紫杉醇联合顺铂化疗对人卵巢浆液性囊腺癌组织occludin和ZO-1表达以及线粒体超微结构的影响

 目的：观察紫杉醇联合顺铂化疗对人卵巢浆液性囊腺癌（serous cystadenocarcinoma, SC）组织紧密连接蛋白occludin和zonula occludens-1(ZO-1)表达以及线粒体超微结构的影响。方法：取紫杉醇联合顺铂化疗和未化疗的卵巢癌患者SC组织,用电镜观察其线粒体超微结构,用免疫组织化学法观察癌组织occludin和ZO-1蛋白的表达,并以子宫肌瘤患者的正常卵巢组织为正常对照。结果：SC细胞线粒体明显肿胀,呈现巨线粒体,且嵴断裂十分显著;化疗后的SC细胞线粒体肿胀减轻,形态接近正常。SC细胞较正常卵巢上皮细胞occludin和ZO-1蛋白表达明显降低（P<005或P<001）;化疗组较未化疗组SC细胞occludin和ZO-1蛋白表达明显增多（P<001）。结论: 紧密连接蛋白occludin 和 ZO-1的低表达可能是SC浆液生成增多和细胞代谢异常的关键所在,而化疗可促进紧密连接蛋白表达,从而减轻线粒体结构肿胀并改善细胞功能。     

浆液性和黏液性卵巢囊腺癌患者线粒体结构和紧密连接蛋白表达的差异比较

目的:探讨浆液性卵巢囊腺癌(SC)与黏液性卵巢囊腺癌(MC)细胞线粒体结构及紧密连接(TJ)蛋白occludin/ZO-1表达异常的差异及可能机制。方法:临床确诊30例卵巢囊腺癌患者中15例为SC(SC组),15例为MC(MC组),另选3例子宫肌瘤患者进行对照(对照组)。采用电镜观察各组线粒体超微结构;采用体视学方法分析线粒体面数密度(Nm)、体密度(Vvm)和外膜面密度(Sv);采用免疫组化方法检测各组卵巢上皮细胞occludin/ZO-1蛋白的阳性单位(PU)及其强弱程度(用积分光密度值IOD表示)。结果:电镜下,对照组线粒体及内质网均未见异常;MC组线粒体体积小、数量较多,线粒体Nm、Vvm和Sv较对照组明显降低(P0.05);SC组线粒体体积大,脊断裂显著,线粒体Nm、Vvm和Sv较MC组显著升高(P0.01)。免疫组化分析显示MC组occludin和ZO-1PU明显高于对照组(24.23±4.74Vs 21.07±5.51、37.07±3.58Vs 20.46±4.89,P均0.05),IOD明显低于对照组(72.39±9.86Vs 92.38±7.17、73.51±6.86Vs 80.34±7.04,P均0.05);SC组occludin和ZO-1PU明显低于对照组(11.50±4.15Vs 21.07±5.51、16.24±3.61Vs 20.46±4.89,P均0.05),IOD明显高于对照组(101.38±6.16Vs 92.38±7.1、92.78±3.07Vs 80.34±7.04,P均0.01)。结论:SC及MC两种卵巢囊腺癌患者线粒体结构和体视学特征明显不同,可能与TJ蛋白的occludin/ZO-1表达异常有关。     

维胺酸对交链孢醇单甲醚致突变性的抑制作用

交链孢醇单甲醚(AME)是直接致突变物,可能是林县食管癌病因之一。维胺酸是国内合成的毒性较小的新维甲衍生物,本文采用V_(79)细胞6-疏基鸟嘌呤抗性突变试验的方法,研究了维胺酸对AME致突变性的影响。结果表明,所用剂量范围内的维胺酸对V_(79)细胞无明显毒性和致突变性(P>0.05)。一定剂量维胺酸(15μg/ml)对不同剂量(25～100μg/ml)AME诱发的V_(79)细胞突变频率低于AME单独作用(P<0.01)。此外,与仅含AME对照相比,不同剂量维胺酸(5～20μg/ml)能分别降低AME的突变频率(P<0.05或P<0.01),并随维胺酸剂量增大,相对抑制率增高,呈现剂量相关性,显示维胺酸对AME致突变性有抑制作用,为林县食管癌的化学预防提供了实验依据。     

