高表达p73 基因对肺腺癌细胞VEGF 、bFGF 表达抑制作用的研究

 目的 观察高表达的p73基因对肺腺癌细胞中VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平的影响。方法 将p73基因以脂质体法转染A549细胞、H1299细胞，G418筛选阳性细胞克隆．采用RT-PCR半定量法检测转染前后VEGF、bFGF mRNA的表达水平，Western-blot半定量法检测蛋白表达水平。结果 转染p73基因后，A549细胞、H1299细胞中VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平均下降，较未转染p73基因的细胞有显著性差异(P<0．05)。结论 高表达的p73基因能够降低肺腺癌细胞中VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平，提示p73基因可能抑制人类肺腺癌的血管生成。     

VEGF和 bFGF在浅表膀胱移行细胞癌中的表达及意义

背景与目的：血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factior,bFGF)都能促进血管内皮细胞分裂和诱导血管形成,是肿瘤的生长,浸润,和转移过程中非常重要的物质,但它们在单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌中表达的差异则未见报道,本研究主要是探讨VEGF和bFGF在浅表膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法：采用免疫组化法对60例浅表膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱组织进行VEGF和bFGF的检测,观察单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中VEGF和bFGF表达的关系。结果：多发性浅表膀胱移行细胞癌的VEGF阳性率为55.6%,bFGF阳性率为50.0%,以及VEGF和bFGF共同表达阳性率为50.0%。均明显高于单发者的水平,而高水平表达的多发性肿瘤患者的术后复发率61.1%也明显高于单发组的复发率（单发组的复发率16.7%)。结论：VEGF和bFGF表达水平的高低与浅表膀胱移行细胞癌的生物学行为有关。     

△Np73基因在人非小细胞肺癌中的转录表达及其临床意义

背景和目的 △Np73是p53基因家族新成员p73的异构体，研究表明△Np73因为N末端转录活化区缺失致转录活化功能完全丧失，对p53和全长型p73的转录活化和促凋亡活性有明显的负调节作用。本研究旨在探讨人非小细胞肺癌组织中△Np73转录表达及其与患者临床病理特征之间的关系，分析其对肺癌患者预后的意义。方法采用半定量逆转录多聚酶链反应技术（RT—PCR）检测40例非小细胞肺癌癌组织及癌旁肺组织△Np73mRNA的表达，结合其临床病理特征，统计分析△Np73在肺癌组织中表达的意义。结果 51例非小细胞肺癌癌组织中有32例（62．7％）呈△Np73mRNA高表达，而在癌旁肺组织中低表达。△Np73的表达与肺癌的临床TNM分期有密切关系（P=0．046），但与患者年龄、性别、分化程度和病理学类型无显著相关性。△Np73mRNA高表达的患者较低表达的患者术后生存期短，预后差（P〈0．001）。结论 △Np73基因在人非小细胞肺癌癌组织中的转录表达较对应癌旁肺组织明显升高，并与患者临床分期和预后相关。△Np73基因的转录表达情况可作为非小细胞肺癌预后判断的参考指标之一。     

VEGF和bFGF共同表达与膀胱癌生物学行为的关系

目的 探讨血管生成因子在膀胱移行细胞癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化方法，对62例原发性膀胱移行细胞癌及8例正常膀胱组织 血管内皮生长因子（VEGF）和碱性纤维细胞生长因子（bFGF）进行检测。结果 膀胱癌组织中VEGF和bFGF阳性表达率分别为56.5%和46.8%，共同表达率为33.9%。VEGF和bFGF表达与膀胱癌的病理分级、临床分期、复发及3年生存率密切相关。结论 VEGF和bFGF表达对膀胱癌生物学行为有重要影响，VEGF和bFGF共同表达对于判定膀胱癌复发、转移和预后更有价值。     

膀胱癌中VEGF和bFGF表达的意义

目的探讨膀胱移行细胞癌中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达与临床病理指标和预后的关系.方法应用免疫组织化学方法,对62例原发性膀胱移行细胞癌组织中VEGF和bFGF进行检测.结果膀胱癌组织中VEGF和bFGF阳性表达率分别为56.5%和46.8%.VEGF和bFGF表达与膀胱癌的病理分级、临床分期、复发及3年生存率密切相关.结论VEGF和bFGF表达对膀胱癌生物学行为有重要影响,VEGF和bFGF表达有可能成为预测膀胱癌复发、转移和预后的指标.     

