类似人弥漫型大B细胞淋巴瘤小鼠模型的免疫学特征

本研究建立类似人弥漫型大B细胞淋巴瘤的BALB／c小鼠模型并探索其免疫学特征。将鼠源性B淋巴瘤细胞株（A20细胞）接种于同源BALB／c小鼠以建立B细胞淋巴瘤鼠模型。实验分为3组：成瘤小鼠组,未成瘤小鼠组和正常小鼠组（对照组）。用流式细胞术检测肿瘤细胞CD抗原表达及成瘤小鼠、未成瘤小鼠和对照正常小鼠的外周血和脾脏的T／B淋巴细胞亚群比例。结果表明：在成功构建病理学形态类似人弥漫大B细胞淋巴瘤的BALB／c鼠模型肿瘤组织中,检测到CD3、CD4、CD8、CD19、CD30阳性细胞的比例分别为（49．27±23．75）％,（6．07±3．65）％,（51．2±23．1）％,（67．06±16．39）％,（37．93±17．03）％,与接种前A20细胞相比,其CD3和CD8阳性细胞比例显著升高,CD19阳性表达比例显著下降（P〈0．05）。成瘤小鼠外周血淋巴细胞亚群阳性表达比例较正常小鼠有显著差异,其CD3和CD4阳性细胞比例显著降低（P〈0．05）。未成瘤小鼠脾脏淋巴细胞亚群的阳性表达比例与正常小鼠相比,CD3、CD4、CD8阳性细胞比例降低,而CD19阳性细胞比例升高（P〈0．05）。结论：本研究为在有免疫功能的小鼠体内进行B细胞淋巴瘤相关研究提供了免疫相关实验依据。     

抗CD20单克隆抗体诱导B淋巴瘤细胞株凋亡的实验研究

本研究探讨抗CD20单克隆抗体体外诱导B淋巴细胞株凋亡情况及其可能的作用机制。体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot测定Daudi、Ramos、Raji和Namalwa细胞经Rituximab 20μg／ml作用24小时后Bcl-2的表达情况。结果表明：抗cD20单克隆抗体对Daudi、Raft和Namalwa淋巴瘤细胞有轻度的抗增殖作用,对Ramos细胞无抗增殖作用,抗增殖作用与单克隆抗体作用浓度无关。抗CD20单克隆抗体对4株细胞无明显诱导凋亡作用,抑制率在3％-10％之间波动。Na—malwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后,Bcl-2蛋白表达下调。结论：单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa和Raji细胞株有轻度抗细胞增殖作用,但与作用浓度和作用时间无明显相关。单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa、Raji和Ramos细胞株有微弱的诱导凋亡作用。Namalwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后Bcl-2表达下调,这可能是抗CD20单克隆抗体增敏细胞毒药物作用的机制之一。     

不同方式转染小鼠B淋巴瘤细胞A20的探讨

目的:探讨小鼠B淋巴瘤细胞A20最佳的转染方式,为后期研究LMP1基因在A20细胞中的表达及作用奠定基础.方法:分别使用脂质体转染法、NucleofectorTM核酸转染法和慢病毒载体介导转染法将带有报告基因绿色荧光蛋白的重组质粒pCDF-LMP1转染小鼠B淋巴瘤细胞A20,荧光显微镜观察细胞内绿色荧光的分布,比较分析这三种转染方式对A20细胞的转染效率.结果:脂质体转染效率最低,仅见个别细胞有绿色荧光,NucleofectorTM核酸转染效率约为10%,浓缩后的慢病毒载体介导转染法效率最高,可达80%以上.结论:对于悬浮细胞A20而言,浓缩后的慢病毒载体介导的转染法是最佳的转染方式,该方法在将外源基因转染至悬浮细胞方面值得推广,也为极难转染的细胞做稳定转染提供参考价值.     

