小鼠显微操作针的制作技术

目的探讨转基因小鼠制作中显微注射时所用移卵管、持卵针和注射针的最佳制作方案。方法通过酒精灯烧制和手拉以及通过P-97拉针仪设置不同的参数将薄壁硼硅玻璃管拉制成不同口径的移卵管、持卵针和注射针。结果按本方案制作的移卵针,持卵针和注射针用于小鼠受精卵的显微注射,实验过程顺利,效果非常好。结论该方法适用于小鼠受精卵显微注射的移卵管、持卵针和注射针制作。     

转基因显微注射的剂量控制与效果分析

为了分析转基因显微注射的注射剂量对胚胎发育效果的影响，用尖端直径为0.5～1.0um的显微注射针在不同气压和不同时间的条件下进行微注射测试，并对133枚小鼠受精卵分别注射不同剂量，观察注射后胚胎发充情况。实验采用的气压电控式显微注射器，具有注射时间短(msec)，注射的可控性和可重复性好的特点，在相同条件下重复注射时，误差小于0.004pl。结果表明．小鼠受精卵原核内注射剂量在2～4pl时．胚胎体外发育不受影响，当大于10pl时，胚胎在注射后1h内全部死亡．也证明了注射针尖端直径小于1．0um时，导致细胞损伤和影响胚胎发育的主要因素是注射剂量的大小。因此，对于小鼠肛胎原核内注射剂量2-4pl是较为合适的“安全剂量”.     

16 号注射针在输液针塑料管液体渗漏处的应用

目的 当静脉输液病人出现输液针塑料管液体渗漏时,不必拔掉渗漏的输液针重新静脉穿刺以增加病人的第2次痛苦.方法 25倒病人(实验组)采用16号注射针用于静脉输液病人液体渗漏处和25例病人(对照组)采用拔掉渗漏的输液针重新静脉穿刺的对照研究.结果 实验组疼痛百分比为O%,满意百分比为100%,不满意百分比为0%,输液通畅,无渗漏,未发现病人感染.对照组疼痛百分比为100%,满意百分比为O%,不满意百分比为100%.结论 此方法简便易行,成本低廉,取用方便,不必重新静脉穿刺而增加病人的痛苦,无不良反应.尤其适用于小儿,值得推广.     

无针注射和有针注射胰岛素在糖尿病治疗中的比较

目的 比较糖尿病治疗中无针注射与有针注射胰岛素的效果.方法 选择我院2015年8月—2016年8月收治的糖尿病患者108例,将其随机分为观察组和对照组,每组54例.观察组应用无针注射胰岛素治疗,对照组应用有针注射胰岛素治疗.观察2组患者治疗后的血糖水平,检测胰岛素药代动力学情况.结果 观察组患者的清晨空腹血糖、早餐后2 h血糖、午餐后2 h血糖、晚餐后2 h血糖水平,糖化血红蛋白水平,注射胰岛素达峰值时间均低于对照组;血药浓度峰值、曲线下面积高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 糖尿病患者接受胰岛素治疗时,无针注射的降糖效果要优于有针注射,可在临床中进一步推广应用.     

单精子显微注射技术

单精子显微注射 (intracytoplasmicsperm injection,ICSI)是新兴助孕技术,出现于1992年,1996年被国内引进。即在体外用机械注射方法将单个精子注入到卵子的胞质内,卵裂达一定程度时移回宫腔。主要用于治疗少精、无精、畸精和不明原因的不孕症。被实践证明是目前治疗男性不孕最有效的方法。     

通过双原核显微注射提高转基因小鼠研制效率的实验研究

目的建立高效的转基因小鼠制备技术,为开展遗传工程动物模型研究奠定技术基础。方法通过向小鼠受精卵原核中注入不同浓度的DNA分子,筛选最适注射用DNA浓度;将K14/hCTLA4-Ig基因表达载体分子通过显微注射分别导入小鼠受精卵雌、雄原核,并设立单原核注射对照组;利用输卵管腹壶部穿刺移植法将注射后的小鼠受精卵移植于同期发情的受体母鼠;利用PCR对出生的转基因首建小鼠进行筛选。结果最适DNA分子浓度为10ng/μl;在单、双原核注射组胚胎2细胞卵裂率分别为52.3%(132/253)和45.0%(108/240),差异有显著性(P<0.05);注射胚胎移植后体内存活率分别为18.1%(24/132)和16.7%(18/108),差异无显著性;转基因首建小鼠阳性率分别为3/24和5/18,转基因阳性小鼠占总注射胚胎的比例为1.2%(3/253)和2.08%(5/240),差异有极显著性(P<0.01)。结论尽管双原核注射对胚胎的2细胞卵裂率有一定影响,但通过双原核注射可有效提高转基因小鼠的制备效率。     

