胃癌组织中间隙连接超微结构改变及间隙连接蛋白-43的表达及其意义

目的 观察胃癌组织中间隙连接结构的改变,并检测Cx43蛋白及mRNA在组织中的表达,为胃癌的发病机制研究提供新的思路,同时也为药物治疗提供潜在的作用靶点。方法 通过透射电子显微镜技术观察正常胃与胃癌组织中间隙连接的变化;利用Western blot和 RT-PCR技术检测Cx43在正常胃与胃癌组织中的表达水平。结果 胃癌组织超微结构中细胞间隙连接破坏,分化越差破坏越严重,在正常胃组织中Cx43蛋白及mRNA的表达高于胃癌组织中的表达（P<0.05）,在胃癌组织中高-中分化者Cx43蛋白及mRNA表达高于低分化者（P<0.05）,胃癌组织中TNM分期Ⅰ/ⅡCx43蛋白及mRNA表达高于Ⅲ/Ⅳ期的表达（P<0.05）,胃癌组织中浸润深度未侵及浆膜层者Cx43蛋白及mRNA的表达高于侵及浆膜层者（P<0.05）,胃癌组织中无淋巴结转移者Cx43蛋白及mRNA的表达高于有淋巴结转移者(P<0.05）,Cx43蛋白及mRNA在不同年龄和性别组中的表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 间隙连接超微结构的改变同Cx43蛋白及mRNA的异常表达与胃癌的发生、发展有关,这为胃癌的发病及靶向治疗提供了新的方向。     

胃癌组织VEGF-D的表达与淋巴管生成和淋巴转移的关系

目的研究胃癌组织中血管内皮生长因子-D（vascular endothelial growth factor-D,VEGF-D）表达与淋巴管生成和淋巴结转移的关系,探讨其在胃癌淋巴转移中的作用和意义。方法采用免疫组化方法检测胃癌及癌旁正常胃组织中VEGF-D的表达,酶组织化学方法行胃癌组织淋巴管染色并计数,分析胃癌淋巴结转移及其它临床病理特征。结果胃癌组织VEGF-D表达阳性率（46.6%）显著高于癌旁正常胃组织（22.4%）（P〈0.01）。VEGF-D阳性表达的胃癌组织淋巴管计数（28.86±6.32）显著高于阴性表达的胃癌组织（21.27±5.66）（P〈0.01）。VEGF-D表达与胃癌患者性别、年龄及肿瘤大小、浸润深度无关（P〉0.05）,但其表达在低分化组（53.3%）、有淋巴结转移组（54.5%）、＋期组（56.1%）显著高于高、中分化组（39.3%）、无淋巴结转移组（31.3%）和＋期组（41.2%）,差异有显著性（P〈0.05）。结论VEGF-D与胃癌的发生、发展有关,VEGF-D可刺激胃癌组织淋巴管生成,促进淋巴道转移。     

实时荧光定量PCR 检测胃癌SOX2的 表达及其临床意义

目的： 探讨性别决定相关基因簇2(SOX2)表达与胃癌发生、发展和转移的关系及其临床意义。方法：用Trizol提取52例胃癌组织及对应正常胃黏膜组织的mRNA,并将其逆转录为cDNA。用实时荧光定量PCR方法检测SOX2 mRNA的表达,并分析SOX2基因的表达水平与患者临床病理指标的关系。结果：胃正常黏膜组织中SOX2 mRNA的表达是胃癌组织的2.24倍,两者差异有统计学意义(t=3.22,P=0.002 6)。高分化和中分化的胃癌组织中SOX2 mRNA表达量高于低分化的胃癌组织(t=3.09和2.87,P均<0.05),肿瘤浸润深度为T1+T2的胃癌组织中SOX2 mRNA表达量是T3+T4癌组织的2.57倍(t=2.16,P<0.05),淋巴结无转移组SOX2 mRNA表达量是转移组的2.69倍(t=2.54,P<0.05)。与Ⅰ+Ⅱ期的胃癌组织比较,Ⅲ+Ⅳ期胃癌组织的SOX2 mRNA表达量明显降低(t =2.59,P=0.014)。SOX2 mRNA表达量与患者的性别、年龄无明显关系(P>0.05)。结论：SOX2 mRNA表达水平的降低与胃癌的发生、浸润和转移相关,有望成为胃癌诊断及预后判断的一个指标。     

