FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用

学术背景：胚胎干细胞无论对转基因动物的制备还是对疾病的治疗都具有巨大的潜能，但前提是用于治疗的胚胎干细胞具有其特有的多能性和全能性，而FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性都具有重要作用。目的：了解FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用。检索策略：应用计算机检索Pubmed1996—09／2007—05期间的相关文章，检索词为“FoxD3”，限定语言种类为英文。检索到67篇文章，排除重复的和与胚胎发育和胚胎干细胞相关性不大的文章，共纳入32篇文献。文献评价：32篇文献中分别涉及胚胎干细胞转录调节、FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用及其Foxd3在其他细胞中（骨髓细胞、神经嵴细胞、色素细胞）的功能等方面的内容,资料综合：胚胎干细胞具有其他细胞不可比拟的特性使胚胎干细胞应用广泛，要合理控制胚胎干细胞在体内和体外的分化，关键要了解那些控制胚胎干细胞命运的基因。FoxD3是叉头框（Forkheadbox，Fox）家族中的一个转录调控因子，它对胚胎上胚层及其衍生物的形成和建立多潜能胚胎干细胞系具有重要作用，并与控制胚胎发育和胚胎干细胞多能性的其他转录调控因子有一定的联系。结论：FoxD3是维持胚胎上胚层细胞多潜能性和在体外建立胚胎干细胞系所必需的。     

人类胚胎干细胞的研究现状与趋势

胚胎干细胞是来源于早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞的一种多潜能性细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。胚胎干细胞在临床移植医学、细胞治疗、组织工程、生物学基础研究等领域具有重要的科学意义和巨大的应用前景。     

对成体干细胞可塑性的新认识及其在再生医学中的意义

根据个体发育过程中出现的先后次序不同 ,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞出现在胚胎发育的胚囊内层 ,高水平表达端粒酶。1981年ＭａｒｔｉｎＥｖａｎｓ首次从小鼠胚囊中分离出小鼠胚胎干细胞 ,后被证实具有自我复制能力 ,且可分化为诸如神经细胞、心肌细胞、肝细胞、β 胰岛细胞、骨细胞、造血细胞等 2 0 0多种组织器官的原始细胞。胚胎干细胞继续分化 ,形成组织定向的多潜能干细胞 ,如多潜能造血干细胞可形成各种血细胞 ,多潜能皮肤干细胞可形成各种类型的皮肤细胞。在胎儿、儿童和成人组织中存在的这类多潜能干细胞统称…     

人胚胎干细胞培养与诱导分化的研究进展及其存在问题

人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,hESCs）指来源于人胚胎的具有无限自我增殖能力和多向分化潜能的细胞,主要由人囊胚内细胞群（innercellmass,ICM）分离得到。由于胚胎干细胞具有高度自我复制能力及多向分化潜能,可被应用于生命科学的多个领域。本文就人胚胎干细胞培养条件、体外诱导分化技术作一综述。     

肝干细胞研究进展

198 1年英国的Evans和Kaufman用延缓着床的胚泡首次成功地分离了小鼠胚胎干细胞 ,从而在全球掀起了有关干细胞的研究热潮。 1998年 11月 ,美国Thomson和Gearhart分别用不同的方法获得人胚胎干细胞及胚胎生殖细胞 ,此后 ,干细胞的研究便进入了一个新的时代。所谓干细胞 (stemcell) ,是指那些处于分化过程之中 ,具有分裂增殖能力 ,可自我更新 ,有多向分化潜能即能分化产生一种以上“专业”细胞的原始细胞。干细胞依其分化潜能的大小可分为 :①胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES细胞 ) ,即具有分化为机体任何一种组织器官潜能的细胞 ,如囊胚…     

干细胞在肝硬化的临床研究现状

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。由于胚胎干细胞的多功能性,能够分化成任何一种细胞类型(除原生殖细胞),它在再生治疗领域的吸引力引人注目。然而,进行胚胎干细胞研究     

诱导多潜能性干细胞的研究现状与临床应用前景

胚胎干细胞可作为细胞替代治疗中很好的供体细胞来源.但由于伦理学的原因,限制了胚胎干细胞在细胞替代治疗中的应用前景,而诱导多潜能性干细胞（induced pluripotent stem cell,iPS细胞）的出现则提供了一种替代胚胎干细胞的多潜能性细胞.因为iPS细胞的建立不需要卵细胞,也不破坏发育中的胚胎,所以iP...     

