细菌伴侣蛋白Skp引起白细胞趋化运动的体内实验研究

目的细菌伴侣蛋白(Seventeen-Kilodalton protein,Skp)可以作用于C5a受体引起白细胞的趋化作用。该研究的目的Skp在生物体内和体外实验一样可以引起白细胞的趋化运动,且是细菌提取掖中主要的白细胞趋化因子。方法制备Skp的特异性抗体,进行免疫吸收实验,进而豚鼠体内实验,观察组织标本。结果E.Coli提取液中主要的白细胞趋化活性来自于Skp。Skp提纯物注射后可在豚鼠皮内发生单核细胞和PMNs的大量浸润。结论细菌体内的Skp可能与在细菌壁发生补体系统激活产生的C5a共同引起白细胞的趋化反应。对于革兰氏阴性病原菌的先天性免疫具有重要意义。     

细菌伴侣蛋白Skp对C5a受体的作用位点

目的 Skp（Seventeen-Kilodalton protein）已被证明是C5a受体的两个内源性的化学配体：C5a和S19核糖体蛋白二聚体（RPS19 dimer）之外的第3个配体，通过C5a受体引起白细胞的趋化运动.该研究目的：阐明Skp如何与受体结合及与受体结合的位点.方法 使用S19核糖体蛋白（RPS19）和C5a的合成模拟肽链，进行的受体拮抗试验.使用Skp的合成模拟肽链进行趋化运动分析试验.结果 证明Skp与RPS19和C5a一样，结合于C5a受体的相同结合区域，且也通过两步结合机制使受体活化.并初步推测了Skp分子结构中可能的受体结合位点.结论 C5a受体可以通过识别革兰氏阴性细菌蛋白，在先天性免疫方面起到重要的作用.     

麝香糖蛋白成分对趋化三肽激活的大鼠中性白细胞功能的…

采用大鼠中性白细胞体外温孵系统，观察麝香糖蛋白成分麝香－１对体外趋化三肽激活的大鼠中性白细胞某些功能，包括超氧阴离子产生和溶酶体酶释放的影响。结果表明，麝香－１在１￣１００μｇ／ｍｌ终浓度下，可使中性白细胞超氧阴离子生成量增加２３．０％￣８３．６％，使β－葡糖苷酸酶释放量降低７％￣４７％，使溶菌酶释放量降低９％￣２２％，抑制溶酶体酶释放可能是麝香抗炎作用机制之一。     

磷酸二酯酶4抑制剂Hemay005对人白细胞趋化活性的影响

目的体外研究磷酸二酯酶4抑制剂Hemay005对人白细胞趋化活性的影响。方法体外分离和培养人外周血白细胞,用甲酰三肽(fMLP)作诱导剂,通过48孔微量趋化小室检测Hemay005人白细胞趋化功能的影响。结果 Hemay005与同类PDE4抑制剂CC-10004对fMLP诱导的人白细胞迁移均有明显抑制,抑制作用呈剂量依赖性,IC50值分别为0.188μg/ml和0.253μg/ml。结论 Hemay005可通过抑制炎性反应的中心环节-白细胞趋化而发挥抗银屑病作用。     

Skp2与人类肿瘤的研究现状

Skp2是F—box蛋白家族成员之一，可参与正常的细胞周期调控。在多数人类肿瘤中，Skp2表达增高，且与肿瘤恶性程度和患者预后相关，提示skp2有癌基因的潜能。本文就skp2与人类肿瘤的研究现状作一综述。     

Skp2在恶性肿瘤发生发展中作用的研究进展

随着分子生物学的研究进展,肿瘤已被认为是一个多基因多信号通路参与调节的复杂的分子过程,以细胞增长和增殖失控为特征,表现为细胞周期调控的紊乱。细胞周期调定点以G1/S期调控检测点最为重要,正调控因子可促进细胞通过调定点,而负调控因子则抑制细胞通过调定点,S期激酶相关蛋白2(S-phase associated kinase protein 2,Skp2)可通过泛素蛋白酶体途径降解磷酸化的p27kip1从而促使细胞进入S期,导致肿瘤的发生。本文对Skp2的生物学作用及其在恶性肿瘤中发生、发展的最新进展进行综述。     

