5种方法制备高尿酸血症大鼠模型的实验研究

【目的】 探讨长期给药建立稳定高效的高尿酸血症合并肾损伤的大鼠模型。【方法】 将48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、氧嗪酸钾组、腺嘌呤组、氧嗪酸钾+腺嘌呤组、酵母膏+氧嗪酸钾组以及酵母膏+腺嘌呤组,每组 8 只,分别给予5%羧甲基纤维素钠 2 mL/d灌胃、氧嗪酸钾250 mg·kg-1·d-1灌胃、腺嘌呤200 mg·kg-1·d-1灌胃、氧嗪酸钾250 mg·kg-1·d-1联合腺嘌呤200 mg·kg-1·d-1灌胃、酵母膏15 g·kg-1·d-1联合氧嗪酸钾250 mg·kg-1·d-1灌胃以及酵母膏15 g·kg-1·d-1联合腺嘌呤200 mg·kg-1·d-1灌胃。连续干预4周后,检测血清尿酸、尿素氮和肌酐水平,采用苏木素-伊红染色法评估肾脏组织病理学变化。【结果】 在为期4周的造模后,各造模组血清尿酸、尿素氮和肌酐值均显著高于正常对照组（P < 0.05）。其中,氧嗪酸钾+腺嘌呤组效果最明显。各造模组可见肾组织尿酸钠盐结晶体积聚,肾小管周围炎性细胞浸润严重,上皮细胞胞质空泡明显。【结论】 为期4周的氧嗪酸钾、腺嘌呤和酵母膏处理均可以建立稳定高效的高尿酸血症的动物模型。     

建立高尿酸血症动物模型实验研究

目的 :探讨构建科学、合理、稳定的高尿酸血症动物模型,为治疗高尿酸血症药物药效及机制研究奠定基础。方法 :采用次黄嘌呤、氧嗪酸钾和乙胺丁醇三者联合应用造模。模型Ⅰ组采用次黄嘌呤(25 g/kg)饲料喂养,乙胺丁醇(250 mg/kg)灌胃并同时皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg);模型Ⅱ组灌胃给予腺嘌呤(100 mg/kg)和乙胺丁醇(250 mg/kg)。连续检测大鼠血清中血尿酸水平,并进行肾脏组织病理学观察,综合评价其对肾脏的影响。结果:模型Ⅰ、Ⅱ组大鼠连续给药10天后,其血尿酸水平均明显升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。模型Ⅰ组在造模的第3、7天的给药后3h血清尿酸值已明显升高,12~24 h与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后模型Ⅰ、Ⅱ组的尿素氮与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组模型动物血清肌酐和谷丙转氨酶与空白对照组比较无差异。模型Ⅰ组肾小管-间质病理损害程度积分均低于模型Ⅱ组(P<0.05)。结论:两种造模方法均能有效造模,模型Ⅰ组更适合于高尿酸血症治疗药物药效筛选及作用机制的研究。     

急性慢性高尿酸血症大鼠模型的建立

目的：筛选出稳定可行的急性、慢性高尿酸血症大鼠模型，为抗高尿酸药物的研发提供模型工具。方法：急性高尿酸血症大鼠模型采用皮下注射次黄嘌呤(HX)+腹腔注射氧嗪酸钾(OAPS)和单纯腹腔注射OAPS的方法造模，在造模后0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、10 h眼眶取血，测定血尿酸、血肌酐及血清尿素氮水平。慢性高尿酸血症大鼠每天灌胃酵母膏(YE)+腺嘌呤(AP)溶液+定期腹腔注射OAPS溶液和每天灌胃乙胺丁醇(EMB)+OAPS混合溶液的方式造模，连续给药14 d，停止给药后继续观察14 d，在第4、6、8、11、14、15、16、18、20、22、25、28天大鼠眼眶取血检测血尿酸、血肌酐、血清尿素氮，在第14、28天取大鼠肾脏进行肾组织病理学检测。结果：2种急性模型均出现了尿酸值短暂性升高和急性肾脏损伤情况，而HX+OAPS联合模型高尿酸水平维持时间更长。2种慢性模型尿酸水平显著提高并出现了肾脏损伤，停止造模后，2种高尿酸水平可以维持1周左右，EMB+OAPS给药肾脏损伤更加严重，2周后各项指标仍处于高水平。结论：4种方法均可建立急性慢性高尿酸血症动物模型，但是HX+OAPS联合给药的急性模型和灌胃EMB+OAPS混合溶液的慢性模型病理症状更加明显，维持时间也更长，更适于药物的筛选。     

氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型的研究及评价

目的:通过对小鼠梯度给药,探讨氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症急性模型的用药剂量,并对不同的高尿酸血症动物模型进行比较,为高尿酸血症研究中动物模型的选择提供参考。方法:小鼠腹腔注射不同剂量氧嗪酸钾,诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行尾静脉采血,测定血清尿酸值,得到小鼠急性高尿酸血症模型氧嗪酸钾合适剂量;再利用实时荧光定量技术检测小鼠给药后肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶基因表达水平的变化。依据文献显示的大鼠和树鼩高尿酸血症动物模型氧嗪酸钾用量和肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶mRNA表达水平的变化对三种动物模型进行分析比较。结果:小鼠腹腔注射600 mg/kg的氧嗪酸钾在给药后1～2 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;腹腔注射氧嗪酸钾1.5h后,小鼠黄嘌呤氧化酶/脱氢酶mRNA的表达水平较对照组上升2.14倍。综合本实验结果和文献分析显示氧嗪酸钾致三种动物高尿酸血症的用药剂量不同,其中树鼩所需最小。结论:尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾均能诱导出大鼠、小鼠和树鼩急性高尿酸模型,但药物的敏感性差异较大,提示树鼩可作为一种潜在的高尿酸动物模型。     

除湿化瘀方防治大鼠高尿酸血症的研究

目的本实验采用腺嘌呤(Adenine)、乙胺丁醇灌喂大鼠诱导高尿酸血症动物模型,观察除湿化瘀方对其的影响.方法选择大鼠作为模型动物,以腺嘌呤、乙胺丁醇为造模剂,塑造高尿酸血症动物模型,动态检测大鼠血尿酸等生化指标,观察除湿化瘀方对该模型动物血清尿酸水平的影响.结果除湿化瘀方高剂量给药7、14d可明显降低腺嘌呤、乙胺丁醇诱发的大鼠血尿酸升高,第7天可明显降低黄嘌呤氧化酶水平,肾功能损害明显低于别嘌呤醇组.结论除湿化瘀方有明显降尿酸作用,其机理有待进一步研究.     

高尿酸血症脾虚证病证结合大鼠模型的建立与评价初探

目的:建立一种疾病与证候相结合的高尿酸血症脾虚证大鼠模型。方法:一是模型建立方法:应用氧嗪酸钾+高嘌呤肥甘厚味饲料喂养+小笼环境制备高尿酸血症脾虚证病证结合大鼠模型。将40只大鼠按随机数字表法分为对照组、脾虚证组、高尿酸血症组和高尿酸血症脾虚证病证结合组4组各10只;二是模型评价方法:以血清尿酸水平评价高尿酸血症"疾病"模型的建立;以外观行为评分、血清D-木糖水平和力竭游泳时间评价脾虚证"证候"模型的建立。结果:与对照组比较病证结合组大鼠血清尿酸值明显升高,与对照组比较病证结合组大鼠外观行为评分明显增加,血清D-木糖水平和力竭游泳时间明显下降。结论:应用氧嗪酸钾+高嘌呤肥甘厚味饲料喂养+小笼环境制备的SD大鼠模型符合高尿酸血症及脾虚证的病证特征,应为一种较实用的研究中医药治疗高尿酸血症作用机制的动物模型,值得进一步发掘。     

水蛭素抗痛风作用及其机制研究

目的探讨水蛭素抗痛风作用及其机制。方法利用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,尿酸钠诱导大鼠急性痛风性炎症模型,观察水蛭素对急性高尿酸血症尿酸水平及其诱导炎症的影响;利用氧嗪酸钾诱导小鼠慢性高尿酸血症模型,观察水蛭素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮水平及血清、肝脏黄嘌呤氧化酶活性,肾脏的病理学改变、C-反应蛋白(CRP)水平及葡萄糖转运体9(GLUT9)表达的影响。结果水蛭素可显著降低次黄嘌呤引起的高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,显著抑制由尿酸钠引起的大鼠足跖急性肿胀;可显著降低由氧嗪酸钾引起的慢性高尿酸小鼠血清高尿酸水平,降低血清尿素氮水平,显著抑制GLUT9的表达,减轻肾脏病理学损伤。结论水蛭素具有显著的抗高尿酸血症及抗痛风作用,其机制可能与保护肾脏作用及调节GLUT9表达有关。     

