神经肽P物质对哮喘大鼠气道阻力的影响

目的 探讨神经肽P物质对哮喘大鼠气道阻力的影响.方法 按照随机分组的原则将60只Wistar大鼠分为正常对照组、哮喘组及P物质干预组,每组各20只.制作哮喘大鼠模型.应用动物肺功能分析仪检测各组大鼠在浓度为0.0625、0.1250、0.250 0、0.5000 mg/ml乙酰甲胆碱(methacholine,MCh)干预下的气道吸气阻力及呼气阻力,其中P物质干预组大鼠在测定气道阻力时于气道内滴入0.2ml浓度为10-7 mol/L的P物质.结果 随着MCh浓度增加,大鼠气道阻力增加,大鼠气道吸气阻力及呼气阻力均与MCh浓度呈正相关(r=0.947,P＜0.05;r=0.965,P＜0.05).在0.0625、0.125 0、0.2500、0.5000 mg/ml浓度梯度的MCh作用下,3组间大鼠气道吸气阻力比较差异具有统计学意义(F值分别为73.4、89.3、91.2、106.4,P＜0.05);呼气阻力比较差异具有统计学意义(F值分别为67.3、77.5、83.4、126.5,P＜0.05).哮喘组大鼠气道阻力对MCh的浓度反应曲线较正常对照组明显上移,其吸气阻力和呼气阻力在不同浓度MCh作用下均高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);P物质干预组大鼠对MCh的浓度反应曲线较哮喘组明显上移,在不同浓度MCh刺激下吸气阻力和呼气阻力均高于哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 神经肽P物质可增加哮喘大鼠的气道阻力,并随着MCh浓度增加气道阻力增加.     

哮喘患儿支气管诱导痰液中P物质含量变化的临床研究

目的　研究支气管哮喘患儿急性发作期、缓解期支气管诱导痰液中P物质含量变化及临床意义。方法　用高渗盐水超声雾化吸入法留取研究组及对照组儿童支气管诱导痰液。其中哮喘急性发作期组 34例 (3d内无静脉或口服激素史 ) ;哮喘缓解期组 30例 ;健康对照组 2 2例。用放射免疫方法检测各组支气管诱导痰中P物质含量。结果　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量明显高于缓解期及正常对照组 ,差异显著 ,P均 <0 0 1。缓解期组与正常对照组比较 ,差异无显著性 ,P >0 0 5。结论　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量显著增高 ,缓解期降低 ,接近正常水平 ;提示支气管诱导痰中P物质含量与儿童哮喘的发作及缓解关系密切 ,可做为一种临床监测指标。     

Abnormal expression of tyrosine hydroxylase not accompanied by phosphorylation at serine 40 in cerebellar Purkinje cells of ataxic mutant mice, rolling mouse Nagoya and dilute-lethal

This study examined immunohistochemically the expression of an enzymatically active form of tyrosine hydroxylase (TH), phosphorylated TH at Ser40 (phospho-TH), in the cerebellum of ataxic mutant mice, rolling mouse Nagoya (RMN) and dilute-lethal (DL). TH immunostaining appeared in some Purkinje cells in RMN and DL, but in a few of the Purkinje cells of littermate controls for both mutants. In all groups of mice, there were no phospho-TH immunoreactive Purkinje cells in the cerebellum, although the subsets of TH immunoreactive Purkinje cells were found in the adjacent sections. The results suggest that TH expression in the Purkinje cells of ataxic mutants abnormally increases without activation of this enzyme by phosphorylation. This may mean that TH in Purkinje cells is not related to catecholamine synthesis.     