治疗性克隆的机遇与挑战

治疗性克隆（therapeutic cloning）是一种将体细胞核移植技术和最新的人胚胎干细胞技术相结合的技术，也是人类医疗历史上革命性的技术。该技术操作方法是先用患者的体细胞，如皮肤细胞、骨髓间充质干细胞等作为核供体，将其细胞核植入去核的人卵母细胞，获得克隆胚胎；然后从克隆胚胎分离建立胚胎干细胞系，并将这些胚胎干细胞在一定条件下诱导分化成所需要的各种类型的细胞用于治疗目的。目前，已有用产生多巴胺的神经元细胞治疗帕金森症、用产生胰岛素的胰岛细胞治疗糖尿病患者的报道。干细胞根据分化能力的不同，可以分为全能干细胞、多能干细胞及单能干细胞；根据来源的不同，又可分为胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESC）和成体干细胞。ESC是从着床前的早期胚胎（囊胚）内细胞团中分离获得的一种二倍体细胞，理论上具有发育成各种组织器官的潜能，是迄今研究得最广泛、最成熟的干细胞体系。上世纪80年代，ESC的分离和培养首先在小鼠中获得成功。     

小鼠胚胎成纤维细胞重编程为多能干细胞

背景:目前胚胎干细胞研究面临伦理争议及来源困难等诸多问题,人们一直在寻找不需破坏胚胎或卵细胞的建立多潜能干细胞的方法。目的:构建小鼠诱导性多潜能干细胞系并对其进行鉴定。方法:利用反转录病毒将3个干细胞基因Oct4、Sox2、Klf4导入小鼠胚胎成纤维细胞中,将其诱导为多潜能干细胞。通过镜下观察、碱性磷酸酶染色、反转录PCR(RT-PCR)、免疫荧光实验及畸胎瘤形成实验等对诱导性多潜能干细胞形态、多能性基因表达情况、干细胞表面标记及全能性等进行鉴定分析。结果与结论:从小鼠胚胎成纤维细胞诱导而来的诱导性多潜能干细胞镜下观察呈典型的克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲细胞分界清楚;RT-PCR、碱性磷酸酶染色及免疫荧光检测诱导性多潜能干细胞高表达胚胎干细胞相关基因及蛋白;种植在免疫缺陷鼠体内能够形成向内中外3个胚层分化的畸胎瘤,表明诱导性多潜能干细胞具有多潜能性。通过转导3种重编程因子可以将小鼠成纤维细胞诱导为类似胚胎干细胞的多潜能干细胞。     

人脑神经干细胞体外培养中增殖、自我更新及多向分化潜能的观察

背景：神经干细胞为神经系统损伤的修复开辟了新的途径，也是发现某些细胞因子和其作用机制的良好模型，神经干细胞的体外培养、增殖和诱导分化的探讨是这些研究的重要基础。目的：分离培养和鉴定人脑神经干细胞。设计和方法：采用无血清培养基分离和培养人胚胎脑皮质分离和培养神经干细胞，并应用免疫荧光技术进行细胞自我更新能力、巢蛋白表达和多向分化潜能的鉴定。地点和材料：实验在福建医科大学分子医学研究中心实施。实验材料为自然流产的孕龄6—8周的人胚胎脑组织。主要观察指标：人脑神经干细胞在体外培养条件中的增殖、自我更新能力、巢蛋白表达和多向分化潜能。结果：人胚胎脑组织分离培养的细胞具有神经干细胞的特征，并可在体外大量增殖，经诱导可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论：从人胚胎脑皮质成功分离培养出的神经干细胞，是研究神经干细胞诱导分化的良好模型。     

