MMP-1、TIMP-1在兔实验性膝骨关节炎中的表达

目的 观察基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)在兔实验性骨关节炎中的表达,探讨骨关节炎的发病机制是否与MMP-1及TIMP-1的异常表达有关.方法 20只日本大耳白兔随机分为2组:A组正常对照组,B组模型组.B组用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,4周后观察软骨组织形态学的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达.结果 B组软骨病理损害程度重于A组(P<0.01),MMP-1表达明显高于A组(P<0.01),TIMP-1表达高于A组(P<0.05).结论 MMP-1与TIMP-1与骨关节炎软骨退变有关,其异常表达在骨关节炎关节软骨退变的病理过程中发挥关键作用.     

HIF-1α、MMP-2在退变腰椎间盘髓核中的表达及相关意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人类退变腰椎间盘髓核组织中的表达变化情况.方法 对照组为取自青壮年腰椎爆裂性骨折患者的正常椎间盘髓核组织;实验组为腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘髓核组织,依据术前MRI影像表现分为3组.分别进行免疫组织化学染色,比较4组椎间盘组织中HIF-1α、MMP-2表达.结果 HIF-1α在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(8.92±3.411%、(46.81±3.63)%、(66.88±4.60)%、(89.63±2.27)%;MMP-2在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(9.61±3.03)%、(47.31±4.4)%、(69.54±5.96)%、(90.05±3.16)%.HIF-1α、MMP-2在实验组退变的椎间盘中的表达显著高于对照组(P<0.05),而且不同退变程度的表达也不同(P<0.05),统计学分析均有显著差异,HIF-1α和MMP-2在退变的椎间盘组织中的表达呈正相关关系.结论 HIF-1α、MMP-2均可能参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,且HIF-1α、MMP-2在人类退变腰椎间盘组织中有相同的增高趋势,HIF-1α可能作为MMP-2的一个重要调节因素,与MMP-2相互协调、共同促进椎间盘退变.     

Expression of matrix metalloproteinase 13 in degenerative and traumatic nucleus pulposus of intervertebral disc

目的 比较基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在退变和创伤椎间盘髓核中的不同表达,探讨其在椎间盘退变过程中的作用.方法 随机选择2011年1-7月在宁波大学附属医院因腰椎间盘突出症行髓核摘除的33例患者(退变组)和因外伤性脊椎骨折行内固定的6例患者(对照组)作为研究对象.采用免疫组织化学方法检测患者髓核组织的MMP-13表达,应用Image-ProPlus5.1图像分析系统测定其灰度值.结果 对照组椎间盘组织中MMP-13的表达很少,平均阳性表达率为(20.4±14.3)％.退变组椎间盘组织中MMP-13的表达呈弥漫性或局灶性强染色,平均阳性表达率为(73.2±10.9)％.退变组的MMP- 13阳性表达率显著高于对照组(P＜0.01).结论 椎间盘退变髓核组织中MMP -13的表达显著升高,MMP-13的异常表达可能在椎间盘退变发病过程中发挥着重要的作用.     

动脉粥样硬化患者血液中基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的基因表达

目的通过检测动脉粥样硬化（AS）患者血液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）的基因表达水平,探讨AS发生的分子机制及预测因子。方法 AS患者120例为动脉硬化组,72例正常体检者为对照组。用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测其血液中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达水平。结果 MMP-9和TIMP-1的RT-PCR产物序列与GenBank上人MMP-9 mRNA和TIMP-1基因片段完全一致。动脉硬化组的MMP-9基因表达水平高于对照组MMP-9基因表达水平,但差异无统计学意义（P〉0.05）。动脉硬化组的TIMP-1基因表达水平低于对照组TIMP-1基因表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05）。MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值,动脉硬化组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AS患者TIMP-1基因表达水平的降低与MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值升高可能是AS发生的分子机制之一,二者一起可以作为AS发生的预测因子。     

