SiO2对肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶组织抑制因子-1和肺成纤维细胞Ⅲ型胶原表达的影响

[目的]探讨SiO2能否通过肺泡巨噬细胞(AM)表达基质金属蛋白酶(MMPs)/基质金属蛋白酶机制因子(TIMPs)系统参与胶原的病理性累积。[方法]收集矽肺患者AM,分别用加入SiO2粉尘的培养液和无血清培养液培养2、6、12、18、24h,取出细胞爬片并吸出培养上清。将HELF分为处理组、对照组和空白对照组,于6h、12h、18h、24h、36h、48h取出细胞爬片、吸出上清。检测AM中MMP-9、TIMP-1及HELF条件培养上清中CⅢ的表达。[结果]经SiO2刺激的AM表达MMP-9增高,各点与同期对照组相比,差异有统计学意义(P﹤0.05或P﹤0.01);12、18、24hTIMP-1的表达与同期对照组相比也明显增高,差异有统计学意义(P﹤0.05或P﹤0.01),但表达较MMP-9晚且少,将处理组的MMP-9与同期的TIMP-1相比,MMP-9表达显著多于TIMP-1,差异有统计学意义(P﹤0.001);AM条件培养上清作用于HELF后,可使HELF上清中CⅢ明显升高,与同期对照组相比,差异有统计学意义(P﹤0.05或P﹤0.01)。[结论]SiO2可促使AM高表达MMP-9和TIMP-1,并通过AM的介导诱导HELF高表达CⅢ,AM通过表达MMPs/TIMPs系统在胶原的病理性累积中起到了重要作用。     

SiO2对人肺泡巨噬细胞及肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

[目的]探讨SiO2是否通过影响矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)和肺成纤维细胞(FB)基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展.[方法]收集矽肺患者的AM,在体外以SiO2(50 μg/ml)和不加血清的DMEM培养基培养2、6、12、18、24、36 h,用免疫细胞化学的方法检测AM中MMP-9和TIMP-1的表达.收集矽肺患者AM培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达.[结果]经SiO2刺激的AM MMP-9表达明显上调,且随刺激时问不同表达量也不同,于18 h达高峰(平均光密度值为0.440±0.021),与同期对照纽AM(0.390±0.011)相比,差异有统计学意义(P<0.05);而TIMP-1的表达与对照组(平均光密度值分别为0.175±0.019、0.162±0.044)的差异无统计学意义(P>0.05).未经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清作用于FB 24 h,FB中MMP-1的表达较空白对照组减少(平均光密度值分别为0.103±0.014、0.133±0.023,P<0.01),TIMP-1的表达增多(平均光密度值分别为0.108±0.012、0.065±0.006,P<0.01);经SiO2刺激24 h的矽肺患者AM培养上清作用于FB后,FB中MMP-1的表达量进一步减少(平均光密度值分别为0.062±0.008、0.133±0.023,P<0.01),而TIMP-1的表达量进一步增加(平均光密度值分别为0.143±0.015、0.065±0.006,P<0.01).[结论]SiO2上调AM中MMP-9的表达,可能与肺脏损伤早期,降解基底膜,导致包括成纤维细胞在内的多种细胞迁移有关.通过肺泡巨噬细胞的介导,SiO2影响了FB中MMP/11MP系统的平衡,参与了矽肺纤维化的发生发展.     

SiO_2刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞基质金属蛋白酶-2/9的表达

目的 探讨SiO_2体外刺激矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HELF)基质金属蛋白酶(MMP)-2/9的表达的影响.方法 将矽肺患者的AM在体外经SiO_2刺激24 h后收集其培养上清,与HELF共同孵育12、24、36、48、72 h,用免疫细胞化学方法检测各时间点HELF中MMP-2/9蛋白表达;明胶酶谱法检测各时间点HELF培养液的MMP-2/9活力的表达.结果 经SiO_2刺激后,实验组HELF在24、36、48、72 h MMP-2活力的表达增强,分别为1.572±0.104、1.786±0.125、1.987±0.130、2.147±0.156,与同期对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).实验组HELF在24、36、48、72 hMMP-9活力的表达增强,与同期对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).实验组HELF在24、36、48、72 h MMP-2蛋白的表达增强,分别为0.171±0.018、0.200±0.018、0.221±0.023、0.212±0.020,与同期对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);实验组HELF在24、36、48、72 h MMP-9蛋白的表达增强,与同期对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SiO_2可通过AM介导促进HELF中MMP-2和MMP-9蛋白及活力表达.     

