Apoptin基因对小鼠S180荷瘤细胞抑制作用

目的研究肿瘤物异性凋亡基因（apoptingene）对肿瘤细胞的抑制作用。方法以S-180肉瘤细胞的荷瘤小鼠为模型，用克隆的肿特异性凋亡基因的真核表达载体直接进行基因抑制，分别测定小鼠体内的肿留大小、荷瘤小鼠生存期和肿瘤细胞的凋亡。结果与对照组相比，基因抑制组小鼠一般生长状态良好、体内肿瘤生长明显减缓（P〈0．01）、生存期延长、体重增加，在基因抑制的肿瘤组织中可检测到肿瘤特异性凋亡基因mRNA的表达及肿瘤细胞的7岗亡。结论肿瘤特异性凋亡基因在体内具有明显的抗肿瘤作用，对开展肿瘤的基因治疗有一定意义。     

金雀异黄素和DC疫苗对H22癌细胞抑制作用

目的 探讨金雀异黄素(GEN)和树突状细胞瘤苗(DC疫苗)对荷瘤小鼠H22癌细胞的免疫抑制作用.方法 采用共聚焦显微镜、流式细胞技术检测H22细胞凋亡的情况,蛋白免疫印迹(Western-blot)检测凋亡相关基因Bax、caspase-3、bcl-2蛋白的表达.结果 共聚焦显微镜观察到GEN DC疫苗诱导凋亡的H22细胞;与1640对照组凋亡率(3.019 ±0.327)比较,GEN DC组总凋亡率(14.488±1.660)明显增高;GEN DC疫苗诱导可上调H22细胞bax、caspase-3基因的表达而下调bcl-2基因表达.结论 金雀异黄素和DC疫苗对肝癌细胞的生长有一定抑制作用.     

六味地黄汤对衰老小鼠肾脏凋亡相关基因表达的影响

[目的]研究六味地黄汤对衰老小鼠肾皮质凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。[方法]雄性KM小鼠分为青年对照组、老年对照组和六味地黄汤组。六味地黄汤组小鼠每日灌胃六味地黄汤,其余两组灌胃等量蒸馏水,共8周。应用免疫组织化学方法检测肾皮质bcl-2、bax表达。[结果](1)与青年对照组比较,老年小鼠肾皮质bcl-2表达下降,bax表达明显增加(P﹤0.05);(2)六味地黄汤组小鼠肾皮质bcl-2表达增多,bax表达下降,与老年对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]六味地黄汤可通过影响细胞凋亡相关基因的表达延缓肾脏衰老。     

大豆甙元对小鼠肝癌H22瘤细胞生长抑制作用

目的探讨大豆甙元(daidzein)诱导H22肿瘤细胞凋亡的作用及机制。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量大豆甙元(0.1～150.0μmol/L)对H22细胞增殖的影响;昆明雄性小鼠60只,随机分为6组,每组10只,腹腔注射给药,分别为模型组、对照组(不含血清的RPMI 1640培养液),低、中、高剂量大豆甙元组(大豆甙元分别为501、00、200 mg/kg),阳性对照组(环磷酰胺30 mg/kg);给药14 d后比较各组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数及瘤重;采用western blot检测bax、bcl-2的蛋白表达。结果 MTT检测结果显示大豆甙元对H22细胞有抑制作用,150μmol/L大豆甙元作用72 h,抑制率达30.3%,与低剂量组比较有明显抑制作用(P<0.05);大豆甙元能使Bax表达上调,Bcl-2表达下调,与对照组比较,10.0μmol/L大豆甙元组bax表达灰度值增加50.05%,凋亡抑制基因bcl-2表达减少52.62%;中、高剂量大豆甙元组小鼠胸腺指数和脾脏指数均明显升高(P<0.01),与模型组比较,大豆甙元各组瘤重指数下降明显(P<0.01)。结论大豆甙元对小鼠肝癌H22细胞的生长具有明显抑制作用,可诱导H22细胞凋亡,并在一定程度上抑制小鼠移植性肿瘤的生长,增强宿主免疫功能。     

