人GLP-1(7-36)酰胺对非肥胖型糖尿病小鼠胰岛炎的影响

目的通过观察人胰高糖素样肽1（GLP-1）刺激后非肥胖型糖尿病（NOD）小鼠胰岛组织形态学的变化,研究GLP-1对NOD 1型糖尿病小鼠胰岛炎的影响。方法 GLP-1治疗组小鼠用微型渗透泵皮下持续泵入人GLP-1,对照组小鼠泵入生理盐水,4周后将其胰腺组织做HE染色、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Br-dU）/胰岛素双重免疫染色及导管细胞角蛋白（DCK）/胰岛素双重免疫荧光染色,观察小鼠胰岛炎的变化及胰岛β细胞的复制和胰腺导管上皮β细胞的新生。结果与对照组相比,GLP-1治疗组NOD小鼠胰岛单核细胞浸润明显减轻,胰岛炎评分明显下降（P〈0.001）。GLP-1治疗组胰岛可见较多BrdU阳性的β细胞和胰岛素阳性的导管上皮细胞,而在对照组几乎看不到。结论人GLP-1持续刺激NOD小鼠后,可使1型糖尿病小鼠胰岛炎减轻并促进β细胞再生。     

人GLP-1(7-36)酰胺促进非肥胖型糖尿病小鼠胰腺导管上皮细胞分化

目的 探讨人胰高糖素样肽1(GLP-1)对非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠胰腺导管上皮细胞分化与增殖的影响.方法 GLP-1治疗组小鼠用微型渗透泵皮下持续泵入人GLP-1,对照组小鼠泵入生理盐水,4周后将其胰腺组织分别做导管细胞角蛋白(DCK)/胰岛素双重免疫荧光染色、胰腺十二指肠同源异型盒基因(PDX-1)/胰岛素双重免疫荧光染色及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)/DCK双重免疫染色,显微镜下观察胰腺导管上皮细胞的分化和增殖.结果 在GLP-1治疗组胰腺导管上皮中可见较多胰岛素阳性细胞及PDX-1/胰岛素双阳性细胞,而在对照组几乎看不到;GLP-1治疗组小鼠BrdU阳性的导管上皮细胞的百分数与对照组小鼠相比明显增高(P ＜0.001).结论 人GLP-1持续刺激NOD小鼠后,可促进胰腺导管上皮细胞分化与增殖.     

2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的相关因素研究进展

随着人们对胰岛β细胞功能障碍导致2型糖尿病发生、发展认识的深入，胰岛β细胞凋亡问题也渐渐受到临床关注。与1型糖尿病自身免疫介导的凋亡不同，多种复合因素参与了2型糖尿病胰岛β细胞的凋亡过程。了解胰岛β细胞凋亡的本质与影响因素有助于人们制定更为合理有效的2型糖尿病防治方案。     

霉酚酸酯对非肥胖性糖尿病小鼠胰岛炎和胰岛β细胞凋亡的保护作用

目的:探讨霉酚酸酯(mycopbenolate mofetil,MMF)对非肥胖性糖尿病小鼠non-obese diabetic mice,NOD)胰岛炎和胰岛β细胞凋亡的保护作用.方法:8周龄NOD雌性小鼠22只分为两组,每组11只,干预组给予霉酚酸酯30 mg/kg灌胃,对照组给予等量的生理盐水.两组小鼠饲养期间定期监测其血糖水平.30天实验结束时,每组取5只小鼠处死,行HE染色观察胰岛炎程度,TUNEL法检测胰岛β细胞凋亡率.余下小鼠观察到发生精尿病或20周处死.结果:干预前两组小鼠血糖均在正常水平.干预期间和干预期满后,MMF干预组小鼠血糖与生理盐水对照组之间无差异(P>0.05);MMF组胰岛炎严重程度及胰岛β细胞凋亡率较生理盐水对照组明显减轻(P<0.01).结论:MMF可以在早期抑制NOD小鼠的胰岛炎和胰岛β细胞凋亡,从而减轻胰腺损伤.如果在糖尿病发病前给予MMF可能延缓或防止糖尿病的发生.     