吸入糖皮质激素对哮喘患儿血浆及支气管诱导痰液中P物质含量的影响及其机制研究

目的研究吸入糖皮质激素（GC）对哮喘患儿血浆及支气管诱导痰液（BIS）中P物质（SP）含量变化的影响并对其机制进行探讨。方法选择临床确诊的轻、中度哮喘患儿50例，随机分成吸入GO（布地奈德雾化溶液）治疗组（组1）及非吸入GC治疗组（组2）各25例，健康对照组20例。用放射免疫（RI）方法，测定各组治疗前及治疗后48h血浆及BIS中SP含量变化。用吸入卵蛋白致敏法制作豚鼠哮喘模型30例，随机分成吸入GC组及非吸入GC组，用RI法检测各组血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织中SP含量；用RT—PCR法检测肺组织中SP mRNA相对含量。结果入院后48h比较，组1血浆及BIS中SP含量较治疗前降低明显，差异有非常显著性（P〈0．01），组2较治疗前降低，但差异无显著性（P〉0．05）；治疗后48h同期比较，组1血浆及BIS中SP含量较组2明显降低，差异有非常显著性（P〈0．001）；哮喘组豚鼠血浆、BALF、肺组织中SP含量及SP mRNA表达均明显高于正常组豚鼠，差异有显著性（P〈0．01）；吸入GC组哮喘豚鼠，其血浆、BALF、肺组织中SP含量及SP mRNA表达均明显低于非吸入GC组哮喘豚鼠，差异有显著性（P〈0．05或0．01）。结论吸入GC具有明显降低哮喘患儿血浆及支气管诱导痰液中SP含量的作用，并可显著降低哮喘豚鼠血浆、BALF及肺组织中SP含量，其机制可能与吸入GC具有在转录水平下调肺组织中SP mRNA表达有关。     

Neuropathology and immunohistochemistry of the brain-stem in neonates with congenital hydrocephalus: Comparative studies between aqueductal stenosis and Arnold-Chiari malformation

Neuropathological and immunohistochemical studies were done on the brain-stem of neonates who had congenital hydrocephalus with aqueductal stenosis or Arnold-Chiari malformation (ACM). The infants with aqueductal stenosis showed heterogeneity in their clinicopathological findings while the infants with ACM were relatively similar in neuropathological findings. There were prominent astrogliosis, decreased immunoreactivity with antisera to tyrosine hydroxylase and myelin basic protein in the periaqueductal area, and an increased reactivity with antiserum to substance P in the tegmentum of most patients with aqueductal stenosis and other malformations. In ACM, there was little gliosis in the tegmentum and periaqueductal area and minimal immunoreactivity of tyrosine hydroxylase, myelin basic protein and substance P. In both groups of cases, the cells in the periaqueductal region differ in neurotransmitter/neuromodulator immunoreactivity and degree of myelination reflecting a difference possibly in their maldevelopment.     

P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用

目的观察原发性肾病综合征(PNS)激素敏感与激素耐药组P300表达的差异,探讨P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用,为揭示PNS激素耐药发生机制提供理论依据。方法采用免疫组化法检测正常对照组肾组织及40例PNS患儿(激素敏感组20例,激素耐药组20例)肾活检组织中P300表达差异。结果正常肾组织仅偶见肾小管上皮细胞P300呈阳性表达;PNS患儿肾组织均存在不同程度P300表达,主要分布于肾小管上皮细胞,肾小球系膜区表达微弱或未表达,其他肾固有细胞未见P300表达;激素敏感组肾小管上皮细胞P300表达较激素耐药组明显增多(P<0.01),P300表达密集部位的肾小管形态正常,结构完整;肾小管上皮细胞P300阳性表达与肾小管间质病理积分呈负相关(P<0.01)。结论P300蛋白主要通过肾小管上皮细胞促进GC效应发挥;PNS患儿肾小管上皮细胞P300表达下降,可能是导致GC耐药及增加GC对肾小管上皮细胞损伤的机制之一。     

