Caspase3、Bcl-2和PCNA在银屑病皮损组织中的表达

目的　探讨银屑病发生发展中细胞增殖和凋亡相关指标表达的趋势。方法　应用免疫组化技术检测 30例寻常型银屑病皮损、邻近皮肤及 10例正常皮肤中PCNA、Bcl - 2、Caspase3的表达。结果　在正常表皮中Bcl - 2和PCNA在基底层阳性表达 ,但在寻常型银屑病皮损中Bcl- 2表达明显低于正常皮肤组 ,皮损处与邻近皮损处表达、邻近皮损处与正常皮肤表达比较有统计学差异 (均P <0 0 5 ) ;PCNA在银屑病皮损处为角质形成细胞广泛阳性表达 ,皮损处与邻近皮肤的表达、邻近皮肤与正常皮肤相比有统计学差异 (P <0 0 1) ;Caspase3在寻常型银屑病皮损处与邻近皮肤及正常皮肤的表达无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　银屑病时 ,PCNA过度表达 ,Bcl - 2低表达 ,表明细胞过度增殖 ,凋亡基因Caspase3表达无统计学差异     

IL-15在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的从mRNA及蛋白质水平研究白介素15（IL-15）在寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用。方法采用RT-PCR和免疫组化法对28例寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中IL-15的表达情况进行了检测,同时以10例正常人皮肤作为对照。结果2种IL-15前体蛋白的mRNA在所有皮肤标本中都有表达,银屑病皮损中IL-15 mRNA的表达明显高于非皮损处皮肤（P〈0．001）和正常人皮肤（P〈0．001）,非皮损皮肤的表达与正常人皮肤相比差异无显著性（P〉0．05）。免疫组化结果显示：IL-15低表达于非皮损和正常皮肤的基底细胞层,而在银屑病皮损处高表达,且表达范围可达表皮全层及真皮乳头层。皮损处IL-15的表达明显高于非皮损（P〈0．001）和正常皮肤（P〈0．001）,非皮损与正常皮肤之间的表达无显著性差异（P〉0．05）。结论寻常型银屑病的皮损中高表达IL-15,在疾病的发生中可能起一定的作用。     

CD45RA和CD45RO在寻常型银屑病皮损中的表达的研究

目的：观察寻常型银屑病患者皮损中CD45RA和CD45RO的表达情况,探讨寻常型银屑病的发病机制。方法：免疫组化检测30例寻常型银屑病患者皮损中CD45RA和CD45RO的表达,取10例正常人的躯干皮肤做正常对照。结果：寻常型银屑病患者皮损中CD45RO的表达明显高于对照组（P〈0．01）,CD45RA的表达和对照组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论：寻常型银屑病患者皮损真皮中浸润的淋巴细胞以记忆性T淋巴细胞为主,推测细胞免疫在寻常型银屑病的发病中起重要作用。     

基质金属蛋白酶2和9在寻常型银屑病中的表达及其意义

目的探讨寻常型银屑病中基质金属蛋白酶2、9（MMP-2,MMP-9）的表达水平及表达模式。方法用ABC免疫组化技术检测19例寻常型银屑病皮损、15例寻常型银屑病非皮损及15例正常人皮肤组织中MMP-2、MMP-9的表达水平及表达模式。结果MMP-2及MMP-9主要表达于表皮各层的角质形成细胞胞浆内。MMP-2及MMP-9在寻常型银屑病皮损表达阳性率分别为100％．72．100％,在寻常型银屑病非皮损表达阳性率分别为13．33％及25．00％,在正常皮肤表达阳性率分别为6．67％及0％。MMP-2及MMP-9在寻常型银屑病皮损、非皮损及正常皮肤组织中表达的阳性率的差异有非常显著的统计学意义（P〈O．01）。结论MMP-2及MMP～9的表达异常可能与寻常型银屑病的发病有关。     

甲氨蝶呤对银屑病CXCR3 mRNA表达调控的研究

目的研究甲氨蝶呤（MTX）对银屑病患者皮损内趋化性细胞因子受体CXCR3表达的影响。方法利用荧光定量聚合酶链反应法测定20例寻常型银屑病患者治疗前后皮损内及17例正常对照者皮肤中CXCR3mRNA的定量表达,以直线相关回归分析CXCR3mRNA的表达与银屑病病情严重程度（PASI）的关系。结果银屑病皮损内CXCR3mRNA高于正常对照者皮肤内的表达水平（P〈0．01）。银屑病皮损内CXCR3mRNA的表达与患者病情严重程度呈显著的正相关“：0．72465,P〈0．011。银屑病患者进过MTX治疗6周后,皮损明显改善,皮损内CXCR3mRNA的表达水平低于银屑病患者治疗前皮损内的表达水平（P=0．0003）,但与正常对照者皮肤内的表达水平无统计学差异（P=0．0756）。结论趋化性细胞因子受体CXCR3可能在银屑病的发病中其重要作用。MTX能抑制银屑病皮损内CXCR3mRNA的过度表达,这可能是MTX治疗银屑病的作用机制之一。     