刺参酸性黏多糖对H22荷肝癌小鼠肿瘤细胞增殖相关基因表达的影响

目的观察刺参酸性黏多糖(Stichopus japonicus acidic mucopolysaccharide,SJAMP)抑制H22荷肝癌小鼠肿瘤细胞增殖的作用,并探讨其可能机制。方法以H22荷肝癌小鼠为对象,随机分为对照组、5-FU(5-Fluorouracil,氟尿嘧啶20mg/kg)、SJAMP低、中、高剂量(6.25、12.5、25mg/kg)5组。分别采用腹腔注射方式连续给予对应试剂12 d。HE染色观察肿瘤组织病理学改变;分别采用免疫组化法检测肿瘤组织中PCNA、P53、P21、Cyclin D1及CDK4蛋白表达水平;Real-time PCR法检测P53、P21、Cyclin D1及CDK4 mRNA的表达水平。结果 SJAMP各剂量组H22肿瘤组织生长比较缓慢,其中SJAMP高剂量组肿瘤质量与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色观察到SJAMP中、高剂量组肿瘤组织较阴性对照组细胞数目少,排列疏松,坏死区多。免疫组化及Real-time PCR结果显示,SJAMP中、高剂量组中与细胞增殖相关基因的PCNA蛋白,P53、Cyclin D1及CDK4蛋白及mRNA的表达较阴性对照组中的表达明显下调(P<0.05),P21蛋白及mRNA的表达明显上调(P<0.05)。结论 SJAMP能够抑制小鼠H22移植瘤的生长。SJAMP发挥抑瘤作用的作用机制可能是其能够调节肿瘤细胞内细胞增殖相关基因与蛋白的表达,以达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。[营养学报,2014,36(3):263-267,272]     

萱草花黄酮对免疫性肝损伤小鼠保护作用及机制

目的探讨萱草花黄酮对免疫性肝损伤小鼠保护作用及凋亡相关基因bax、bcl-2表达变化。方法使用卡介苗和脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,将60只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、低、中、高剂量萱草花黄酮(15、30、60 mg/kg)组。苏木素-伊红染色观察肝组织病理损伤程度;比色法测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)含量;免疫组化法检测肝脏bax、bcl-2表达。结果与对照组比较,模型组小鼠血清中ALT水平[(105.48±46.34)U/L]、丙二醛含量[(8.57±0.54)nmol/mgprot]明显升高,SOD与GSH-Px活力[分别为(168.14±13.21)、(95.32±1.48)U/mgprot]明显下降(P0.01);与模型组比较,30、60 mg/kg萱草花黄酮组小鼠血清中ALT水平[分别为(56.38±26.31)、(59.77±13.34)U/L]、丙二醛含量[分别为(5.37±0.34)、(5.52±0.38)nmol/mgprot]降低(P0.05),SOD与GSH-Px活力[分别为(197.40±25.22)、(249.41±24.08)与(107.32±1.83)、(114.24±1.41)U/mgprot]升高(P0.05);与对照组比较,模型组小鼠肝脏bax基因表达上调,bcl-2基因表达下调(P0.0 5);与模型组比较,萱草花黄酮小鼠肝脏bax表达下调,bcl-2表达上调(P0.05)。结论萱草花黄酮对小鼠免疫性肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与提高小鼠抗氧化能力、下调促凋亡基因bax表达、上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

β-谷甾醇对H_(22)荷瘤小鼠体内抗肿瘤作用

目的探讨β-谷甾醇对H_(22)荷瘤小鼠体内抗肿瘤作用及其机制。方法建立H_(22)荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、β-谷甾醇高、低剂量组,每组10只,连续给药14 d,眼球取血后颈椎脱臼处死,称取H_(22)荷瘤小鼠的实体瘤重,计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数,测定血清学指标,并进行肿瘤和脾脏组织病理学观察。结果与模型组比较,环磷酰胺组、β-谷甾醇高、低剂量组小鼠瘤重减轻,差异均有统计学意义(P0.05),环磷酰胺组、β-谷甾醇高、低剂量组小鼠抑瘤率分别为56.1%、53.0%、41.4%;与对照组比较,模型组小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)水平[分别为(1 112.47±76.15)、(512.75±22.55)pg/mL]明显升高(P0.05);与模型组比较,高剂量β-谷甾醇组小鼠血清中IL-6、VEGF水平[分别为(341.31±31.19)、(356.92±19.45)pg/mL]明显下降,而IFN-γ水平[(122.92±13.66)pg/mL]明显升高(P0.05);与模型组比较,β-谷甾醇组小鼠肿瘤组织细胞出现一定的坏死区域,肿瘤组织细胞凋亡明显。结论β-谷甾醇对H_(22)荷瘤小鼠具有一定的抑瘤作用,其机制可能与其对IL-6、IFN-γ和VEGF表达的调节有关。     