基质金属蛋白酶-13在退变和创伤椎间盘髓核中的不同表达

目的比较基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在退变和创伤椎间盘髓核中的不同表达,探讨其在椎间盘退变过程中的作用。方法随机选择2011年1—7月在宁波大学附属医院因腰椎间盘突出症行髓核摘除的33例患者(退变组)和因外伤性脊椎骨折行内固定的6例患者(对照组)作为研究对象。采用免疫组织化学方法检测患者髓核组织的MMP-13表达,应用Image-ProPlus5.1图像分析系统测定其灰度值。结果对照组椎间盘组织中MMP-13的表达很少,平均阳性表达率为(20.4±14.3)%。退变组椎间盘组织中MMP-13的表达呈弥漫性或局灶性强染色,平均阳性表达率为(73.2±10.9)%。退变组的MMP-13阳性表达率显著高于对照组(P<0.01)。结论椎间盘退变髓核组织中MMP-13的表达显著升高,MMP-13的异常表达可能在椎间盘退变发病过程中发挥着重要的作用。     

基质金属蛋白酶-2在退变椎间盘髓核组织中的表达

[目的] 检测退变椎间盘髓核组织中 MMP-2的表达,进一步阐明椎间盘退变的机制.[方法] 利用 RT-PCR、 Western blot技术和明胶酶谱法对 45例退变椎间盘髓核、 12例非突出椎间盘髓核的 MMP-2进行了检测.[结果] 正常髓核内有一定量的 MMP-2 表达,退变髓核 MMP-2 mRNA、蛋白质表达水平和酶活性明显升高,分别是正常组的 2.30, 2.01和 1.75倍,差异显著 (P< 0.01, P< 0.01, P< 0.01).[结论] MMP-2和髓核退变关系密切.     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1的表达及与气道炎症、重塑的关系

目的：观察实验性哮喘豚鼠BALF中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1）的表达；观察哮喘豚鼠气道平滑肌MMP-9、TIMP-1的表达及气道平滑肌面积的变化。方法：用免疫组化方法结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度；BALF中细胞总数；MMP-9、TIMP-1阳性细胞百分比。结果：MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道平滑肌；哮喘组MMP-9平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组TIMP-1平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组气道平滑肌厚度明显高于对照组（P〈0．05）；BALF中哮喘组嗜酸粒细胞明显高于对照组（P〈0．05）；巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞MMP-9、，TIMP-1均呈阳性；且哮喘组MMP-9及TIMP-1阳性细胞百分比比对照组MMP-9及TIMP-1明显增高（P〈0．01）。结论：MMP-9、TIMP-1可能与哮喘气道炎症及气道重塑有关。     

白介素-6对人髓核细胞表达基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

目的研究炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）对人髓核细胞表达基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响。方法①应用不同浓度的IL-6（0ng／ml、10ng／ml、100ng／ml、1000ng／m1）刺激体外培养的人髓核细胞,共同培养72h．~收集细胞;②应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测MMP-3和TIMP-1的表达情况。结果在不同剂量IL-6的刺激下,MMP-3的表达量在实验剂量范围内随着IL-6的剂量加大而呈上升趋势,TIMP-1的表达量实验剂量范围内随着IL-6的剂量加大而呈下降趋势。结论较大剂量的IL-6可抑制人髓核细胞基质的合成,从而促进椎间盘退变。     

基质金属蛋白酶1及其抑制剂在舌癌浸润性转移中的作用

目的检测舌癌黏膜固有层组织中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达,揭示它们在舌癌浸润和转移中的作用。方法应用ABC免疫组织化学染色方法分别检测舌癌标本及正常组织各取材部位中MMP-1、TIMP-1的免疫学定位及表达情况。结果舌癌组织的MMP-1和TIMP-1的阳性表达率与对照组相比,差异有高度统计学意义（P〈0.01）;舌癌组织中的MMP-1和TIMP-1的表达与舌癌大小无关（P〉0.05）,而与舌癌分化程度、有无转移、病理分级等具有差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论 MMP-1和TIMP-1在舌癌黏膜固有层组织中的表达关系,有助于判断舌癌的侵袭和转移及病理分期。     