浆液性与黏液性卵巢囊腺癌线粒体超微结构及体视学

目的观察黏液性卵巢囊腺癌(MC)及浆液性卵巢囊腺癌(SC)细胞线粒体超微结构及体视学特点的改变,探讨两种腺癌线粒体体视学改变的临床意义及其可能机制。方法用电镜观察超微结构,并用体视学检测线粒体的体密度(Vvm)、外膜面密度(Sv,μm-1)、表面积体积比(Rsv,μm-1)及其相互关系。结果癌变后的卵巢囊腺癌细胞线粒体明显增多,线粒体肿胀、嵴断裂明显。MC细胞Vvm和Sv分别为0.07±0.06和0.06±0.04,显著低于正常的0.14±0.07和0.09±0.05(P<0.05),但线粒体Rsv则明显升高(0.89±0.04,P<0.05)。SC细胞线粒体Vvm和Sv明显升高,分别为0.27±0.12和0.12±0.06(P<0.01),而线粒体Rsv则明显降低(0.58±0.49,P<0.05)。结论 MC与SC的线粒体体视学改变不同,前者以减少为主,而后者则以增大为主。     

不同转移潜能肿瘤细胞内Ca^2＋浓度的测定及维胺酸的影响

本文观察了小鼠肺腺癌ＬＡ７９５母系及不同转移潜能克隆株ＬＡ１、ＬＡ５细胞其胞内〔Ｃａ＾２＋〕及诱导分化剂维胺酸和二甲基亚砜对其影响。发现母系与克隆株细胞间，其胞内静息〔Ｃａ＾２＋〕确有差异（Ｐ〈０．０１）。中转移ＬＡ５克隆株胞内〔Ｃａ＾２＋〕最高，不转移ＬＡ１克隆株最低，母系ＬＡ７９５胞内〔Ｃａ＾２＋〕居中。在克隆株细胞中，胞内〔Ｃａ＾２＋〕与其转移潜能成正比。维胺酸作用不同时间，ＬＡ７９５、ＬＡ     

米酵菌酸对培养人膀胱癌细胞超微结构的影响

目的：探讨米酵菌酸对人膀胱癌细胞毒性、杀伤作用及其超微结构的影响。方法：将不同浓度的米酵菌酸加入培养的人膀胱癌细胞，24h后，用光镜、透射电子显微镜分析其形态学改变。结果：光镜下可见米酵菌酸低浓度组细胞体积变小，核浆比增大，培养液中死亡细胞增多；高浓度组细胞体积进一步变小，核浆比进一步增大，细胞生长受到显著抑制。电镜下多数线粒体嵴断裂、空泡样变和髓样变;核染色质边集，核周隙增宽；粗面内质网脱颗粒。结论：米酵菌酸对人膀胱癌细胞形态及超微结构有显著影响。     

基于生物信息学分析PI3在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及临床意义

目的 探究PI3基因在卵巢浆液性囊腺癌（OV）中的表达及临床意义。方法 利用多种生物信息学分析在线工具,基于GEO、TCGA、GTEx、GEA数据库挖掘PI3基因在OV的表达、生物学作用及临床意义。结果 PI3在OV组织的表达量高于正常卵巢组织（P<0.05）;OV患者中,PI3低表达组总生存期和无复发生存期比高表达组长（P<0.001）;在免疫细胞浸润方面,中性粒细胞水平与PI3在OV中的表达呈正相关,Th1细胞、Th2细胞、B细胞、嗜酸性粒细胞水平对OV患者生存有影响且与PI3表达高低有关;PI3参与了炎症反应、白细胞活化等生物学过程,参与了PI3K-Akt、Toll样受体等信号通路。结论 PI3基因在OV中高表达,可作为OV患者诊断、治疗的潜在靶点。     

ataxin-3在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其临床意义

目的检测ataxin-3在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测ataxin-3在各组卵巢浆液性肿瘤中表达情况。结果ataxin-3在卵巢低级别浆液性囊腺癌中表达水平明显高于卵巢浆液性囊腺瘤、交界性浆液性囊腺瘤、高级别浆液性囊腺癌中的表达水平,但后三者之间无明显差异(P0.05),ataxin-3表达与卵巢浆液性囊腺癌的分化程度呈负相关,与其它临床病理因素均不存在相关性(P0.05)。结论ataxin-3可能参与卵巢低级别浆液性囊腺癌的发生机制,可能成为其早期诊断指标和治疗靶点。     

