补肾中药有效成分对SAMP8小鼠氧化应激水平的影响

[目的]观察补肾中药有效成分补骨脂素、齐墩果酸、淫羊藿苷对快速老化(SAMP8)小鼠氧化应激水平的影响。[方法]选取9月龄雄性SMAP8小鼠,采用随机数字表法随机分为补骨脂素组、齐墩果酸组、淫羊藿苷组及模型组。同时另取同龄段的抗快速衰老亚系1(SAMR1)小鼠作为对照组。治疗组分别给予补骨脂素(50 mg/kg)、齐墩果酸(50 mg/kg)、淫羊藿苷(20 mg/kg)灌胃,对照组与模型组均给予等量的生理盐水灌胃,每次0.3 m L,每日1次,连续灌胃4周后断头取脑。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测SMAP8小鼠大脑皮质中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。[结果]SMAP8小鼠大脑皮质中SOD、CAT和GSH-Px活性较同龄SAMR1小鼠明显降低,模型组大脑皮质SOD、CAT和GSH-Px活性均低于对照组,经4周治疗后,治疗组大脑皮质中SOD、CAT和GSH-Px活性均高于模型组,对于以上指标,补骨脂素、齐墩果酸、淫羊藿苷3种组间比较差异无统计学意义(P0.05)。[结论]补肾中药对SAMP8的氧化应激损伤具有一定保护作用,从而可以达到防治老年性痴呆的作用。     

壮骨止痛胶囊A部分抗骨质疏松有效成分研究

目的 通过研究壮骨止痛胶囊A部分石油醚部位抗骨质疏松作用的化学成分,为壮骨止痛胶囊的药效物质基础研究及质量标准制定打下基础,同时为壮骨止痛胶囊的二次开发提供依据.方法 采用硅胶柱及葡聚糖凝胶柱反复层析分离制备得到各化合物,再利用去卵巢大鼠模型进行药效学筛选,然后通过理化性质和波谱数据解析,并与参考文献数据进行比对确定有效成分的化学结构.结果 从壮骨止痛胶囊A部分石油醚部位分得8个化合物,其中4个化合物具有抗骨质疏松作用,通过波谱学分析及文献对照,分别鉴定为异补骨脂素、补骨脂素、齐墩果酸、补骨脂定,其中首次发现补骨脂定具有抗骨质疏松作用.结论 壮骨止痛胶囊A部分石油醚部位中具有抗骨质疏松作用的有效成分为异补骨脂素、补骨脂素、齐墩果酸、补骨脂定.     

壮骨止痛方治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析

目的:探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松相关蛋白改变谱。方法:利用二维凝胶电泳分离股骨组织的总蛋白,通过软件分析2-DE图谱,比较各组间蛋白的表达量,然后利用MALDI-TOF-MS制作差异蛋白点的肽谱,确定各差异蛋白的种类,通过生物信息学分析所得蛋白的功能。结果:壮骨止痛方能调节骨骼肌的能量代谢、物质转运,对大鼠去卵巢骨质疏松症产生调节作用。     

3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用

目的:观察3种补肾代表中药淫羊藿、补骨脂、女贞子各自有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对去卵巢3个月大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:40只Sprague Dawley(SD)雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组(后3组合称治疗组)。模型组和治疗组切除双侧卵巢,正常对照组切除卵巢周围部分脂肪组织。治疗组于造模第2d开始按20mg/kg给予对应药物每日1次灌胃,连续12周。造模后第4周开始称量体质量,每周1次。造模后12周大鼠处死,取第4腰椎进行micro-CT扫描,评价骨量改变情况。采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSCs,于取材后第7d干细胞基因芯片技术检测mRNA表达。结果:造模后大鼠体质量增加,补骨脂素能减少增加幅度,而淫羊藿苷和齐墩果酸没有明显作用。Micro-CT显示,去卵巢12周后,模型组与正常对照组之间,骨形态计量学参数骨体积与组织体积之比BV/TV,骨小梁数目Tb.N,骨小梁厚度Tb.Th明显减少,骨小梁空间距离Tb.Sp明显增加。淫羊藿苷和齐墩果酸显著增加Tb.Th,对其他参数也有改善的趋势。补骨脂素有改善的趋势,但没有统计学差异。大鼠全基因表达谱显示在被检测的26 420个基因中,模型组比正常对照组下调2倍的基因有4 193个,约占15.87%,淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸比模型组上调2倍的基因分别有3 226,1 701和3 232个。模型组比正常对照组上调2倍的基因有5 015个,约占18.98%,3个有效成分比模型组下调2倍的基因分别有3 549,1 660和3 545个。基因功能分类分析显示3个有效成分共同改变的基因涉及的功能包括:细胞成分中的初级内体、分子功能相关的磷酸跨膜转运蛋白活性、GDP结合、内肽酶活性、酶调节剂活性、谷氨酸受体结合、转移酶活性、5-羟色胺受体活性、血清素结合;细胞外基质、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性、氨基酸结合、RNA甲基转移酶活性、磷蛋白磷酸激酶抑制剂活性等。结论:补肾中药可能从增加BMSCs细胞外基质、促进生长因子相关信号通路、增加蛋白质合成等方面发挥促进BMSCs成骨分化的作用,最终实现治疗骨质疏松的疗效,但其确切的机制还有待深入研究。     