青年和绝经女性乳腺癌VEGF、bFGF及其受体表达的差异

目的 探讨青年和绝经女性乳腺癌血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(FLK-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体(HLG)的表达特征和差异。方法 以SABC免疫组化法检测40例年龄≤35岁的青年女性(青年组)和30例绝经女性(绝经组)乳腺癌组织中VEGF、FLK-1、bFGF和FLG的阳性系数值并进行比较,探讨其与腋窝淋巴结转移和临床病理特征之间的关系,同时比较两组之间各项临床指标的差异。结果 青年组腋窝淋巴结转移率和VEGF、bFGF阳性系数值明显高于绝经组,差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01);腋窝淋巴结转移组的VEGF、bFGF、FLK—1和FLG阳性系数值明显高于腋窝淋巴结未转移组,差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01);VEGF、FLK—1和FLG阳性系数值在两组的TNM临床分期0-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期组问差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01)。结论 青年乳腺癌侵袭性强与肿瘤血管生成相关,主要表现为VEGF和bFGF高表达。     

外源性P73基因对WtP53型人肺腺癌细胞A549化疗敏感性的影响

目的 研究外源p73基因转染wtp53型人肺腺癌A549细胞对其化疗药物敏感性的影响。方法 用脂质体介导的转染技术。将含有全长人野生型p73α cDNA和野生型p53 cDNA的真核表达重组质粒分别导入A549细胞，观察基因转染前后肿瘤细胞对化疗药物顺铂和阿霉素敏感性的变化。结果 A549-p73α细胞可以稳定地表达P73α蛋白，其生长速度较未转染p73α和转染wtp53基因的A549细胞明显减慢，克隆形成数下降，凋亡细胞明显增多。与未转染组比较，在原本没有抑制和杀伤作用的化疗药物浓度作用下A549-p73α细胞生长明显受到抑制，顺铂和阿霉素的IC50值分别降低为约1／6和／70。结论 研究显示外源性p73基因的导人增加了wtp53型人肺腺癌A549细胞对顺铂和阿霉素等化疗药物的敏感性，为p73基因用于治疗wtp53不能发挥作用的恶性肿瘤提供实验依据。     

非小细胞肺癌血清VEGF、bFGF和TNF-α的临床意义

[目的]观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)与NSCLC临床特征的相关性,探讨三者在NSCLC疗效评价中的临床价值。[方法]采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测NSCLC患者化疗前1d、化疗结束1周后血清VEGF、bFGF和TNF-α的含量。[结果]NSCLC患者化疗前血清VEGF、bFGF和TNF-α与患者临床分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别及病理类型无关;分析68例晚期NSCLC患者化疗前后血清VEGF、bFGF和TNF-α的变化,临床获益组与疾病进展组比较三者均有明显下降(P<0.05)。[结论]血清VEGF、bFGF和TNF-α与NSCLC肿瘤负荷有关;血清VEGF、bFGF和TNF-α水平可作为NSCLC患者化疗疗效预测的参考指标。     

p73基因在食管癌中的转录表达及其意义

目的：检测p73 mRNA在食管癌中的表达情况，探讨p73基因在食管癌发生、发展中的角色和作用机制。方法：采用逆转录多聚酶链反应技术（RT－PCR）检测37例食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织、区域淋巴结和相应正常食管组织中p73 mRNA的转录表达，并探其与食管癌临床病理特性的关系。结果：37例食管肿瘤组织中有21例（15．8％）p73 mRNA过度表达，其过度表达率显著高于相应的癌旁组织、区域淋巴结和正常组织（P＜0．05），但与食管癌TNM分期、细胞分化程度和病理类型均无明显关系（P＞0．05）。结论：食管肿瘤组织中存在p73基因的过度转录表达，可能参与了调控食管癌的发生过程，它的存在并没有阻止食管癌的进展，在食管癌中可能没有担当起主要的抑癌作用。     