高嘌呤饮食联合尿酸酶抑制制备大鼠高尿酸血症肾损害模型

目的:建立大鼠高尿酸血症肾损害动物模型。方法:采用不同配比的腺嘌呤和氧嗪酸钾给实验大鼠灌胃,观测实验前后大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮水平变化,行肾组织病理与超微病理观察。结果:各组大鼠血尿酸均有不同程度的升高,高剂量组肾损害较重,低剂量组肾损害不明显。结论:中剂量组作为高尿酸血症动物模型较为合适。     

王再谟教授采用温肾化瘀法治疗高尿酸血症的机理探讨

目的:研究温肾化瘀法治疗高尿酸血症的作用机理。方法:将温肾化瘀中药分别用于因酵母膏和氧嗪酸钾盐致高尿酸血症动物模型身上,并与苯溴马隆和别嘌呤醇对照观察其对模型动物血尿酸、尿素氮及血清黄嘌呤氧化酶的影响。结果:两种方法均可使小鼠血尿酸明显升高(P<0.05)。在酵母膏致高尿酸血症动物模型中,中药各剂量组及苯溴马隆组有明显改善模型动物血UA、BUN异常升高的作用(P<0.05),但中药各剂量组对XOD活性的改善与模型组相比无统计学意义(P>0.05);在氧嗪酸钾盐致高尿酸血症动物模型中,中药高剂量组、别嘌呤醇组及苯溴马隆组与模型组比较有改善实验小鼠血UA、BUN异常升高的作用(P<0.05),但中药各剂量组对XOD活性的改善与模型组相比无统计学意义(P>0.05)。但对XOD活性的改善,高剂量组已接近于阳性组。结论:温肾化瘀中药很可能有抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性和促进尿酸排泄的作用。     

慢性高尿酸血症动物模型的制备及改良

目的：制备高尿酸血症大鼠模型,并采用不同的给药方式,观察模型大鼠不同时间血尿酸的变化,以期建立稳定的慢性高尿酸血症动物模型,为研究慢性高尿酸血症、评估其治疗药物的疗效建立可靠平台。方法：予大鼠尿酸灌胃或自由饮水,同时,氧嗪酸钾（OA）分别灌胃或皮下注射,在不同时间点观察大鼠血尿酸的变化。结果：大鼠尿酸灌胃同时予OA后血尿酸显著升高,2h值最高,尤以OA皮下注射组血尿酸值最高,至6h仍维持较高水平,随着时间的延长血尿酸逐渐降低。结论：建立慢性高尿酸血症大鼠模型必须有赖尿酸及尿酸酶抑制剂同时、分次干预,才能形成稳定的高尿酸血症。     

痛风宁防治急性痛风性关节炎的实验研究

[目的]探讨痛风宁防治大鼠急性痛风性关节炎的作用机制。[方法]将70只大鼠随机分为7组,分别为空白组、模型组、中药对照组、西药对照组、痛风宁高、中、低剂量组,每组10只,采用尿酸钠和氧嗪酸钾诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,测定大鼠关节肿胀度和大鼠血清尿酸水平。[结果]痛风宁具有抑制大鼠足肿胀的作用,并能降低大鼠血清尿酸水平。[结论]痛风宁对大鼠急性痛风性关节炎有一定的防治作用,其中痛风宁高、中剂量组作用明显。     

金匮肾气丸对中老年男性原发性高尿酸血症血尿酸及性激素的影响

[目的]考察金匮肾气丸对中老年男性原发性高尿酸血症血尿酸及性激素的影响。[方法]将60例患者随机分为2组各30例。对照组用别嘌呤醇治疗;治疗组加用金匮肾气丸。[结果]两组治疗后性激素水平及比值、血尿酸值比较,差异有显著性意义。[结论]温补肾阳对中老年男性原发性高尿酸血症血尿酸及性激素均有调节作用,性激素水平的平衡可能有降低高尿酸血症血尿酸的作用。     

大黄藿苓汤对慢性肾衰大鼠成纤维细胞生长因子表达的影响

[目的]探讨大黄藿苓汤对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用及机制。[方法]采用腺嘌呤造模,设空白组、模型组、治疗1、2组。[结果]治疗1、2组肾脏病理改变较模型组轻,尿素氮、肌酐、尿酸、成纤维细胞生长因子(bFGF)表达治疗1组较模型组减少(P0.05),治疗2组与模型组相比bFGF表达无明显差异。[结论]大黄藿苓汤对腺嘌呤致慢性肾衰大鼠肾脏有保护作用,且早期用药优于晚期用药,其机制可能是抑制bFGF表达。     