胰高糖素样肽GLP—1（7—36）NH2对体外培养的新生大鼠胰岛细胞 …

目的与方法 探讨ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２对培养的新生大鼠胰岛细胞胰岛素和胰高 糖素释放的影响，并以Ｆlro－３为探针，用５７０型粘附式细胞仪研究ＧＬＰ－１（７－ ３６）ＮＨ２对β细胞内Ca＾２＋的作用。结果在含１１．２mmol/Ｌ葡萄糖的ＫＲＢＢ液中孵育１h,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在１０＾－１１～１０＾－８mol/Ｌ使胰岛细胞胰岛素分泌无明显增加，但在含葡萄糖５．６、１１．２和１６．７mmol/Ｌ时，胰岛素分     

艾塞那肽对2 型糖尿病大鼠糖脂代谢和胰岛超微结构的影响

目的 研究胰高糖素样肽-1 受体激动剂艾塞那肽对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和胰岛细胞的影响及其作用机制。方法 健康雄性SD 大鼠随机分为正常对照组（C 组6只）、正常对照+ 艾塞那肽处理组（C+E 组6 只）、糖尿病组（D 组5 只）以及糖尿病+ 艾塞那肽处理组（D+E 组5 只）,由高脂饮食加小剂量STZ 诱导成2型糖尿病后,D+E 组以及C+E 组大鼠予艾塞那肽,5μg,腹部皮下注射,1 次/d 干预;8 周后,分别测定各组大鼠体重、FBG、空腹胰岛素（FINS）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感指数（ISI）以及血脂谱。同时行透射电子显微镜观察大鼠胰岛组织超微结构改变。结果 D+E 组大鼠FBG、FINS、TG、TC、LDL、HOMA-IR水平均明显低于未予干预的D 组大鼠（均P＜0.05）,ISI 则显著高于D 组大鼠（P＜0.05）。超微结构研究,与D 组大鼠比较,D+E 组大鼠胰岛β 细胞数量增加,形态较规则,胞质分泌颗粒增加,颗粒密度较正常;仅见少量线粒体肿胀,结构模糊。内质网结构无明显破坏。结论 艾塞那肽能显著改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,对其残存的胰岛细胞具有明确的保护作用。     

胰高糖素样肽1对大鼠胰岛功能影响的研究

目的:研究胰高糖素样肽-1(GLP-1)对大鼠胰岛功能的影响,探讨GLP鄄1在糖尿病治疗中的作用。方法:①GLP鄄1(10nmol/L)与原代培养的大鼠胰岛共孵育1天、3天和5天后,分别行葡萄糖刺激下的胰岛素分泌试验(GSIS),在试验的0、10、20及60min依次收集细胞培养上清液,放免法检测胰岛素水平的变化。或与GLP鄄1共育1天、3天、5天后分别收集各组胰岛细胞,RT鄄PCR法检测各组胰岛素基因表达的变化。②分别予不同浓度的GLP鄄1(0、1、10、102和103nmol/L)与大鼠胰岛细胞瘤细胞RINm5f共育24h,及GLP鄄1(10nmol/L)与RINm5f共育24h、48h及72h,MTT法检测各组A值变化。结果:①与GLP鄄1共育后,大鼠胰岛基础胰岛素分泌量增加(P<0.05),GSIS试验中各时间点胰岛素分泌量均升高(P<0.05),胰岛素基因的表达量呈时间依赖性升高,即予GLP鄄1刺激5天后,胰岛素基因表达量最高;②与GLP鄄1共育后,随GLP鄄1浓度的增高及刺激时间的延长,RINm5f细胞MTT法中A值呈剂量及时间依赖性的增加。结论:GLP鄄1可促进大鼠胰岛细胞胰岛素基因的表达和蛋白的分泌,对大鼠胰岛细胞亦有明显的促增殖作用。     

2型糖尿病KKAY小鼠胰岛β细胞凋亡与胰岛素水平关系的研究

目的 :探讨 2型糖尿病发病的机制 ,并了解 APP- 17肽、APP- 11肽、胰岛素对胰岛 β细胞凋亡率及功能的影响。方法 :将30只 2型糖尿病小鼠随机分为 4组 ,其中 3组被分别注射 APP- 17肽、APP- 11肽和胰岛素 ,另 1组未用药 ,并设 6只非糖尿病KKAY小鼠为正常对照组。 6个月后 ,用原位末端转移法 (TUNEL)对各组胰岛 β细胞进行观察 ,计算凋亡胰岛 β细胞的阳性率 ;并用放射免疫法检测胰岛素的水平。结果 :2型糖尿病小鼠未用药组胰岛 β细胞凋亡率 (5 6 .2 4± 2 .38) %显著高于正常对照组 (47.38± 3.6 5 ) % (P <0 .0 5 ) ,APP- 17肽、APP- 11肽组胰岛 β细胞的凋亡率分别为 (49.96± 2 .6 9) % ,(5 1.2 0± 2 .2 7) % ,显著低于 2型糖尿病小鼠未用药组 (P均≤ 0 .0 5 ) ;胰岛素组胰岛 β细胞的凋亡率为 (5 2 .84± 4 .5 6 ) % ,绝对值低于 2型糖尿病小鼠未用药组 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。胰岛 β细胞凋亡率在 (47.38± 3.6 5 ) %～ (5 6 .5 4± 2 .38) %时 ,所检测的胰岛素水平无显著性差异。结论 :胰岛 β细胞凋亡是 2型糖尿病的发病机制 ,APP- 17肽、APP- 11肽、胰岛素可减少胰岛 β细胞的凋亡     