天然放射性高本底地区居民凋亡基因bcl-2和bax表达水平研究

目的探讨小剂量长期连续照射人群凋亡相关基因(抑制凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax)的mRNA表达水平。方法选择我国阳江天然放射性高本底辐射地区(HBRA)50名50～59岁男性居民为研究对象,另选择恩平市某镇(CA)出生并长大的年龄相仿的50名男性居民为对照人群。分别取其周围血10 ml并利用实时定量基因扩增荧光检测系统(QPCR)测定其白细胞bcl-2和bax的mRNA表达水平。结果在HBRA和CA人群中,bcl-2 mRNA相对表达量(RQ)分别为(1.26±0.59)、(1.03±0.39);bax mRNA RQ分别为(1.63±0.85)、(2.11±0.64);bcl-2 mRNA RQ/baxmRNA RQ分别为(0.92±0.10)、(0.54±0.05)。与CA组比较,HBRA组人群抑制凋亡基因bcl-2 mRNA RQ较高,促凋亡基因bax mRNA的RQ较低,指示抗凋亡能力的指标bcl-2 mRNA RQ/bax mRNA RQ值较高,以上指标在2组间的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论小剂量长期连续电离辐射可能提高机体细胞存活基因的表达,降低促凋亡基因的表达。     

SO2吸入对大鼠肺p53、bax、bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

[目的]观察SO2对大鼠肺细胞凋亡相关基因mRNA和蛋白表达的影响。[方法]运用荧光实时定量RT- PCR和免疫组化技术研究了不同浓度SO2(0、14、28、56 mg/m3)吸入对大鼠肺细胞p53、bax、bcl-2三种细胞凋亡相关基因mRNA和蛋白表达的影响。[结果]肺中p53和bax mRNA表达水平及bax/bcl-2比值呈剂量依赖性增加,在低浓度SO2(14mg/m3)吸入条件下,p53、bax mRNA表达水平及bax/bcl-2比值虽然有升高趋势,但统计学上未见显著差异, 在SO2浓度为28．00和56．00mg/m3时均为显著增加(与对照组相比,p53:在14mg/m3为1．07倍,在28mg/m3为1．23倍, 在56 mg/m3为1．39倍;bax:在14 mg/m3为1．12倍,在28 mg/m3为1．77倍,在56 mg/m3为2．26倍;bax/bcl-2比值:在 14 mg/m3为1．13倍,在28 mg/m3为2．19倍,在56 mg/m3为3．01倍);而bcl-2 mRNA表达水平呈剂量依赖性降低,在低浓度SO2(14mg/m3)吸入条件下,bcl-2 mRNA水平虽然有降低趋势,但统计学上未见显著差异,在SO2浓度为28．00和 56．00mg/m3时显著降低(与对照组相比,bcl-2:在14mg/m3为0．99倍,在28mg/m3为0．78倍,在56mg／m3为0．73倍)。免疫组化的实验结果表明吸入SO2后大鼠肺中p53和bax蛋白表达水平呈剂量依赖性增加,而’bcl-2蛋白表达水平呈剂量依赖性降低。[结论] SO2可以改变凋亡相关基因的表达,表明SO2可诱导大鼠肺细胞凋亡,这可能与一些凋亡相关疾病的发生有关。这些机制的阐明有助于对SO2毒作用机制的理解和所致疾病的治疗。     

苯巴比妥促癌过程中细胞凋亡与bcl-2和bax mRNA表达的变化

目的 研究苯巴比妥（PB）促肝癌过程中细胞凋亡与相关基因bcl-2和bax mRNA表达,探讨PB促肝癌的分子机制。方法 建立大鼠肝癌启动／促进模型,采用TUNEL法检测促癌过程中肝细胞凋亡,提取总RNA用RT-PCR检测bcl-2和bax mRNA在促癌过程中的表达。结果 经DEN启动诱发的大鼠肝癌前病灶细胞凋亡率显著高于正常组。高、低剂量PB组和启动组随时相点延长细胞凋亡率降低,且各时相点间凋亡率差异显著（P〈0．05）。经DEN启动的各组（高、低剂量组和启动对照组）bcl-2 mRNA表达显著高于正常对照组,高剂量组随时相点延长bcl-2 mRNA表达呈增高趋势。经启动处理的各组bax mRNA表达高于正常对照,高剂量组bax mRNA表达随时间延长而降低。结论 在促癌阶段,促癌物PB能抑制凋亡,诱导抗凋亡基因bcl-2 mRNA轰达上调和俚凋亡基因bax mRNA轰达下调．提示凋亡抑制可能是促癌的机制之一。     