四君子汤加减配合替吉奥胶囊治疗晚期胃癌

目的:比较四君子汤加减配合替吉奥胶囊与单纯替吉奥胶囊对晚期胃癌患者的临床疗效、毒副作用及免疫功能的改变.方法:将40例晚期胃癌患者随机分为观察组(四君子汤加减加替吉奥胶囊组)与对照组(单纯替吉奥胶囊组)各20例,观察两组患者在近期疗效、免疫功能、不良反应及生活质量等方面的差异.结果:两组对比观察组近期疗效、生活质量及免疫功能均明显高于对照组(P＜0.05);观察组毒副作用明显低于对照组(P＜0.05).结论:四君子汤加减联合替吉奥胶囊治疗晚期胃癌可提高疗效、减轻毒副作用,改善患者的免疫功能,提高患者的生活质量.     

芹菜素对慢性肾功能衰竭大鼠贫血和电解质代谢紊乱的影响

[目的]研究芹菜素(APG)对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠贫血和电解质代谢紊乱的影响。[方法]将100只SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型组、APG低剂量组[10 mg/(kg·d)]、APG中剂量组[20 mg/(kg·d)]、APG高剂量组[40 mg/(kg·d)]组,每组20只;采用腺嘌呤连续灌胃21 d的方法复制CRF模型大鼠,APG各剂量组腹腔注射给药治疗(1次/日),正常对照组和模型组同步给予生理盐水,疗程28 d。测定肾功能指标[血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿素(UA)],称体质量并计算肾脏指数;测定贫血指标[红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、铁蛋白(FER)];测定血清电解质[钾(K~+)、钠(Na~+)、钙(Ca~(2+))、磷(P~(3+))];通过苏木精-伊红(HE)染色对肾脏组织进行病理学检查。[结果]与模型组比较,经APG中、高剂量治疗28 d后能够有效降低CRF模型大鼠血清BUN、SCr、UA含量;降低肾脏指数;提高HGB、HCT和SI、TIBC、FER,其中APG高剂量组RBC显著升高;提高血清Ca~(2+)含量并降低P~(3+)含量,其中APG高剂量组K~+、Na~+显著降低;上述差异均具有统计学意义(P0.05或P0.01)。病理学检查结果显示,经APG治疗能够有效抑制CRF大鼠肾脏组织病变。[结论] APG具有改善CRF大鼠贫血、电解质紊乱的药理学作用,这可能是APG对肾功能衰竭能够起到一定保护作用的机制之一。     

清热利湿、活血通络法治疗急性期痛风74例临床观察

[目的]通过临床与常规西药治疗比较,观察清热利湿、活血通络法治疗急性期痛风的临床疗效与安全性。[方法]将明确诊断的74例患者随机分为治疗组37例和对照组37例。治疗组给予萆薢汤化裁中药汤剂口服,对照组口服双氯芬酸钠缓释片及秋水仙碱,入组期间两组患者均采用低嘌呤饮食。1周后进行中医证候疗效评价,观察治疗前后受试者关节疼痛评分、肿胀评分、全身症状评分、血尿酸、血沉及不良反应发生情况。[结果]与对照组比较,治疗组中医证侯疗效评分差异无统计学意义(P0.05)。两组治疗后关节疼痛评分、肿胀评分、全身症状评分、血尿酸、血沉较治疗前均明显改善,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后治疗组全身症状评分、血尿酸及血沉改善情况均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究期间,治疗组未见不良反应发生,对照组不良反应4例,停药或经对症处理后即恢复正常。[结论]清热利湿、活血通络法治疗急性期痛风疗效显著,在改善全身症状,降低血尿酸及血沉方面优于常规西药治疗,且具有良好的安全性,值得临床推广应用。     