参仙片的质量标准研究

参仙片是由淫羊藿、女贞子、仙茅、人参和制何首乌五味药材组成,功能与主治为温肾益精、补气养血.适用于肾阴阳两虚,心气不足所致的腰膝酸软,神疲乏力,头晕耳鸣,胃寒肢冷,心悸气短,夜尿频多等症.本试验选用TLC法对处方中淫羊藿、女贞子、何首乌和仙茅进行了鉴别,HPLC法测定处方中齐墩果酸和淫羊藿苷的含量,为参仙片质量的控制(标准的建立)提供了实验数据.     

补肾活血壮骨方治疗早期创伤性股骨头坏死66例

目的:观察补肾活血壮骨方治疗早期创伤性股骨头坏死的临床疗效。方法:将66例患者随机分为治疗组44例和对照组22例,治疗组予补肾活血壮骨方制成膏方,对照组服用钙尔奇D片,两组服用疗程均为6个月,1~2 a后对其进行随访,以采用成人股骨头缺血性坏死疗效百分评价法及影像学资料。结果:对照组有效率为63.6%,治疗组有效率为90.9%。两组有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血壮骨方能延迟或预防早期创伤性股骨头坏死,改善髋关节功能,为早期创伤性股骨头坏死治疗的有效方法。     

RP-HPLC法测定补肾活血胶囊中淫羊藿苷的含量

目的:建立测定补肾活血胶囊中淫羊藿苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为C18,以乙腈-水(28∶72)为流动相,检测波长为270 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃。结果:淫羊藿苷在0.12-1.2μg范围内呈良好的线性关系r,=0.9996,平均加样回收率为97.53%(RSD%=1.72%)。结论:该方法准确、操作简便,可用于补肾活血胶囊的质量控制。     

不同生境朝鲜淫羊藿有效成分分析

目的：探讨于不同生境下栽培的朝鲜淫羊藿有效成分变化规律．为朝鲜淫羊藿生产标准的制定提供依据。方法：依照2000年版《中华人民共和国药典》朝鲜淫羊藿项下检测方法,对通化和敦化两地不同生境栽培的朝鲜淫羊藿。不同物候期采收的样品进行总黄酮、淫羊藿苷的检测。结果：各样品总黄酮、淫羊藿苷的含量均远高于药典标准,且郁闭度小比郁闭度大者含量高;5月花期含量最高,之后下降,8月下旬又升高。结论：朝鲜淫羊藿可于阔叶林下仿生栽培。于8月下旬采收。     

从蛋白质组学探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松症的作用机理

目的:用蛋白质组学的方法研究壮骨止痛方治疗骨质疏松的作用机理。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组,13周后骨质疏松症模型成功,提取股骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组股骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MAlDI-TOF-MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Marx science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了2个差异蛋白,分别P1为膜联蛋白A1,P2为蛋白质二硫键异构酶A3,初步认为这两种蛋白质在壮骨止痛方治疗该病过程中发挥着重要调控作用。     

壮骨灵胶囊中淫羊藿苷的含量测定

目的：建立中药壮骨灵胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相：乙腈-水（30∶70）;检测波长：270nm;柱温：40℃;流速：1.0mL/min。结果与结论：淫羊藿苷在0.1～0.18μg范围内线性关系良好,相关系数r=0.999 9,淫羊藿苷含量平均值为0.287 8mg/g,该法准确、可靠、重复性好,可用于壮骨灵胶囊中淫羊藿苷含量的测定。