卵泡浆内单精子显微注射—胚胎移植的研究进展

卵胞浆内单精子显微注射 -胚胎移植 (ｉｎｔｒａｃｙ ｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｅｍｂｒｙｏｔｒａｎｓｆｅｒ,ＩＣＳＩ ＥＴ)是通过显微操作技术将单个精子注入卵母细胞浆内使精卵结合受精 ,并将受精卵体外培养形成早期胚胎植入母体子宫内的一种较为精细、尖端的辅助生殖技术。主要适用于少弱畸精症 ,甚至经精液常规检查无精子而只要在附睾或睾丸内能取到活精子的患者。该项技术最早应用于人类是在 1992年 ,由Ｐａｌ ｅｒｍｏ等〔1〕获得成功。随后各国相继报道并肯定了该项技术。本文就ＩＣＳＩ的发展、受精机理、…     

一种便捷而经济的显微注射针填充方法

介绍了一种便捷而经济的将DNA溶液填充至显微注射针的方法。将通常用于转移胚胎的口吸管稍加改进，吸取DNA溶液，从尾部直接注入显微注射针，可在2~5min完成DNA填充，大大提高了效率。     

小儿静脉头皮针的固定技巧

我科采用的小儿静脉头皮针固定方法,在临床的实践工作中取得较好的效果。方法:将外科病人常用来固定头部伤口的头套剪开,宽度约2~3cm,在静脉穿刺成功后,常规用胶布固定后,将剪开的头套套在头上,压住针柄及针梗处,使针头牢牢固定在血管中。此方法常用于:①患儿发烧,哭闹频繁等出     

显微注射技术制备转基因豚鼠早期胚胎的初步探讨

目的：应用显微注射方法生成转基因豚鼠。方法：将外源DNA注射到用人工注射性激素超排卵诱导的豚鼠受精卵内，体外培养数小时后移植到假孕母鼠输卵管中使其体内发育，发育到第7天处死假孕母鼠，回收早期胚胎观察其存活情况。结果：显微注射成功率达85%；早期胚胎存活率低（15个中仅2个存活）。结论：显微注射技术是一种简便、可重复性的好方法。要常规生成转基因豚鼠还需进一步研究。     

小鼠胚胎显微操作针的制备方法

本文结合我们自己制备用于小鼠胚胎显微操作的持卵针(holding pipette)和注射针(injection pipette)的经验,介绍其制备的一些方法和技巧.     

授精后5h补救性卵胞浆内单精子显微注射的临床应用价值

目的 探讨授精后5h对可能受精失败的卵子行补救性卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的可行性。方法 授精后3、4、5h分别观察卵子是否排出第二极体。若已经排出第二极体,则认为卵子已经被激活,是受精的征象。如果患者在授精后5h观察少于65%的卵子排出第二极体,则剩余的只有第一极体的卵子接受补救性ICSI。1050例接受体外受精-胚胎移植(IVF ET)的患者,按照有无补救性ICSI 将患者分为2组：Ⅰ组：部分接受补救性ICSI,本组又按照有无补救性ICSI将卵子分为两部分：补救性ICSI部分及IVF部分;Ⅱ组：未接受补救性ICSI。201例接受ICSI治疗的患者作为对照组。结果 ①Ⅰ组患者卵子在授精后3、4、5h第二极体排出率均低于Ⅱ组(P<0.05),Ⅰ组患者原发不孕的比例、不明原因性不孕的比例高于Ⅱ组(P<0.05);②Ⅰ组、Ⅱ组、对照组,受精率、多精受精率、临床妊娠率、种植率均无显著性差异(P>0.05),但Ⅰ组补救性ICSI部分卵子优胚率低于Ⅱ组和对照组(P<0.05)。结论 IVF中精卵共培养3h是可行的;授精后5h第二极体的排出可作为卵子激活的征象;授精后5h行补救性ICSI可获得可观的临床结局,且不会增加多精受精率;低受精率可能更易出现在原因不明性不孕及原发不孕患者。     

大鼠显微注射胚胎采集方法的比较

目的优化大鼠显微注射前胚胎采集的方法。方法选用最佳超排5周龄SD大鼠，腹腔注射PMSG-HCG，分别用撕开输卵管壶腹部和输卵管伞端冲洗两种方法采集胚胎，比较获得卵数，受精率，注射存活率等的差异。结果冲洗输卵管伞端采集胚胎的方法所得到的受精率、存活率都较高，与撕开输卵管壶腹部方法比较差异显著（P〈0．01），胚胎总数无显著性差异（P〉0．05）。结论冲洗输卵管伞端采集胚胎的方法为大鼠显微注射前胚胎采集比较好的方法。     

改进静脉留置针固定方法的效果观察

目的 探讨消除静脉留置针留置期间穿刺点渗血渗液,静脉炎、套管脱出等并发症的最佳留置方法. 方法 选择200例在我科住院治疗并使用静脉留置针的患者,根据穿刺先后顺序,按照单、双号随机分为两组,即对照组和观察组,两组均选用头静脉进行穿刺,输注的液体种类均无明显差异,且无刺激性.分别采用常规方法和改进后的方法进行固定,进行效果观察和比较.结果 两组在正常拔管、渗血渗液、发生静脉炎,套管脱出、患者有恐惧心理等方面有显著差异(P＜0.05).观察组明显高于对照组,差异具有统计学意义.结论 改进后的方法可避免静脉留置针的脱出,减少渗血渗液,降低静脉炎的发生率,减轻患者的恐惧心理,能明显提高正常拔管率.     

