血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌血小板源生长因子

目的:观察血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌血小板源生长因子(PDGF)受体β亚单位的调节,探讨两条信号转导途径的交互作用在血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的意义。方法:制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型,免疫印迹法检测主动脉组织PDGF受体β亚单位的含量。培养大鼠主动脉VSMC,观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对PDGF受体β亚单位的影响。结果:两肾一夹大鼠术后8周动脉血压明显增高,同时主动脉PDGF受体β亚单位的表达高于对照组126.6%(P＜0.05)。AngⅡ刺激培养的VSMC可导致PDGF受体β亚单位上调192.74%(P＜0.01),该效应可被Ⅰ型AngⅡ受体(AT₁)的拮抗剂losartan和磷脂酶C(phospholipasec,PLC)的抑制剂U73122完全阻断(P＜0.01),但仅被丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂PD98059部分阻断(P＜0.01)。结论:AngⅡ可以通过AT₁及下游的信号分子PLC上调PDGF受体β亚单位的表达,而细胞外信号调节激酶可能参与AngⅡ的胞内信号转导。     

血管活性物质对人内皮细胞C-型利钠利尿肽合成和释放的影响

目的:在培养的人内皮细胞上观察内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和同型半胱氨酸(Hcy)对C-型利钠利尿肽(CNP)生成和释放的影响,以探讨CNP生成和释放的机制。方法:人内皮细胞培养;CNP放免测定。结果:ET、AngⅡ均可刺激内皮细胞CNP的生成,10^-9、10^-8、10^-7mol/L的ET和AngⅡ分别使细胞CNP含量较对照组高1%(P＞0.05),49%(P＜0.05),117%(P＜0.01)和137%(P＜0.01),165%(P＜0.01),201%(P＜0.01),大剂量ET、AngⅡ可刺激CNP的释放。Hcy对内皮细胞CNP的生成没有影响,但10 ^-9、10^-8、10^-7mol/LHcy可使其释放增加17%(P＞0.05),84%(P＜0.01)和555%(P＜0.01)。结论:ET、Ang和Hcy可调节CNP的释放和/或生成。     

肾性高血压大鼠血浆ET、CGRP、AngⅡ水平变化及缬沙坦、贝那普利干预的影响

目的:研究肾性高血压大鼠血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)等血管活性物质的变化及降压药物缬沙坦、贝那普利干预对收缩压和ET、CGRP、AngⅡ的影响。方法:采用两肾一夹方法复制肾性高血压大鼠模型,成模大鼠随机分为缬沙坦组(30mg/kg/天,n=8)、贝那普利组(10mg/kg/天,n=8)、肾性高血压模型组(n=8);假造模大鼠作为假手术组(n=10),前两组以缬沙坦和贝那普利溶液、后两组以等量生理盐水每日灌胃。分别于术前及术后每周末测定各组大鼠收缩压变化,并在灌药治疗8周后用放免法测定各组血浆ET、CGRP、AngⅡ含量变化。结果:两肾一夹术后4周可形成稳定肾性高血压大鼠模型。缬沙坦组、贝那普利组大鼠经灌胃治疗8周后血压明显下降(P<0.01)。肾性高血压模型组ET、CGRP、AngⅡ血浆浓度均高于假手术组(P<0.05或P<0.01);缬沙坦组、贝那普利组CGRP浓度高于肾性高血压模型组(P<0.05),贝那普利组AngⅡ浓度低于肾性高血压模型组和缬沙坦组(P<0.05);肾性高血压模型组血浆ET与AngⅡ浓度呈正相关(r=0.62,P<0.05)。结论:肾性高血压大鼠血浆ET、CGRP、AngⅡ浓度增高,缬沙坦、贝那普利可能通过调节血管活性物质水平而降低收缩压。     