P27和 PCNA蛋白对儿童脑胶质瘤预后判断价值

为探讨P27、PCNA在儿童脑胶质瘤中判断预后的价值，应用免疫组织化学S－P法，在脑组织切片上检测48例儿童脑胶质瘤P27、PCNA蛋白的表达，并结合随访资料进行分析。结果显示P27、PCNA表达与脑胶质瘤预后有关，P27高表达组，患儿生存率高，反之，患儿生存率降低（χ^2=9.8,P=0.0075）；随PCNA低、中、高表达，生存率曲线逐渐下移（χ^2＝10.6,P=0.0062）。提示P27、PCNA对儿童脑胶质瘤的预后判断有一定的指导意义。     

偏头痛患儿发作间期血浆P物质、降钙素基因相关肽及ACE活性水平变化及其相关性研究

目的研究偏头痛患儿发作间期血浆P物质(SP)、降钙素相关基因肽(CGRP)和血管紧张素转换酶活性(SACE)的变化及其相关关系。方法分别检测2005年3月～2006年10月儿科门诊98例偏头痛患儿发作间期及50例正常健康儿童血浆SP、CGRP及SACE水平,比较正常组、偏头痛有先兆组(MA)及偏头痛无先兆组(MO)三者间的差异及其相关关系。结果SP和CGRP水平MA组较正常组和MO组高,而SACE水平MA组较正常对照组高,与MO组比较差异无统计学意义。SP与CGRP相关,r=0.281(P<0.05);SP与SACE水平相关,r=0.423(P<0.05);CGRP与SACE之间未发现明显相关性。结论SP、CGRP和ACE与偏头痛的发病机制密切相关,并且它们之间也相互作用。     

伴基底节钙化的婴幼儿外伤后腔隙性脑梗塞

目的 探讨伴有基底节钙化的婴幼儿外伤后腔隙性脑梗塞的发病机理和治疗效果。方法 总结20例婴幼儿较轻微头颅外伤后发生脑梗塞的症状、影像学表现、治疗效果及预后。结果 婴幼儿外伤后脑梗塞均发生于一侧基底节区。临床表现为不同程度的一侧急性偏瘫、无意识改变及颅内高压症状。CT扫描发现双侧基底节区存在细小点状钙化,腔隙性脑梗塞灶毗邻钙化点,经治疗预后好,随访3个月全部康复。结论 婴幼儿外伤后腔隙性脑梗塞的发生与基底节钙化关系密切,但发病机理及基底节钙化的生理过程尚有待探究,本病诊断需与脑弓形虫病及巨细胞包涵体等相鉴别。     

新生儿脑梗死19例临床分析

目的探讨早产儿及足月儿脑梗死的临床特征。方法回顾分析2013年1月1日至2018年1月31日经影像学确诊的19例新生儿脑梗死患者的临床资料,并比较早产儿及足月儿脑梗死的临床特征、影像学及预后的差异。结果 19例脑梗死新生儿中足月儿8例、早产儿11例。8例足月儿均为缺血性脑梗死;早产儿中3例为缺血性脑梗死,8例为出血性脑梗死。11例缺血性梗死患儿中,9例梗死部位为大脑中动脉;8例出血性脑梗死则均为脑室旁静脉性梗死。发病因素包括血管发育异常6例、围生期缺氧6例、重症感染3例、先天凝血因子缺乏2例,4例病因不明,5例为多因素。8例足月儿脑梗死患者中6例表现为惊厥,发生在生后4天内;11例早产儿起病无特异性,仅2例表现为惊厥,发生于生后7天内。好转出院12例;家属放弃治疗7例,放弃治疗后死亡5例。结论足月儿和早产儿均可发生新生儿脑梗死,临床表现无特异性,影像学检查有助确诊。     

