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相似文献
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1.
骨关节炎是最常见的软骨退行性疾病。越来越多的研究显示,表观遗传学与骨关节炎之间密切相关,表观遗传修饰方式组蛋白甲基化水平与骨关节炎相关。组蛋白H3上不同氨基酸甲基化水平与骨关节炎病理发展的关联具体表现为第4位赖氨酸甲基化水平上升将加剧骨关节炎病理发展,而第9位与27位赖氨酸则呈现相反现象。因此,组蛋白甲基化修饰存在复杂网络,如能针对不同位置组蛋白的甲基化水平进行特异性靶向调控,有望延缓或阻止骨关节炎的发展。  相似文献   

2.
目的:探索不同浓度氨基酸标准溶液的最佳衍生试剂用量。方法:通过取20μl衍生试剂所能衍生的氨基酸标准液的最高浓度样品,依次减少衍生试剂用量,根据数理统计学分析,比较各组峰面积与标准20μl所得峰面积有无显著性差异,探索各浓度范围的氨基酸标准溶液所需的最佳衍生试剂用量。结果:在浓度为0.75μmol/ml的氨基酸标准溶液中,加入17μl衍生试剂所得峰面积与标准20m相比,无显著性差异;在浓度为0.5μmol/ml的氨基酸标准溶液中,加入15斗l衍生试剂所得峰面积与标准20μl相比,无显著性差异。结论:当氨基酸浓度≤0.5μmol/ml时,衍生试剂用量为15灿l即可充分衍生;对于浓度≤0.75μmol/ml的氨基酸标准溶液,17μl衍生试剂为最佳用量。  相似文献   

3.
DNA甲基化是哺乳动物表遗传机制,也是哺乳动物DNA惟一的自然化学修饰方式。但异常甲基化则为肿瘤发生的重要因素,在人类多种妇科肿瘤中都可以发现不同程度的DNA异常甲基化现象。本文介绍了哺乳动物DNA甲基化的特点及其抑制转录、表达的机制,DNA异常甲基化与妇科肿瘤发生、发展的关系,甲基化的检测方法及展望等。  相似文献   

4.
巢式PCR法检测不同类型标本中p16基因启动子过甲基化   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性。PCR法(nested-MSF,nMSP),探讨该方法最佳应用条件,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化,比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度。结论 巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。  相似文献   

5.
(1)叶酸、维生素B12的代谢及生理功能:正常机体内的叶酸完全依赖于食物摄入,在小肠靠主动运输和扩散吸收入血,与蛋白结合经血至肝脏,在肝脏被甲基化,再至骨髓细胞及成熟的红细胞或其它细胞,发挥其生理功能。其生理作用主要为:①参与体内重要分子如嘌呤、嘧啶DNA及RNA的合成。②构成血红素(血红蛋白中的含铁蛋白)。③氨基酸的转化及甲基化,神经系统髓鞘的甲基化障碍将导致髓鞘形成障碍和脱失,轴索变性。④与胆碱的合成有关。  相似文献   

6.
在肿瘤形成过程中,启动子区异常高甲基化的抑癌基因始终保持沉默、功能丧失,而启动子区去甲基化后抑癌基因则可以重新激活。因此,DNA去甲基化药物可治疗肿瘤。本文阐述了DNA甲基化与肿瘤的关系,以及DNA去甲基化药物的研究现状。  相似文献   

7.
目的 克隆蛇苔氧甲基转移酶(CcOMT1)基因并对其进行功能鉴定。 方法 通过RT-PCR技术获得CcOMT1基因的cDNA全长。构建原核表达质粒pET32a-CcOMT1,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达后,利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组蛋白进行纯化,并通过体外酶活分析其活性。采用DNAMAN 7.0和MEGA 5.1软件分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析。 结果 克隆得到的CcOMT1开放读码框为837 bp,编码278个氨基酸,预测分子量为30.95 kDa,等电点为5.59。与来自钝鳞紫背苔、紫花苜蓿和冰叶日中花的氧甲基转移酶的同源性分别为73.18%、53.60%和44.60%。对纯化的重组蛋白进行酶活检测,结果表明融合蛋白可以催化具有邻二酚羟基的黄酮和苯丙类化合物,产生相应的氧甲基化产物,其最适底物为槲皮素。 结论 克隆并鉴定了一个CcOMT1基因,为通过酶法实现化合物的氧甲基化修饰提供了一个候选基因。  相似文献   

8.
研究了15种氨基酸对中华仓鼠卵巢细胞在无血清培养基中的作用。实验表明,添加的精氨酸,亮氨酸,脯氨酸及蛋氨酸对细胞生长有明显的促进作用;而高浓度的丝氨酸,色氨酸则对细胞生长有明显的抑制作用;其它几种氨基酸在细胞不同生长时期所起的作用为不同。  相似文献   