血清VEGF、bFGF与乳腺癌生物学行为的关系

目的:探讨VEGF、bFGF与乳腺癌的生物学行为的关系,复发转移患者血清VEGF、bFGF的表达水平与化疗疗效的关系.方法:应用ABC-ELISA方法检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达情况.结果:术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF表达水平明显高于健康体检者、乳腺腺瘤患者(P<0.05),也明显高于同组患者术后血清VEGF、bFGF表达水平(P<0.05).术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF的表达水平与原发肿瘤的大小、TNM分期、淋巴结转移有关.术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF与bFGF的表达水平呈正相关(r=0.210,P<0.05).乳腺癌复发转移组化疗前血清VEGF、bF-GF的表达水平比健康体检者及无病生存组明显增高(P<0.05).乳腺癌复发转移组化疗后CR+PR组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前明显减低(P<0.05);化疗后NC+PD组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前略高,但没有显著性差异(P>0.05).乳腺癌复发转移组化疗后CR+PR组血清VEGF、bFGF表达水平比NC+PD组明显降低(P<0.05).结论:乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平与乳腺癌生物学行为有关,而且与化疗疗效有关,提示通过检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平可能对乳腺癌的诊断、客观预测肿瘤的复发转移、选择合理有效的治疗方案有一定的参考价值.     

p73基因对人肺腺癌细胞H1299化疗敏感性的影响

背景与目的:实验证明野生型p53基因能增强大多数非小细胞肺癌的化疗敏感性。p53基因的同源体p73与其在结构和功能上都具有高度的相似性。本研究拟探讨p73基因对人肺腺癌细胞株H1299化疗敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将p73α基因导入人肺腺癌细胞株H1299,G418筛选获得稳定表达P73α的阳性细胞克隆。Westernblot检测转染细胞中P73α蛋白的表达;MTT法检测细胞存活率,观察转染细胞对阿霉素、顺铂的敏感性变化;采用流式细胞仪和TUNEL法检测.p73646化疗药诱导前后转染细胞凋亡的变化;克隆形成实验观察细胞生物学性状的变化。结果:转染p73α基因的H1299细胞可以稳定高表达P73α蛋白。MTT实验提示顺铂和阿霉素的IC50值分别减少了86.2%和99.2%,转染细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(1.25μmol/L的顺铂或0.05μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制。流式细胞术显示p73α基因转染后顺铂诱导的细胞凋亡率从10.1%升高到38.4%(P<0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从12.1%升高到49.3%(P<0.01)。克隆形成实验显示p73α基因转染能明显降低化疗后H1299细胞的克隆形成数(P<0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为1.8和2.6倍。结论:转染p73基因可以提高H1299细胞对阿霉素、顺铂等化疗药的敏感性。该作用可     

p73基因过量表达对人肺癌细胞A549凋亡及其化疗敏感性的作用

背景与目的：部分非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）表达野生型p53基因（wild-type p53,wt-p53）,因此在基因治疗中克服这些NSCLC对wt-p53的抵抗机制就非常重要。P53基因家族的新成员p73是p53的同源体,本研究旨在探讨对wt-p53基因治疗抵抗的人肺腺癌细胞A549在外源p73基因转染或联用化疗药后凋亡程度和对化疗药物敏感性的变化。方法：将真核表达重组质粒pcDNA3-HA-p53或pcDNA3-HA-p73α转染入A549细胞,G418筛选,Western blot检测P53或P73α的表达。MTT法分析转染细胞对顺铂和阿霉素的敏感性,用流式细胞术、TUNEL法和DNA片段法分析化疗药作用下转染细胞的凋亡变化,克隆形成实验观察细胞生物学性状的改变。结果：转染p53或p73α基因的A549细胞可以稳定高表达p53或p73α蛋白。转染p73α的A549细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度（6．25μmol／L的顺铂或0．25μmol／L的阿霉素）作用下生长明显受到抑制。顺铂的IC50值从22．65μmol／L降至3．75μmol／L,阿霉素的IC50值从4．20μmol／L降至0．06μmol／L。p73能使A549细胞受顺铂和阿霉素诱导的细胞凋亡增加。而p53没有明显作用。流式细胞术显示p73α基因转染后,顺铂诱导的细胞凋亡率从10．6％升高到36．8％（P〈0．01）,阿霉素诱导的细胞凋亡率从13．0％升高到41．1％（P〈0．01）。克隆形成实验显示．p73α基因转染能明显降低顺铂和阿霉素作用后A549细胞的克隆形成数（P〈0．01）。对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为2．0和2．4倍。结论：外源性p73基因的导入增加了wt-p53型A549细胞对顺铂和阿霉素等化疗药的敏感性。该作用可能与p73基因能不依赖于p53基因诱导细胞凋亡有关。p73基因可用于治疗wt-p53不能发挥作用的恶性肿瘤。     