P53基因在幼年性息肉病不典型增生中的表达及其意义

目的 探讨P^53基因异常与幼年性息肉病(JPS)不典型增生改变的关系。方法 采用免疫组化及原位杂交方法检测JPS不典型增生标本中P^53蛋白(DO-7)和P^53mRNA的表达。结果 P^53蛋白在正常黏膜，单发结、直肠幼年性息肉，JPS无不典型增生。JPS伴不典型增生和大肠癌各组中阳性表达率分别为0％、9．3％、27．3％、66．7％和70％；P^53mRNA在上述各组中阳性表达率分别为0％、12．5％、54．5％、75％和80％。P^53蛋白阳性袁达率、P^53阳性面积及P^53mRNA阳性表达率在JPS不典型增生组均显著高于JPS无不典型增生组。P^53蛋白与P^53mRNA表达呈显著一致性。结论 P^53基因变异可能在JPS伴不典型增生的形成过程中起重要作用。     

吸入糖皮质激素对哮喘豚鼠肺内SP含量及基因表达的影响研究(英文)

目的　P物质 (SP)是气道非胆碱能兴奋性神经的重要递质 ,是导致哮喘气道神经源性炎症产生的一种重要感觉神经肽。糖皮质激素是否有降低肺内SP的效应尚不清楚 ,为此本文研究了吸入糖皮质激素对哮喘豚鼠肺内SP的影响及其分子机制。方法　 30只豚鼠用卵蛋白致敏、诱喘制成哮喘动物模型 ,随机分为哮喘组和治疗组 (每组 1 5只 ) ,另 1 5只豚鼠吸入生理盐水作为对照组。治疗组豚鼠在诱喘前 1天、诱喘当天及诱喘后 2 4h吸入丙酸倍氯米松雾化溶液。哮喘组和治疗组豚鼠均于诱喘后 2 4h取材 ,对照组同期取材 ,分别留取支气管肺泡灌洗液 (BALF)、血浆及肺组织标本。用放射免疫放法检测SP蛋白含量 ;用反转录多聚酶链式反应检测肺组织SPmRNA相对含量。结果　哮喘组豚鼠血浆、BALF及肺组织SP含量 [(1 2 2± 4 6 )pg/mL ,(90± 39) pg/mL ,(78±15 )pg/克蛋白 ]均明显高于正常对照组 [(84± 33) pg/ml,(32± 2 1 ) pg/ml,(4 2± 1 2 ) pg/ml]及激素治疗组 [(5 0±1 3) pg/mL ,(4 7± 2 0 )pg/mL ,(4 0± 1 3) pg/克蛋白 ],其差异均有显著性 (P <0 .0 1 ) ;激素治疗组血浆SP含量低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,BALF及肺组织SP含量与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。哮喘组豚鼠肺组织中SPmRNA相对含量明显高于正常     

青岛市苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿基因突变分析

目的探讨青岛市苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)缺乏症患儿的基因突变特点,为青岛市PAH缺乏症的产前诊断、治疗提供科学参考依据。方法对经青岛市新生儿疾病筛查确诊的44例PAH缺乏症患儿,应用第二代高通量测序及多重连接酶探针依赖扩增(multi-ligase probe dependent amplification,MLPA)技术进行基因分析,检测患儿基因突变位点,应用Sanger测序对其父母的PAH基因相应突变位点进行检测并验证。根据患儿血苯丙氨酸浓度,分为经典型苯丙酮尿症、轻度苯丙酮尿症和轻度高苯丙氨酸血症。结果①44例PAH缺乏症患儿PAH基因中均检测到2个突变位点,其中2例为纯合突变,纯合突变的频率为4.6%,所有突变在患儿父母相应突变位点处均能检测到。②44例PAH缺乏症患儿共检测到突变36种,其中c.728G>A突变频率最高(15.9%,14/88),其次是c.1068C>A(10.2%,9/88),再次为c.158G>A(9.1%,8/88)。③21例经典型苯丙酮尿症患儿PAH基因突变19种,其中c.1068C>A突变频率最高(21.4%,9/42),其次是c.728G>A(19.0%,8/42)。10例轻度苯丙酮尿症患儿PAH基因突变14种,其中c.721C>T/722delG突变频率最高(15.0%,3/20),其次为c.1197A>T、c.1301C>A、c.721C>T、c.728G>A(均为10.0%,2/20)。13例轻度高苯丙氨酸血症患儿PAH基因突变17种,其中c.158G>A突变频率最高(26.9%,7/26),其次为c.728G>A(15.4%,4/26)。结论青岛市PAH缺乏症患儿PAH基因突变以复合杂合突变为主,具有明显热点突变(c.728G>A、c.1068C>A、c.158G>A),经典型苯丙酮尿症患儿以c.1068C>A、c.728G>A为主,轻度苯丙酮尿症患儿以c.721C>T/722delG为主,轻度高苯丙氨酸血症患儿以c.158G>A为主。本研究明确了青岛市PAH缺乏症患儿基因的突变类型与特点,为深入开展PAH缺乏症的诊断以及进一步的基因治疗奠定了基础。     