芹菜对雌性小鼠卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

[目的]观察芹菜对小鼠卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。[方法]给予实验组动物芹菜汁灌胃,分别于灌胃7d、14d时分批处死动物,免疫组化方法观察Bcl-2和Bax表达情况。[结果]灌胃7d高剂量组与对照组比较Bcl-2和Bax蛋白表达差异均有统计学意义。灌胃14d中、高剂量组与对照组比较Bcl-2和Bax蛋白表达差异均有统计学意义。[结论]芹菜能诱导颗粒细胞的凋亡。     

环境雌激素双酚A对小鼠脾细胞周期的影响

[目的]观察环境雌激素双酚A对小鼠脾细胞周期的的影响。[方法]每天分别以0.9mg/kg、9mg/kg、18mg/kg剂量给予小鼠腹腔注射双酚A,分别在连续染毒14d后处死小鼠,取脾,测定脾细胞周期。[结果]小鼠脾细胞G1期、G2期明显增加,而S期明显减少。[结论]双酚A可以诱导小鼠脾细胞G1、G2期阻滞,抑制脾脏细胞的分裂增殖。     

重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤组织生长及Janus 激酶2-信号转导与转录激活因子3通路的影响

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对荷人胃癌裸鼠移植瘤生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路相关的肿瘤血管生成因子的影响。方法采用免疫细胞化学染色法筛选出生长激素受体阳性（GHR^＋）和阴性（GHR^-）细胞株各1株,分别接种于裸鼠皮下,建立GHR不同表达状态胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组、低剂量rhGH组和高剂量rhGH组,连续给药14d,观察并记录裸鼠体重及肿瘤体积的变化,RT-PCR、Western-bolt检测肿瘤血管生成因子mRNA及蛋白表达。结果SGC-7901细胞株GHR强阳性表达,MKN-45不表达GHR。SGC-7901接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组肿瘤体积[（1．141±0．234）和（2．106±0．260）cm^3]较对照组[（0．6124±0．156）cm^3]增大（P=0．034,P=0．001）,高剂量rhGH促增长效应最为显著（P=0．043）,各组间裸鼠体重差异无统计学意义;低剂量rhGH可促SGC-7901血管生成因子mRNA表达,GHR、Janus激酶2、信号转导与转录激活因子3、血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子1et（HIF-1α）、成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶2（MMP-2）的P值分别为：0．001、0．011、0．042、0．045、0．040、0．002和0．003,但高剂量组未增加;低剂量rhGH组血管生成因子的蛋白表达水平明显升高,。磷酸化信号转导与转录激活因子3、信号转导与转录激活因子3、VEGF、HIF-lα和MMP-2的P值分别为：0．015、0．003、0,010．0,008和0．005,高剂量组VEGF、HIF-lα和MMP-2较低剂量组表达增加（P=0．012,P=0．025,P=0．046）。MKN-45接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组裸鼠体重[（24．94±0．517）和（26．97±0．686）g]较对照组[（22．78±0．418）g]增加（P=0．040,P=0．012）,肿瘤体积、血管生成因子mRNA及蛋白水平各组之间差异无统计学意义。结论rhGH促GHR^＋的SGC-7901移植瘤生长,并促肿瘤血管生成因子的分泌,对GHR^-的MKN-45则无此效应;GHR的表达情况是rhGH影响肿瘤生长及肿瘤血管生成因子表达的关键靶点之一,Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路是其可能途径。     

微量元素锌影响老年小鼠免疫功能的实验研究

[目的]观察微量元素锌对老年小鼠免疫功能的影响,判定微量元素锌对老年小鼠的免疫作用.[方法]测定老年小鼠脾悬液中淋巴细胞转化率和腹腔液中巨噬细胞吞噬率.[结果]锌(8～10mg/kg)可显著提高老年小鼠淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数(P<0.01).[结论]适量的锌可增强老年小鼠细胞免疫功能,提高机体巨噬细胞吞噬功能.     