食管鳞癌组织中MMP-1和TIMP-1的表达及临床意义

目的研究食管鳞状细胞癌组织中基质金属蛋白酶-1（matrix metallopr-oteinas-1，MMP-1）及基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1，TIMP-1）的表达与食管鳞状细胞癌生物学行为之间的关系，探讨两者与食管鳞状细胞癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移的关系。方法采用ElivisionTM plus免疫组组织化学法检测食管鳞癌组织中MMP-1、TIMP-1的表达。结果MMP-1在食管鳞癌组织中的阳性率为38．8％，其表达与浸润深度、淋巴转移呈正相关（P〈0．05）。TIMP-1在肿瘤细胞、间质细胞中阳性表达率为50．2％，其表达与浸润深度与淋巴转移成负相关（P〈0．05）。MMP-1表达超过TIMP-1的食管鳞癌发生转移的几率明显高于TIMP-1表达超过MMP-1者（P〈0．05）。结论MMP-1和TIMP-1的表达与食管癌的生物学行为有密切关系。MMP-1在食管癌的发展过程中起正性的调节作用，TIMP-1起负性调节。MMP—TIMP平衡是维持细胞外基质内环境和完整性的决定因素，也为抗肿瘤转移治疗提供了一个重要靶点。     

Survivin、TGFβ3与TIMP-1慢病毒载体的构建及其人髓核细胞表达

目的构建人生存素（Survivin）、转化生长因子03（TGFtβ3）与基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）三基因过表达慢病毒载体,通过一次转染,实现Survivin、TGFβ3、TIMP-1三基因在人退变椎间盘髓核细胞的稳定转染,为逆转或延缓椎间盘退变的基因治疗提供实验基础。方法应用Survivin、TGFβ3、TIMP-1慢病毒载体联合转染人退变髓核细胞,应用Real—TimePCR技术检测转染后基因表达情况。结果人退变椎间盘髓核细胞在转染后1周,Survivin、TGFβ3、TIMP-1三基因在基因水平均获得稳定过表达,并且其表达能维持细胞传至第3代或更久。Real—TimePCR检测结果显示,目的病毒组Survivin、TGFβ3、TIMP-1均过表达,其相对表达量与空白组比较,差异有显著性（F=12．96～3889．70,P〈O．05）。结论Survivin、TGFβ3与TIMP-1慢病毒载体能够稳定转染人退变椎间盘髓核细胞,并且能长时间维持其表达,从而发挥生物学效应。     

MMP-13在大鼠退行性变腰椎间盘中的表达及意义

目的检测MMP-13在大鼠退行性变腰椎间盘中的表达,探讨其在大鼠腰椎间盘退变中的作用。方法雄性大鼠24只,随机分为两组,实验组建立大鼠手术制备腰椎间盘退变模型,正常组不做处理,采用免疫组织化学方法检测两组椎间盘组织中MMP-13的表达。结果组织病理学显示实验组髓核细胞数目较正常组减少。实验组和正常组椎间盘组织中均有MMP-13的表达,实验组表达较对照组显著增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MMP-13在腰椎间盘退变的过程中发挥着重要作用。     

肝纤维化大鼠血清及肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子表达的变化

目的检测肝纤维化大鼠血清及肝组织中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达,探讨MMP-1和TIMP-1在肝纤维化中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机均分正常组及模型组,每组各10只,其中模型组以四氯化碳腹腔注射方法制作大鼠肝纤维化模型,12周后同时处死大鼠,用酶联免疫吸附测定法、免疫组化染色检测血清MMP-1及TIMP-1含量及肝组织MMP-1及TIMP-1表达的变化,两组间数据采用统计软件SPSS 12.0进行分析。结果①与正常组（553.81±98.89）μg/L比较,模型组血清MMP-1含量较正常组明显下降（t=13.38,P〈0.01）;模型组TIMP-1含量较正常组（10.17±1.35）μg/L升高,差异均有高度统计学意义（t=31.92,P〈0.01）。②模型组肝组织MMP-1免疫组化图像分析面积百分比为（5.60±1.51）%,较正常组（19.20±1.48）%明显下降（t=14.37,P〈0.01）;模型组TIMP-1免疫组化图像分析面积百分比较正常组明显升高,差异均有高度统计学意义（t=38.96,P〈0.01）。结论模型组血清及肝组织MMP-1子IMP-1下降下表达减少,而TIMP-1表达增加,TIMP-1表达增加可能在肝脏纤维化过程发挥重要作用。     