RAGE在胃癌组织中的表达及与肿瘤侵袭转移的关系

目的 研究RAGE蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌的侵袭和转移的关系。方法 选取50例胃癌组织标本,采用SP免疫组化法检测RAGE表达情况。选取9例新鲜手术切除胃癌标本用于蛋白质印迹（western blot）检测。结果 RAGE在正常组织表达于内皮、平滑肌细胞、单核吞噬细胞。胃癌组织中表达明显增多（P〈0.05）。RAGE在低分化腺癌中的表达明显升高,RAGE的表达和有无淋巴结转移呈负相关（γs=-0.399,P=0.004）。有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P〈0.05）。RAGE蛋白表达的相关性分析表明浸润深度与RAGE蛋白的表达呈正相关（γs=0.385,P=0.06）。不同浸润深度的RAGE的表达差异有显著性意义（P〈0.05）。Western blot结果 分析表明：胃癌的组织学类型与RAGE的表达呈正相关（γs=0.744,P=0.001）。在正常组织、癌旁组织、高分化、中分化、低分化癌组织中,RAGE蛋白含量呈依次上升趋势（P〈0.05）。结论 RAGE在正常胃组织低水平表达,在胃癌组织中的表达明显增强。RAGE的表达与胃癌的侵袭转移密切相关。     

环氧合酶-2 mRNA在胃腺癌组织中表达的实验研究

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)mRNA在胃腺癌组织及癌旁的正常胃粘膜组织中的表达及其意义.方法应用半定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测胃腺癌组织及病灶旁的正常胃粘膜组织中COX-2 mRNA的表达水平.应用Molecular Analyst软件定量分析RT-PCR产物电泳带,COX-2指数由COX-2和β-actin条带的积分吸光度值的比值来确定.COX-2指数大说明组织中COX-2 mRNA的表达水平高.结果胃腺癌组织的COX-2指数明显高于正常胃粘膜(P＜0.01).有淋巴结转移的胃癌组织COX-2指数显著高于无淋巴结转移者(P＜0.01);Ⅲ期和Ⅳ期的COX-2指数分别明显高于Ⅰ期及Ⅱ期(P＜0.05及P＜0.05).癌组织中COX-2 mRNA的表达水平与肿瘤的Borrmann分型、肿瘤浸润深度、分化程度、有无远处转移及肿瘤长径间无相关性(P＞0.05).结论 COX-2 mRNA的表达水平在胃腺癌组织中明显增高;其高表达与淋巴转移及临床TNM分期相关.     

P-gp、GST-π、Topoll在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨P-糖蛋白（P-gp）,谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）及DNA拓扑异构酶（TopoⅡ）在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化S-P法联合检测P-gp、GST-π、TopoⅡ在97例胃癌组织和20例正常胃黏膜组织中的表达情况,探讨其与胃癌的组织学类型、浸润程度、有无淋巴结转移的关系。结果：P-gp、GST-π在胃癌组织中的表达高于正常胃黏膜组织（P〈0.05）,TopoⅡ在胃癌组织中的表达低于正常胃黏膜组织（P〈0.05）。P-gp、GST-π在中高分化腺癌中的表达高于低分化腺癌,有显著意义（P〈0.05）,TopoⅡ在高中分化腺癌中的表达低于低分化腺癌,有显著意义（P〈0.05）。P-gp、GST-π、TopoⅡ在高中分化腺癌中的阳性表达率与黏液癌相比无显著统计学意义（P〉0.05）。TopoⅡ在黏液癌中的表达率显著低于低分化腺癌（P〈0.05）。P-gp、GST-π、TopoⅡ在肿瘤浸润程度上无显著差别（P〉0.05）。P-gp、GST-π在有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组,有显著意义（P〈0.05）;TopoⅡ在有淋巴结转移组的表达率低于无淋巴结转移组,但统计学上无显著意义（P〉0.05）。结论：P-gp、GST-π、TopoⅡ均在胃癌原发性多药耐药中起重要作用。它们在胃癌中的表达与肿瘤浸润深度无关,与组织学类型、有无淋巴结转移有关。联合检测P-gp、GST-π、TopoⅡ对于胃癌制定个体化的化疗方案有指导意义。     