SiO2对血小板源性生长因子蛋白表达及胶原合成的影响

目的 探讨siO2刺激矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)及其介导的人胚肺成纤维细胞(HELF)血小板源性生长因子(PDGF)的蛋白表达及胶原合成.方法 收集矽肺患者AM,体外经SiO2刺激3、6、12、18、24、36 h,收集培养上清,用ELISA法检测AM上清中PDGF的蛋白表达,用其表达峰值时的培养上清与HELF共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学法及Western blot法分别检测HELF及其培养上清中PDGF的蛋白表达情况,用3H-脯氨酸掺入法检测HELF胶原的合成与分泌情况.结果 经SiO2刺激的矽肺患者AM条件上清中PDGF的蛋白表达量在作用24 h时最高(平均吸光度值为0.282±0.019),与同期对照组(平均吸光度值为0.214±0.014)相比,差异有统计学意义(P<0.01). 用AM上清作用于HELF后,HELF细胞内及其培养上清中PDGF的蛋白表达均升高,与对照组比较,HELF培养上清中PDGF蛋白表达于12、18、24、36、48 h时明显增高,HELF中PDGF蛋白表达于18、24、36、48 h时明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05).矽肺患者AM培养上清与HELF共同孵育不同时间后,HELF细胞内及培养上清中胶原明显增加.结论 SiO2通过AM的介导影响了HELF中PDGF的蛋白表达与胶原合成及分泌.     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的 探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展。方法 收集矽肺患者AM培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达。结果 未经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清作用于FB 24 h,FB中MMP-1的表达较空白对照组减少(积分光密度值分别为0.103±0.014、0.133±0.023),TIMP-1的表达增多(积分光密度值分别为0.108±0.012、0.065±0.006);经SiO2刺激24 h的矽肺患者AM培养上清作用于FB后,FB中MMP-1的表达量进一步减少(积分光密度值分别为0.062±0.008、0.133±0.023),而TIMP-1的表达量进一步增加(积分光密度值分别为0.143±0.015、0.065±0.006)。结论 SiO2可能通过AM的介导影响了FB中MMP-1/TIMP-1系统的表达,参与了肺纤维化的形成。     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子和胶原表达的影响

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子(TIMP-1)和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后吸出培养上清.将原代培养的HELF分为4组:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加人未经SiO2刺激的AM上清;(3)10%血清组:仅加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM;(4)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM.4组均分别于6、12、18、24、36、48 h取出细胞爬片,吸出上清,用免疫细胞化学方法 检测HELF中MMP-1和TIMP-1的表达,用Western blot法检测HELF条件培养上清中Ⅲ型胶原的表达.结果 处理组18、24、36、48 h MMP-1表达分别为0.0605±0.0201,0.0519±0.0117,0.0412±0.0105,0.0213±0.0106,较对照组和空白对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与对照组和空白对照组相比,处理组各时间点TIMP-1表达和Ⅲ型胶原含量明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),TIMP-1/MMP-1与Ⅲ型胶原呈正相关(r=0.88,P<0.01).结论 SiO2经AM的介导可促进FB表达TIMP-1和Ⅲ型胶原,抑制HELF表达TIMP-1,TIMP-1/MMP-1的失衡与Ⅲ型胶原的病理性累积有关.     

TGF-β1对人胚肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的探讨SiO2是否通过转化生长因子β(TGFβ-1)影响肺成纤维细胞(FB)中基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)的表达而参与矽肺纤维化的发生发展。方法收集矽肺病人肺泡巨噬细胞(AM)培养上清,与人胚肺成纤维细胞(FB)共同孵育6 h和24 h,并用TGF-β1抗体进行干预,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达。结果经SiO2刺激的矽肺病人AM培养上清作用于FB,与对照组比较,可使FB中MMP-1的表达减少(吸光度A值0.062±0.008 vs 0.103±0.014,24 h),可使TIMP-1的表达增多(吸光度A值0.143±0.015 vs 0.108±0.012,24 h);加入TGF-β1抗体可逆转此作用。结论TGF-β1可影响AM介导的FB中MMP-1/TIMP-1系统的表达。     

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响

目的探讨SiO2是否通过影响矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)基质金属蛋白酶(MMPs)金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展。方法收集矽肺患者的AM,在体外以SiO2(50μgml)和不加血清的DMEM培养基培养2、6、12、18、24、36h,用免疫细胞化学的方法检测AM中MMP9和TIMP1的表达。结果经SiO2刺激的AMMMP9表达明显上调,且随刺激时间不同表达量也不同,于18h达高峰(平均光密度值为0.440±0.021),与同期对照组AM(0.390±0.011)相比,差异有统计学意义(P<0.05);而TIMP1的表达与对照组(平均光密度值分别为0.175±0.019、0.162±0.044)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论SiO2可诱导AM高表达MMP9。AM在损伤早期通过产生MMP9而降解基底膜,可能与包括成纤维细胞在内的各种细胞的迁移有关。     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.     

厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏组织环加氧酶-2表达的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型受体拮抗剂（ARB）厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾组织环氧化酶-2（COX-2）表达的影响及其肾保护的可能机制.方法 将18只实验大鼠随机分成正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）、厄贝沙坦治疗组（C组）.6周时用免疫组织化学法检测肾脏COX-2、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）表达,并采用放射免疫法测定尿液前列腺素代谢产物血栓烷素B2（TXB2）、6-酮前列腺素F1α（6-Ket-PGF1α）排泄量.结果 与A组比较,B组大鼠肾脏COX-2、TIMP-1表达明显增强,MMP-9表达减弱（COX-2：0.39±0.02 vs 0.24±0.04,TIMP：0.41±0.03 vs 0.24±0.02,MMP-9：0.24±0.02 vs 0.32±0.02,P＜0.05）;与B组比较,C组COX-2（0.31±0.03）、TIMP-1（0.34±0.02）表达减弱、而MMP-9（0.29±0.03）表达增强（P＜0.05）;B组大鼠尿TXB2[（1313.10±14.03）ng/d]、6-Ket-PGF1α[（1598.00±39.25）ng/d]排泄量明显增加;C组尿TXB2[（658±13.68）ng/d]、6-Ket-PGF1α[（1022±58.04）ng/d]排泄量则较B组明显下降;B组大鼠出现明显蛋白尿及基底膜增厚、系膜外基质增多等病理变化;C组则无明显蛋白尿且病理变化较B组明显减弱.结论 COX-2参与了糖尿病肾病发生、发展病理过程;厄贝沙坦抑制COX-2活性、上调MMP-9、下调TIMP-1是其肾保护的可能机制之一.     

细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路对SiO2活化的肺成纤维细胞转化生长因子-β1表达的影响

目的 探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路对矽尘诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中转化生长因子(TGF-β1)表达的影响及调控作用.方法 收集矽肺患者支气管肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞(AM),在体外将AM分别用不含SiO2的DMEM培养液和含SiO2(50 μg/ml)的DMEM 培养液培养作用18 h后,将收集的AM条件培养上清液与HELF共同孵育.通过采用免疫细胞化学法检测应用ERK1/2抑制剂PD98059干预后SiO2活化的矽肺患者AM上清介导的HELF中TGF-β1表达的改变.结果 SiO2处理组HELF中TGF-β1的表达量(0.3227±0.0238)明显高于空白对照组(0.1637±0.0196)及AM对照组(0.2406±0.0225),而PD98059干预组TGF-β1的表达量(0.2711±0.0229)明显低于SiO2处理组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PD98059对由SiO2刺激的矽肺患者AM条件培养上清介导的HELF中TGF-β1的表达有一定抑制作用,ERK信号途径在一定程度上可能介导SiO2刺激的HELF细胞因子表达.

Abstract：

Objective To investigate the effect and regulation of extracellual signal-regulated kinase (ERK1/2)signaling pathway on the expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in human embryonic lung fibroblasts induced by SiO2. Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and in the presence or absence of SiO2 (50 ug/ml) exposition for 18h, and then the conditioned supernatants were used to incubate HELF. The expressions of TGF-β1 of the HELF acted with the conditioned AM supernatant fluid were detected with the immunocytochemistry method after treatment with PD98059 of inhibitor of ERK. Results The expression of TGF-β1 in HELF of the SiO2 treatment group(OD value is 0.322 7±0.023 8)exceed blank group (OD value is 0.163 7±0.019 6) and AM control group(OD value is 0.240 6±0.022 5) by the immunocytochemistry method. But the expression of TGF-β1 had reduction in some extent in the PD98059 intervention group (OD value is 0.271 l±0.022 9). The values were statistically different (P＜0.05). Conclusion ERK inhibitor PD98059 have inhibition effect on the expression of transforming growth factor-pi and expression of cytokine of human embryonic lung fibroblasts stimulated by SiO2, The study indicate that the proliferation and collagen prodction of HELF activated by SiO2 are mediated by ERK/MAPK signal pathway in some extent. PD98059 may antagonizes silica-induced lung fibrosis by inhibiting the expression of transforming growth factor-β1.     

矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c-myc基因表达的影响

目的 探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c-myc基因表达的影响.方法 AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36 h,收集培养上清.Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48 h使大部分细胞处于静止期后,加人SiO2刺激6 h的AM培养上清(S6组),用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法观察c-mycmRNA和蛋白的时程变化.然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7 h,观察c-myc mRNA和蛋白表达的变化.结果 HEFB在静止状态时c-myc mRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c-myc mRNA及蛋白的表达,以AM培养12 h的卜清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101.加尘组中各上清也刺激了c-myc mRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6 h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141.与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6 h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 SiO2激活的AM培养上清可促进HEFB c-myc基因的表达.     