脂质过氧化诱导培养的内皮细胞表达白细胞介素-1

为探讨脂质过氧化能否诱导内皮细胞表达白细胞介素-1(IL-1)及其是否具有对单核细胞的趋化活性,用不同浓度(1、5和10μmol/L)的联胺诱发培养的内皮细胞脂质过氧化,用硫代巴比妥酸微量荧光测定法测定样品中的丙二醛含量;用免疫细胞化学检测IL-1β蛋白的表达;用单核细胞趋化实验观察脂质过氧化诱导的白细胞介素-1的趋化活性.结果显示,随着联胺浓度的增高,细胞内的丙二醛含量逐渐升高,分别为对照组的2.60倍、5.88倍和11.67倍(F=129.10,P＜0.05).免疫细胞化学显示,正常内皮细胞可表达低水平IL-1β,加联胺后,各组IL-1β蛋白表达明显增加,分别为对照组的1.78倍、2.70倍和5.02倍(F=293.83,P＜0.05).趋化实验显示,经联胺刺激的条件培养基引起的单核细胞迁移距离明显大于非联胺条件培养基和随机移动组(F=612.55,P＜0.05),在联胺刺激的条件培养基中加入抗IL-1α或抗IL-1β抗体后,单核细胞迁移距离皆明显缩短(F=437.03,P＜0.05).结果提示,联胺可诱发内皮细胞的脂质过氧化,诱导其表达和分泌IL-1,并初步证明IL-1可招引单核细胞迁移,从而在动脉内膜单核/巨噬细胞的募集过程中起一定的作用.     

肺结核患者痰液及血清中单核细胞趋化蛋白-1和白细胞介素-13的变化

目的:探讨肺结核患者清晨痰液和外周血单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及白细胞介素-13(IL-13)的变化及意义。方法:选择2003年4月～2004年1月在长沙市中心医院胸科门诊收治的42例患者,活动性肺结核、肺结核稳定期及无器质性肺疾病者(对照组)各14例。酶联免疫吸附法(ELISA)测定清晨痰液和血清中的MCP-1及IL-13水平。结果:活动性肺结核组中清晨痰液的单核/巨噬细胞总数及MCP-1水平显著高于肺结核稳定期组及对照组(P<0.01),肺结核稳定期组外周血IL-13水平显著高于活动性肺结核组及对照组(P<0.05)。结论:MCP-1及IL-13参与了肺结核炎症反应及纤维化形成,抑制其产生、释放可能会为减轻肺结核炎症反应、防止纤维化形成提供一种新的方法。     

Skp2在膀胱移行细胞癌组织中表达的研究

目的研究Skp2在膀胱癌组织中的表达,探讨其临床意义。方法采用免疫组化方法检测Skp2蛋白在86例膀胱癌和18例膀胱正常黏膜中的表达。结果膀胱癌组织中Skp2蛋白阳性率45．3％,高于膀胱正常黏膜组织16．7％。细胞分化程度越差,Skp2蛋白表达越高。结论膀胱癌中Skp2蛋白的过度表达,提示Skp2蛋白可能在膀胱癌的发生发展中起重要作用。     

冠心病患者Fractalkine、单核细胞趋化蛋白-1和白细胞介素-8的检测及意义

目的:探讨趋化因子Fractalkine、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-8(IL-8)在不同类型冠心病(CHD)患者血清表达水平的变化及意义。方法:采集经冠状动脉造影确诊的稳定型心绞痛(SA)组患者48例、不稳定型心绞痛(UA)组患者56例、急性心肌梗死(AMI)组患者37例外周血标本,同期住院而冠状动脉造影正常的50例患者外周血标本作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测4组血清Fractalkine、MCP-1和IL-8的表达水平,并以国际通用的Judkins法评估冠状动脉病变程度。结果:CHD患者血清Fractalkine、MCP-1和IL-8水平均明显高于对照组(P<0.01),UA和AMI组Fractalkine、MCP-1和IL-8水平均显著高于SA组(P<0.01);多支病变组和双支病变组Fractalkine、MCP-1和IL-8均明显高于单支病变组(P<0.01);重度狭窄组和中度狭窄组Fractalkine、MCP-1和IL-8水平亦显著高于轻度狭窄组(P<0.01)。结论:随着CHD患者病情的加重,血清趋化因子Fractalkine、MCP-1和IL-8水平明显升高,可用以评估CHD患者疾病的严重程度并监测疾病的进展情况。     

