鼠转化生长因子-β1基因的克隆及其在成骨细胞中的表达

目的 克隆鼠转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）基因并研究其在转染的成骨细胞中表达情况。方法 采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）可从大鼠淋巴细胞中扩增出１．２ｋｂ特异性片段,经酶切鉴定证实为鼠ＴＧＦ－β１ ｃＤＮＡ。将此片段插入５．４Ｋｂ的ｐｃＤＮＡ表达载体,构建得到６．６Ｋｂ的ｐｃＤＮＡ－ＴＧＦ－β１重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将ＴＧＦ－β１表达载体导入鼠成骨细胞,４８ｈ后用ＳＡＢ     

骨巨细胞瘤GCF－5抗原分子量测定及蛋白性质分析

为了探明抗骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）肿瘤细胞成分的单克隆抗体ＧＣＦ－５相应抗原的性质，并为研究ＧＣＴ肿瘤抗原打下基础。本研究采用高浓度ＳＤＳ提取细胞膜蛋白。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ分析了抗原蛋白的分子量。用蛋白质化学染色技术对ＧＣＦ－５抗原蛋白进行了糖、脂分类染色。结果显示主要的ＧＣＦ－５抗原为分子量１３．５ＫＤ和１７．４ＫＤ的含糖量极少的糖蛋白     

骨巨细胞瘤单克隆抗体GCF—5特性及价值的进一步研究

本文是关于本室制备的骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）单克隆抗体ＧＣＦ－５系列研究之一。为了进一步揭示它的特性和价值，用Ｆ１ＴＣ（偶联ＧＣＦ－５）、ＰＩ（标记ＤＮＡ）和ＰＥ（偶联抗ＣＤ２单抗）对３０例ＧＣＴ标本进行标记，通过流式细胞仪分析了ＧＣＦ－５与ＧＣＴ中细胞结合的特性。结果显示：瘤细胞ＧＣＦ－５阳性率与Ｓ＋Ｇ２／Ｍ期细胞所占比率呈显著性相关（Ｐ〈０．０５）；在２６例原发瘤与４例复发瘤两组之间，ＧＣＦ－５阳     

纤溶酶原激活物抑制物—1／绿色荧光蛋白融合基因表达载体的？…

目的 以绿色荧光蛋白为报告基因,构纤溶酶原激活物抑制物－１与ＧＦＰ融合基因的真核表达质粒,在活细胞状态下观察ＰＡＩ－１／ＧＦＰ融合蛋白在大鼠系膜细胞中表达。方法 利用聚合酶以应（ＰＣＲ）从含有编码人类ＰＡＩ－１（ｈＰＡＩ－１）全长ｃＤＮＡ序列的质粒ｐＵＣ１９－ＰＡＩ－１中扩增出ｈＰＡＩ－１的编码区全长ｃＤＮＡ序列,定向克隆至真核表达载体ｐＣＭＸ－ＣＦＰ。利用脂质体为转染载体,将表达质粒转染至体外培     

肾癌差异表达基因GYLZ-RCC18的全长克隆及意义

目的 克隆并鉴定肾癌与下沉肾组织之间差异表达的基因。为研究肾癌发生发展机制提供新的突破口。方法 应用抑制性消减杂交技术,构建人肾癌组织与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库,并从中克隆鉴定出肾癌特异表达的基因。结果：构建成功高消减效率的人肾癌组织ｃＤＮＡ消减文库,对其中１０个克隆的插入ｃＤＮＡ片段进行测序后,经基因库检索表明１０个片段均为未知新序列,其中ＧＹＬＺ－ＲＣＣ１８基因为５个拷贝,这提示以上１０个ｃＤＮＡ片段可能来自６个新基因。差异分析显示ＧＹＬＺ－ＲＣＣ１８的肾癌组织中有明显表达,而在正常肾组织中无表达,应用ＳＭＡＲＴ ＲＡＣＥ技术获得ＧＹＬＺ－ＲＣＣ１８基因的全长,并证明ＧＹＬＺ－ＲＣＣ１８是一个５′端有Ｄ３种不同剪切方式亚型的基因家族。结论 ＧＹＬＺ－ＲＣＣ１８基因是肾癌特异表达的新基因。人肾癌ｃ     

人精子有效抗原基因表达克隆的研究

我们从人睾丸组织中提取ＲＮＡ，并进一步纯化出ｍＲＮＡ；以此为模板，在反转录酶和ＤＮＡ多聚酶的作用下，合成ｃＤＮＡ；将ｃＤＮＡ与λｇＩＩ载体重组后转染大肠杆菌，构建人睾丸ｃＤＮＡ表达文库。运用遗传显色法和噬菌斑原位杂交法鉴定表达文库后，用兔抗人精子抗体筛选人精子抗原基因表达克隆（ＨＳＧ）。对ＨＳＧ表达抗原（ＨＳＧＡｇ）和特异抗体（ＨＳＧＡｂ）进行纯化和抗生育效应的测定。结果显示：（１）人睾丸ｃＤＮＡ表达文库容量为１．８２Ｘｌ０６ｐｆｕ，遗传显色法示重组率为６７％，噬菌斑原位杂交法示重组率为５１％。（２）经兔抗人精子抗体筛选２Ｘｌ０４ｐｆｕ，得８株人精子抗原基因表达克隆。（３）人血清、兔血清ＨＳＧ２Ａｂ和兔血清ＨＳＧ８Ａｂ对人精子具有补体依赖细胞毒作用。（４）兔血清ＨＳＧ３Ａｂ能阻断人精子在顶体反应时顶体后区ＣｏｎＡ受体的暴露。结果提示，ＨＳＧ２、ＨＳＧ３和ＨＳＧ８克隆的表达抗原是精子有效抗原，能作为精子免疫避孕疫苗的候选成分。     