低温对大鼠血浆及不同脑区神经肽等活性物质含量变化的影响

目的:探讨低温对血浆及不同脑区精氨酸加压素 (AVP)、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)、亮氨酸-脑啡肽 (L-EK)、环磷酸腺苷 (cAMP)、Ca²⁺ 及Mg²⁺含量影响。方法:复制大鼠实验性低温模型,随机分组处理,实验结束时,取下丘脑、脑干及血样品,采用放射免疫法测定AVP、AngⅡ、L-EK、cAMP的含量,原子吸收法测定Ca²⁺ 及Mg²⁺含量。结果:实验组L-EK、cAMP、Ca²⁺ 及Mg²⁺值显著高于对照组 (P <0.01);实验Ⅰ组、Ⅲ组血浆AVP、AngⅡ值显著高于对照组 (P <0.01),Ⅱ组显著低于对照组 (P <0.01)。实验Ⅰ组、Ⅲ组下丘脑和脑干AVP、AngⅡ值显著低于对照组 (P<0.01),Ⅱ组显著高于对照组 (P <0.01)。结论:低温时,L-EK、AVP、AngⅡ、cAMP、Ca²⁺ 及Mg²⁺可能参与体温调节.     

内源性血管紧张素Ⅱ对大鼠血管钙化的作用

目的:在大鼠血管钙化模型上观察内源性血管紧张素II(AngⅡ)对大鼠血管钙化的影响。方法:用VitD₃皮下注射和尼古丁灌胃诱导大鼠血管钙化模型。测定血管组织中钙含量、[⁴⁵Ca²⁺]聚集及碱性磷酸酶活性作为观察钙化的指标。结果:钙化血管组织中钙含量,[⁴⁵Ca²⁺]摄入及碱性磷酸酶活性分别高于对照组。血管组织中的血管紧张素原mRNA、血浆和血管AngⅡ含量均高于对照组水平。血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利和AngⅡ受体AT₁阻断剂洛沙坦处理的大鼠血管内钙含量、[⁴⁵Ca²⁺]聚集及碱性磷酸酶活性显著低于单纯钙化组。卡托普利处理的钙化大鼠血浆和动脉中AngⅡ含量、动脉中血管紧张素原mRNA的含量也显著低于钙化组水平。结论:钙化大鼠血浆和血管组织中AngⅡ水平上调,卡托普利和洛沙坦可减轻大鼠血管钙化程度。     

血管紧张素Ⅱ在自发性高血压大鼠主动脉重建中的作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在高血压主动脉重建中的作用。方法:选用AngⅡ受体I亚型拮抗剂losartan,对雄性自发性高血压大鼠(SHR)进行为期10周的治疗,观察并比较其在剂量15 mg/kg·d^-1及0.75 mg/kg·d-1时,对16周到26周SHR胸主动脉重建的影响。结果:Losartan 15 mg在降低血压的同时, 通过抑制主动脉中膜平滑肌细胞(VSMC)的肥大明显抑制了主动脉肥厚,losartan 0.75 mg未能使血压下降的情况下,对VSMC及主动脉肥厚均没有影响。Losartan对胶原纤维的作用与对VSMC的作用不同,两种剂量的losartan均明显抑制了胶原纤维的合成。结论:AngⅡ对SHR主动脉平滑肌生长的调节可能为压力依赖性,对胶原纤维的作用则可能是通过非压力机制。     

血管紧张素Ⅱ受体在压力超负荷致左室肥大中的作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体(ATRs)在压力超负荷致左室肥大中的作用。 方法:采用大鼠腹主动脉缩窄模型,通过放免法测心肌组织血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)含量,放射性配基结合分析法检测心肌组织ATRs及其亚型的变化。结果:手术组AngⅡ含量显著增高,与左室重量指数(LVMI)呈正相关(r=0.8066,P<0.01)。ATRs最大结合容量 (Bmax) 显著高于对照组(P＜0.01),但两组之间的平衡解离常数(kd)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT₁R)和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT₂R)之间的比例无显著差异。非肽类AT₁R 拮抗剂Irbesartan可显著抑制Ang Ⅱ的升高和左室肥大,非肽类AT₂R 拮抗剂CGP42112A则无此作用。结论: 压力超负荷时心肌组织ATRs上调,Ang Ⅱ致左室肥大的作用主要由AT₁R介导。     

限钠或补钠对充血性心衰大鼠心肌血管紧张素原mRNA表达的影响

目的:研究限钠或补钠对充血性心衰大鼠心肌血管紧张素原mRNA表达的影响。方法:用放射免疫分析法和原位杂交技术分别测定心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和血管紧张素原(ANG)mRNA的表达水平。结果:限钠组血钠显著低于心衰组(P＜0.05),心肌AngⅡ含量、ANGmRNA表达水平及心/体重比值均显著高于心衰组(P＜0.05或P＜0.01);补钠组血钠显著高于心衰组(P＜0.05),与对照组无显著差别,其它3项均与心衰组无显著差别。结论:心衰后限钠可进一步激活心脏局部肾素-血管紧张素系统。     