胰升糖素样肽-1对胰岛β细胞增殖、分化及凋亡的调节

胰升糖素样肽-1（GLP-1）是一种肠促胰岛素（incretin），是由营养物质，特别是由葡萄糖刺激而引起释放的一类胃肠激素，在高糖条件下能刺激胰岛素的分泌。GLP-1最早是在对胰升糖素原（proglucagon，PG）基因进行序列分析时发现的，PG基因首先在胰岛α细胞、少数脑干神经元和肠内的神经内分泌细胞-L细胞内表达，然后通过胰升糖素原的组织特异性翻译后修饰，最终在不同的组织内形成各种不同的终末产物。胰升糖素原含有160个氨基酸残基，在胰岛α细胞内被激素原转化酶2酶解为胰升糖素，而在肠道内被激素原转化酶1／3酶解为GLP-1、GLP-2、IP等肽类激素。     

内质网应激对2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的影响

糖尿病是一种多因素慢性代谢性疾病,与遗传因素和环境因素密切相关。随着生活水平的提高和饮食结构的改变,2型糖尿病（type2 diabetes mellitus,T2DM）的发病率日益增高,其各种并发症严重危害着人们的生活质量和生命安全,因此成为医学界关注的重要问题之一。目前虽T2DM的发病机制尚未完全澄清,但研究表明T2DM是以胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能衰竭为主要特征,     

GLP-1受体激动剂Exendin4对胰岛β细胞胰岛素和IAPP分泌模式的影响

目的：探讨GLP-1受体激动剂（GLP-1RA）Exendin4作用下胰岛β细胞的胰岛素及胰淀粉样多肽（IAPP）的分泌模式。方法：观察小鼠胰岛瘤细胞系MIN6细胞在不同浓度Exendin4作用不同时间后的细胞形态的变化;利用MTT实验检测MIN6细胞在不同干预后的细胞活性的变化;采用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验,检测MIN6细胞在不同干预后培养液上清中的胰岛素和IAPP分泌量的变化;采用荧光定量PCR（RT-PCR）检测各组MIN6细胞的胰岛素和IAPP mRNA表达水平的变化。结果：与正常对照组比较,Exendin4组的细胞数量增加,贴壁牢固,形态正常;细胞活性随Exendin4作用浓度以及作用时间的增加而显著增加,具有一定的浓度及时间依赖性;胰岛素和IAPP的分泌水平随Exendin4作用浓度以及作用时间的增加而显著增加,具有一定的浓度及时间依赖性,而IAPP/胰岛素的比值随作用浓度以及作用时间的增加而减小;胰岛素和IAPP mRNA水平均随Exendin4作用浓度以及作用时间的增加而上调,具有一定的浓度及时间依赖性,IAPP/胰岛素mRNA比值随作用浓度以及作用时间的增加而减小。结论：Exendin4作用于MIN6细胞可增加细胞数量和细胞活性,改善细胞状态,保护胰岛细胞功能;并且可引起胰岛素以及IAPP分泌水平增加,胰岛素和IAPP mRNA表达水平增加,而IAPP/胰岛素比值下降。     

罗格列酮对实验性1型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的:观察罗格列酮(Rosiglitazone natrium,RSG)对实验性1型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响.方法:6周龄SD大鼠随机分成3组,正常对照(Control,Con)组24只,糖尿病(Diabetic mellitus,DM)组24只,罗格列酮干预(Rosiglitazone,RSG)组24只.以链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)溶液单次腹腔注射,72 h后测空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)≥16.7 mmol/L为造模成功.应用罗格列酮后5个时间段(2、5、7、10、13周),分别用TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)方法检测胰岛β细胞的凋亡,用免疫组化法检测胰岛中胰岛素(Insulin,Ins)及Fasl的表达.结果:与DM组相比,RSG组胰岛表达胰岛素水平提高,β细胞相对凋亡指数及Fasl表达水平均下降(P均＜0.05).结论:罗格列酮能抑制或延缓β细胞凋亡,其机制可能与抑制Fas/Fasl细胞凋亡通路有关.     