胃癌组织中组织蛋白酶D和层黏连蛋白受体的表达及意义

 目的　研究组织蛋白酶D、层黏连蛋白受体在胃癌中的表达,探讨其与胃癌侵袭及淋巴结转移的关系。方法　采用免疫组织化学SP法,检测96例胃腺癌组织中组织蛋白酶D和层黏连蛋白受体的表达情况。结果　组织蛋白酶D在浆膜层、有淋巴结转移及低分化胃癌组织中的表达明显高于浸润肌层以下、无淋巴结转移及高、中分化的胃癌（分别为P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05）。经四格表χ2检验,层黏连蛋白受体在胃癌组织中的高表达与浸润深度、分化程度密切相关（分别为P＜0.05和P＜0.01）,与淋巴结转移无关（P＞0.05）。胃癌组织中层黏连蛋白受体和组织蛋白酶D之间的相关性分析显示,组织蛋白酶D阳性表达与层黏连蛋白受体阳性表达之间呈正相关（P＜0.05）。结论　胃癌组织中层黏连蛋白受体高表达、组织蛋白酶D高表达与胃癌侵袭转移密切相关。     

喉鳞癌组织中Oct-4 mRNA的表达及意义

目的探讨Oct-4 mRNA在喉鳞癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR和荧光定量PCR检测48例喉鳞癌及其癌旁正常喉黏膜组织中Oct-4 mRNA的表达。结果 RT-PCR显示Oct-4 mRNA在喉鳞癌组织中的阳性率为64.6%,荧光定量PCR显示喉鳞癌组织中Oct-4 mRNA的相对表达量为0.533±0.142,而癌旁正常喉黏膜组织未检测出Oct-4基因的表达（P〈0.01）。Oct-4 mRNA在喉鳞癌高分化组阳性率为33.3%,显著低于中、低分化组的69.0%（P〈0.05）;无淋巴结转移组阳性率为47.8%,显著低于有淋巴结转移组的80.0%（P〈0.05）;Ⅰ、Ⅱ期组阳性率为47.4%,低于Ⅲ、Ⅳ期组的75.9%（P〈0.05）。荧光定量PCR结果显示Oct-4基因的相对表达量随着喉鳞癌组织分化减低、淋巴结转移和高的临床分期而显著增加（P〈0.05）。结论 Oct-4基因的高表达可能参与了喉鳞癌的发生、发展,并对判断喉鳞癌患者的生物学行为有一定意义。     

胃癌组织中Toll样受体4/9的表达与肿瘤病理分期和转移的相关性

目的:探讨Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)4和TLR9在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:收集2009年1月至2009年10月在解放军第174医院手术切除的42例胃癌及其癌旁(距癌灶边缘5 cm)组织标本。RT-PCR和Western blotting检测胃癌组织中TLR4、TLR9在mRNA和蛋白水平的表达。结果:胃癌组织中TLR4和TLR9 mRNA表达高于癌旁组织(1.29±0.03 vs 0.53±0.02,0.99±0.04 vs 0.22±0.05;均P<0.05),Ⅲ期+Ⅳ期胃癌组织中TLR4和TLR9mRNA表达显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P<0.05),有远处转移的胃癌组织中TLR4和TLR9 mRNA表达显著高于无远处转移者(P<0.05);TLR4和TLR9 mRNA的表达水平与患者的年龄、性别、淋巴结转移没有相关性。胃癌组织中TLR4和TLR9蛋白的表达高于癌旁组织(1.36±0.05 vs 0.48±0.04,1.12±0.05 vs 0.34±0.03;均P<0.05),Ⅲ期+Ⅳ期胃癌组织TLR4和TLR9蛋白的表达显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P<0.05)。结论:TLR4和TLR9在胃癌组织中高表达,其表达与胃癌分期、远处转移具有相关性,表明TLR4和TLR9可能参与了胃癌的发生和发展,可能为胃癌的治疗提供一种潜在的靶点。     

胃癌组织中Survivin蛋白表达及临床意义研究

目的探讨胃癌患者中Survivin蛋白的表达和临床意义。方法选取手术切除的胃癌石蜡标本46例,用SP免疫组化法检测Survivin蛋白的表达,分析Survivin蛋白与胃癌组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及高危因素之间的关系。结果 Survivin蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为50.00%,其中低分化及未分化癌的阳性表达率高于高、中分化癌,但差异无统计学意义(P0.05)。黏液腺癌高于印戒细胞癌;食管-胃结合部癌高于胃体及胃窦部癌;Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率高于Ⅰ、Ⅱ期;有淋巴结转移阳性表达率高于无淋巴结转移者;有高危因素者阳性表达率高于无高危因素者,以上差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Survivn表达高低与胃癌病理特点具有相关性,其高表达对于预后分析有重要指导意义。     