9.
目的观察慢性髓细胞白血病(CML)病情恶化与降钙素(CT)基因高甲基化程度之间的关系。方法用内切酶酶切和PCR技术研究45例CML患者(其中慢性期33例,加速期2例,急变期10例)的CT基因高甲基化程度。CT基因未高甲基化,则能被相应内切酶切断,无法扩增出特异DNA片断,否则,能扩增出特异DNA片断,据此推断DNA的甲基化程度。结果3例慢性期,2例加速期及8例急变期患者呈现降钙素基因高甲基化;急变期组(包括加速期)甲基化率明显高于慢性期组,两组有显著性差别(P<0.01);1例在慢性期呈现CT基因高甲基化者于10个月后发生急粒变。结论该方法有助于监测CML的恶化  相似文献   

10.
聚合酶链反应结合酶切法检测载脂蛋白B-100第3500位氨基酸突变方法的建立刘 芳,何丽芳,宁寿葆,任建英,黄伟民(上海医科大学儿科医院,卫生部医学分子病毒学实验室200032;上海市徐汇区中心医院200040)关键词载脂蛋白B-100;聚合酶链反应...  相似文献   

11.
目的 观察慢性髓细胞白血病(CML)病情恶化与降钙素(CT)基因高甲基化程度之间的关系,方法 用内切酶酶切和PCR技术研究45例CML患者(其中慢性期33例,加速期2例,急变期10例)的CT基因高甲基化程度,CT基因未高甲基化,则能被相应的内切酶断,无法扩增出的特异DNA片断,否则,能扩增出特异DNA片断,据此推断DNA的甲基化程度。结果 3例慢性期,2例加速期及8例急变期患者呈现降钙素基因高甲基  相似文献   

12.
目的 比较新的CpG岛甲基化表型(CIMP)筛选标记基因和经典CIMP筛选标记基因在CIMP肺癌筛选中的作用,并分析CIMP肺癌的临床病理特征.方法 取第二军医大学长海医院呼吸科50例肺癌患者的肺癌组织和癌旁组织,提取DNA,进行甲基化转换后,利用甲基化特异性PCR (MSP)对新的CIMP筛选标记基因(SHISA3、CTSL1、C1ORF103和TMEM200B)和经典的CIMP筛选标记基因(CACNA1G、IGF2、NEUROG1、RUNX3)的启动子CpG岛区域进行扩增,采用琼脂糖凝胶电泳分析其甲基化状态.运用SPSS统计软件对结果进行统计分析.结果 肺癌组织发生明显的甲基化,所研究的8个基因甲基化水平均明显高于癌旁组织(P=0.014).其中RUNX3甲基化与淋巴结转移及功能状态(PS)评分有关(P值分别为0.017、0.018).年龄>60岁的肺癌患者甲基化率高于≤60岁者(P=0.031).吸烟对CTSL1基因甲基化的影响也很大(P=0.018).结论 CpG岛甲基化表型肺癌具有独特的临床病理特征;新的和经典的甲基化基因组合在CIMP肺癌筛选上都具有较高的灵敏度和特异性.  相似文献   

13.
目的 探讨P16、P15、P14基因5'CpG岛在膀胱移行细胞癌中甲基化状态及其临床意义。方法 应用甲基化特异性PCR(methylation—specific PCR,MSP)方法检测40例膀胱移行细胞癌P16、P15、P14基因甲基化程度,χ^2检验分析其甲基化程度与膀胱癌病理分级分期间关系。结果 膀胱移行细胞癌P16、P15、P14 5'CpG岛甲基化扩增阳性化率分别为27.5%、17.5%、35%,而正常膀胱组织中均未检测到三种基因5'CpG岛甲基化。P16、P14基因甲基化与膀胱癌病理分级分期有显著性差异(P〈0.05),P15基因则没有显著性差异(P〉0.05)。结论 P16、P15、P14基因在膀胱癌组织中的甲基化率较高,三种抑癌基因5'CpG岛异常高甲基化,在膀胱癌的发生、发展中具有重要作用。  相似文献   

14.
美国波士顿哈佛大学医学院流行病学家Edward Giovannucci及其同事的一项新研究结果表明,新鲜水果和蔬菜里有两种营养素(叶酸盐和蛋氨酸)可以预防癌变前的结肠疾病。这一研究支持以往研究所提示的:在生物化学过程(甲基化过程)减少时结肠癌增加。其他研究表明甲基化不足激活了致癌基因。为了完成甲基化,细胞需要大量的叶酸盐,叶酸盐是新鲜水果和叶状蔬菜里中一种很丰富的物质。在甲基化期间还需要基本的氨基酸蛋氨酸,是类似鱼、鸡和乳制品的高蛋白食物的一种成分。  相似文献   

15.
颤蛋白(Reelin )是一种分泌型细胞外基质蛋白,Reelin 在大脑的正常发育、学习记忆、突触可塑性、神经元的迁移和定位、板层结构的形成方面发挥重要的作用,本文从DNA 甲基化、Reelin受体、Reelin信号通路的相关基因3个方面阐述Reelin对学习记忆的影响。  相似文献   