p53可调控表达的B细胞淋巴瘤小鼠模型的建立

目的探讨p53可调控表达的B细胞淋巴瘤小鼠模型的建立。方法利用MYC过表达同时p53失活原理建立了B细胞淋巴瘤小鼠模型,利用敲入的可编码p53和雌激素受体(ER)融合蛋白p53 ERTAM的等位基因,可实现对p53的失活与活化两种状态的调控。结果过表达c-Myc及p53功能缺失足以使正常骨髓细胞恶变成为肿瘤细胞。RT-PCR证实肿瘤细胞呈Rag1阳性和Td T阴性,说明肿瘤细胞确实来源于B细胞的早期发育阶段。结论 p53可调控小鼠B细胞淋巴瘤模型不仅具备B细胞淋巴瘤特征,而且可实现p53活性的可控。     

钛颗粒诱导小鼠骨溶解模型的评价

背景：磨损颗粒引起的骨溶解是导致假体松动的主要原因,已成为骨科学的研究热点之一,但是准确模拟磨损颗粒诱导假体周围骨溶解发生过程的动物模型是首先需要解决的问题。RANKL是细胞因子中调控破骨细胞分化、成熟及激活其功能最关键的因子之一。目的：拟建立钛颗粒诱导小鼠air-pouch骨溶解模型,模拟人工关节无菌性松动发生的病理过程。设计、时间及地点：随机对照、动物体内实验,于2008-03/10在苏州大学附属第一医院骨科实验室完成。材料：选用雌性BALB/c小鼠20只,按随机数字表法分成实验组和对照组,每组10只。方法：背侧单点皮下注射3mL无菌空气,间隔1d补注1mL气体,连续5d。囊内植入同种系小鼠颅骨。术后实验组和对照组分别在囊内注射10g/L的钛颗粒0.5mL或0.5mL磷酸盐缓冲液,14d后处死小鼠将囊及植入颅骨一并取出。主要观察指标：应用苏木精-伊红染色观察囊壁组织学改变,以定量反转录-聚合酶链反应检测检测标本中RANK、RANKL和破骨细胞成熟标志因子之一蛋白酶K基因mRNA含量。结果：组织学观察发现,实验组标本囊壁增厚、细胞浸润增多。经钛颗粒刺激后,组织中RANK、RANKL及蛋白酶K基因表达显著高于对照组（P〈0.05）。结论：钛颗粒诱导的小鼠air-pouch骨溶解模型,简单、灵敏、经济、重复性好,能准确模拟人工关节松动发生的病理过程。     

Myc可控表达的B细胞淋巴瘤小鼠模型的建立

目的建立Myc可控表达的B细胞淋巴瘤小鼠模型。方法将p53敲除小鼠的骨髓细胞与编码Myc雌激素受体融合蛋白(MycER)病毒包装的细胞混合后注入小鼠皮下。腹腔注射他莫昔芬(TAM),1次/d。结果正常对照组小鼠未出现肿瘤;模型组小鼠持续注射TAM后,肿瘤迅速生长。停止注射TAM后,肿瘤大小迅速减小。3周后,肿瘤恢复生长,但速度较慢;此时若注射TAM,肿瘤生长异常加速。结论本研究通过TAM实现对Myc"失活"及"激活"两种状态的调控,成功建立Myc可控表达的B细胞淋巴瘤小鼠模型。     

SCID小鼠腹腔内人B细胞非霍奇金淋巴瘤模型的建立

目的 为探讨人B细胞非霍奇金淋巴瘤诊治策略提供动物模型.方法 采用4-5周龄的SCID小鼠,经腹腔接种7.5×106 个Namalwa细胞.观察小鼠的发病情况及生存时间.取瘤组织进行HE及免疫组化染色检测CD20,CD79a,Ki-67和CD3抗原的表达.结果 Namalwa细胞在SCID小鼠腹腔发病的主要表现是腹腔出现肿块,时间（18.67±1.94） d,伴竖毛、精神萎靡、行动迟缓,一般情况随时间的延长而不断恶化.荷瘤SCID小鼠中位存活时间（28.00±6.36） d.瘤细胞主要浸润肠壁、肠系膜,胃、胰、肝、脾、肾、肺的周缘、盆腔以及邻近肌组织和皮肤.CD20在瘤组织表达为散在阳性,CD79a和Ki-67为弥慢阳性,CD3为阴性.结论 成功建立SCID小鼠腹腔人Namalwa细胞株B细胞非霍奇金淋巴瘤模型,为探索淋巴瘤提供载体.     

BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立与评价

背景：对于一些药物研究,小鼠是理想的造模工具,但由于小鼠耐受性相对较差,肾脏及肾蒂小且难于寻找,容易增加实验误差,导致造模失败。目的：探讨BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立方法,评价肾脏缺血时间对肾缺血再灌注损伤的影响。方法：采用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法建立雄性BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型,根据肾缺血时间不同分为0min组（对照组）、30min组、35min组、45min组,肾再灌注后24h观察肾功能和肾脏病理组织学的变化,比较不同的肾脏缺血时间对上述指标的影响;观察45min组小鼠肾缺血再灌注损伤后的生存率。结果与结论：模型成功率95.9%,与对照组相比,肾缺血30min组、35min组和45min组再灌注后24h血清肌酐、尿素氮和肾脏病理组织学评分均升高,肾缺血45min组生存率明显下降,差异均有显著性意义（P〈0.05）。结果提示,应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法可制备稳定肾缺血再灌注损伤模型,雄性小鼠肾缺血35～45min是造模较为理想的肾缺血时间,所得模型效果满意。     

BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立与评价

背景:对于一些药物研究,小鼠是理想的造模工具,但由于小鼠耐受性相对较差,肾脏及肾蒂小且难于寻找,容易增加实验误差,导致造模失败.目的:探讨BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立方法,评价肾脏缺血时间对肾缺血再灌注损伤的影响.方法:采用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法建立雄性BALB/c小鼠肾缺血再灌注损伤模型,根据肾缺血时间不同分为 0 min组(对照组)、30 min组、35 min组、45 min组,肾再灌注后24 h观察肾功能和肾脏病理组织学的变化,比较不同的肾脏缺血时间对上述指标的影响;观察45 min组小鼠肾缺血再灌注损伤后的生存率.结果与结论:模型成功率95.9%,与对照组相比,肾缺血30 min组、35 min组和45 min组再灌注后24 h血清肌酐、尿素氮和肾脏病理组织学评分均升高,肾缺血45 min组生存率明显下降,差异均有显著性意义(P < 0.05).结果提示,应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法可制备稳定肾缺血再灌注损伤模型,雄性小鼠肾缺血35～45 min是造模较为理想的肾缺血时间,所得模型效果满意.     

多发性骨髓瘤局部成瘤小鼠模型的建立

本研究探讨多发性骨髓瘤小鼠模型建立的方法。于BALB／c小鼠皮下接种6×10^5MPC-11骨髓瘤细胞．待荷瘤小鼠出现皮下结节后随机将其中5只处死,取其皮下结节进行HE染色及免疫组织化学（CD138,K轻链）检测。同时,在荷瘤第5、7、9、11、12、35、65天进行荷瘤小鼠血清免疫固定电泳的动态监测。在荷瘤前、荷瘤后第15天和30天对荷瘤小鼠进行血红蛋白的检测。在荷瘤第35及65天进行荷瘤小鼠血清IL-6水平检测。每周观察荷瘤小鼠的生存情况,测量荷瘤小鼠的肿瘤大小,体重变化。结果表明：荷瘤小鼠出现皮下结节的高峰为荷瘤后12—15天,在荷瘤第12天荷瘤小鼠血清中可检测到单克隆免疫球蛋白。皮下结节HE染色、免疫组织化学检测CD138（＋）及K轻链（＋）证实了瘤组织为浆细胞来源。荷瘤后第12天时可在小鼠血清中检测出M蛋白,表现为IgG及K轻链的浓聚条带。荷瘤小鼠的死亡高峰为荷瘤后第20-40天,中位生存时间为31天。在荷瘤第15天时小鼠开始逐渐出现贫血,荷瘤组与正常对照组小鼠的Hb水平在荷瘤第15天及30天时差异有统计学意义（P〈0．05）。荷瘤小鼠血清IL-6水平高于正常对照组。结论：采用MPC—11骨髓瘤细胞于BALB／c小鼠皮下接种（接种浓度为6×10^5个肿瘤细胞）建模,具有造模简单、荷瘤成功率较高、肿瘤生长变化易于观察等优点。监测本模型肿瘤大小的变化、血清IL-6水平及血清免疫固定电泳的变化可用于对多发性骨髓瘤疗效的评价。     