虎杖-桂枝药对配伍对大鼠慢性高尿酸血症和肾、肠尿酸转运体表达的影响

目的:研究虎杖-桂枝药对配伍对大鼠高尿酸血症的防治作用及对尿酸盐阴离子转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白3(OAT3),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2(ABCG2)表达的影响。方法:84只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,苯溴马隆组(10 mg·kg~(-1)),痛风定组(160 mg·kg~(-1))和虎桂低、中、高剂量组(3.5,7,14 g·kg~(-1))。以皮下注射氧嗪酸钾(200mg·kg~(-1))和ig次黄嘌呤(50 mg·kg~(-1))和乙胺丁醇(250 mg·kg~(-1))的方法,建立高尿酸血症大鼠模型。第4天开始各组大鼠ig给予相应药物,每天1次,连续2周,测定血尿酸(SUA),尿尿酸浓度(UUA),肌酐(Cr),尿素氮(BUN),谷丙转氨酶(GPT)水平;以RT-PCR方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3和小肠ABCG2的mRNA表达水平,以Western blot方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3的蛋白表达水平;以免疫组化方法测定大鼠小肠ABCG2的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸水平显著升高,尿尿酸排泄减少,肾脏URAT1 mRNA和蛋白高表达,肾OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白低表达,具有明显统计学差异(P0.01)。与模型组比较,虎桂药对高中剂量组能显著降低血尿酸和尿素氮水平,增加24 h尿酸排泄量;虎桂药对高中剂量组能显著降低肾脏URAT1 mRNA和蛋白表达量水平,升高肾脏OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白的表达量水平,均具有明显统计学差异(P0.01,P0.05)。结论:虎桂药对有明显的抗高尿酸血症作用,可能是通过下调大鼠肾脏URAT1的表达,并上调大鼠肾脏OAT3和小肠ABCG2的表达而减少尿酸的重吸收并增加其排泄。     

尿酸性肾病大鼠模型的建立

目的：考察4种不同的方法,建立稳定的尿酸性肾病（uAN）大鼠模型。方法：50只雄性SD大鼠随机分成5组,正常对照组实验过程中正常饲养;模型I、Ⅱ、Ⅲ组给予10％高酵母饲料喂养,同时分别给予腺嘌呤每日50mg／kg、100mg／kg、200mg／kg灌胃;模型Ⅳ组按腺嘌呤100mg／kg、乙胺丁醇250mg／kg的比例,配置成混悬液每日350mg／kg灌胃,连续给药2ld,制造UAN模型。实验前、实验第10天、第21天大鼠测定血清uA、BUN、CR水平;HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法观察。肾脏组织尿酸盐阴离子交换器1（uRAT1）、有机阴离子转运子1（OAT1）、有机阳离子转运体2（OCT2）的表达。结果：模型I组uA、BUN、CR水平较正常组轻微升高（P〉0．05）;模型Ⅱ组UA、BUN、CR水平在第10天、第21天较正常组升高（P〈0．05）;模型Ⅲ、Ⅳ组仅在第10天uA水平较正常组升高（P〈0．05）;BUN、CR水平在第10天、第21天,较正常组升高明显（P〈0．05）。HE染色病理切片结果提示：各模型组肾小管和间质均有不同程度的损伤,模型Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肾组织内可见黄褐色结晶,其中模型Ⅲ、Ⅳ组肾组织存在广泛性损害。免疫组化法观察肾组织蛋白表达情况：模型Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组URAT1蛋白表达较正常组上调（P〈0．05,P〈0．01）;同时,OAT1、OCT2蛋白表达较正常组下调（P〈0．05,P〈0．01）。结论：采用酵母和腺嘌呤适合剂量联合用药,可建立稳定的UAN大鼠模型。     

益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用

该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg·d)制备高尿酸血症模型, 并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200, 100, 50 mg·kg·d), 给予氧嗪酸钾1 h后给药, 连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid, SUA), 肌酐(serum creatinine, SCre), 尿中尿酸(uric acid, UA)及肾脏中相关转运体的表达水平, 研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比, 益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸, 肌酐的水平, 升高尿尿酸水平;同时, 益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1, URAT1), 葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9, GLUT9) mRNA 的表达, 上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter, OCT), 肉毒碱转运体(carnitine transporter, OCTN)mRNA的表达, 具有促进肾脏尿酸排泄的作用。     

清血汤治疗肾性高尿酸血症疗效观察

[目的]观察中药清血汤治疗肾性高尿酸血症的疗效。[方法]将60例患者随机分两组,每组各30例。对照组采用常规治疗加别嘌醇,治疗组用常规治疗加清血汤,8周后统计疗效。[结果]治疗组可以降低血肌酐、尿素氮、血尿酸和升高肾小球滤过率,与治疗前相比差异有统计学意义(P0.01);治疗组降低血肌酐、尿素氮和升高肾小球滤过率与对照组相比差异有统计学意义(P0.01);对照组降低血尿酸与治疗组相比差异有统计学意义(P0.01)。[结论]清血汤可以改善慢性肾脏病3期继发高尿酸血症(肾性高尿酸血症)患者的临床症状、肾功能,并降低升高的血尿酸。