参附芎泽方对压力超负荷大鼠心肌TGF-β1、CTGF表达的影响

目的探讨参附芎泽方对压力超负荷大鼠心肌纤维化的干预作用。方法 SD大鼠随机分成假手术组、模型组、方药组,每组10只。采用腹主动脉缩窄术建立压力超负荷大鼠心肌纤维化模型。假手术组和模型组给予纯净水,方药组给予参附芎泽方(含生药量6.4g/kg)相应的等体积药液。以20ml/kg的容积灌胃,一日1次,连续8周。ELISA法检测血清TNF-α、AngⅡ含量;Western blot检测转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达;HE染色观察心肌组织的病理变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清TNF-α、AngⅡ含量增高,心肌组织中TGF-β1与CTGF表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,参附芎泽方药组血清TNF-α、AngⅡ含量降低,心肌组织TGF-β1与CTGF表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。HE染色模型组心肌纤维可见明显断裂、部分溶解,排列紊乱,大量结缔组织增生。而方药组心肌纤维排列较为整齐,心肌细胞轻度肿大。结论参附芎泽方可通过降低血清TNF-α、AngⅡ含量,抑制心肌组织TGF-β1和CTGF的表达等途径干预心肌纤维化进程。     

参附益心颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的观察参附益心颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及可能作用机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法制备心肌梗死模型,将造模成功的32只SD大鼠随机分为模型组、参附常用量组、参附高剂量组、氯沙坦组,另设只穿线不结扎的假手术组,均每组8只。参附常用量组和参附高剂量组分别给予参附益心颗粒1.76、8.8g/(kg·d)灌胃,氯沙坦组给予氯沙坦片10mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水1ml/(100g·d)灌胃。4周后超声心动图评价各组大鼠心脏功能,并计算左室重量指数(LVWI);Masson染色法及羟脯氨酸测定法测定心肌组织胶原蛋白分布及含量;Western blot法确定心肌组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad 2、Smad 3的蛋白表达量;RT-PCR法检测微小RNA-21(miR-21)和转化生长因子βⅢ型受体(TGF-βRⅢ)mRNA的表达水平。结果与模型组比较,参附常用量组、参附高剂量组、氯沙坦组左室收缩末内径(LVESD)减小、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)升高,LVWI和胶原蛋白含量下降,同时心肌组织TGF-β1、Smad 3蛋白表达量和miR-21的mRNA表达水平降低,TGF-βRⅢmRNA表达水平升高(P0.05或P0.01);与参附常用量组比较,参附高剂量组LVESD减小、LVEF、LVFS和心肌组织TGF-βRⅢmRNA表达升高(P0.05或P0.01)。结论参附益心颗粒可改善心力衰竭大鼠心肌纤维化,抑制心室重构,提高心脏功能,其作用机制可能与调控miR-21从而抑制TGF-β1/Smads信号通路的过度激活有关。     

参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠血液流动力学和心肌组织及血清TNF-α IL-1β IL-6含量的影响

目的:参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠血流动力学和心肌组织及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响。方法:参照Ohkusa等介绍的方法复制腹主动脉缩窄大鼠模型。48只SD大鼠随机分为假手术组(12)和造模组(36),术后4周将造模组随机分为模型组(11)、参附芎泽注射液治疗组(11)和依那普利治疗对照组(11)。参附芎泽注射液8mL/(kg.d),依那普利对照组剂量为10mg/(kg.d),假手术组和模型组腹腔注射等剂量生理盐水,干预时间共28天。术后8周,测定血流动学指标后处死动物,用E lASA法测定压力超负荷大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量;用ELASA法测定心肌组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量。结果:与假手术组相比,模型组左室内压力峰值(LVSP)、左心室内压最大下降速率(-LVdp/dmt ax)及左心室内压最大上升速率(+LVdp/dtm ax)下降;收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、左室舒末期压(LVEDP)均升高;模型组心肌组织及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量均明显高于假手术组(P<0.01)。参附芎泽注射液各项指标均低于模型组(P<0.05和P<0.01),能降低心肌组织及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量,与依那普利组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:参附芎泽注射液可改善压力超负荷心衰大鼠血流动力学指标,降低心肌组及血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量,阻断这些细胞因子对心肌重塑的影响。     