特应性皮炎小鼠模型建立方法的研究

目的通过外用2,4-二硝基氟苯（DNFB）丙酮／橄榄油溶液致敏与激发BALB／c小鼠,探索特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）模型的建立方法。方法将16只小鼠随机分为模型组及对照组各8只。实验第1天和第2天在模型组和对照组小鼠背部脱毛区分别涂搽一次DNFB丙酮／橄榄油溶液及丙酮／橄榄油,第7天开始每隔2天涂搽一次,共涂搽10次。观察小鼠皮肤的生理和病理改变。结果外用DNFB致敏与激发小鼠完成后,小鼠搔抓频率增加,小鼠皮肤可见慢性皮损改变,镜下可见慢性炎细胞浸润,ELISA血清检查发现Ign、IL-4及IFN-γ在血清中高表达。结论外用DNFB致敏与激发BALB／c小鼠产生的皮肤生理和病理改变与AD患者一致,可作为研究AD的发病机理及探索其治疗手段的有效的动物模型。     

表达乙肝病毒preS2S蛋白的荷瘤小鼠模型的建立

目的:建立能表达乙肝病毒(hepatitis Bvirus,HBV)preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型,为研究HBV核酸疫苗的体内CTL应答及免疫治疗作用提供简便易行的研究模型。方法:以免疫印迹法验证SP2/0-S2S细胞中有HBVpreS2S抗原的稳定表达,将SP2/0-S2S细胞种植到BALB/c小鼠胁部皮下(荷瘤),观察能否生长成瘤,以及成瘤的时间、肿瘤大小和荷瘤后小鼠的生存时间;以免疫组织化学法检测小鼠肿瘤组织HBVpreS2S抗原的表达。以不表达preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV细胞荷瘤小鼠作为阴性对照。结果:荷瘤后3天～1周,SP2/0-S2S细胞可在小鼠皮下形成实体肿瘤,成瘤率为100%,肿瘤细胞中有preS2S抗原表达,荷瘤后小鼠的平均生存时间为16±1天;与不表达preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV细胞荷瘤小鼠相比,成瘤率、成瘤时间、肿瘤大小及生存时间差异。结论:建立了能表达HBVpreS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型,可用于HBV核酸疫苗的体内CTL应答及免疫治疗作用的实验研究。同时也建立了不表达preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型,可用作阴性对照。     

脂多糖联合D-氨基半乳糖诱导急性重症肝炎小鼠模型的建立

目的：建立存活时间较长的急性重症肝炎小鼠模型。方法：将50只BALB／c小鼠平均分成5组,其中A、B、C、D4组为实验组,E组为对照组;实验组分别给予D氨基半乳糖（D-GaIN）和脂多糖（LPS）,剂量分别为800mg／kg和10μg／kg、500mg／kg和10μg／kg、500mg／kg和5μg／kg、300mg／kg和5,ug／kg,用生理盐水稀释至1mL,行腹腔注射;对照组E腹腔注射生理盐水2mL。以12h死亡率、24h死亡率及肝组织学改变为观察指标。结果：A、B、C、D及E组小鼠12h死亡率分别为80％％、30％、10％、0和0;24h死亡率分别为909,6、60％、30％、0和0;A和B组小鼠肝组织学均呈急性重症肝炎表现,C组中有5只小鼠肝组织学符合重症肝炎的表现,而该组其余小鼠及D组所有肝组织学虽有炎症改变,但达不到重症肝炎的程度,E组肝组织学表现正常。结论：LPS10ug／kg联合D～GaIN500mg／kg可成功建立12h存活率较高的急性重症肝炎小鼠模型。     

卵巢弥漫性大B细胞性淋巴瘤误诊1例分析

对卵巢弥漫性大B细胞性淋巴瘤误诊1例分析如下。 1摘历摘要 女，43岁。以左下腹胀痛10d、发现盆腔肿物3d入院。平素月经规律，14～5／30d型，LMP2008—04—20。10d前无明显诱因出现下腹胀痛感，未治疗。3d前于本院彩超检查示盆腔肿物14．1cm×8．6cm×14．4cm，     