呼吸道合胞病毒感染时气道重塑相关因子失调与内源性血浆皮质醇的相关性

目的 通过测定急性呼吸道合胞病毒( RSV)感染时内源性血浆皮质醇浓度和气道重塑相关因子,揭示RSV感染时内源性血浆皮质醇和气道重塑相关因子之间的关系.方法 选择42例急性RSV感染患儿,其中重症21例(重症组),轻症21例(轻症组),另选择21例同期健康婴儿作为对照组.ELISA方法检测血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,放射免疫分析法检测血浆皮质醇水平.结果 重症组血浆皮质醇水平为(236.25±119.87)μg/L,与轻症组的(130.62±73.04)μg/L和对照组的(56.35±34.52)μg/L比较差异有统计学意义(P＜0.05),轻症组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).重症组血清TIMP-1和TGF-β1水平高于轻症组(P＜0.05),轻症组高于对照组(P＜0.05);重症组MMP-9/TIMP-1低于对照组(P＜0.05);重症组血清MMP-9水平高于轻症组(P＜0.05).重症组淋巴细胞、嗜酸粒细胞、CD4+、CD8+均较轻症组和对照组降低(P＜0.05);轻症组嗜酸粒细胞、CD8+均较对照组降低(P＜0.05).结论 RSV感染可导致患儿气道重塑相关因子失衡,存在气道重塑的高危因素,可能与血浆皮质醇水平增高有关,从而导致难治性喘息性疾病的存在.     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌病保护作用

目的探讨α-硫辛酸对糖尿病心肌病大鼠心肌损伤保护作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、糖尿病模型组、α-硫辛酸低、中、高剂量组。以60 mg/kg链脲佐菌素腹腔一次性注射建立大鼠糖尿病模型;α-硫辛酸低、中、高剂量组分别按15、30、60 mg/kg灌胃12周;检测血糖和血清果糖胺,心功能状态;免疫组织化学法和western blot法测定心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白表达。结果与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖值/血清果糖胺含量明显升高(P<0.05),心肌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值明显增加(P<0.05);与糖尿病模型组比较,α-硫辛酸中剂量组血糖[(14.25±3.23)mmol/L]和血清果糖胺[(3.05±0.20)mmol/L]含量明显降低(P<0.05),左室舒张末压[(5.60±0.98)mmHg]明显降低(P<0.05),左心室收缩压[(127.55±5.45)mmHg]明显升高(P<0.05);α-硫辛酸中剂量组MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白表达分别为62.26、76.78、72.87,明显减少(P<0.05)。结论α-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与细胞因子及细胞外基质组成异常有关。     

糖尿病肾病患者蛋白氧化损伤与血清基质金属蛋白酶-2的相关性分析

目的检测糖尿病肾病患者血清蛋白氧化损伤指标的变化,探讨蛋白氧化损伤在糖尿病肾病发病中的可能机制。方法应用改良后的Witko—Sarsat法和2,4-二硝基苯肼法检测血清晚期氧化蛋白产物（AOPP）水平、蛋白质羰基（PCO）含量,应用ELISA及酶谱法分别检测血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达水平和活性。结果DNl组、DN2组AOPP水平明显高于DM组（78．23±19．30VS61．25±12．13、101．59±30．22VS61．25±12．13,F=41．988,P〈0．01）,DNl组、DN2组PCO含量亦明显高于DM组（0．84±0．03VS0．66±0．02、1．05±0．05VS0．66±0．02,F=205．763,P〈0．01）,AOPP、PCO与血清MMP-2的表达水平（r=0．460,0．480,P〈0．05）和活性（r=0．385,0．560,P〈0．05）均呈正相关,多元逐步回归分析表明AOPP、PCO为血清MMP-2表达水平（P〈0．05,P〈0．01）和活性（P〈0．01,P〈0．05）的主要影响因素。结论推测蛋白氧化损伤通过改变MMP-2的表达和活性,影响肾脏基质代谢。     

矽肺肺泡巨噬细胞对人胚肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达的体外研究

目的探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)胶原的表达,参与矽肺纤维化的发生发展。方法收集矽肺患者AM,经SiO_2体外刺激18 h收集培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48、72 h,用~3H-脯氨酸掺入检测48 h胶原的合成与分泌,免疫细胞化学方法、Western blot方法检测各时间点Ⅰ型胶原表达。结果经SiO_2刺激矽肺患者AM培养上清,可使FB中Ⅰ型胶原的表达增高,实验组48 h细胞内、外3H-脯氨酸掺入值分别为1259.500±73.879、790.500±70.315,免疫细胞化学染色的积分光密度值为0.341±0.011,Western blot条带扫描灰度值为14.218±0.342,均明显高于空白对照组及AM对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论SiO_2可通过AM介导影响FB中Ⅰ型胶原表达,参与肺纤维化的形成。