肺癌中血管内皮生长因子及突变型p53基因表达及其临床意义研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）、突变型p53（rhtp53)基因表达水平与肺癌病理生理学特征之间的关系。方法 采用免疫组化方法（LSAB法）,检测120例肺癌组织及相应癌旁组织,40例肺良性病变组织中的VEGF、mtp53表达水平。结果 肺癌组织中VEGF、mtp53基因的表达水平显著高于癌旁肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）。VEGF、mtp53基因表达水平与肺癌患者在性别、年龄、吸烟史、组织学类型均无明显关系（P＞0．05）,与原发肿瘤大小、细胞分化程度、淋巴结转移状态、P－TNM分期均有密切关系（P＜0．01）。mtp53基因表达水平与VEGF表达水平呈显著正相关（P＜0．01）。结论 VEGF、mtp53基因可能参与了肺癌的发生、发展进程,可以作为肺癌生物学行为恶化的一项指标。     

非霍奇金淋巴瘤组织p73 mRNA基因表达与病因关系

目的 :探讨非霍奇淋巴瘤p73mRNA基因表达与病因的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR) ,检测 10例非恶性淋巴组织与 40例非霍奇金淋巴瘤组织 p73mR NA基因表达状况。结果 :10例非恶性淋巴组织均有mRNA表达 ( 10 0 % )。 40例非霍奇金淋巴瘤 p73mRNA表达 3 2 5 % ( 13 / 40 ) ,两组表达率差异有统计学意义 ,P <0 0 1。p73mRNA表达与临床分期无关 ,P >0 0 5 ,与病理类型有关 ,P <0 0 5。结论 :p73基因可能与非霍奇金淋巴瘤的发生有关     

p73基因与肿瘤

癌基因的激活和抑癌基因的失活是人类恶性肿瘤发生和发展的重要原因。p53基因是与人类肿瘤相关性最高的基因,近半数的恶性肿瘤与p53基因的突变有关,而p73基因是1997年发现的p53基因家族的一个成员,近年来对其结构、功能、分布和表达情况都有了深入的研究。我们就p73基因的研究现状以及其在人类肿瘤中的表达情况作一综述。p73基因定位于1p36.33,由13个外显子和12个内含子组成,表达相对分子质量为73×103的蛋白,在结构上与p53蛋白有同源性。p73过表达时能抑制细胞生长和诱导细胞凋亡,但是病毒原癌蛋白却与p73没有相互作用。C-Ab1激酶可以活化p73基因并参与凋亡反应。p73基因敲除的小鼠没有肿瘤易患现象发生,但却有严重的发育异常。p73基因在神经母细胞瘤中不常发生突变,在肺癌、食管癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌表达增高,在淋巴瘤和某些白血病表达降低。与p53基因有明显的不同,p73基因有自己独特的功能。对于野生型p73基因在多种人类肿瘤中过表达的一种解释是,p73基因的过表达可能是一种p53基因失活的代偿反应,虽然这种作用可能无法完全替代p53基因的作用。但是目前研究已经证实p73基因很少突变,而且在肿瘤组织中存在异常表达,增加其表达可能诱导肿瘤细胞的凋亡,并且在p53基因突变时起抑制肿瘤细胞增殖的作用。因此增强p73基因表达也许是恶性肿瘤治疗的一种新方法。