Skp2和p27^kip1蛋白在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨泛素降解途径蛋白Skp2和p27^kip1在前列腺癌中的表达及与前列腺癌各项临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性。方法：应用免疫组织化学法和图像分析系统研究41例前列腺癌标本、20例开放手术切除良性前列腺增生标本中Skp2和p27^kip1的表达情况。分析临床病理资料与免疫组化的结果及Skp2、p27^kip1之间的相关性。结果：在前列腺癌中的Skp2蛋白染色阳性率显著高于良性前列腺增生（P〈0.01）;前列腺癌中的p27^kip1蛋白染色阳性率显著低于良性前列腺增生（P〈0.01）。Skp2蛋白表达与前列腺癌术前前列腺特异性抗原（PSA）水平、肿瘤穿透前列腺被膜、肿瘤分期、病理分级均显著相关（均P〈0.05）。p27^kip1蛋白表达与上述临床病理特征负相关（均P〈0.05）。Skp2和p27^kip1蛋白表达呈负相关（r=-0.572,P〈0.01）。结论：Skp2蛋白在前列腺癌中表达增加,其参与了前列腺癌的发病过程。Skp2蛋白表达与p27^kip1蛋白表达之间负相关。Skp2可能成为前列腺癌治疗的一个新的靶标。     

Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究

目的：探讨Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白在大肠癌组织中表达的意义以及相关性。方法：采用免疫组化SP法检测20例正常大肠粘膜、20例大肠腺瘤性息肉及60例大肠癌组织中skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白表达情况，并分析与临床病理参数之间的关系，以及Skp2与c-Myc和P27^kip1蛋白表达的相关性分析。结果：Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白在大肠癌组织中阳性表达率分别为71．67％、66．67％和21．67％。随肿瘤细胞分化程度降低、浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移，P27^kip1阳性表达率逐渐降低，Skp2阳性表达率逐渐升高。c-Myc过表达与浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移有关。三者的阳性表达率均与大肠癌患者的年龄和性别无关。大肠癌组织中Skp2与P27^kip1蛋白表达呈负相关，Skp2与c-Myc蛋白表达呈正相关。结论：从正常大肠粘膜-大肠腺瘤性息肉-大肠癌过程中，Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白表达发生相应变化，均参与大肠癌的发生和发展，其蛋白的检测可为判断大肠癌恶性进程和预后提供重要参考，同时也为大肠癌的靶向治疗提供理论依据。     

Skp2与P27~(kip1)在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的:F-box蛋白家族中的一员Skp2参与细胞周期抑制蛋白P27kip1泛素化降解,研究发现Skp2在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中表达增加。本研究旨在探讨Skp2与P27kip1在鼻咽癌组织中的表达及与鼻咽癌多项临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性。方法:鼻咽癌组39例,慢性鼻咽炎组24例。标本均经石蜡包埋,HE染色确诊。Skp2和P27kip1蛋白的检测采用免疫组化染色(PV-9000二步法)。结果:(1)Skp2在鼻咽癌组织中的阳性表达率为71.79%,明显高于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(41.67%),差异有统计学意义(P<0.05);P27kip1在鼻咽癌组织中的阳性表达率为35.90%,明显低于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(79.17%),差异有统计学意义(P<0.01);(2)Skp2、P27kip1的蛋白表达与鼻咽癌的临床分期、颅神经侵犯有关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度、颈淋巴结转移无关(P>0.05);(3)Skp2、P27kip1在鼻咽癌组织中的表达呈负相关(rs=-0.373,P=0.019)。结论:鼻咽癌中Skp2蛋白表达与靶蛋白P27kip1蛋白降解有关,Skp2、P27kip1可能与鼻咽癌的发生发展有关,联合检测Skp2、P27kip1蛋白表达可作为判断鼻咽癌生物学行为的指标之一。     

Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中的表达和临床意义

目的 探讨Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中的表达,并分析其与子宫内膜样癌发生发展及预后的关系. 方法 选取48例术前未行放化疗的子宫内膜样癌石蜡标本及与其对应正常子宫内膜组织,免疫组织化学Polymer conjugate法检测Skp2和Cmyc蛋白在两种组织中表达情况. 结果 Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中阳性表达率分别为35.4％和70.8％,显著高于正常子宫内膜组织(分别为2.1％和0),差异有统计学意义(P＜0.05).Skp2蛋白表达与淋巴结转移及病理分期有关(P＜0.05),与患者年龄、绝经及肿瘤分化程度无关(P＞0.05);Cmyc蛋白表达与肿瘤分化程度、病理分期和绝经有关(P＜0.05),而与年龄和淋巴结转移无关(P＞0.05),Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样中的表达无相关性(P＞0.05). 结论 Skp2和Cmyc蛋白表达均与子宫内膜样癌的发生发展及预后有关,二者表达增高可能是患者预后差的标志.     

Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中的表达和临床意义

目的：探讨Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中的表达,并分析其与子宫内膜样癌发生发展及预后的关系。方法选取48例术前未行放化疗的子宫内膜样癌石蜡标本及与其对应正常子宫内膜组织,免疫组织化学Polymer conjugate法检测Skp2和Cmyc蛋白在两种组织中表达情况。结果 Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样癌中阳性表达率分别为35.4%和70.8%,显著高于正常子宫内膜组织(分别为2.1%和0),差异有统计学意义(P<0.05)。 Skp2蛋白表达与淋巴结转移及病理分期有关(P<0.05),与患者年龄、绝经及肿瘤分化程度无关(P>0.05);Cmyc蛋白表达与肿瘤分化程度、病理分期和绝经有关(P<0.05),而与年龄和淋巴结转移无关(P>0.05),Skp2和Cmyc蛋白在子宫内膜样中的表达无相关性(P>0.05)。结论 Skp2和Cmyc蛋白表达均与子宫内膜样癌的发生发展及预后有关,二者表达增高可能是患者预后差的标志。     

Skp2、P27和CyclinE在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨宫颈浸润癌组织中Skp2、p27和CyclinE的表达及相关性，以及与临床病理因素和预后的关系。方法采用免疫组化二步法检测70例宫颈癌中Skp2、p27和CyclinE的表达，并分析三者的表达与宫颈癌临床病理因素及预后的关系，同时探讨三者在宫颈癌中表达的相关性。结果①Skp2和CyclinE在宫颈癌中的阳性表达率分别为57．1％和64．3％，并随着肿瘤分化程度的降低表达增高（P〈0．05），与浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移显著相关（P〈0.05），与年龄、临床分期、癌灶大小无关（P〉0．05）。两者的高表达5年生存期明显低于其低表达（P〈0．05）。P27在宫颈癌中的阳性表达情况与以上两者相反。②Skp2、CyclinE和P27呈负相关（P〈0．01）；Skp2和CyclinE呈正相关（P〈0．01）。结论Skp2和CyclinE蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志，Skp2、CyclinE高表达，伴P27低表达提示肿瘤的高侵袭性及不良预后。     

宫颈腺癌中HPV感染与Skp2、p27kip1蛋白表达的研究

目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）和细胞周期调控因子p27^kip1在宫颈腺癌发生发展中的作用，分析高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与Skp2、p27^kip1，蛋白表达关系。方法采用组织微阵列技术结合原住杂交和免疫组化（二步法）检测HPV16／18DNA和Skp2、p27^kip1蛋白在86例宫颈腺癌和24例慢性宫颈炎组织中的表达。结果宫颈腺癌组HPV16／18DNA与Skp2蛋白阳性表达率分别为65．1％和68．6％，均显著高于慢性宫颈炎组（P〈O．01）。p27^kip1蛋白在宫颈腺癌组中的阳性表达率为55．8％，明显低于慢性宫颈炎组（P〈O．05）。HPV16／18感染与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性，但与Skp2表达呈正相关（P〈0．05），与p27单表达呈负相关（P〈O．05）。Skp2表达与宫颈腺癌的病理分级有关，G2、G3组阳性表达率均明显高于G，组（P〈O．05）。Skp2和p27^kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性。结论宫颈腺癌的发生与HPVl6／18感染及Skp2、p27^kip1蛋白的表达异常相关，三者协同作用导致宫颈腺癌恶性发展。     

肝细胞癌组织中Skp2的表达及与p27kip1、PCNA蛋白表达的关系

目的:探讨Skp2的表达在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用,及其与p27kip1(p27)和PCNA的关系。方法:收集76例HCC及癌旁组织,l0例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,l0例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学方法及免疫印迹技术检测Skp2、p27及PCNA蛋白在这些组织中的表达。结果:免疫印迹结果显示:Skp2在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示HCC中Skp2的阳性率(24.08%)显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.001)。Skp2的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P<0.05)。p27在正常肝组织和癌旁组织中的表达明显高于HCC组织(P<0.001)。HCC组织中PCNA蛋白的表达明显高于癌旁和正常组织(P<0.01)。HCC组织中Skp2的表达与p27呈负相关(P<0.001);与PCNA呈正相关(P<0.01)。结论:Skp2在HCC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27,加速了对p27泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常。导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了HCC的发生和发展。