Gαq/11介导的信号转导通路在自发性高血压大鼠主动脉中的变化

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)主动脉Gαq/11及磷脂酶C(PLC)的动态变化,探讨其在SHR高血压发病机制中的意义.方法: 4周龄和12周龄SHR,颈动脉插管记录动脉血压,放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ的浓度,免疫印迹法检测主动脉组织Gαq/11和PLC的含量.结果:SHR 12周龄时动脉血压明显增高.4周龄SHR主动脉Gαq/11的表达较对照高69.2%(P＜0.05).4周龄和12周龄SHR主动脉PLCβ3分别较各自同龄对照组高66.9%和85.1%(P＜0.05). 结论: Gαq/11介导的信号转导通路上调参与SHR高血压的发生和发展.     

血管紧张素转换酶2在自发性高血压大鼠肾脏表达与血压的关系研究

目的： 研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在20周龄自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar Kyoto大鼠(WKY)肾脏组织的表达以及与血压的关系。 方法： 采用实时定量PCR方法检测肾脏组织中ACE2 mRNA的含量，应用放免法测定肾脏组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度。 结果： 20周龄SHR的血压明显高于WKY（P<0.05）,SHR肾脏组织ACE2的表达显著低于WKY（P<0.01），而SHR肾脏组织AngⅡ的浓度显著高于WKY（P<0.05）。 结论： ACE2在肾素-血管紧张素系统(RAS)中可能通过改变SHR肾脏中AngⅡ水平调节血压。     

氟伐他汀抑制高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的:探讨氟伐他汀对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法:培养自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞,不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血小板源生长因子(PDGF)、氟伐他汀及甲羟戊酸干预后,行细胞计数和[³H]-TdR掺入率测定。结果:①氟伐他汀呈浓度依赖性抑制10^-6mol/LAngⅡ和10μg/LPDGF刺激诱导的血管平滑肌细胞数和[³H]-TdR掺入率增加;②10^-3mol/L甲羟戊酸几乎完全逆转氟伐他汀对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。结论:氟伐他汀抑制AngⅡ和PDGF诱导的高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖;甲羟戊酸代谢途径可能参与血管平滑肌细胞增殖过程。     

Rho蛋白解离抑制因子α在高血压大鼠胸主动脉的表达

目的 研究高血压大鼠胸主动脉以及周期性张应变刺激下血管平滑肌细胞(VSMCs)的Rho蛋白解离抑制因子(RhoGDIα)的表达变化,探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)信号通路对其表达的调控影响. 方法 应用实时PCR和Western blotting技术分别检测4周、12周和18周自发性高血压大鼠(SHR, n =4)和正常血压京都种鼠(WKY, n =4)胸主动脉RhoGDIα mRNA和蛋白的表达;免疫组织化学检测RhoGDIα在SHR和WKY胸主动脉的定位;Western blotting技术检测腹主动脉缩窄性高血压大鼠(ACR, n =6)胸主动脉RhoGDIα蛋白的表达;应用细胞应变加载系统对大鼠胸主动脉VSMCs施加1Hz、10%的周期性张应变,在有或无血管紧张素亚型Ⅰ(AT1)受体拮抗剂 L-158809的条件下观察周期性张应变刺激对VSMCs RhoGDIα蛋白表达的影响. 结果 4周与12周SHR和WKY胸主动脉RhoGDIα表达无显著性差异,而在18周组,SHR胸主动脉RhoGDIα表达显著高于WKY.RhoGDIα主要存在于血管中膜VSMCs.2周和4周ACR胸主动脉RhoGDIα表达较正常对照组显著上调,提示在高血压状态下的主动脉RhoGDIα的表达上调.10%周期性张应变加载抑制了VSMCs的RhoGDIα表达,加入ATI受体拮抗剂后RhoGDIα表达显著低于10%周期性张应变加载组. 结论 大鼠高血压时主动脉RhoGDIα表达上调;Ang Ⅱ信号通路在RhoGDIα表达调控中起重要作用.     