MMP-1及TIMP-1在大鼠肠粘连组织中的表达及其意义

目的通过大鼠肠粘连动物模型,检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在肠粘连组织及正常组织中的表达,研究MMP-1和TIMP-1在肠粘连发病中的作用。方法选取SD雄性大鼠70只随机分为3组：10只作为正常组;观察组30只刮伤其回肠浆膜,创面滴无水酒精,钳夹盲肠系膜动脉制成损伤性肠粘连模型;对照组30只大鼠与观察组一样麻醉、开腹,但不动肠组织,直接关腹。观察组及对照组分别于造模后2、7、14d3个时相点各取10只大鼠,处死并分别取小肠浆膜层浆膜粘连面组织,应用免疫组化和图像分析的方法测定MMP-1和TIMP-1在肠粘连组织及正常肠组织中的蛋白表达。结果 （1）造模术后2d,观察组中MMP-1和TIMP-1的含量均升高（P均〈0.01）,MMP-1升至峰值。（2）造模术后7d,观察组MMP-1含量降低,而TIMP-1的含量升高至峰值,与术后2d及对照组相比,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。（3）造模术后14d,观察组MMP-1、TIMP-1的含量均下降,与术后2、7d及对照组相比,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。（4）对照组各时相点两两比较,无明显差异（P均〉0.05）。结论 MMP-1、TIMP-1的活性变化是肠粘连形成的重要调节因素之一。     

鼠舌致癌过程中MMP-1及TIMP-1的动态变化

目的 通过观察金黄地鼠舌癌发生过程中基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达情况,探讨MMP-1、TIMP-1的动态变化与舌癌恶性程度及其侵袭的相关性.方法 使用DMBA涂抹金黄地鼠舌体建立模型,应用ABC免疫组织化学染色方法分别检测舌黏膜各取材部位中MMP-1、TIMP-1表达情况.结果 实验组舌黏膜组织MMP-1和TIMP-1的阳性表达与对照组相比,具有显著差异(P＜0.01)二者表达与舌癌病理分级具有显著关系(P＜0.01);随着病理分级的进展和涂抹周龄延长,实验组舌黏膜MMP-1和TIMP-1阳性表达率均增强(P＜0.01);10 W之前,在相应表达强度下的TIMP-1积分高于MMP-1积分(P＜0.01);12 W以后二者关系倒置(P＜0.01).结论 MMP-1、TIMP-1的表达与舌癌进展密切相关,对于舌癌癌前病变早期诊断、判断转归及治疗有重要的意义.     

抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及MMP-1、TIMP-1的影响

目的：观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂（TIMP-1）的影响,探讨抗骨增生片是否能调节关节软骨MMP-1及TIMP-1的表达而起到对软骨的保护作用。方法：30只日本大耳白兔随机分为3组：正常对照组（A）,模型对照组（B）,抗骨增生片组（C）。用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,C组灌胃给药4周后,观察软骨组织病理形态的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达。结果：C组软骨病理损害程度轻于B组（P〈0.05）,MMP-1表达明显低于B组（P〈0.01）,TIMP-1表达高于B组（P〈0.05）。结论：抗骨增生片能减轻膝骨关节炎关节软骨退行性改变,其对关节软骨的保护作用与调节MMP-1及TIMP-1的表达有关。     