高苯丙氨酸血症患儿苯丙氨酸负荷试验后苯丙氨酸和酪氨酸浓度变化

目的了解苯丙氨酸负荷试验对高苯丙氨酸血症HPA患儿血苯丙氨酸Phe和酪氨酸Tyr浓度及其比值Phe/Tyr的影响。方法HPA组30例,非HPA儿童(对照组)33例。所有儿童均空腹口服Phe100mg/kg,分别于服Phe前0h、服Phe后1h、2h、3h、4h采手指血,滴于滤纸片上,取直径3mm干血滤纸片,经含Phe和Tyr同位素内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生,进行串联质谱分析,测定Phe、Tyr浓度和Phe/Tyr值。结果血Phe浓度HPA组于服Phe后2h最高,服Phe后4h仍维持在较高水平,对照组于服Phe后1h值最高,服Phe后4h下降至接近正常浓度,两组比较各时间段差异均有显著性(P<0.001)。Tyr浓度HPA组各时间段差异无显著性,对照组于服Phe后逐渐升高,各时间段差异有显著性P<0.05,于服Phe后2h、3h时高于HPA组,差异有显著性(P<0.05)。Phe/Tyr值HPA组各时间段均高于对照组,差异非常显著(P<0.001)。结论HPA患儿Phe代谢速度下降,测定血Phe浓度结合Phe/Tyr值有助于HPA诊断。     

北京地区苯丙酮尿症基因突变构成及基因型与表型相关分析

目的 明确北京地区苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶基因(phylalanine hydroxylase gene,PAH)突变图谱及其突变基因的微单体型(STR/VNTR)构成,探讨突变基因型与生化代谢表型的相关关系.方法 应用PCR/SSCP、序列分析和变性凝胶电泳等技术,对50例北京地区PKU患儿及其父母,进行PAH基因的全部外显子及两侧的内含子序列和STR与VNTR多态性分布的分析.依据由基因型预测生化代谢表型的方法进行基因型与生化代谢表型的相关关系分析.结果 (1)共检测到34种PAH突变基因,总的检出率为95%;较为常见的突变有R243Q(20%)、EX6-96A＞G(11%)、Y356X(9%)和V399V(7%),其次是R111x(5%)、R413P(5%)、R252Q(3%)和A434D(3%).(2)北京地区PKU患儿的STR杂合度较高,共检测出8种等位基因,以240 bp(34%)和244 bp(44%)最为常见;而VNTR的杂合度较低,只检测到3种等位基因,以VNTR3(83%)最为常见.(3)由基因型预测的生化代谢表型与患儿实际的生化代谢表型之间一致率为81.5%,在经典型PKU中一致率达到87.5%.结论 (1)北京地区共有34种PAH基因突变,检出率为95%,以R243Q、EX6-69A＞G、Y356X和V399V突变为常见突变.(2)PAH突变基因的微单位(STR/VNTR)构成以240/3和244/3最为常见.(3)PKU患儿基因型与生化代谢表型之间存在较好的相关关系,一致率达到80%以上.     