16.
目的:采用一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),检测外科手术切除新鲜组织、石蜡包埋组织及纤维支气管镜活检组织中WIF-1基因启动子的异常甲基化状态。方法:将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果:在3种类型的原发性非小细胞肺癌标本中都检测出了WIF-1基因启动子的异常甲基化。结论:巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化的分析。  相似文献   

17.
背景:该研究了胃癌中有丝分裂前期检查点(CHFR)的基因甲基化水平及其与微管抑制剂(MI)疗效的相关性。方法:选取46份胃癌切除术标本,检测其中9份标本的细胞系,启动子甲基化采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测,CHFR mRNA的表达水平通过定量逆转录PCR检测,MI介导的生长抑制反应通过标准的MTT方法检测。结果:在9份胃癌细胞系中,有3份细胞系的CHFR表达被异常的启动子甲基化所抑制,CHFR mRNA的表达水平与MI处理细胞(R=M10.889;P=0.005)的IC,o密切相关。在46例胃癌术后患中,有24例(52%)出现CHFR异常甲基化,其中12例因晚期肿瘤或术后复发而接受MI治疗。MI治疗有效包括29%的CHFR甲基化和20%的CHFR非甲基化患。然而,在7例CHFR甲基化患中,有6例(86%)出现肿瘤消退或不再进展的迹象。反之,在5例CHFR非甲基化患中有4例(80%)出现病情恶化。  相似文献   

18.
同型半胱胺酸属于含硫氨基酸,是蛋氨酸代谢的中间产物.正常情况下,同型半胱胺酸通过转硫通路、再甲基化过程进行代谢,人体内很少蓄积.  相似文献   

19.
目的 探讨 19 个组蛋白赖氨酸去甲基化酶(KDMs)在膀胱癌多组学中的表达模式与潜在作用。方法 本研究使用UALCAN和GSCALite分析来自TCGA的膀胱癌样本的KDMs的转录表达和甲基化水平、体细胞变异多组学高通量测序数据。使用Kaplan Meier-Plotter和Assistant for clinical bioinformatics探讨KDMs的表达对BLCA样本的预后影响。利用Timer和GSCALite分析KDMs在膀胱癌中的免疫浸润和药物敏感性。结果 分析结果首先揭示了KDMs在膀胱癌多组学中的表达特征,并不是所有KDMs都具有一致的表达模式。转录组数据分析显示KDM1A/1B/2B/4A/4B/5B/5C的表达上调(P<0.05),而KDM3B/6B/7C的表达下调。甲基化水平差异分析显示KDM1A/3B/4A/4B/4C/5A/5B/5C/7B的甲基化水平下调,而KDM7C甲基化水平上调(P<0.05)。相关性分析显示,14个KDMs家族成员的转录水平与甲基化水平呈负相关,其中KDM1A最显著。突变分析显示,KDM6A非同义突变频率最高,突变种类最多,且与其它KDMs 的非同义突变具有互补性。生存分析显示,KDM3A/4C/5D/6A/7B对BLCA患者总生存率具有保护性作用,而KDM3B/5B/5C对BLCA患者无复发生存率具有危险性影响。综合预后模型证实KDM4C/6A/7B具有膀胱癌预后生物标志物的潜在作用,其表达与BLCA患者免疫浸润呈正相关。药物敏感性分析显示,KDM2B/3B/4B/4C/5A与大多数抗癌药物呈负相关,而KDM2B/4B与6种抗癌药物呈正相关(P<0.05)。结论 本研究系统性地揭示了KDMs基因家族在膀胱癌中的高突变互补性、过表达与低甲基化负相关性的特征,并与膀胱癌预后、免疫浸润和药物敏感性密切相关。  相似文献   

20.
核化线粒体的进化加速作用与转基因人模型分析   总被引:3,自引:3,他引:0  
生物分子钟的应用在当代生物研究领域具有十分重要的意义。然而,分子钟仅能用于粗略估计不同种群生物间的进化时程,间接表明进化可能不是或不仅仅是由于中性突变通过遗传渐变所造成;相反,染色体DNA与外源性DNA之间,以及染色体DNA相互之间的大量基因重组,则可能是推动进化进程的更大动力之一。鉴于人体内的线粒体DNA是一种外源性环状DNA,人类可认为是一种天然发生的整合了外源性线粒体DNA的转基因物种。本文引入转基因人分析法并应用这一方法探讨与人类进化过程相关的基因重组。通过对人、小鼠、大鼠进行核化线粒体组学分析,发现人类染色体基因组含有大量与线粒体DNA同源的核酸片段;人体基因组内核化线粒体基因在重组数与总碱基长度上均较小鼠和大鼠高出数倍。人体内大量存在的线粒体DNA介导的基因重组可能在促进人类进化中发挥了一定的作用。  相似文献   

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