芩珠凉血合剂对豚鼠银屑病模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的：研究芩珠凉血合剂对豚鼠银屑病模型血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR2）的影响，探讨其治疗寻常型银屑病的相关作用机制。方法：选择豚鼠32只，随机取8只为正常组；其余以5％心得安乳剂外涂耳部皮肤造模，使其产生银屑病样病理改变，并随机分为模型组、芩珠凉血合剂治疗组（治疗组）、复方氨肽素片对照组（对照组），分别予蒸馏水或相应药物干预4周。检测治疗前后银屑病样皮损豚鼠血清VEGF水平、皮损组织中VEGF与VECFR2水平的变化，观察该变化与皮损表现的关系。结果：模型组豚鼠血清VEGF显著高于正常组。经药物干预治疗后，治疗组血清VEGF低于模型组和对照组，与正常组无统计学差异（P〉O．05）；而对照组与模型组无统计学意义（P〉0．05），仍高于正常组（P〈0．05）。免疫组化切片经图像分析显示，模型组VEGF及其受体VEGFR2表达均高于其余3组。经治疗，两药物干预组豚鼠皮损处的VEGF表达仍高于正常组，且与模型组无统计学差异（P〉0．05）；但治疗组VEGFR2表达却有显著降低，与对照组和模型组有统计学差异（P〈0．05）。结论：芩珠凉血合剂能明显改善豚鼠银屑病样皮损，其作用机制可能与降低血清中VEGF水平和皮损处VEGFR2表达有关。     

寻常型银屑病hBD-2表达及与嗜脂性马拉色菌感染的相关性

目的探讨寻常型银屑病（psoriasis vulgaris,PV）患者皮损中β防御素2（human β-defensin-2,hBD-2）mRNA表达水平及其与嗜脂性马拉色菌相关性。方法以真菌镜检和培养法检测30例寻常型银屑病患者皮损皮屑中是否存在马拉色菌,同时应用逆转录（RT）-PCR的方法检测该30例寻常型银屑病患者皮损和15例正常人皮肤中hBD-2mRNA的表达水平。结果寻常型银屑病患者皮损皮屑中的hBD-2mRNA表达水平马拉色菌阳性组高于阴性组,两者与正常人比较,表达均高于正常人,差异均有统计学意义（P〈0．01）。同时阳性组的平均PASI分值高于马拉色菌阴性组。结论寻常型银屑病患者皮损皮屑中存在马拉色菌可能是导致皮损中hBD-2mRNA表达升高的原因,推测马拉色菌可能参与寻常型银屑病患者皮损局部的免疫反应,进而可能与银屑病相关。     

甲氨蝶呤对寻常型银屑病患者外周血IL-8表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（Methotrexate,MTX）对寻常型银屑病患者外周血中自细胞介素8（Interleukin 8,IL-8）表达调控作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术检测19例寻常型银屑病外周血治疗前,MTX治疗8周后及19例正常对照者外周血IL-8的表达。结果IL-8在寻常型银屑病外周血中治疗前的表达水平为76．84±31．05pg／ml,经过MTX治疗8周后的表达水平为43．25±31．64pg／ml,正常对照者的表达水平为34．79±15．75pg／ml。IL-8在寻常型银屑病外周血治疗前的表达水平明显高于治疗后及正常对照者的表达水平（P〈0．01）,治疗后的表达水平与正常对照者的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTX能抑制寻常型银屑病患者外周血IL-8的表达,这可能是MTX治疗银屑病的作用机制之一。     