人诱导性多潜能干细胞系的建立

背景:诱导性多潜能干细胞与肿瘤干细胞的发生过程极其相似,而且具有的干细胞特性极其接近人胚胎干细胞。因此,研究诱导性多潜能干细胞有利于人们进一步认识并了解人类发育以及肿瘤的发生过程。目的:掌握建立人诱导性多潜能干细胞系的技术,以便为特异性疾病细胞的重编程建立技术平台,从而利用重编程技术研究疾病的发病机制。方法:将含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4个转录因子的反转录病毒感染人皮肤成纤维细胞(HS27细胞),在人胚胎干细胞培养条件下诱导产生人胚胎干细胞样的克隆。挑取并进一步扩增,通过克隆形态、碱性磷酸酶活性、免疫荧光检测是否有人胚胎干细胞标记物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表达,悬滴法检测HS27细胞来源的克隆形成畸胎瘤的能力和验证向3个胚层的分化能力。结果与结论:经病毒感染诱导产生的胚胎干细胞样克隆呈绿色荧光蛋白阴性,克隆在细胞形态方面与人胚胎干细胞克隆相似,进一步扩增经碱性磷酸酶检测克隆呈阳性,免疫荧光检测克隆表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4,并且HS27细胞来源的克隆注入免疫缺陷小鼠体内可以形成畸胎瘤并经苏木精-伊红染色显示具有向三胚层分化能力。实验成功构建了人诱导性多潜能干细胞系,为下一步开展疾病细胞特异性重编程研究奠定了良好的实验基础。     

造血干细胞的发生及生物学特性

造血干细胞来源于胚胎发育期的全能干细胞,是一群处于不同发育阶段,具有自我更新能力,增殖分化潜能和潜在可塑性的异质性细胞。     

造血干细胞的发生及生物学特性

造血干细胞来源于胚胎发育期的全能干细胞,是一群处于不同发育阶段,具有自我更新能力,增殖分化潜能和潜在可塑性的异质性细胞。     

羊水多潜能干细胞的体外培养及其生物学特性

背景：近来发现羊水中含有具有多向分化潜能的干细胞，具有向内胚层、中胚层和外胚层分化的能力。目的：建立羊水多潜能干细胞的体外培养方法，并探讨其生物学特性。设计、时间及地点：单一样本实验，于2007—04／2008—01在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。材料：5份羊水标本来自孕16～22周流产孕妇自愿捐献。方法：从人孕中期羊水中，采用贴壁筛选法分离羊水多潜能干细胞。主要观察指标：采用免疫荧光、流式细胞术和反转录聚合酶链反应等方法分析细胞的生物学特性和鉴定细胞表型。结果：体外培养的羊水多潜能干细胞呈梭形或类上皮细胞样，细胞增殖迅速，细胞倍增时间约为24h，细胞周期中G1、S、G2期的细胞所占百分比分别为72．88％、5．77％、21．35％；细胞表达Oct4、Nanog、SSEA-4、CD44和CD105，不表达CD34和CD45。结论：采用贴壁筛选法获得的羊水多潜能干细胞增殖能力强，同时表达胚胎和成体干细胞的部分标志，可能为介于胚胎干细胞与成体干细胞之间的一种过渡阶段的干细胞。     