miRNA-200c在IIIc期卵巢浆液性囊腺癌中的表达及其参与癌转移中的作用

研究miR-200c在IIIc期卵巢浆液性囊腺癌中的表达格局,探索其参与转移癌形成的相关机制。选取2010年1月至2013年12月上海交通大学医学院附属仁济医院妇科卵巢肿瘤组织标本(IIIc期卵巢浆液性囊腺癌40例(其中选择自身配对的原发灶40例、转移灶40例)、卵巢浆液性囊腺瘤30例为对照),采用real time-qPCR法检测miR-200c的表达;采用CCK8法、Transwell小室分别检测细胞过表达miR-200c后增殖、迁移和侵袭能力的改变;采用western blot法检测相关蛋白表达量。结果发现:(1)IIIc期卵巢浆液性囊腺癌转移灶肿瘤与原发灶肿瘤相比,miR-200c表达是升高的(490.37±78.32cf.157.46±17.21),P0.01;而且这两者均高于对照组(卵巢浆液性囊腺瘤)的表达(25.32±10.17),P0.01。SKOV3细胞过表达miRNA-200c后(2)细胞迁移能力降低(35.6±4.3cf.18.6±1.9),P0.05;侵袭能力降低(26.7±3.1cf.15.4±2.4)P0.05;但是增殖能力不改变。(3)在蛋白水平检测ZEB1蛋白表达下降(0.3023±0.0251cf.0.6753±0.0262)P0.05、E-cad蛋白表达升高(1.274±0.0331cf.0.6140±0.0460)P0.05、Vimentin蛋白表达降低(0.0957±0.0049cf.0.1767±0.0158)P0.05。可见,miR-200c在IIIc期卵巢浆液性囊腺癌组织样本中表达增高,检测miR-200c的表达格局对于临床上监测上皮性卵巢癌的临床进展和转移有重要意义;也为开拓过表达miR-200c作为卵巢癌治疗手段,提供了理论与实验依据。     

卵巢浆液性肿瘤中IQGAP1与E-cadherin表达的检测

目的探讨上皮性钙黏素(E-cadherin)与具有IQ结构域的人Ras GTP激活蛋白相关蛋白1(IQGAP1)在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其临床意义。方法分别用免疫组织化学SP法和Western blot法检测20例卵巢浆液性囊腺癌、10例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、10例卵巢浆液性囊腺瘤以及10例正常卵巢组织中E-cadherin和IQGAP1的蛋白表达。结果 E-cadherin蛋白在浆液性囊腺瘤中表达最高,明显高于正常卵巢组织和浆液性囊腺癌组织(P0.05),其均值高于交界性囊腺癌,无统计学意义。IQGAP1在卵巢浆液性囊腺癌中表达较正常卵巢组织、良性及交界性肿瘤组织均增高(P0.05);免疫组织化学染色证实IQGAP1在浆液性囊腺癌中以胞膜表达为主,而在良性肿瘤中以胞质表达为主。结论 E-cadherin和IQGAP1在卵巢浆液性瘤高表达,可联合用于卵巢浆液性肿瘤的免疫组化诊断。     

单胺氧化酶抑制剂诱导胶质瘤细胞的体外分化

为研究单胺氧化酶抑制剂(TCP)对体外培养的人脑胶质瘤U251细胞的诱导分化作用,以不同浓度TCP单独或与100nmol/L组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)联合处理U251细胞。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖变化;流式细胞仪检测细胞周期变化;Hoechst 33258染色显示细胞凋亡;Real-time PCR和Western印迹法检测分化相关基因mRNA和蛋白表达水平的改变。结果表明:TCP可诱导细胞突起增多且变细长,抑制细胞增殖,阻滞细胞周期于G1期,抑制全能性转录因子Oct4和Sox2的表达,上调分化标志基因胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,TCP联合TSA也诱导了GFAP的高表达。这些结果提示:TCP可诱导胶质瘤U251细胞分化,TSA对TCP诱导细胞分化有协同作用。     