ERK1/2及JNK参与DL0805抑制血管紧张素Ⅱ引起的大鼠离体胸主动脉环收缩

目的研究Rho激酶抑制剂DL0805对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引起的大鼠离体胸主动脉环收缩反应的影响及其可能的机制。方法测定离体血管张力观察大鼠胸主动脉环收缩反应,Western blot检测大鼠离体胸主动脉环ERK1/2和JNK蛋白磷酸化,和AngⅡ1型受体(AT1R)蛋白表达水平。结果 DL0805(10、25和50μmol/L)浓度依赖性地抑制AngⅡ(100 nmol/L)引起的内皮完整或去内皮的大鼠离体胸主动脉环收缩(P<0.01,P<0.001),DL0805(25和50μmol/L)抑制AngⅡ(100 nmol/L)诱导的ERK1/2和JNK的活化(P<0.05,P<0.01和P<0.001),但DL0805(5、25和50μmol/L)对AngⅡ刺激的血管环AT1R蛋白表达水平无显著影响。结论 DL0805抑制AngⅡ引起的大鼠离体胸主动脉环收缩,其机制可能与其抑制AngⅡ诱导的ERK1/2和JNK活化有关。     

肾上腺髓质素对尾加压素Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察肾上腺髓质素(ADM)对尾加压素Ⅱ(UⅡ)刺激的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法:贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC;[³H]-胸腺嘧啶([³H]-TdR)掺入测定反映VSMCDNA合成;[γ-³²P]-ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果:UⅡ(10^-8mol/L)显著促进VSMC-TdR掺入和激活MAPK比对照组分别高38%(P＜0.05)和260%(P＜0.01)。UⅡ加10^-10、10^-9、10^-8mol/LADM组VSMC-TdR掺入分别较UⅡ组低7%(P＞0.05)、32%(P＜0.05)和41%(P＜0.01)。MAPK活性分别低24%(P＞0.05)、32%(P＜0.05)和36%(P＜0.05)。结论:肾上腺髓质素抑制UⅡ诱导的VSMC增殖,可能与其抑制MAPK活性有关。     

硫氢化钠对慢性心力衰竭大鼠心脏功能和肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性的影响

目的:探讨硫氢化钠(Na HS)对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心脏功能和肾素(renin)-血管紧张素(Ang)-醛固酮(ALD)系统(RAAS)活性的影响。方法:本研究通过腹主动脉缩窄术构建CHF大鼠模型,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Na HS低剂量组和Na HS高剂量组,每组6只。采用超声心动图检测每组大鼠治疗前及治疗结束后的左心室舒张末内径(LVEDD)、左心室收缩末内径(LVESD)和左心室射血分数(LVEF)。治疗结束后,采用ELISA试剂盒检测各组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD的浓度。采用q PCR和Western blot实验分别检测各组大鼠心肌组织中血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的mRNA和蛋白表达。结果:经Na HS治疗后,与模型组和治疗前相比,Na HS低剂量组和Na HS高剂量组的LVEDD和LVESD均明显降低,而LVEF明显升高(P0.05);与Na HS低剂量组相比,Na HS高剂量组的LVEDD和LVESD降低,而LVEF升高(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD浓度显著升高(P0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05);与模型组相比,Na HS低剂量组和Na HS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度显著降低(P0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著下调(P0.05);Na HS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度及心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著低于Na HS低剂量组(P0.05)。结论:Na HS可通过抑制RAAS的活性改善CHF大鼠的心功能,且高剂量组的改善效果优于低剂量组。     

PAMP、ADM和AngⅡ在血管组织释放的相互影响

目的:探讨肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)和肾上腺髓质素(ADM)与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)之间的相互作用关系。方法:采用离体大鼠主动脉条孵育的方法,在孵育液中分别加入不同浓度(10^-9、10^-8、10^-7 mol/L)AngⅡ,用放射免疫的方法分别测定孵育液中的PAMP、ADM浓度,以及大鼠主动脉条组织中PAMP、ADM的含量;另一组在孵育液中分别加入不同浓度( 10^-9、10^-8、10^-7mol/L)PAMP。分别测定孵育液中以及大鼠主动脉条组织中AngⅡ的含量。结果:不同浓度的AngⅡ可引起大鼠主动脉条组织中及释放于孵育液中的PAMP、ADM含量成剂量依赖性增加;不同浓度的PAMP对大鼠主动脉条组织中及释放于孵育液中的AngⅡ含量无明显影响。结论:AngⅡ可刺激主动脉组织释放和合成PAMP、ADM,此作用可能在心血管的调节中起一定作用。     