基质金属蛋白酶-9与转化生长因子-β1在胎膜早破患者胎盘胎膜中的表达

目的有研究提示基质金属蛋白酶（martix metalloproteinase,MMP）及其抑制物金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP）、转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β1在细胞外基质（extracellular matrix,ECM）降解过程中起着重要的作用,但MMP、TIMP和TGF-β1在胎膜早破（premature rupture of membrane,PROM）中的作用机制尚不明了。文中的研究目的为探讨PROM患者胎盘胎膜组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1表达变化及意义。方法采用免疫组织化学SP法和Western blot印迹杂交法分别检测足月未临产择期剖宫、足月自然临产阴道分娩和足月PROM各28例孕妇分娩后的胎盘胎膜组织中MMP-9,TIMP-1和TGF-β1表达变化。结果免疫组化结果显示：①未临产组胎膜组织中MMP-9表达强度最低（P〈0.05）,临产组次之（P〈0.05）,PROM组最高（P〈0.05）,胎盘中MMP-9表达趋势亦同;②TIMP-1和TGF-β1表达趋势与MMP-9相反,未临产组胎膜组织中TIMP-1和TGF-β1表达强度最高（P〈0.05）,临产组次之（P〈0.05）,PROM组最低（P〈0.05）,胎盘中TIMP-1和TGF-β1亦然。Western blot结果显示：①未临产组胎膜组织中MMP-9表达量最低（P〈0.05）,临产组次之（P〈0.05）,PROM组最高（P〈0.05）,胎盘中MMP-9表达趋势亦同;②未临产组胎膜组织中TIMP-1和TGF-β1表达量最高（P〈0.05）,临产组次之（P〈0.05）,PROM组最低（P〈0.05）,胎盘中TIMP-1和TGF-β1亦然。胎盘和胎膜上TGF-β1表达水平与TIMP-1表达呈正相关,与MMP-9表达呈负相关。结论胎盘胎膜上TGF-β1表达降低,可通过调节MMP-9和TIMP-1的表达引起MMP-9/TIMP-1之间的比例失衡,使胶原降解加速,胎膜强度与韧性下降,从而导致PROM的发生。     

β1转化生长因子对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌相关的基质金属蛋白酶的影响

目的探讨β1转化生长因子（TGF-β1）对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的调节作用,及TGF-β1与瘢痕的关系。方法培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经TGF-β1处理,采用酶联免疫法（ELISA）测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP-1、MMP-2和TIMP-1的水平。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1、MMP-2和TIMP-1的生成量显著高于正常皮肤（P〈0.01）;加TGF-β1处理后,瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1的分泌量显著降低（P〈0.01）,MMP-2的分泌量显著升高（P〈0.01）,而TIMP-1的分泌量无显著改变（P〉0.05）。结论培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞显示MMP-1、MMP-2和TIMP-1增加,TGF-β1在生成调节过程中起重要作用。     

MMP-3、TIMP-1、NO水平与川崎病冠脉损害的关系研究

目的：研究川崎病（KD）患儿血清基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）及一氧化氮（NO）的表达水平,探讨其在KD冠脉损害中的作用。方法：用固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）测定各组患儿血清中MMP-3、TIMP-1的水平,用硝酸还原法检测各组患儿血清中NO的水平。结果：川崎病CAL组血清MMP-3、MMP-3/TIMP-1与NCAL组相比明显升高（P〈0.05）;血清TIMP-1水平较NCAL组明显降低（P〈0.01）;KD急性期和恢复期MMP-3、TIMP-1、MMP-3/TIMP-1水平与正常对照组相比较均明显升高（均P〈0.01）。川崎病CAL组NO水平明显高于NCAL组（P〈0.05）;血清MMP-3与NO之间呈显著正相关（r=0.898,P〈0.01）;血清中TIMP-1与NO之间呈显著负相关（r=-0.772,P〈0.01）。结论：川崎病CAL组血清MMP-3和NCAL组相比明显升高,提示MMP-3可以作为KD伴发冠脉损害的血生化指标之一。KD急性期MMP-3、TIMP-1、MMP-3/TIMP-1水平明显高于恢复期和对照组,提示MMP-3、TIMP-1、MMP-3/TIMP-1可作为早期诊断川崎病的一个客观生化指标。NO过度表达参与了KD急性期冠脉损害的发生发展,可以将循环中NO水平作为判断KD冠脉损害的一个有效指标。     

基质金属蛋白酶3在椎间盘退变中的作用

椎间盘退变是下腰痛、颈项部疼痛及相关功能障碍的主要病因[1].椎间盘退变的机制较为复杂,目前认为其主要病理变化为髓核细胞的减少与细胞外基质的降解.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)是一类金属离子依赖性的蛋白酶,具有降解结缔组织细胞外基质中所有组成成分的能力[2].其中,以MMP-3在椎间盘疾病发生与进展中起重要作用[3].研究[4]显示退变的椎间盘组织中促炎细胞因子水平明显增高,诱导MMP-3表达上调[5],从而进一步加速椎间盘退变的进程.然而椎间盘退变过程中的调控细胞因子介导的MMP-3表达信号转导通路因其复杂性而所知甚少.本文对MMP-3在椎间盘退变中起到的作用综述如下.