cofilin1在胃癌组织中表达的临床病理意义

目的检测胃癌组织中cofilin1蛋白的表达水平,探讨cofilin1蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片与免疫组织化学SP法检测cofilin1在正常胃黏膜、上皮内瘤变和胃癌组织中的表达。结果cofilin1在正常组织、上皮内瘤变与胃癌中表达呈递增趋势（P<0.05）;弥漫型胃癌cofilin1阳性率显著高于肠型胃癌（P<0.05）。胃癌中瘤直径≤3.0 cm的cofilin1的表达明显低于＞3.0 cm的表达（P<0.05）。淋巴结转移组表达明显高于未转移组（P<0.05）。TNM分期Ⅲ、Ⅳ期表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）。cofilin1表达与患者性别差异无统计学意义（P>0.05）。结论cofilin1与胃癌肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关,且与胃癌进展及预后密切相关,可能是胃癌侵袭转移的重要生物标志。     

胃癌组织FRAT1表达与临床病理因素相关性分析

目的:探讨胃癌组织FRAT1的表达及其与胃癌各临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化、RT-PCR及蛋白质印迹法检测112例胃癌组织和20例癌旁胃黏膜组织中FRAT1的表达及其在不同病理级别胃癌组织中的表达差异。结果:FRAT1mRNA和蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为68.8%,明显高于癌旁胃黏膜组织的阳性表达率0,两者比较差异有统计学意义,χ2=30.23,P=0.000。FRAT1在高、中、低分化的胃癌组织中阳性表达率分别为51.6%、72.1%和78.9%,χ2=6.300,P=0.043。且FRAT1的阳性表达与临床分期(P=0.013)和淋巴结转移(P=0.032)有关,而与患者的年龄和性别无关(P>0.05)。结论:FRAT1蛋白的表达率与胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,且随着胃癌组织分化程度的增高而降低,随着TNM分期增高而增高。     

survivin与c-MYC在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨胃癌组织中survivin和c-MYC的表达及意义.方法 采用免疫组化法检测24例胃癌组织及其癌旁正常组织中survivin和c-MYC的阳性表达情况,分析其与临床特征的关系.结果 胃癌组织中survivin和c-MYC的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P﹤0.01).低分化癌组织中survivin的阳性表达明显高于高、中分化癌(P﹤0.01),Ⅲ～Ⅳ期癌组织中survivin的阳性表达高于Ⅰ～Ⅱ期(P﹤0.05),有淋巴结转移的癌组织中sur-vivin的阳性表达高于无淋巴结转移者(P﹤0.05).低分化癌组织中c-MYC的阳性表达明显高于高、中分化癌,Ⅲ～Ⅳ期癌组织中c-MYC的阳性表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期,有淋巴结转移的癌组织中c-MYC的阳性表达明显高于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P﹤0.01).胃癌组织中survivin与c-MYC、分化程度、TNM分期呈正相关(r=0.856、0.973、0.630,P﹤0.01),与淋巴结转移亦呈正相关(r=0.472,P﹤0.05);胃癌组织中c-MYC与分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈正相关(r=0.714、0.734、0.590,P﹤0.01).结论 在胃癌组织中survivin和c-MYC表达较高,对胃癌的发生、发展起到促进作用,可成为胃癌诊断的判断指标.     

抑癌基因PTEN、一氧化氮合酶与胃癌的关系及临床意义

目的检测抑癌基因PTEN编码蛋白、iNOS在正常胃粘膜及胃癌组织中的表达情况,探讨PTEN、iNOS与胃癌发生发展的关系及作用机理.方法采用免疫组织化学S-P法进行检测.结果 10例正常胃粘膜均可见PTEN蛋白的强表达,40例胃癌组织中28例PTEN蛋白表达较正常胃粘膜明显下降或缺失,差异有显著性(P＜0.01),与胃癌的分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移显著相关(P＜0.05).iNOS在胃癌组织中的表达显著高于正常胃粘膜组,(72.5%vs10%,P＜0.01),与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期显著相关(P＜0.05).在PTEN蛋白阴性的胃癌组中,iNOS阳性率为93.8%,显著高于PTEN阳性组(P＜0.05).结论抑癌基因PTEN编码蛋白在胃癌及胃癌发展过程中表达逐渐下降或缺失,与iNOS之间可能存在相互作用,协同参与了胃癌的发展、转移及浸润.PTEN蛋白表达可作为判定胃癌生物学行为的临床参考指标.     