大鼠胰岛α细胞及其分泌物对β细胞功能的影响

目的：探讨大鼠胰岛α细胞和胰高血糖素样肽1（GLP-1）对β细胞（INS-1细胞,即胰岛素瘤细胞）功能的影响,阐明α细胞与INS-1细胞混合移植对降糖效果影响的可能机制。方法：采用MTT法分析10%、20%和30%胰岛α细胞条件培养基和0.03、0.30、3.00和30.0 mg·L^-1 GLP-1作用下INS-1细胞的增殖能力;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测10%、20%和30%胰岛α细胞、胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下INS-1细胞胰岛素释放水平;采用激光共聚焦显微镜分析高糖和GLP-1作用下INS-1细胞内Ca²⁺浓度;采用Western blotting法分析不同浓度的胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下胰岛素蛋白表达水平;将INS-1细胞、INS-1细胞与α细胞的混合物移植至糖尿病裸鼠左肾包膜下,监测血糖,观察肾脏形态,采用免疫组织化学法检测移植部位细胞中胰岛素和胰高血糖素水平。结果：与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1均可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放（P < 0.05）。激光共聚焦显微镜分析,GLP-1可刺激INS-1细胞内Ca²⁺浓度升高（P < 0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1作用下INS-1细胞中胰岛素蛋白表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。与移植前比较,糖尿病裸鼠肾包膜下移植INS-1细胞35d时血糖明显下降（P < 0.05）,甚至出现低血糖,移植部位明显肿胀;移植INS-1和α细胞混合物的糖尿病裸鼠血糖无明显变化（P > 0.05）,移植部位未见明显肿胀。免疫组织化学染色,移植INS-1细胞部位的组织既表达胰岛素又表达胰高血糖素。结论：胰岛α细胞及其分泌物可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放,但α细胞与INS-1细胞混合移植给糖尿病裸鼠可降低INS-1细胞移植的降糖效果,其机制可能与INS-1细胞既表达胰岛素基因又表达胰高血糖素基因有关。     

GLP-1及其类似物在2型糖尿病治疗领域研究进展

胰升糖素样肽-1（GLP-1）及其类似物的研究应用是近年糖尿病治疗领域的研究热点。2005年,第一个GLP-1类似物（Exenatide）经美国FDA批准上市应用于临床,经过5年的临床实践,已作为糖尿病治疗新药受到医学界的广泛关注。2010年,GLP-1类似物及DDP-4抑制剂在中国上市。本文借此机会对GLP-1及其类似物在2型糖尿病治疗领域的研究进展进行综述,以使我国广大临床医生对这一新的糖尿病治疗药物获得全面认识。     

2型糖尿病胰岛β细胞凋亡机制

2型糖尿病(T2DM)是一种多基因遗传性疾病,其病因及发病机制目前尚不十分清楚.一般认为,T2DM的发生是多源性的,是环境因素和遗传因素共同作用的结果.近年研究证实,胰岛β细胞功能上的改变在发病初期起关键作用,由凋亡所致的β细胞数量减少及胰岛功能受损在整个病程中都起着重要的作用.本文就近年来2型糖尿病胰岛β细胞凋亡机制的研究进展作一综述.     

Bcl-2家族与2型糖尿病胰岛β细胞凋亡

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的死亡。Bcl-2家族是细胞凋亡的关键调节分子,由Bcl-2亚家族、Bax亚家族和BH3亚家族组成。β细胞的功能障碍和凋亡是2型糖尿病发生的重要因素。高血糖、游离脂肪酸、胰淀素等可诱导2型糖尿病β细胞凋亡。Bcl-2家族成员接受诱导凋亡信号后,共同构成一个异常复杂的相互作用网络,调节胰岛β细胞凋亡。     

GLP-1与糖尿病的研究进展

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是30个氨基酸的多肽,是目前所知最强的葡萄糖依赖型的胰岛素分泌促进激素.GLP-1是第一个被描述的肠促胰岛素(incretin),是一种消化时由胃肠道系统释放出来的物质,促进葡萄糖依赖性的胰岛素从胰腺β细胞中释放出来.不仅如此,GLP-1还具有降低血浆中的胰高血糖素水平,降低胃排空的速率,促进饱食感和刺激胰岛β细胞的增殖与分化等多种生理活性,这些特性使许多学者认为GLP-1可能成为治疗2型糖尿病比较理想的药物,因此成为糖尿病治疗新药物研究的热点.本文就GLP-1与糖尿病的关系作一综述.     