胚胎干细胞研究临床应用性的挑战

胚胎干细胞是存在于胚胎发育早期阶段，具有自我更新和多分化潜能的干细胞，是组成机体各种组织器官的起源细胞。在一定条件下，其在体外可以保持未分化状态，长期存活无限繁殖。有关胚胎干细胞在动物疾病模型中治疗作用的研究，尤其是在小鼠胚胎干细胞的研究，已趋于成熟。在此基础上，人们开始尝试将人类胚胎干细胞用于临床治疗各种疾病，探讨其可行性和安全性等问题。目前胚胎干细胞已经应用在治疗糖尿病、帕金森及心血管损伤等各种疾病中，虽然有很多技术问题和社会伦理问题需要解决与克服，相信随着胚胎干细胞定向分化机制的逐渐完善，优化培养体系的建立，致瘤性的解决，该细胞疗法作为一种新的治疗方式，将适用于临床使用。     

肿瘤干细胞与胃癌

与胚胎干细胞一样，成体干细胞也具有强大的分化可塑性，具有分化成其他细胞或组织的潜能，成为当今研究的热点。文章从干细胞研究着手，重点讲述肿瘤干细胞学说的兴起，认为肿瘤干细胞是肿瘤生长、侵袭、转移和复发的根源；并分析胃部组织干细胞，试图寻找胃癌与胃部组织干细胞有着某种联系，分析胃癌可能也是一种干细胞性疾病。     

GFP转基因胚胎大鼠神经干细胞生物学特性研究

目的 体外分离、培养、鉴定绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）转基因胚胎大鼠神经干细胞，研究其体外活性与生物学性状，为在体分化示踪研究奠定基础。方法 采用机械分离，无血清传代培养法从GFP胚胎大鼠海马获得神经干细胞，免疫荧光和免疫细胞化学法染色进行体外神经干细胞性质和分化活性鉴定，并利用流式细胞计数法行纯度检测。结果 成功从GFP胎鼠海马获得神经干细胞，体外生长情况与活性良好，能分化成神经元和胶质细胞；体外连续传代3次后绝大部分细胞Nestin表达阳性，且分化后细胞的GFP表达不受影响。结论 GFP胚胎大鼠来源神经干细胞具有普通胎鼠NSCs相同的自我更新和多向分化潜能，且能稳定表达GFP，因此它可以成为示踪神经干细胞研究的有效工具细胞。     

人胚胎干细胞的研究进展

人胚胎干细胞(hES细胞)是由早期人类胚胎内细胞团或原始生殖细胞(PGCs)经体外分化抑制培养而建立的克隆细胞系，具有多种增殖和分化潜能。其生物学特征包括：正常的核型、高端粒酶活性及表达阶段特异性胚胎抗原等。细胞因子及细胞培养条件对胚胎干细胞分化有着重要的影响作用。     

诱导性多潜能干细胞的研究进展及应用价值

诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)是指一类经过重编程处理后,具有与胚胎干细胞(embryonicstem cells)十分类似的形态与生长发育潜能的细胞,它是由日本Yamanaka研究小组命名的,2006年,Takahashi等[1]将四个转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc(Yamanaka四因子)导入已分化的小鼠成纤维细胞,进而获得了类似于胚胎干细胞的多能性     

诱导人孤雌胚胎干细胞分化为胰岛样细胞团

背景:随着人类孤雌胚胎干细胞系的成功建立,对该细胞的进一步分化功能研究成为新的研究热点.目的:研究体外培养的人类孤雌胚胎干细胞诱导分化为胰岛样细胞团的潜能.方法:自主建系孤雌来源人胚胎干细胞和正常来源人胚胎干细胞各1株,运用基于胰腺体内发育规律的改良5阶段诱导法诱导人孤雌胚胎干细胞为胰岛样细胞团,加入不同生长因子及诱导试剂对人胚胎干细胞分5阶段序贯培养.结果与结论:终末分化细胞光镜下呈团状聚集,RT-PCR、免疫荧光染色检测分化细胞表达胰岛细胞特征性的基因与蛋白.胰岛素释放实验提示获得的细胞具有胰岛样生化功能.由人类孤雌胚胎干细胞来源的胰岛样细胞团具备胰岛的基本特征,是未来治疗1型糖尿病的可用材料.