膜移植免疫排斥反应的主要药物,但合适的药物剂型和给药途径对提高药物利用度有重要意义。目的探讨CsA缓释微球结膜下给药、前房给药及CsA滴眼液局部点眼途径抑制兔眼穿透角膜移植术（PKP）后的排斥反应。方法健康清洁级成年新西兰白兔60只60只眼作为受体,健康清洁级青紫蓝兔30只60只眼作为供体。将受体兔按随机数字表法随机分为空白对照组、结膜下给药组、结膜下对照组、前房给药组、前房对照组和CsA滴眼液组,每组10只实验兔。所有实验兔行PKP。术毕结膜下给药组和前房给药组兔眼以相应的给药途径注射12g／LCsA缓释微球悬液0．1ml,结膜下对照组和前房对照组采取相应的给药途径注射空白微球悬液0．1ml,CsA滴眼液组每日应用质量分数1％（10g／L）CsA滴眼液点眼,空白对照组PKP术后不给予CsA药物。术后裂隙灯显微镜下定期观察各组术眼角膜植片的透明度、水肿情况、新生血管生长情况等,并计算术眼的排斥反应指数（RI）。分别于术前,术后3d,术后1、2、3周和术后1、2、3个月用Tono—pen眼压计测量眼压;分别于术后1个月、3个月获取各组植片行常规组织病理学检查。结果术后各组兔眼眼压较术前均明显下降,手术前后兔眼眼压的总体比较差异有统计学意义（F目目：29．210,P=0．000）;同一时间点各组兔眼眼压比较差异无统计学意义（F捆=0．254,P=0．938）。空白对照组、结膜下对照组及前房对照组于术后2～3周出现不同程度的角膜植片混浊和新生血管,术后4周时植片混浊加重,R1分别为8．60±1．52、8．60±0．55和8．80±0．84;结膜下给药组、前房给药组及CsA滴眼液组于术后3周时出现角膜新生血管,但未发现植片混浊,R1分别为4．40＋0．89、3．20±0．84和3．00±0．71,均明显低于空白对照组、结膜下对照组和前房对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。其中前房给药组兔眼术后前房有轻度炎症反应,随时间延长逐渐减轻,至术后3个月时}肖失。组织病理学检查可见,空白对照组、结膜下对照组、前房对照组术眼角膜植片均明显增厚,有大量炎性细胞浸润和新生血管长人;而结膜下给药组、前房给药组和CsA滴眼液组植片的炎性细胞浸润明显减轻,新生血管减少。结论CsA缓释微球经不同途径给药均可抑制兔眼角膜移植术后的排斥反应,其中经前房给药途径的整体疗效较经结膜下给药途径更佳。     

环孢素A缓释系统的眼内释药性和生物相容性的实验研究

目的研究前房植入环孢素A缓释系统(CsA DDS)的生物相容性和房水药物浓度变化。方法新西兰白兔36只,随机分为A、B、C、D四组,分别与A、B、C、D四型不同的CsA DDS相对应。每组9只兔随机编号为1～9号,其中1～3号兔各任选1只眼前房植入相应的CsA DDS,另1只眼植入不含CsA的空白缓释系统(EMDDS)为对照;4～6号兔各任选1只眼前房植入EM DDS,另1只眼行角膜切开及缝合术为对照;7～9号兔各任选1只眼前房植入CsA DDS,另1只眼行角膜切开及缝合术为对照。术后观察12周。结果四型CsA DDS均未见明显眼内毒性反应;A、B两型释药速率迅速,但维持时间短,C、D两型则缓慢而持久。结论前房植入CsA DDS对兔眼的生物相容性良好;4型CsA DDS中A、B型较适宜治疗排斥反应,C、D型较适宜预防排斥反应。     