γ-氨基丁酸治疗对哮喘患儿血浆P物质和降钙素基因相关肽含量的影响

目的：探讨γ-氨基丁酸（GABA）治疗前后哮喘患儿血浆P物质（SP）和降钙素基因相关肽(CGRP)含量的变化。方法：75例哮喘患儿随机分为GABA治疗组（36例）和对照组（39例）,两组患儿均给予哮喘常规治疗。治疗组在常规治疗的基础上给予GABA口服 (每日25~30 mg/kg）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定患儿治疗前、缓解后血浆SP、CGRP的含量。结果：两组患儿治疗前血浆SP、CGRP含量差异无统计学意义（P＞0.05）;哮喘缓解后治疗组血浆SP、CGRP含量分别为57±15 pg/mL、23±10 pg/mL,显著低于对照组（分别为127±12 pg/mL、 42±8 pg/mL）,差异有统计学意义（P<0.01）。两组哮喘缓解后血浆SP、CGRP含量均较治疗前明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。哮喘患儿血浆SP与CGRP含量呈显著正相关（r=0.792,P<0.01）。结论：GABA可抑制小儿哮喘急性发作期血浆SP、CGRP的释放。     

肾小球疾病血清内源性洋地黄样物质测定

目的探讨儿童肾小球疾病血清内源性洋地黄样物质的变化规律及临床意义。方法用荧光偏振免疫法测定５２例肾小球疾病患儿（肾病综合征急性发作期１６例，肾病综合征恢复期１６例，肾小球肾炎２０例）及正常对照组儿童２０例血清内源性洋地黄样物质（ＥＤＬＳ）水平，并与临床表现、血及尿中β２微球蛋白（Ｓβ２－ＭＧ）、（Ｕβ２－ＭＧ）、血肌酐（Ｓｅｒ）、尿素氮（ＢＵＮ）进行相关分析。结果肾病综合征和肾小球肾炎患儿血清ＥＤＬＳ水平均显著增高（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０５），肾病综合征恢复期血清ＥＤＬＳ水平恢复正常。血清ＥＤＬＳ水平与患儿的血压、ＳＣｒ、ＢＵＮ．Ｓβ２－ＭＧ、Ｕβ２－ＭＧ浓度呈显著正相关。结论肾小球疾病血清ＥＤＬＳ水平升高，并与水肿、高血压和肾功能损害相关。ＥＤＬＳ在肾小球疾病的发展中起一定作用。     

苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿基因型和表型关系及其临床应用的研究

目的构建苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏症患儿的PAH基因变异谱,研究基因型和表型的关系。方法回顾分析76例经新生儿筛查确诊的PAH缺乏症患儿的PAH基因变异位点,建立基因型-表型预测模型。对等位基因进行赋值,设定变异位点特定值(AV),并计算AV评分之和,进而预测临床表型。结果应用第二代高通量测序技术和多重连接酶探针依赖扩增检测(MLPA)技术,在76例新生儿152个PAH等位基因中共检测出146个变异位点,频率为96.1%。70例新生儿检测出2个变异等位基因,其中3例纯合变异,67例复合杂合变异;另外6例检测出1个变异等位基因。共检测出变异类型45种,变异频率较高的位点为c.728GA(26/146,17.8%)、c.158GA(13/146,8.9%)、c.1068CA(11/146,7.5%)、c.721CT(10/146,6.8%),c.1238GC(8/146,5.5%)、c.331CT(8/146,5.5%)、c.1301CA(7/146,4.8%)。其中c.95AG位点未曾被BIOPKU数据库报道。患儿治疗前血苯丙氨酸(Phe)浓度与AV评分之和呈显著负相关(r=-0.83,P0.001)。随访发现2例轻度高苯丙氨酸血症患儿血Phe浓度120 μmol/L者无需治疗。结论构建常见PAH基因变异谱,验证了PAH基因突变和表型的相关性,有助于PAH确诊及分型、早期判断预后以及遗传咨询。