人牙周韧带细胞成骨诱导分化后的超微结构观察

目的 观察成骨诱导分化培养前后,人牙周韧带细胞超微结构的变化.方法 对人牙周韧带细胞进行体外培养,并进行成骨诱导分化,14d后行透射电子显微镜观察.结果 体外成骨诱导分化培养后,人牙周韧带细胞内细胞器发达,数目较常规培养条件下明显增多.细胞内可见大量的基质小泡、髓样结构及中、低电子密度的圆形和椭圆形小泡样结构.结论 人牙周韧带细胞是一种具有成骨潜能的细胞,经成骨诱导分化培养后,其超微结构具有成骨细胞和成牙骨质细胞的特点.     

基于癌症基因组图谱筛查卵巢浆液性囊腺癌相关基因

目的:利用全基因组表达谱芯片筛查与卵巢浆液性囊腺癌发生相关的基因,对在卵巢浆液性囊腺癌发生过程中可能参与的基因间的信号转导通路进行分析。方法:选取癌症基因组图谱(TCGA)数据库中卵巢浆液性囊腺癌的Affymetrix Gene Chip Human Exon 1.0 ST Array数据共16张,分别为卵巢浆液性囊腺癌组8张和正常组8张,筛选出差异表达基因,并进行基因本体(gene ontology,GO)分析和信号通路分析,构建卵巢浆液性囊腺癌相关基因间的信号转导通路,分析网络中具有重要作用的基因。结果:共筛选出1 144个在卵巢癌中差异表达的基因,其中表达上调的基因有747个,表达下调的基因有397个。GO分析得到上调差异基因的显著性功能分析结果362项,下调差异基因的显著性功能分析结果 160项(P0.05)。其中包括与肿瘤发生相关的基因功能有细胞周期、DNA复制、细胞增殖、细胞凋亡、细胞黏附等。信号通路分析得到45个显著上调信号通路和14个显著下调信号通路(P0.05)。其中参与肿瘤发生相关的信号通路主要有细胞周期、P53信号通路、DNA复制、肿瘤中的信号通路、PI3K-Akt信号通路、ECM-receptor信号通路、细胞黏附因子、细胞凋亡等。挑选显著性基因功能和信号通路分析的交集基因229个,构建显著性GO与信号通路基因间信号转导网络。分析发现CDK1、PLK1、MCM3和PGK1这4个基因在卵巢癌的基因调控网络中具有重要作用。结论:卵巢浆液性囊腺癌中有大量差异表达基因,差异表达的基因在多个与肿瘤发生密切相关的信号通路中发挥重要的调控作用。     

癌胚蛋白Glypican-3鉴别卵黄囊瘤与卵巢透明细胞癌

卵巢透明细胞癌（CCCs）是最常与原发性生殖细胞肿瘤相混淆的卵巢表面上皮性肿瘤，尤其与卵黄囊瘤（YST）和无性细胞瘤较难鉴别。现已证实OTC3／4是无性细胞瘤敏感性及特异性较高的标记，但用于诊断YST的标记仍较有限。近年来有研究显示，一种表达于胎儿肝脏及肝细胞来源肿瘤的癌胚蛋白Glypican-3（GPC3）也表达于生殖细胞肿瘤，尤其是YST。为探讨GPC3能否用于鉴别YST与卵巢CCCs，作者收集了33例YST、42例CCCs、157例卵巢浆液性腺癌、     

卵巢的嗜酸细胞性肿瘤

嗜酸细胞(oxyphil cell)是指体积大的圆形或多边形细胞，其核常位于中央，核仁明显，并有丰富、致密或颗粒状嗜酸性胞质，如电镜下胞质中有多量大的线粒体则称oncocyte。在人体的许多肿瘤中都会出现嗜酸细胞，有的肿瘤以这种嗜酸细胞为主要成分，卵巢肿瘤也不例外(表1)。     