芩珠凉血合剂对豚鼠银屑病模型管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的：研究芩珠凉血合剂对豚鼠银屑病模型血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR2）的影响,探讨其治疗寻常型银屑病的相关作用机制。方法：选择豚鼠32只,随机取8只为正常组;其余以5％心得安乳剂外涂耳部皮肤造模,使其产生银屑病样病理改变,并随机分为模型组、芩珠凉血合剂治疗组（治疗组）、复方氨肽素片对照组（对照组）,分别予蒸馏水或相应药物干预4周。检测治疗前后银屑病样皮损豚鼠血清VEGF水平、皮损组织中VEGF与VECFR2水平的变化,观察该变化与皮损表现的关系。结果：模型组豚鼠血清VEGF显著高于正常组。经药物干预治疗后,治疗组血清VEGF低于模型组和对照组,与正常组无统计学差异（P〉O．05）;而对照组与模型组无统计学意义（P〉0．05）,仍高于正常组（P〈0．05）。免疫组化切片经图像分析显示,模型组VEGF及其受体VEGFR2表达均高于其余3组。经治疗,两药物干预组豚鼠皮损处的VEGF表达仍高于正常组,且与模型组无统计学差异（P〉0．05）;但治疗组VEGFR2表达却有显著降低,与对照组和模型组有统计学差异（P〈0．05）。结论：芩珠凉血合剂能明显改善豚鼠银屑病样皮损,其作用机制可能与降低血清中VEGF水平和皮损处VEGFR2表达有关。     

银屑病病人外周血单核细胞TLR2基因表达及血清ASO和IL-8水平变化

目的观察寻常型银屑病病人外周血单核细胞Toll样受体2（TLR2）mRNA表达及血清抗链球菌溶血素“O”（ASO）和白细胞介素-8（IL-8）水平的变化,探讨其与银屑病发病的关系。方法采用RT—PCR方法检测银屑病病人（银屑病组）外周血单核细胞TLR2 mRNA表达,采用胶乳凝集法检测血清ASO水平,采用ELISA法检测血清IL-8水平。以我院体检健康者30例作为对照（正常对照组）。结果银屑病组TLR2 mRNA表达明显高于正常对照组（t=5．541,P〈0．01）;银屑病组点滴型与斑块型TLR2 mRNA表达比较无显著性差异（t=0．318,P〉0．05）。银屑病组血清ASO水平明显高于正常对照组（x^2=8．604,P〈0．01）;且点滴型病人明显高于斑块型病人（x^2=9．780,P〈0．01）。银屑病组血清IL-8水平显著高于正常对照组（t=28．463,P〈0．01）;点滴型与斑块型病人之间比较无显著性差异（t=0．660,P〉0．05）。点滴型病人ASO阳性者TLR2 mRNA表达水平高于ASO阴性者,差异有显著性（t=2．407,P〈0．05）;银屑病病人外周血TLR2 mRNA表达与IL-8水平呈正相关（r=0．637,P〈0．01）。结论TLR2可能通过识别链球菌等入侵病原微生物启动机体免疫应答,介导细胞因子IL-8等的产生,参与银屑病皮损的发生和发展。     

大肠肿瘤组织中Caspase-3、Bcl-2的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤伯血病基因2（Bcl-2）与大肠肿瘤发生、发展的关系。方法利用链菌素亲生物素-过氧化物酶法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法。检测80例大肠组织（腺癌43例、腺瘤27例、正常组织10例）中Caspase-3、Bel-2和增殖细胞核抗原的表达水平及细胞凋亡情况。结果Caspase-3在大肠腺癌和腺瘤中的表达率分别为41．9％和55．6％，明显低于正常组织的80．0％（P〈0．01）；Caspase-3在大肠腺癌中的表达与肿瘤Dukes分期、分化程度有关（P〈0．05）。Bcl-2在大肠腺癌和腺瘤中的表达率分别为76．7％和70．4％，明显高于正常组织的20．0％（P〈0．01）；Bcl-2在大肠腺癌中的表达与分化程度有关（P〈0．01）。凋亡指数与增殖指数呈正相关（r=0.471，P〈0．01），与Caspase-3的表达呈正相关（r=0．634。P〈0．01）。与Bcl-2的表达呈负相关（r=-0．523，P〈0．01）。结论Caspase-3、Bcl-2与大肠肿瘤的细胞凋亡密切相关，参与细胞凋亡的调节机制，在大肠肿瘤恶变的过程中发挥作用，并与恶性程度关系密切，有可能成为大肠癌预后评估的参考指标。     

Expression and Significance of Bcl-2, Bax, Fas and Caspase-3 in Different Phases of Human Hemangioma