前房植入环孢素A缓释系统抑制鼠高危角膜移植术后的免疫排斥反应

目的　探讨前房内植入环孢素A缓释系统 (cyclosporineAdrugdeliverysystem ,CsADDS)抑制高危角膜移植术后免疫排斥反应的有效性和可行性。方法　 (1)对 6 0只Wistar大鼠 (6 0只眼 )用缝线法诱导角膜新生血管增生。 (2 )将发生角膜新生血管化的 4 0只Wistar大鼠 (40只眼 )随机分为4组 :对照组 ,1%CsA滴眼组 ,CsADDS结膜下植入组 ,CsADDS前房内植入组。每组均接受同种异系(Spregue Dawley大鼠 )角膜供体 ,行穿透性角膜移植术 ,术后比较各组大鼠免疫排斥反应发生的时间 ,并定期检测各组大鼠房水中CsA的浓度。 (3)正常Wistar大鼠 8只 (16只眼 ) ,随机分为 2组 ,分别在结膜下和前房内植入CsADDS ,术后 2和 4周行眼的组织病理学检查。结果　 (1) 5 1只Wistar大鼠 (5 1只眼 )经角膜基质缝线 ,成功诱导角膜新生血管增生。 (2 ) 4组共 4 0只Wistar大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的发生时间分别为 :对照组 (8 2 0± 1 4 8)d ,1%CsA滴眼组 (10 6 0± 1 90 )d ,CsADDS结膜下植入组 (11 4 0± 2 5 0 )d ,CsADDS前房内植入组 (17 0 0± 6 0 5 )d。房水中CsA浓度均值分别为 :对照组 0 μg/L ;1%CsA滴眼组 (47 90± 3 4 8) μg/L ;CsADDS结膜下植入组术后 1、2、4周 ,房水中CsA浓度均值分别为 (5 9 0 0± 3 6 6 ) μg/     

环孢霉素A在高危角膜移植免疫排斥应用观察

目的：探讨环孢霉素A在高危角膜移植手术后防治角膜移植排斥反应的疗效。方法：对在我院施行穿透性及槔层角膜移植术中属于高危角膜移植的病共24例26只眼,其中≥9mm的大植片的有12只眼（占50％）,在术后26只眼均用环孢霉素A口服及环孢霉素A液滴眼。结果：角膜移植术后出现角膜排斥反应的有10例11只眼（占42．3％）,经过治疗后角膜植片均透明,术后角膜移植片最终透明者有24只眼（占92．3％）,未见严重副作用。结论：证明在高危角膜移植术应用环孢霉素A治疗角膜移排斥反应是确实有效。     

角膜移植联合FK506治疗单疱病毒性角膜炎

目的:探讨角膜移植联合FK506治疗严重单疱病毒性角膜炎的临床疗效。方法:对临床确诊为单疱病毒性角膜炎且经抗病毒药物治疗无效的患者行角膜移植术。根据单纯疱疹病毒性角膜炎累及角膜范围及深度的不同程度分别行板层角膜移植术和穿透性角膜移植术共15例15眼。治疗性角膜移植术后给予抗炎防感染治疗并应用FK506滴眼液局部点眼,术后随访6~24mo。观察术后患者视力、植片的透明度及并发症等情况。结果:治疗性角膜移植术后15例患者中,14例患者术眼视力均有不同程度的恢复(0.05~0.6),其中12例植片透明,2例植片轻度混浊;1例术后出现明显的排斥反应而失败。其中继发性青光眼7%(1眼),并发性白内障的7%(1眼)。结论:角膜移植联合FK506治疗单疱病毒性角膜炎相对安全有效的方法。     

异种全厚板层角膜移植术后局部应用高渗葡萄糖的研究

目的 研究局部应用50%葡萄糖降低异种全厚板层角膜移植术后炎性反应的作用.方法 18周龄的健康雄性新西兰白兔16只随机分成两组,每组各8只.两组均进行猫兔异种全厚板层移植术:A组(实验组)手术后给予50%葡萄糖滴眼每日2次,复方氯霉素滴眼液滴眼每日3次;B组(对照组)术后仅给复方氯霉素滴眼液滴眼.每日3次.术后每日在裂隙灯显微镜下观察植片存活情况,治疗及观察时间均为3个月.各组于术后1,2,3月各取2只兔的术眼角膜进行病理学检查.结果 术后半个月内,A、B两组植片透明、无明显浑浊.术后20 d部分植片开始出现排斥反应,在3个月内,A、B两组全厚角膜植片的排斥反应指数差异显著.在无排斥反应的正常兔角膜中组织学及电子显微镜下的结构特征清晰;但在出现排斥反应的兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润.结论 异种全厚板层角膜移植术后局部应用50%葡萄糖滴眼能减少术眼水肿,降低炎性反应,延长角膜植片成活时间.     