参附益心颗粒对心衰大鼠心肌c-fos,c-myc表达的影响

目的:探讨参附益心颗粒对心衰大鼠心肌c-fos,c-myc表达的影响。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只,假手术组20只。造模组结扎左冠状动脉前降支,假手术组手术方法同上,仅在冠状动脉前降支下穿线不结扎。造模8周后,经超声测定大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)<50%者随机分为5组(模型组、卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒(5.48,21.90 g.kg-1.d-1)2个剂量组,每组10只,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水ig,药物干预组将药物溶于纯净水中ig给药,每天1次,疗程4周。4周后超声测定LVEF,称重后,处死测左室重量指数(left ventricular mass index,LVMI),免疫组化法检测大鼠心肌中c-fos,c-myc表达。结果:21.90 g.kg-1.d-1参附益心颗粒可显著提高心衰大鼠LVEF,降低LVMI,抑制心衰大鼠心肌中c-fos,c-myc表达。结论:参附益心颗粒能够通过抑制心衰大鼠心肌中c-fos,c-myc表达,抑制心肌重塑。     

参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠血流动力学、左室质量指数及心肌组织病理学的影响

目的:探讨参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠血流动力学、左室质量指数及心肌组织病理学的影响。方法:参照Ohkusa等介绍的方法复制腹主动脉缩窄大鼠模型。左心室插管术检测血流动力学指标;计算左心室质量指数;HE染色光镜观察心肌结构,摄片对比。结果:与假手术组相比,模型组左室内压力峰值、左心室内压最大下降速率及左心室内压最大上升速率下降;收缩压、舒张压、左室舒张末期压均升高;LVMI增大;心肌纤维增粗,排列紊乱,细胞肿大,细胞核大而深染,细胞间质增多,间隙增宽。参附芎泽注射液组与模型组相比,LVSP、±LVdp/dtmax均升高,LVEDP、SBP、DBP降低;LVMI减小均有显著性差异(P<0.05或P<0.01);心肌纤维排列欠整齐,间质较少,间隙较窄,心肌病理损害明显较轻。与依那普利组相比无显著性差异。结论:参附芎泽注射液能改善压力超负荷大鼠血流动力学指标,降低LVMI,减轻心肌组织病理性损害。     

温阳活血方对慢性心衰大鼠心肌组织转化生长因子β_1的影响

目的:观察温阳活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:利用肾上腹主动脉缩窄法制备慢性心力衰竭大鼠模型30只随机分为3组各10只,温阴活血方组给予温阳活血方(8m L/kg)每日灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,假手术组只分离服主动脉通不结扎。观察各组大鼠左心室重量指数(LVMI)和胶原容积积分(CVF),RT—PCR测定各组大鼠左心室心肌TGF-β1 mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,模型组LVMI、CVF明显升高,左心室心肌TGF-β1 mRNA表达明显升高(P0.05);与模型组比较,温阳活血方组LVMI、CVF明显下降,左心室心肌TGF-β1 mRNA表达明显下降(P0.05)。结论:温阳活血方通过影响信号通路中TGF-β1 mRNA的表达而改善心衰大鼠心肌纤维化程度。     

积雪草苷对大鼠心肌梗塞后左室功能及胶原修复影响的实验研究

目的:研究积雪草苷对心梗大鼠左室功能及胶原修复的影响。方法:结扎雄性SD大鼠左冠状动脉前降支建立心肌梗塞模型,随机分为假手术组、心梗模型组和积雪草苷治疗组。积雪草苷治疗组自造模当天灌胃给予积雪草苷连续2周,其他两组给予等体积生理盐水,2周后测定各组大鼠左心室重量与体重之比、梗塞面积;动脉导管测定左室功能;氯氨T法测量左室非梗塞区心肌羟脯氨酸水平;免疫组织化学检测左室非梗死区心肌转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:与心梗模型组比,积雪草苷治疗组左室梗死面积无显著差异(P0.05),左心室重量/体重低于心梗模型组,差异显著(P0.05);左室功能显著改善(P0.05);左室非梗塞区心肌羟脯氨酸含量显著降低(P0.05);免疫组织化学染色结果显示,左室非梗死区心肌TGF-β的表达显著降低(P0.05)。结论:积雪草苷可降低心梗大鼠左室非梗死区心肌TGF-β1的表达及心肌羟脯氨酸含量,改善左室功能,减轻大鼠心梗后心肌纤维化。     