不同品系小鼠幽门螺杆菌感染实验模型的建立及其病理特征的比较

目的应用不同的HP菌株感染不同遗传背景小鼠,观察HP的感染状况及病理特征。方法SPF级C57BL/6及BALB/C小鼠预先灌饲0.5 ml NaHCO3(0.1M),随后分别接种HP SS1、NCTC11637菌液0.5 ml(1×109CUF/ml)连续4次,间隔48 h,对照组灌饲相同剂量的PBS。于末次接种后4、8、12周处死小鼠,胃黏膜行快速尿素酶检测、HP培养以及病理组织学检查。结果C57BL/6小鼠接种HP SS1后4、8及12周HP感染率均为100%,HP主要定植在胃窦部及胃窦/胃体交界部,黏膜下可见淋巴细胞及单核细胞浸润。C57BL/6小鼠接种HP NCTC 11637、BALB/C小鼠接种HP SS1或NCTC 11637,HP感染率低,胃黏膜HP定植量低,病理组织学改变轻。结论C57BL/6小鼠接种HP SS1可获得较好的HP感染模型。     

美罗华治疗B细胞淋巴瘤7例的观察及护理

我科2003-06～2004-10应用美罗华联合化疗治疗B细胞淋巴瘤有较好疗效,护理体会如下.　1 临床资料　1.1 一般资料本组7例均为B细胞、CD20阳性淋巴瘤患,其中男5例,女2例,年龄25～60岁.用药前心电图、肝、肾功能等均在正常范围.     

利妥昔单抗治疗B细胞淋巴瘤20例的护理

目的：探讨利妥昔单抗联合化疗治疗B细胞淋巴瘤的护理方法。方法：对20例B细胞淋巴瘤应用利妥昔单抗联合化疗进行治疗,化疗前给予心理护理,使其能较好的配合治疗;治疗期间重点做好不良反应的护理,预防及减轻不良反应的发生。结果：治疗过程中1例出现利妥昔单抗过敏,1例出现肺水肿,经处理后好转,其余治疗均顺利进行。结论：恰当的护理可预防和减轻利妥昔单抗不良反应的发生,确保治疗的顺利进行,提高治疗效果。     

N-甲基亚硝基脲诱导的胸腺淋巴瘤小鼠模型改进

本研究的目的旨在进一步提高N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导小鼠胸腺淋巴瘤模型的成瘤率并降低其死亡率。在前期实验的基础上,对给药方案和实验周期进行了调整。第0、4周2次给C57BL/6小鼠腹腔注射MNU诱导液,分组分剂量注射。注射后观察动物一般情况。于第24周处死全部小鼠,解剖检查胸腺肿瘤的发生及其他脏器情况,并应用病理学和免疫组织化学方法,对诱发的胸腺淋巴瘤及其侵袭脏器进行研究并鉴定肿瘤细胞来源、分型。结果表明:第25周83.3%(55/66)实验小鼠产生胸腺淋巴瘤,其中5只死亡,死亡率7.6%。结论:通过调整给药方案和实验周期后,使该模型的成瘤率从以前的67.5%提高到83.3%,死亡率从10%降低至7.6%。     

两种实验动物感染艰难梭菌的特征比较

目的 研究分析树鼩和BALB/c小鼠感染艰难梭菌的特征,比较和评估二者作为艰难梭菌动物感染模型的适用性.方法 分别以树鼩和BALB/c小鼠作为研究对象,抗生素组合喂养后灌胃艰难梭菌RT078(105 CFU芽孢/只),7 d内观察动物的感染特征和表现,对感染动物的肠道组织进行组织病理学检查和分析.结果 树鼩自灌胃第2天...     

艰难梭菌肠道感染BALB/c小鼠模型的建立及简易评价

目的 建立简单、可重复的实验室小鼠艰难梭菌感染模型.方法 分别采用链霉素、氨苄西林和万古霉素配制抗生素溶液,经3天自然饮水法破坏BALB/c小鼠肠道正常菌群,更换正常饮水1天后用艰难梭菌进行肠道感染,观察BALB/c粪便细菌载量、小鼠存活状况.结果 经链霉素处理的BALB/c小鼠粪便中艰难梭菌芽孢数最多,万古霉素处理的...