FK506 in a biodegradable glycolide-co-clatide-co-caprolactone polymer for prolongation of corneal allograft survival

PURPOSE: FK506 has been extensively used in preventing immune rejection for human organ transplantation. This study aimed to evaluate the effects of a biodegradable FK506 drug delivery system (DDS) implanted into anterior chamber for the prolongation of corneal allograft survival in high-risk keratoplasty. METHODS: Biodegradable glycolide-co-clatide-co-caprolactone polymer (PGLC) was used as drug carrier to be incorporated with 0.5 mg of FK506 powder. The drug release from the FK506-PGLC DDS was evaluated in vitro and in vivo. The FK506-PGLC DDS was implanted into the anterior chamber of 12 high-risk keratoplasty rabbits. The graft survival time and clinical features of the FK506-PGLC DDS group were compared with the untreated, PGLC DDS, cyclosporin A-PGLC DDS, and 0.5% FK506 drops groups. The histopathological examination was performed to evaluate the safety of the FK506-PGLC DDS. RESULTS: The mean graft survival time was longest (> 180 days) in the FK506-PGLC DDS group. In vivo, the FK506 concentration in aqueous humor peaked on day 28 (17.9 +/- 2.3 ng/ml) and kept a sustained release for at least 168 days. No adverse reactions were observed in the FK506-PGLC DDS group. CONCLUSIONS: Biodegradable FK506-PGLC DDS implanted into anterior chamber can effectively prevent immune rejection in high-risk keratoplasty model, presenting a promising approach for the prolongation of corneal allograft survival.     

雷帕霉素缓释片防治兔高危角膜移植免疫排斥反应和新生血管增殖的研究

目的探讨雷帕霉素(RAPA)缓释片防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖的疗效及其作用机制。方法RAPA缓释片制作:RAPA与载体乙交酯-丙交酯-己内酯三元共聚物(PGLC)制成RAPA缓释片(W/W=50/50),每粒缓释片含RAPA0·5mg。65只健康新西兰大白兔,其中45只兔(45只眼)采用缝线法诱导角膜新生血管生成,选择大于3个象限、新生血管长入角膜超过3mm的40只兔按照随机数字表法分为对照组(A组)、1mgPGLC载体前房植入组(B组)、1%RAPA滴眼液组(C组)及0·5mgRAPA缓释片前房植入组(D组),每组10只兔;余20只兔为供体。对4组兔行右眼同种异体穿透性角膜移植术,术后观察90d,记录排斥指数(RI,为植片水肿、混浊及血管长入评分合计)和新生血管指数(NI,为血管长入植片评分)。定期检测C、D组兔房水中RAPA浓度;术后3周,原位杂交法对4组兔角膜植片中白细胞介素(IL)-2R、单核细胞化学吸引蛋白质(MCP)-1、Fas/FasL进行检测,采用免疫组化法对肿瘤坏死因子(TNF)α和血管内皮细胞生长因子(VEGF)进行检测。术后90d,病理组织学检查视网膜、肝肾结构变化。结果(1)免疫排斥:A、B、C及D组兔发生免疫排斥反应的平均时间分别为(16·5±2·5)、(16·0±2·6)、(47·1±13·2)、(87·6±5·8)d(P=0·000)。术后2周,4组兔植片RI分别为4·9±2·2、3·9±0·9、0·8±0·4、0·3±0·6(P=0·000)。术后12周分别为10·4±0·8、10·0±0·0、7·2±2·2、2·0±3·3(P=0·000)。(2)角膜新生血管:术后2周,4组NI数分别为2·4±0·7、2·1±0·5、0·6±0·5、0·3±0·5(P=0·000)。术后12周分别为3·8±0·5、3·8±0·4、0·8±0·7、0·4±0·8(P=0·000)。(3)房水中RAPA浓度:术后第2、4、8、12周,D组房水中RAPA浓度分别10·7、12·0、9·2、7·0ng/ml,C组房水中RAPA浓度检测不出。(4)细胞因子表达:A、B组植片大量表达IL-2R、MCP-1、TNF-α、VEGF细胞因子,C、D组不表达上述细胞因子,4组植片中Fas/FasL均不表达。(5)组织病理:4组兔视网膜、肝肾组织结构正常。结论局部应用RAPA可以防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖,RAPA缓释片疗效优于滴眼液。     