共轭亚油酸对泌乳鼠肝脏脂类代谢相关基因mRNA表达的影响

目的研究共轭亚油酸(CLA)对泌乳鼠肝脏脂类代谢相关基因mRNA表达的影响。方法选取16只泌乳昆明鼠,随机分为对照组(1.5%亚油酸)和CLA组(1.5%共轭亚油酸),每组8只,从泌乳D日喂至D18,检测母鼠胰岛素耐受,采集血液和肝脏组织,分析血液指标和肝脏脂类代谢相关基因mRNA的表达。结果 CLA组泌乳鼠肝脏重量和甘油三酯含量与对照组比没有显著差异(P>0.05),CLA组泌乳鼠血液中的胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和谷氨酰转肽酶的含量均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),CLA组泌乳鼠血液中胰岛素的含量也显著升高,形成胰岛素抵抗。与对照组比,CLA组泌乳鼠肝脏中硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因的mRNA表达显著上调(P 0.05),而脂肪酸合成酶(FASN)、脂肪酸转位酶(CD36)、载脂蛋白B100(APOB100)及调控因子固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1-c)和过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)基因的mRNA表达均没有显著差异。结论饲料中加入1.5%CLA能够升高泌乳鼠血液中胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、谷氨酰转肽酶和胰岛素含量,上调肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶基因mRNA的表达。[营养学报,2012,34(6):531-535]     

重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤组织生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路的影响

目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对荷人胃癌裸鼠移植瘤生长及Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路相关的肿瘤血管生成因子的影响.方法 采用免疫细胞化学染色法筛选出生长激素受体阳性(GHR+)和阴性(GHR-)细胞株各1株,分别接种于裸鼠皮下,建立GHR不同表达状态胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组、低剂量rhGH组和高剂量rhGH组,连续给药14 d,观察并记录裸鼠体重及肿瘤体积的变化,RT-PCR、Western-bolt检测肿瘤血管生成因子mRNA及蛋白表达.结果 SGC-7901细胞株GHR强阳性表达,MKN-45不表达GHR.SCC-7901接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组肿瘤体积[(1.141±0.234)和(2.106±0.260)cm3]较对照组[(0.612±0.156)cm3]增大(P=0.034,P=0.001),高剂量rhGH促增长效应最为显著(P=0.043),各组问裸鼠体重差异无统计学意义;低剂量rhGH可促SGC-7901血管生成因子mRNA表达,GHR、Janus激酶2、信号转导与转录激活因子3、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的P值分别为:0.001、0.011、0.042、0.045、0.040、0.002和0.003,但高剂量组未增加;低剂量rhGH组血管生成因子的蛋白表达水平明显升高,磷酸化信号转导与转录激活因子3、信号转导与转录激活因子3、VEGF、HIF-1α和MMP-2的P值分别为:0.015、0.003、0.010、0.008和0.005,高剂量组VEGF、HIF-1α和MMP-2较低剂量组表达增加(P=0.012,P=0.025,P=0.046).MKN-45接种裸鼠,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组裸鼠体重[(24.94±0.517)和(26.97±0.686)g]较对照组[(22.78±0.418)g]增加(P=0.040,P=0.012),肿瘤体积、血管生成因子mRNA及蛋白水平各组之间差异无统计学意义.结论 rhGH促GHR+的SGC-7901移植瘤生长,并促肿瘤血管生成因子的分泌,对GHR-的MKN-45则无此效应;GHR的表达情况是rhCH影响肿瘤生长及肿瘤血管生成因子表达的关键靶点之一,Janus激酶2-信号转导与转录激活因子3通路是其可能途径.     

运动预适应对力竭运动后心肌mir-21和bax基因表达的研究

[目的]探讨运动预适应(excerise preconditioning,EP)对大鼠一次性力竭运动后心肌mir-21和bax基因表达的影响。[方法]健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(C组)、一次性力竭运动组(E组)、运动预适应+一次性力竭运动组(EP组)。力竭运动后即刻和24h取各组心肌采用real-timePCR检测各心肌内mir-21和bax基因表达情况。[结果]EP可以显著抑制一次性力竭运动后心肌内mir-21基因的下调表达(P﹤0.05)和bax基因的上调表达(P﹤0.05)。[结论]EP可以通过抑制mir-21基因下调从而抑制bax基因的上调来发挥保护作用。     

开县特大天然气井喷事件对灾区环境影响评估

[目的]对开县特大天然气井喷事件对灾区环境的影响进行评估。[方法]本文作者收集开县井喷事件的所有相关资料,结合事件处理中环境空气、水和食品检测结果进行分析。[结果]井喷前H2S在空气中浓度高,点火后即迅速下降。[结论]根据对事件喷发的天然气量及其H2S含量分析,作者认为事件虽然造成大量的人员伤亡及动物死亡,但事件排放的硫化物总量相对于面积数平方公里而言其量较微,特别是后期由于点火,H2S燃烧生成相对毒性较低的二氧化硫最终沉积于环境,事件对环境影响较小。