Summary： The relationship between Bcl-2, Bax, Fas, caspase-3 and development of hemangioma and the molecular mechanism was investigated. By using immunohistochemical S-P method, proliferating cell nuclear antigen was detected. According to the classification of Mulliken in combination with PCNA expression, 27 cases were identified as proliferating hemangioma and 22 cases as involutive hemangioma. Five normal skin tissues around the tumor tissue served as controls. By using immunohistochemical technique, the expression of Bcl-2, Bax, Fax and Caspase-3 was detected. The cells expressing Bcl-2, Bax, Fax and cappase-3 were identified as hemangioma endothelia by immunohistochemical staining of Ⅷ factor. The average absorbance （A） and average positive area rate of Bcl-2, Bax, Fas and caspase-3 expression were measured by using HPIAS-2000 imaging analysis system. The results showed that the expression of Bcl-2 in the endothelia of proliferating hemangioma was significantly higher that in involutive degenerative hemangioma endothelia and vascular endothelia of normal skin tissue （P〈0.01）. The expression of Bax, Fas and Caspase-3 in the endothelia of involutive hemangioma was obviously higher than in the endothelia of proliferating hemangioma and normal skin tissue （P〈0.01）. The expression of BAx and Fas in endothelia of proliferating hemangioma was higher than in those of normal skin tissue （P〈0.05）. It was suggested that Bcl-2, Bax, Fas and caspase-3 might be involved in the development and involution of hemangioma. Bcl-2 could promote the growth of hemangioma by inhibiting apoptosis of endothelia. Bax, Fas and caspase-3 promote the switch of hemangioma from proliferation to involution by inducing the apoptosis of hemangioma endothelia.     

糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡

目的 研究糖尿病大鼠肾皮质细胞凋亡的可能机制及其对糖尿病肾病的影响.方法 20只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组.糖尿病大鼠模型采用链脲佐菌素65 mg/kg腹腔注射诱导建立.12周后观察2组体质量、血糖以及血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白等肾功能指标;采用透射电镜和原位末端标记法（TUNEL法）检测大鼠肾皮质细胞凋亡,并用免疫组织化学的方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达.结果 建模12周的糖尿病组肾小球和肾小管细胞凋亡明显增多（P＜0.01）,肾小球和肾小管细胞PCNA表达无明显差别（P＞0.05）;与对照组比较,糖尿病组肾小管Bax和Caspase-3表达明显增加（P＜0.01）,Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）;2组肾小球都不表达Bax和Bcl-2,糖尿病组肾小球有少量Caspase-3表达.结论 糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡.包括Bax、Bcl-2和Caspase-3在内的Caspase依赖的线粒体凋亡途径可能参与了糖尿病状态下肾小管细胞的凋亡;细胞凋亡的增多可能是糖尿病肾病发展的原因之一.     

The Expression of Interleukin-22 and S100A7, A8, A9 mRNA in Patients with Psoriasis Vulgaris

In order to study the expression of interleukin-22 （IL-22） and S 100A7, A8, A9 mRNA in the skin lesions of patients with psoriasis vulgaris and their relationship, the biopsies were taken from skin lesions in 35 patients with psoriasis vulgaris and the skin of 16 normal controls, and the expression levels of 1L-22 and S 100A7, A8 and A9 mRNA were detected by semi-quantitative RT-PCR. The results showed that （1） IL-22 and S 100A8, A9 mRNA were positively expressed in the psoriatic skin lesions but negatively expressed in the normal controls; The expression level of S 100A7 was （1.133±0.040） in the psoriatic skin lesions, significantly higher than that in the normal controls （0.744±0.037, P〈0.01）. （2） There were significantly positive correlations between the expression of IL-22/S100A7 mRNA, IL-22/S100A8 mRNA, IL-22/S100A9 mRNA in the psoriasis vulgaris （r1=-0.543, r2=0.774, r3=0.621, P〈0.01）. It was concluded that IL-22 and S 100A7, A8, A9 might play important roles in the occurrence and progression of psoriasis.     

银屑病病人皮损组织中C5b—9的表达及其皮损形成的关系

①目的　探讨银屑病病人皮损组织内补体活化成分的表达 ,以探讨其与银屑病皮损形成的关系。②方法　采用免疫组织化学ABC法检测了 37例银屑病病人皮损组织、非皮损组织及 2 0例正常皮肤组织C5b 9的原位表达。③结果　银屑病皮损组织中角质层和真表皮交界处C5b 9阳性表达明显高于非皮损组织和正常组织 ,差异有显著性 (χ2 =6 2 .90 ,45 .45 ,P <0 .0 1) ;进行期与静止期银屑病病人皮损组织角质层和真表皮交界处C5b 9阳性表达差异无显著性 (P =0 .2 97,0 .739)。④结论　皮肤组织中补体成分沉积与活化可能与银屑病病人皮损组织的形成有关。     