Prolongation of corneal allograft survival using cyclosporine in a polylactide-co-glycolide polymer

PURPOSE: To test for prolongation of corneal transplant survival with cyclosporine in a polymer placed in the anterior chamber of corneal allograft recipients. METHODS: Wistar inbred rats with vascularized corneas were recipients of corneal allografts from Sprague-Dawley donor rats. Grafted rats were randomized into six groups: untreated control animals, cyclosporine-polymer anterior chamber recipients, cyclosporine-polymer subconjunctival recipients, cyclosporine-olive oil drop recipients, polymer-only anterior chamber recipients, and autografted Wistar rats. Grafts were examined by slit lamp every 3 days and the clinical condition scored. The cyclosporine concentration in the aqueous humor was assayed at 1, 2, and 4 weeks. At 2 and 4 weeks after transplantation, the eyes were collected for histopathologic evaluation of the grafts. RESULTS: The median survival time of untreated corneal allografts was 8.2 +/- 1.48 days for grafts treated with topical cyclosporine, 8.5 +/- 1.50 days for polymer-only anterior chamber implants, 10.6 +/- 1.90 days for 1% cyclosporine drops, 11.4 +/- 2.50 days for grafts given subconjunctival cyclosporine-polymer, 17 +/- 3.05 days for grafts given cyclosporine-polymer implants in the anterior chamber, and more than 3 months in autografted rats. There was a statistically significant difference ( p < 0.05) between the survival time of the allografts in the animals treated with the cyclosporine-polymer in the anterior chamber compared with the other groups of graft recipients. Significantly higher concentrations of cyclosporine were found in the eyes given an anterior chamber implant of cyclosporine-polymer than in the other treatment groups or the untreated rats. The cyclosporine-polymer implants placed in the anterior chamber induced a transient inflammatory response in transplanted eyes. CONCLUSIONS: Cyclosporine-polymer placed in the anterior chamber significantly prolongs corneal allograft survival in a high-risk corneal graft rejection. This intraocular delivery system may be a valuable adjunct for the suppression of immune graft rejection in high-risk recipients of corneal transplants.     

小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中作用的初步研究

目的 探讨小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中的作用。方法以23只C57BL／6小鼠作为供体,76只BALB／c小鼠作为受体建立角膜移植实验模型,随机数字法分为A、B、C及D组,A组为BALB／c小鼠自体原位角膜移植,B、C及D组为C57BL／6-BALB／c小鼠间同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予不含药物的空白液,C组和D组分别给予环孢素A（CsA）和小分子化合物J2,连续灌胃12d,比较各组小鼠角膜植片的存活时间和存活率,术后21d对各组小鼠行外周血单核细胞行流式细胞学检查,并做角膜植片的组织学检查。结果A组观察期内角膜植片未发生排斥,B组角膜植片平均存活时间为（17．8±2．1）d,C组为（38．1±9．9）d,D组角膜植片存活时间为（40．6±8．3）d,D组与A组（P=0．04）及B组（P=0．00）比较存活时间差异均有统计学意义,与C组比较差异无统计学意义（P：0．99）。流式细胞学检查显示J2给药小鼠外周血CD^＋细胞、CD8^＋细胞未发生增殖,组织学检查证实术后21dD组角膜植片未见明显的淋巴细胞浸润。结论小分子化合物J2能够抑制排斥的发生,延长小鼠角膜植片存活时间。（中华胺群条峦,2007,43：608-612）     