穴位埋线抑制2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的实验研究

目的：观察穴位埋线对2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的影响,探讨穴位埋线治疗2型糖尿病的机制。方法：将造模成功的大鼠按随机化原则分为穴位埋线组、西药组、安慰剂组,同时将普食组大鼠作为正常对照组,每组各10只。穴位埋线组大鼠取双侧胰俞、后三里和中脘等穴,西药组用罗格列酮（0.2mg/kg体重）灌胃,安慰剂组用生理盐水（2mL/kg体重）灌胃,均1次/d,连续4周。观察治疗前后空腹血糖变化,实验结束时,HE染色观察大鼠胰腺组织学改变,免疫组化标记胰岛β细胞,末端脱氧核糖核酸缺口标记法（TUNEL）＋免疫组化法标记凋亡的胰岛β细胞。结果：穴位埋线组、西药组胰岛β细胞凋亡率均明显低于安慰剂组（P=0.000）,穴位埋线组胰岛β细胞凋亡率有低于西药组的趋势,但无显著性差异（P=0.351）。结论：穴位埋线可有效抑制2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的凋亡。     

胰高血糖素样肽-1对葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素原合成的短期作用

目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在高浓度、低浓度葡萄糖作用下对胰岛β细胞胰岛素原合成的短期影响。方法:将NIT-1细胞随机分为低浓度葡萄糖(LG)组、低浓度葡萄糖+GLP-1(LGG)组、高浓度葡萄糖(HG)组和高浓度葡萄糖+GLP-1(HGG)组4组。检测基线0h及葡萄糖和(或)GLP-1刺激后4h各组细胞胰岛素原基因和蛋白表达。结果:基线时各组胰岛素原表达无显著差异(P>0.05),4h后HG组、HGG组胰岛素原表达均明显增高(P<0.05),而LG和LGG组无明显变化(P>0.05)。组间比较,HGG组胰岛素原表达量明显高于LG组、LGG组及HG组(均P<0.05)。HG组胰岛素原表达量显著高于LG组、LGG组(均P<0.05)。结论:在高浓度葡萄糖条件下,短期GLP-1刺激可显著增加胰岛β细胞胰岛素原合成;GLP-1联合高糖对胰岛素原合成具有协同作用。     

可溶性环氧化酶水解酶抑制剂-1471预防2型糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡的机制

目的:探讨可溶性环氧化酶水解酶抑制剂-1471(sEHI-1471)预防2型糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡的作用及其机制。方法:2型糖尿病KKAy小鼠随机分为2组:sEHI-1471组(18只)及对照组(18只),分别饮用含8mg/L的sEHI-1471或等体积生理盐水的饮用水,将同周龄的雄性C57BL/6J小鼠设为正常组,饮水不受干预。比较各组小鼠空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素水平(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。TUNEL检测胰岛β细胞凋亡。Western Blot检测胰腺组织Bcl-2,Bcl-xL,Bim,Bax和Bid表达水平。结果:干预3周后,与正常组相比,对照组FBG、FINS和HOMA-IR指数均显著升高(P<0.05);与对照组相比,sEHI-1471组小鼠FBG、FINS和HOMA-IR指数均显著降低(P<0.05);比较各组凋亡变化的结果,对照组较正常组胰岛β细胞凋亡数显著增加(P<0.05),sEHI-1471组较对照组凋亡细胞数明显下降(P<0.05)。比较各组小鼠胰腺抗凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-xL和促凋亡蛋白Bax,Bim,Bid表达水平,对照组相对于正常组Bcl-2,Bcl-xL表达明显降低,Bax,Bim和Bid表达明显升高,而相对于对照组,sEHI-1471组Bax,Bim和Bid表达明显降低,Bcl-2和Bcl-xL表达明显升高(P<0.05)。结论:sEHI-1471能降低血糖,增加糖尿病小鼠对胰岛素的敏感性,减少KKAy小鼠胰岛β细胞凋亡,其机制可能与降低促凋亡蛋白Bax,Bim,Bid表达和增加抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL表达有关。