E-cadherin、PDPN、TLR4在舌鳞状细胞癌中的表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的 研究E-cadherin、PDPN、TLR4在舌鳞状细胞癌中的表达及与淋巴结转移的相关性.方法 选取82例舌鳞状细胞癌患者作为研究对象,检测舌鳞状细胞癌组织以及癌旁正常组织内粘附分子E(E-cadherin)、平足蛋白(PDPN)、Toll样受体4(TLR4)的表达,同时与患者临床特征进行分析.结果 E-cadh...     

胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2表达的临床意义

目的 观察HER2在胃癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达及其临床意义.方法 选取胃癌患者140例,其中淋巴结转移94例.采集胃癌患者的原发灶、淋巴结转移灶及癌旁组织,采用免疫组织化学法(Elivision)方法检测3种组织中HER2蛋白表达情况.结果 140例胃癌原发灶组织中HER2蛋白阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者性别、年龄和分化程度无关(P>0.05),癌旁组织中HER2表达与性别、年龄、分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移均无关(P>0.05);HER2蛋白在胃癌原发灶、淋巴结转移灶中表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义,而94例淋巴结转移灶和对应的胃癌原发灶中HER2表达的差异无统计学意义;94例有淋巴结转移的患者淋巴结转移灶与原发灶HER2表达一致率为89.4%,两类标本HER2表达状态具有一致性(Z=6.386,P<0.001).结论 胃癌HER2蛋白的阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关,提示HER2的表达与胃癌的浸润转移有关;胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2的表达具有较好的一致性,患者在不能获取原发病灶的情况下,检测转移灶中HER-2可能为靶向治疗的选择提供依据,为晚期胃癌患者带来希望.     

ZEB-1、E-cadherin在胃癌组织中的表达及与临床病理因素的关系

目的:研究ZEB-1、E-cadherin 蛋白在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理因素之间的相互关系。方法:应用免疫组织化学法（IHC 法）检测ZEB-1 蛋白和E-cadherin 蛋白在171 例胃癌组织和60 例癌旁胃组织中的表达情况,分析两种蛋白在胃癌组织中与临床病理参数之间的关系。结果:ZEB-1在胃癌组织中呈阳性表达,阳性表达率明显高于癌旁胃组织（P<0.05）,且表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM 临床分期有关（P<0.05）;E-cadherin在胃癌组织中阳性表达率明显低于癌旁胃组织,且表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM 临床分期有关（P<0.05）;ZEB-1、E-cadherin 蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关性（r=-0.369,P=0.019）。结论:联合检测E-cadherin 和ZEB-1 对判断胃癌患者的预后具有一定的临床价值。     

血管内皮生长因子C在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的 研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)在胃癌中的表达并探讨其与淋巴结转移的关系。 方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF-Cm RNA在5株胃癌细胞株中的表达情况,同时采用免疫组化法,检测63 例接受根治性切除手术病例的胃癌组织标本VEGF-C蛋白表达。 结果 VEGF-C mRNA表达于胃癌细胞株MKN-45、SGC-7901及AGS。VEGF-C蛋白则在52．4％(33／63)的病例中呈阳性表达。在 伴淋巴结转移的胃癌中,VEGF-C表达较无淋巴结转移者更显著(P<0．01)。同时,VEGF-C表达与淋巴管浸润和TNM分期密切相 关(P<0．01),但与年龄、性别、肿瘤大小、位置、Lauren分型、浸润深度和血管浸润均无明显相关。 结论 VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,同时,淋巴管生成可能成为治疗胃癌的一个新靶点。     

血管内皮生长因子C在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的研究血管内皮生长因子 C(VEGF-C)在胃癌中的表达并探讨其与淋巴结转移的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测 VEGF-Cm RNA 在5株胃癌细胞株中的表达情况,同时采用免疫组化法,检测63例接受根治性切除手术病例的胃癌组织标本 VEGF-C 蛋白表达。结果 VEGF-C mRNA 表达于胃癌细胞株 MKN45、SGC-7901及 AGS。VEGF-C 蛋白则在52.4%(33/63)的病例中呈阳性表达。在伴淋巴结转移的胃癌中,VEGF-C 表达较无淋巴结转移者更显著(P<0.01)。同时,VEGF-C 表达与淋巴管浸润和 TNM 分期密切相关(P<0.01),但与年龄、性别、肿瘤大小、位置、Lauren 分型、浸润深度和血管浸润均无明显相关。结论 VEGF-C 的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,同时,淋巴管生成可能成为治疗胃癌的一个新靶点。