雷帕霉素抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的探讨雷帕霉素(RAPA)对大鼠角膜移植排斥反应的防治效果。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体建立角膜移植实验模型。采用完全随机分组设计方案,将68只Wistar鼠(68只眼)随机分为4组,A组为Wistar鼠自体原位角膜移植,B、C、D组为SDWistar鼠之间进行同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予空白液,C组和D组分别给予RAPA(3mg·kg-1·d-1)和环孢霉素A(CsA)(10mg·kg-1·d-1),连续用药12d。根据Holland排斥反应评分系统,判断术后植片排斥情况。比较各组角膜植片的平均存活时间和植片存活率。采用广义估计方程对角膜的新生血管评分进行统计学分析。术后14d,对各组角膜进行组织学检查。结果RAPA组发生排斥反应的时间明显延迟,同种异体移植对照组植片平均存活时间(MST)为(11.0±1.5)d,RAPA组MST为(36.1±14.9)d,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。RAPA组角膜植片存活情况较CsA组好,但两组植片存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA组术后角膜新生血管的生长明显低于异体移植对照组(P<0.05)和CsA组(P<0.05)。组织学检查证实,术后14d,RAPA组角膜植片未见明显淋巴细胞浸润。结论口服RAPA能够延缓大鼠角膜移植排斥反应的发生,并能够抑制术后新生血管的生成。     

环孢素A缓释系统植入前房抑制鼠角膜移植免疫排斥反应机制的研究

目的　探讨前房植入环孢素A(cyclosporineA ,CsA)缓释系统抑制鼠角膜移植免疫排斥反应的机制。方法　 (1)环孢素A缓释系统的制备 :为CsA粉剂与已交酯 丙交酯 已内酯的三元共聚物混合体 ,每粒含环孢素A 0 5mg。 (2 )对 90只 (90只眼 )BALB c鼠 (受体 )行穿透性角膜移植术 ,将其分为A、B、C组 ,每组 30只。供体为C5 7BL 6鼠。A组术中鼠前房植入CsA缓释系统 ;B组术中鼠前房植入不含CsA的空白缓释系统 ;C组术后不作任何处理作为正常对照组。术后 3d用裂隙灯显微镜观察角膜植片情况 ,记录角膜植片免疫排斥反应发生的时间和程度。各组分别于术后 1、2、4及 6周随机取 2只鼠眼行组织病理学检查 ,并用CD4、CD8及CD11B单克隆抗体行免疫组织化学染色 ,观察各组T淋巴细胞的迁移和数量。结果　A组鼠角膜植片排斥时间平均 (35± 3)d ,较B、C组 (14± 3)d明显延长 (P <0 0 0 1)。前房植入的CsA缓释系统体积缩小前 ,A组角膜植片均保持透明 ;当前房植入的CsA缓释系统消失后 ,角膜出现免疫排斥反应 ,植片逐渐混浊、增厚、血管化。B、C组免疫排斥反应均在术后 2周发生。组织病理学和免疫组织化学检查 :A组在术后 14d仅于植床角膜可见少量CD+ 4 　和CD+ 8　细胞浸润 ,在虹膜和睫状体中未见CD+ 11B、CD+ 4 、CD+ 8　T淋     

Preliminary study of the effect of FK506 nanospheric-suspension eye drops on rejection of penetrating keratoplasty.