钠摄入量对充血性心衰大鼠血浆及心肌Ang Ⅱ、Ald和ANP水平的影响

观察严格限钠或适量补钠对充血性心衰(CHF)大鼠血钠及血浆和心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)和心钠素(ANP)水平的影响。结果表明：限钠使血钠进一步降低(P＜ 0.05), 血浆AngⅡ、Ald、ANP水平进一步升高(均 P＜ 0.01),尿钠、尿量显著减少,心衰加重;补钠则使血钠恢复正常,血浆AngⅡ和Ald降至正常,ANP仍保持较高水平,尿钠、尿量显著增加,心衰缓解。提示：充血性心衰时,适当补钠可促使RAAS与ANPS两大激素系统之间的活性恢复平衡、促进排钠利尿、心衰缓解。     

慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸

目的:探讨慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响。方法:采用慢性低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺血管孵育,测定慢性HPH对大鼠肺动脉L-Arg转运,一氧化氮合酶(NOS)活性和NO生成释放的影响。结果:(1)低氧4周大鼠肺动脉平均压(mPAP)比对照组高33.7%(P＜0.01),右心室(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量比值(RV/LV+S)高44.2%(P＜0.01)。(2)低氧对血浆L-Arg含量无明显影响。(3)低氧大鼠离体孵育的肺动脉摄取低浓度(0.2mmol/L)和高浓度(5.0mmol/L)[³H]-L-Arg分别低于对照组15.8%(P＜0.05)和27.2%(P＜0.01)。(4)低氧大鼠肺动脉tNOS、iNOS和cNOS活性较对照组高38.0%、32.8%和53.0%(P＜0.01)。(5)低氧大鼠血浆NO含量低于对照组,与mPAP和RV/LV+S呈负相关(P＜0.01)。结论:慢性HPH时NOS活性代偿性增强,但L-Arg转运受损使血浆NO生成仍减少,说明L-Arg转运是NO生成的重要限速步骤。     

孕期自发性高血压鼠服卡托普利预防子鼠高血压及其机制

目的：探讨自发性高血压大鼠（SHR）在孕期服转换酶抑制剂卡托普利预防子鼠高血压的作用及其肾素血管紧张素系统机制。方法：观察孕期服卡托普利（Cap100mg·kg-1·d-1）对子鼠收缩压的影响；以放免法和反转录一聚合酶链式反应法分别测血浆、组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度和组织AngⅡ－Ⅰ型受体（AT1）mRNA表达。结果：红血单纯在孕期服用卡托普利能有效桔抗子鼠随增龄的升压幅度（P＜0.01）；同时降低其大脑皮质、肾皮质地AngⅡ浓度，增高AT1mRNA表达。结论：证实胚胎期是SHR发病的关键阶段，在此期干扰AngⅡ的生成能有效预防子鼠发生高血压，为高血压病的防治提供了实验性启示。     

钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节

目的:观察钙调神经磷酸酶(CaN)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节。方法:建立AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大模型,观察CaN抑制剂对AngⅡ刺激的心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入的影响,以及各种因素对心肌细胞CaN酶活性的影响。结果:10、 100、 1000 nmol·L^-1的AngⅡ作用12 h分别使心肌细胞的CaN活性增加了13%、 57%(P＜0.05)、 228%(P＜0.01)。AngⅡ(10 nmol·L^-1)刺激心肌细胞2 h内,CaN活性与对照组无明显差异(P＜0.05);AngⅡ刺激心肌细胞12 h以上,CaN活性才明显增高(P＜0.05)。Losartan(50 μmol·L^-1)、H₇(50 μmol·L^-1)及Fura-2/AM(4 μmol·L^-1)可明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性;而PD98059(50 μmol·L^-1)对AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性无明显影响。AngⅡ(10^-7mol/L)刺激的大鼠心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入明显高于对照组(P＜0.01),而CaN特异性抑制剂-环孢素A(0.5~5 μg/mL)可以明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入。结论:依赖Ca²⁺/CaM活化的CaN可能在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用;CaN的活化可能有赖于胞内Ca²⁺水平的持续升高,另外,CaN的活性还可能受到蛋白激酶C等信号分子的磷酸化调节。