芪参颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨芪参颗粒治疗心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的可能作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组15只、模型组12只、芪参颗粒组12只、非诺贝特组11只。除假手术组外,其余各组大鼠采用左心冠状动脉结扎诱导心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。芪参颗粒组给予芪参颗粒18.66 g/(kg·d)灌胃,非诺贝特组给予非诺贝特胶囊10 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予同体积生理盐水灌胃,连续给药28天。检测各组大鼠心功能,分别观察各组大鼠心肌组织病理变化,并采用Western blot法检测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF-β)、Smad3、Wnt1a、β-catenin、Wnt1诱导的分泌蛋白1 (WISP-1)、Wnt5a蛋白含量。结果与假手术组比较,模型组左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)均显著降低,左室舒张末内径(LVIDd)、左室收缩末内径(LVIDs)均显著增高(P0.01);与模型组比较,芪参颗粒组EF、FS显著升高,LVIDd、LVIDs显著降低,非诺贝特组EF、FS显著升高,LVIDs显著降低(P0.05或P0.01)。HE染色显示,模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,心肌间质出现大量炎性细胞浸润,胶原过度沉积,纤维明显增生,丧失正常结构;芪参颗粒组与假手术组细胞排列整齐,细胞形态基本无变化,仅表现少量胶原沉积,心肌纤维化得以改善。与假手术组比较,模型组TGF-β、Smad3、Wnt1a、β-catenin、WISP-1、Wnt5a蛋白表达增高(P0.05或P0.01);与模型组比较,芪参颗粒组和非诺贝特组TGF-β、Smad3、Wnt1a、β-catenin、WISP-1、Wnt5a蛋白降低(P0.05或P0.01),芪参颗粒组与非诺贝特组各指标比较差异均无统计学意义(P 0.05)。结论芪参颗粒能够显著改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化,且与非诺贝特胶囊效果相当,其机制可能与抑制心肌组织TGF-β与Wnt通路有关。     

葶苈生脉方对心衰大鼠心肌纤维化及TGF-β_1表达的影响

目的:通过观察葶苈生脉方对充血性心力衰竭(CHF)大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其治疗CHF的作用机制。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型对照组、葶苈生脉方高剂量组、葶苈生脉方低剂量组、阳性药心宝丸对照组。采用腹主动脉缩窄法复制CHF大鼠模型,喂养4周后分别给予蒸馏水或药物,8周后检测血流动力学参数,用MASSON染色法观察左室心肌胶原形态,图像分析测量胶原容积分数(CVF),免疫组化法检测心室肌中TGF-β1的表达。结果:与假手术组比较,模型对照组CVF明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组CVF则显著降低(P<0.01);与假手术组比较,模型对照组TGF-β1表达增强(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组TGF-β1表达则减弱(P<0.01)。结论:葶苈生脉方能明显改善心室重构和心肌纤维化,改善心功能,此作用可能与影响TGF-β1表达有关。     

参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠心肌细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、Bax的影响,分析其治疗心力衰竭的机制。方法:参照Ohkusa等介绍的方法复制腹主动脉缩窄大鼠模型。48只SD雄性大鼠随机分为假手术组(12)和造模组(36),术后4周将造模组随机分为模型组(11)、参附芎泽注射液治疗组(11)和依那普利治疗对照组(11)。参附芎泽注射液8ml.kg-1.d-1,依那普利对照组剂量为10mg.kg-1.d-1,假手术组和模型组腹腔注射等剂量生理盐水,干预时间共28天。连续用药4周后,分别用TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡,用SP免疫组化方法和图像分析技术检测心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果:与假手术组相比,模型组心肌凋亡指数(AI)增多、Bcl-2蛋白表达光密度值(OD值)减少、Bax蛋白表达OD值增多。参附芎泽注射液组与模型组相比,心肌凋亡指数(AI)减少、Bcl-2表达明显增多而Bax的表达减少,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。与依那普利组相比无显著性差异。结论:参附芎泽注射液可通过上调Bcl-2抑制凋亡基因的表达,下调Bax促凋亡基因的表达,抑制压力超负荷大鼠心肌细胞凋亡。