OBJECTIVE: The aim of this study was to investigate the effect of a topical FK506 nanospheric suspension in a rat model of penetrating keratoplasty. METHODS: FK506 nanospheres were prepared by using a biodegradable poly (lactic-co-glycolic acid) copolymer (PLGA). Its distribution in the eye and blood after a single instillation was examined in rabbits. Sprague-Dawley (SD) rats received corneal heterografts and were topically treated with phosphate-buffered saline (PBS), PLGA, FK-506 0.01% (nanospheres), or dexamethasone 0.05% solutions twice a day for 28 days. Rejection index and graft-survival time were recorded and compared between the four groups. Three grafts were collected at different time points for immunohistochemical studies. RESULTS: In the cornea, the FK-506 concentration reached its peak within 1 h of a single eye-drop instillation and then decreased by half (1667.85 +/- 611.87 ng/g) at 8 h. FK-506 cannot be detected in rabbit blood. There were significant differences in the graft-survival time between the FK-506 nanosphere group (15.09 +/- 4.81 days) and the other three groups [PBS (7.90 +/- 1.20, t = -4.594, P < 0.001), PLGA (8.44 +/- 0.88, t = - 4.074, P = 0.001) and dexamethasone (10.44 +/- 1.42, t = -2.790, P = 0.012)]. The rejected corneas in the FK506 nanosphere group showed significantly fewer CD4, CD8, CD68, CD79, vascular endothelial growth factor, ICAM, and tumor growth factor-beta(1)-positive cells than those in the other groups. CONCLUSIONS: FK506 0.01% nanospheric-suspension eye drops delayed the occurrence of corneal allograft rejection and prolonged allograft survival time. The FK506 nanospheres may be valuable in suppressing corneal graft rejection.     

猪-猴异种角膜移植的初步研究

目的探讨猪-猴穿透性角膜移植术后排斥反应的特点及糖皮质激素在异种角膜移植排斥反应中的作用。方法3月龄五指山小型猪（WZS）6只为供体,恒河猴12只为受体,建立猪-猴异种穿透性角膜移植动物模型。受体猴分为角膜移植组和激素干预组,每组6只。激素干预组角膜移植术毕,结膜下注射复方倍他米松注射液0．5ml（7mg／m1）,术后每10d结膜下注射长效倍他米松注射液0．3ml,共10次;角膜移植组术后相同时间点注射等量生理盐水。观察两组术后植片的存活情况,术后1个月取角膜植片行病理组织学检查,流式蛋白分析系统检测猴血浆与房水中细胞因子IFN、TNF、IL-4、IL-5及IL-10浓度。免疫浊度法检测猴外周血免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的变化。流式细胞仪分析手术前后受体全血中CIM^＋、CD8^＋、CD16^＋T淋巴细胞的比率变化。结果猪-猴穿透性角膜移植组植片平均存活时间为（15．54-2．3）d;激素干预组为（182．84-66．1）d。角膜移植组植片术后在前房形成渗出膜,角膜植片水肿明显,植片新生血管长入。而激素干预组在给药期间植片维持透明,仅有轻微的植片水肿反应。组织病理学显示角膜移植组植片较植床明显增厚,上皮下及前基质层炎性细胞浸润,后基质和角膜内皮层破坏,内皮面形成渗出膜;激素干预组植片少量淋巴细胞浸润,内皮完整,无渗出膜。在术后第3周角膜移植组受体猴房水中各种细胞因子浓度均升高,尤其以IFN升高明显;而激素干预组中房水的细胞因子变化主要是IL-10和IL-4浓度升高,但IFN和TNF的浓度均有降低。两组猴全身体液免疫和细胞免疫指标显示,角膜移植组术后第2～3周免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3、C4浓度升高,而激素干预组IgG和补体C4浓度降低。结论猪．猴异种角膜移植术后的主要表现为角膜内皮排斥反应,全身体液免疫可能参与排斥反应的发生,局部应用糖皮质激素能明显延长植片存活时问。（中华腰科杂志,2007,43：594-601）     

雷公藤多甙和FK506滴眼防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的比较

目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。分别于术后15d及30d行常规病理学检查。并通过免疫组化检查CD25,CD5+4在角膜植片基质中的表达。结果:0.3g/LTⅡ及0.5g/LFK506抑制角膜移植免疫排斥反应的效应均有效,两者相比效果无显著性差异。HE染色及免疫组化分析可见15d时各有效组角膜植片厚度基本正常,基质中仅有少量CD25,CD5+4阳性细胞表达、淋巴细胞浸润,新生血管少见。结论:TⅡ与FK506疗效近似。具有抑制高危角膜移植免疫排斥反应发生的临床应用价值。