骨巨细胞瘤GCF—5抗原分子量测定及蛋白性质分析

为了探明抗骨巨细胞瘤肿瘤细胞成分的单克隆抗体ＧＣＦ－５相应抗原的性质，并为研究ＧＣＴ肿瘤抗原打下基础，本研究采用高浓度ＳＤＳ提取细胞膜蛋白。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析了抗原蛋白的分子量，用蛋白质化学染色技术对ＧＣＦ－５抗原蛋白进行了糖、脂分类染色、结果显示主要的ＧＣＦ－５抗原为分子量１３．５ＫＤ和１７．４ＫＤ的含糖量极少的糖蛋白。     

体外免疫吸附对狼疮肾炎的治疗和保护作用

目的　观察体外免疫吸附（ＥＩＡ） 对狼疮肾炎（ＬＮ） 的治疗和肾脏保护作用。方法　比较树脂型ＥＩＡ、大剂量激素和ＣＴＸ联合治疗（ 简称ＥＩＡ组）与大剂量激素和ＣＴＸ治疗（ 简称对照组） 血ＩｇＧ、ＡＮＡ、ｄｓＤＮＡ、Ｃ３、２４ 小时尿蛋白、ＢＵＮ、Ｓｃｒ 及其他临床指标的变化。结果　治疗２ 周时,ＥＩＡ组血ＩｇＧ、ＡＮＡ、ｄｓＤＮＡ显著低于对照组［ 两组分别为ＩｇＧ（１０－０３ ±２－９１） 、（１３－５４ ±３－０５）ｇ／Ｌ,ＡＮＡ（１４－００ ±１３－１４）、（３１－８２ ±３０－０２）ｔｉｔｅｒ－ １,ｄｓＤＮＡ（８－３０ ±４－８３） 、（２７－００ ±１８－５１） ％］ 。Ｃ３ 显著回升［ 两组分别为（５８７－３±９７－０３） 、（４８１－５±１３２－０４）ｍｇ／Ｌ］,２４ 小时尿蛋白、ＢＵＮ、Ｓｃｒ 显著低于对照组［ 两组分别为２４ 小时尿蛋白（２－２８±２－０７） 、（５－９８ ±３－３４）ｇ／２４ｈ,ＢＵＮ（９－１７ ±２－８３）、（１５－２９ ±５－３８）ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｓｃｒ（１５６－７５ ±８９－３３）、（２４７－１４±７４－６９）μｍｏｌ／Ｌ） 。治疗４ 周时,ＥＩＡ 组血ＩｇＧ、ｄｓＤＮＡ 仍低于对照组［ 两组分别为Ｉｇ     

人精子抗原基因表达克隆HSG_3生物学效应研究

本研究在已构建人睾丸ｃＤＮＡ表达文库，并用抗人精子抗体从中筛选出人精子抗原基因表达克隆（ＨＳＧ）的基础上，对其中ＨＳＧ３克隆进行了生物学效应的测定，结果显示①ＨＳＧ３克隆的溶原蛋白分子量为１４９ＫＤａ，并被兔抗人精子抗体识别。②ＨＳＧ３克隆表达抗原的特异抗体（ＨＳＧ３Ａｂ）对人精子ＳＩＴ和ＧＡＴ无明显影响，但能阻断人精子在顶体反应时，顶体后区ＣｏｎＡ受体的暴露。表明ＨＳＧ３克隆的表达抗原具有受精抗原的特性，能作为精子免疫避孕疫苗的候选成份。     

膀胱癌多药耐药的流式细胞术分析

本实验旨在研究流式细胞术(ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ)在膀胱癌细胞的多药耐药分析方面的作用,现报道如下。一、材料与方法1.试剂及仪器:ＤＭＥＭ、ＤＮＡ提取试剂盒ＤＮＡｚｏｌ、ＲＮＡ提取试剂盒Ｔｒｉｚｏｌ为Ｇｉｂｃｏ产品;秋水仙素、甲酰胺、ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ为Ｓｉｇｍａ产品;缺口平移系统(ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ)为Ｐｒｏｍｅｇａ产品,尼龙膜为ＺｅｔａＰｒｏｂｅ产品;鲑鱼精ＤＮＡ购自晶美生物公司;ＭＤＲ1ＰＣＲ引物Ｐ1:5′ＣＣＣＡＴＣＡＴＴＧＣＡＡＴＡＧＣＡＧＣ3′,Ｐ2:5′ＣＴＴＣＡＡＡＣＴＴＣＴＧ…     

In Vitro Evaluation of U. S. and U. S. S. R. Artificial Hearts

This report summarizes the results of the in vitro evaluation of Soviet and American artificial hearts. The devices were tested at the All-Union Institute of Transplantation and Artificial Organs, Moscow, U.S.S.R., and Baylor College of Medicine, Houston, Texas, U. S. A. These studies were designed to standardize procedures to allow comparison of artificial ventricles of different designs. Also, these studies might provide a means for evaluation of other characteristics such as hemolysis, durability, and reliability. Static and dynamic tests were performed, varying preload, afterload, rate, and systolic and diastolic time intervals. All designs demonstrated comparable function curves with capability of taking over the pressure and volume work of the natural heart.