PCNA、Caspase-3和Bcl-2在不同类型IgA肾病中的表达及意义

目的观察增殖细胞核抗原（PCNA）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2）在不同病理学类型IgA肾病（IgAN）中的表达,并探讨其意义及与患者肾功能临床指标之间的关系。方法采用免疫组化法测定54例IgAN患者肾组织PCNA、Caspase-3和Bct-2的水平,收集患者血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24h尿蛋白定量的临床检测结果。结果（1）IgA肾病患者肾组织中PCNA的表达从低到高依次为Ⅰ级（0．09±0．03）、Ⅱ级（0．12±0．02）、Ⅴ级（0．13±0．01）、Ⅲ级（0．28±0．08）、Ⅳ级（0．54±0．03）,其中Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级间均有统计学意义（均P〈0．01）;Caspase-3与Bcl-2的表达随级别增加而逐渐增高：Caspase一3的表达依次为Ⅰ级（0．08±0．01）、Ⅱ级（0．11±0．02）、Ⅲ级（0．13±0．08）、Ⅳ级（0．20-±0．01）、V级（0．35±0．01）,其中Ⅰ级与其他各级间比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。Bcl-2的表达依次为Ⅰ级（0．09±0．02）、Ⅱ级（0．11±0．01）、Ⅲ级（0．15±0．01）、Ⅳ级（0．29±0．01）、V级（0．32±0．01）．其中Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ～Ⅴ级间均有统计学意义（均P〈0．01）。三种蛋白Ⅲ、Ⅳ级的表达为PCNA〉Bcl-2〉Caspase-3,Ⅴ级的表达为Caspase-3〉-2〉PCNA,差异均有统计学意义（P〈0．01）。（2）Scr、BUN、24h尿蛋白定量从Ⅰ级到Ⅴ级均逐渐增高,Scr的水平依次为65．08±14．11、81．53±21．71、133．86±69．36、147．56±52．69、280．03±137．81,其在Ⅴ级的水平与其他各组间比较均有统计学意义（P〈0．01）;BUN的水平依次为4．77±1．39、6．16±2．48、6．97-±3．60、9．44±2．80、13．30±6．32,其Ⅴ级水平与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间比较均有统计学意义（P〈0．01）;24h尿蛋白定量的水平依次为0．84±0．33、2．50±1．08、3．35±0．82、3．54±0．77、4．66±1．42,其Ⅰ级的水平与其他各级间及Ⅴ级与Ⅱ、Ⅲ级间均有统计学意义（P〈0．01）。（3）PCNA、Caspase-3和Bel-2的表达与Scr、BUN、24h尿蛋白定量均呈正相关（P〈0．01）,PCNA的表达与Caspase-3呈正相关（P〈0．05）。结论PCNA、Caspase-3和Bel-2随着IgANⅠ～Ⅴ级表达水平逐渐增加,提示IgAN病程进展及肾功能的损伤可能与细胞凋亡增殖失衡有关。     

A study on the expression of interleukin(IL)-10 and IL-12 P35, P40 mRNA in the psoriatic lesions

Psoriasisisa common chronic,relapsing and in-flammatory disease and its pathogenesis is still un-known.It is considered thatit is one kind of geneticand immunological diseases controlled by multiplegenes.Even though theexactpathogenesisisstillun-known,many studies showed that T cells mediatedimmune response played a very important role in thepathogenesis of psoriasis.In this study,the expres-sion of IL- 1 0 ,IL- 1 2 P35 and P40 m RNA in the pso-riasis lesions were detected by using RT- P…     

银屑病患者皮损微血管密度和肥大细胞密度及光化学疗法对其影响

目的 了解银屑病患者皮损微血管密度和肥大细胞密度及光化学疗法对其的影响。方法 对正常对照组皮肤和银屑病患者皮损用血管内皮细胞特异性标志CD34抗体免疫组化法检测微血管密度，用肥大细胞特异性标志类胰蛋白酶单抗免疫组化法检测肥大细胞密度，并观察光化学疗法对其的影响。结果 银屑病患者皮损的微血管密度明显高于正常对照组（P〈0．01）。银屑病皮损处肥大细胞密度比正常对照组明显升高（P〈0．01）。银屑病患者经过9周光化学疗法治疗，微血管密度和肥大细胞密度明显下降。结论 肥大细胞参与银屑病的血管新生，光化学疗法可能通过抗血管新生作用来治疗银屑病。