防止外固定器术后针道感染和固定针松动的临床研究

目的:分析比较应用外固定器两种手术操作方法对固定针松动、感染的影响,探讨防止固定针松动和感染的外固定器最佳穿针操作技术。方法:共240例患者,A组120例,为传统手术和护理方法;B组120例,为改进手术和护理方法,分析比较两组固定针感染发生率及感染发生时间。感染定义为针道炎性渗出伴疼痛,细菌培养阳性,使用抗生素有效。结果:B组感染发生率低,且第一次出现感染的时间延迟。结论:避免术中热损伤和局部血肿形成,术后应用抗生素,局部采用碘伏纱布加压包扎等方法,能够大大降低针道感染和固定针松动的发生率。     

一种非Piezo依赖的高卵子存活率小鼠显微授精技术

目的对已建立的非Piezo依赖的小鼠显微授精技术作进一步改良,以获得更高的卵子存活率。方法将卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术中对卵子深吸持后直接深穿刺(一步法非Piezo-ICSI组)的步骤分成两步进行(两步法非Piezo-ICSI组):先浅吸持后浅穿刺,再进一步深吸持后深穿刺;另以孤雌激活发育的卵子作为卵子质量对照组。比较两步法非Piezo-ICSI组与一步法非Piezo-ICSI组卵子的存活率、原核出现率和卵裂率。结果两步法非Piezo-ICSI组的卵子存活率(92.2%)显著高于一步法非Piezo-ICSI组(83.7%)(P<0.01);而原核出现率和卵裂率与一步法非Piezo-ICSI组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠卵子胞膜在被新型持卵管深吸持时的变形造成了部分卵子胞膜变脆,两步法吸持穿刺在深吸持前进行了穿刺,避免了脆性敏感时的穿刺,有利于卵子存活。     

糖尿病患者浅静脉留置针两种固定方法的效果观察

目的探讨适用于糖尿病患者浅静脉留置针的固定方法。方法选择使用浅静脉留置针输液的糖尿病患者120例,其中观察组60例,对照组60例,观察组患者使用自制的观察窗医用胶布固定浅静脉留置针,对照组使用3L一次性粘贴手术巾固定浅静脉留置针,分别观察两组患者固定效果和对浅静脉留置针并发症的影响。结果通过观察两组患者在软管脱出、软管跟部打折、胶布松脱、胶布卷边的比较,说明使用自制的观察窗医用胶布固定浅静脉留置针比使用3L粘贴手术巾固定浅静脉留置针要牢固。通过观察两组患者在静脉炎和局部炎症反应、局部渗漏、留置时间的比较,说明观察组使用自制的观察窗医用胶布固定浅静脉留置针可以预防和(或)减少并发症的发生,延长留置针的使用时间,明显提高浅静脉留置针的临床使用效果。结论观察窗医用胶布是适用于糖尿病患者浅静脉留置针固定的理想材料。     

静脉留置针固定贴的固定方法对输液的影响

目的探讨静脉留置针输液固定方法对输液的影响.方法将我科120例使用静脉留置针输液的病人按照单、双日分为对照组和观察组,固定由2名护士操作,两组均选用上肢前臂浅静脉按照留置针操作规程进行(由远心端向近心端)穿刺,并为患者采取平卧位,对照组按照常规方法在留置针的正上方直接粘贴固定贴,观察组采用由针尖向针柄的方向粘贴固定.每天输液完毕,两组均用肝素钠盐水进行正压封管处理,观察两组留置针在每天输液过程中滴入畅通的差异.结果对照组留置针平均留置3~4天,重新更换固定贴52次,其中42例留置针第2~3天开始出现输液滴入不畅现象,其中10例第4天开始出现输液滴入不畅,其余8例患者输液滴入情况良好.观察组留置针平均留置5~7天,除6例固定贴卷边予以更换,10例患者住院4天要求出院予以拔除留置针,其余患者每天输液滴入状况良好.结论采用由针尖向针柄方向粘贴固定静脉留置针能保证患者输液滴入通畅,减少护理工作量及减轻病人的痛苦,提高输液质量.     

锁骨骨折钢板内固定及克氏针内固定的比较

目的：比较钢板及克氏针治疗锁骨骨折的疗效及意义。方法：回顾性分析钢板或克氏针治疗锁骨骨折的４９例患者。结果：克氏针内固定优良率８８％,并发症发生率１２％,钢板内固定优良率９５．６％,无并发症发生。结论：钢板内固定治疗锁骨骨折优于克氏针内固定。