玉女煎对棕榈酸诱导的L细胞损伤的影响

目的：研究玉女煎对棕榈酸（PA）诱导的肠L细胞损伤的影响。方法：（1）将不同浓度（1.5、3和6g/L）玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基（DPPH·）溶液（100 mg/L）混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·的清除作用。（2）将小鼠肠内分泌细胞系GLUTag分为空白对照组、PA(400μmol/L)组、PA+玉女煎（1.5 g/L）组、PA+玉女煎（3 g/L）组和PA+玉女煎（6 g/L）组,通过Hoechst 33342细胞核染色实验和MTT实验评价玉女煎对PA诱导的细胞凋亡的影响。（3）将GLUTag细胞分为空白对照组、PA组和PA+玉女煎（6 g/L）组,采用免疫荧光染色检测细胞内胰高血糖素样肽1(GLP-1)表达水平,通过2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平,通过Western blot实验检测超氧化物歧化酶1(SOD1)表达水平。结果：（1）玉女煎在体外可显著清除DPPH·（P<0.01）。（2）与PA组比较,玉女煎能以浓度依赖性方式抑制PA诱导的GLUTag细胞活...     

氨对星形胶质细胞超微结构的影响

目的：在体外实验条件下观察氨对星状胶质细胞超微结构的影响。材料与方法：用ＮＨ４Ｃｌ造成高高ＮＨ４环境，对体外培养之星形胶质细胞的形态变化进行了超微结构观察。结果：高ＮＨ４环境下，星菜胶质细胞首先表现出损伤性变化，细胞电子密度降低，线粒体、内质网等细胞器肿胀，在胞质内形成许多单位膜包绕的电子密度降低的空泡区域，以后随着氨浓度加大或／和氨作用的时间延长，细胞内成份开始出现增生修复现象，次级溶酶体数量增     

丙戍酸镁缓释片合并维思通对精神分裂症患者脂代谢影响

目的 分析丙戍酸镁合并维思通治疗对精神分裂症患者脂代谢的影响.方法 200例女性首发精神分裂症患者随机分为研究组与对照组各100例,研究组丙戍酸镁合并维思通治疗,对照组维思通治疗.于治疗前,治疗2、4、6、8、12周采集血样,检测胆固醇（TC）进行比较.结果 研究组治疗各周后胆固醇与治疗前相比脂代谢无明显变化.对照组自第2周即出现明显升高,此后各周持续升高（t=2.23,6.69,11.81,14.74,36.39;P＜0.01）,两组各周比较有显著差异（t=2.74,6.68,11.19,13.82,28.65;P ＜0.01）.结论 丙戍酸镁合并维思通治疗对精神分裂症患者脂代谢影响小,与丙戍酸镁特殊作用机制有关.     

蛋白酶体抑制剂MG132增强4-羟苯基维胺脂诱导肝癌细胞凋亡

目的:观察4-羟苯基维胺脂(4-HPR)联合蛋白酶体抑制剂MG132增强人肝癌Hep3B细胞凋亡的机制.方法:利用流式细胞仪技术检测4-HPR或(和)MG132联合应用后肝癌Hep3B细胞凋亡发生,采用电泳迁移率分析法(EMSA)检测核转录因子(NF-κB)活性变化.结果:流式细胞仪检测显示,MG132明显增加4-HPR诱导肝癌细胞Hep3B引起凋亡;EMSA实验表明MG132能抑制NF-κB的活性.结论:MG132抑制NF-κB活性可增强4-HPR诱导的肝癌Hep3B细胞凋亡,且NF-κB的激活部分抑制4-HPR诱导的肝癌Hep3B细胞凋亡.     

普鲁卡因胺对血小板功能和超微结构影响的研究

普鲁卡因胺对ＡＤＰ、花生四烯酸、凝血酶、肾上腺素、胶原、ＣａＣｌ２、Ａ２３１８７、ＰＡＦ等多种血小板聚集诱导剂诱导的血小板聚集有显著的抑制作用。普鲁卡因胺使可乐定的浓度－效应曲线平行右移,抑制Ａ２３１８７引起的胞浆游离Ｃａ２＋增加,抑制血栓素Ｂ２和丙二醛生成,促进６－酮－前列腺素Ｆ１α生成,提高６－酮－前列腺素Ｆ１α与血栓素Ｂ２的比值。降低血小板粘附和小鼠肺血栓栓塞。对血小板及其致密颗粒、α颗粒等超微结构有明显的保护作用。