薄层扫描法测定牛黄解毒片中猪去氧胆酸的含量

用双波长薄层扫描法测定牛黄解毒片中猪去氧胆酸的含量。薄层色谱条件：硅胶G板，氯仿-乙醚-冰醋酸（2：2：1）展开，10％磷钼酸乙醇液显色，λs＝700nm，λR＝450nm。     

HPLC-ELSD测定胆酸钠中猪去氧胆酸的含量

目的：建立胆酸钠中猪去氧胆酸的含量测定方法。方法：采用RP-HPLC法,以Zorbax SB C18为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液（80∶20）,流速为0.5ml/min,采用蒸发光散射检测器,漂移管温度为90℃,氮气流速为1.6L/min。结果：猪去氧胆酸线性范围为0.7068～10.602μg,r=0.9993。猪去氧胆酸的平均回收率为98.15%,RSD=2.4%。结论：本方法定量准确,重复性好,可用于胆酸钠的质量控制。     

薄层扫描法测定牛黄降压丸及胆南星中猪去氧胆酸的含量

用双波长薄层扫描法测定牛黄降压丸及胆南星中猪去氧胆酸的含量.薄层色谱条件:硅胶G板,氯仿-乙醚-冰醋酸(2:2:1)展开,10%磷钼酸乙醇溶液显色,λ_S=700nm,λ_R=450nm.平均回收率:牛黄降压丸为99.14%,RDS=3.0%,n=5;胆南星为97.52%,RSD=2.9%,n=5.     

HPLC-ELSD法同时测定痔速宁片中鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸的含量

目的 采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测法测定痔速宁片中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量。方法 采用Thermo U-3000液相色谱系统;ChromeleonTM 7工作站;ELSD 2000ES检测器,检测器条件：漂移管温度：105℃,撞击管关闭,增益为1,气体流速：2.0 L/min。采用Thermo（4.6×150 mm,C185μm 120 A）色谱柱;流动相：乙腈-0.1%冰醋酸（50∶50）;流速：0.9 mL/min;柱温：20℃。结果 表明猪去氧胆酸在（21.530～262.884）μg/mL（r=0.9997）,鹅去氧胆酸在（11.148～133.776）μg/mL（r=0.9995）的范围内呈良好的线性关系;猪去氧胆酸平均加样回收率为101.8%（n=9）,RSD=2.8%;鹅去氧胆酸平均加样回收率为98.0%（n=9）,RSD=2.3%。结论 本方法操作简便、准确、灵敏度高,可用于痔速宁片的质量控制。     

人工牛黄中胆酸的测定

本文利用糠醛-硫酸比色法测定速效伤风胶囊中人工牛黄(Ⅰ)的胆酸含量。取10粒胶囊研细,将样粉(约含Ⅰ2mg)用氯仿提取。过滤,在80℃水浴上蒸去溶剂,冷却,加60%醋酸溶液溶解Ⅰ并稀释至25ml。将此溶液2.0ml及1%糠醛溶液(Ⅱ)1.0ml混合,冰浴上冷却5min,加入硫酸溶液并混匀。用分光光度法于605nm以空白对照测量吸收值。每粒中约含Ⅰ为5,10,15mg时回收率分别为93.56,94.39及97.62%;变异系数分别为0.13(n=3),1.2(n=6)及0.26%(n=3)。     

HPLC法测定双胆片中猪去氧胆酸含量

双胆片是本院研制的口服治疗湿热酒毒内蕴所致的酒精性肝炎的一种新药.方中猪胆汁膏为主要药物,其有效成分为猪去氧胆酸.猪去氧胆酸测定方法已有薄层扫描法[1,2]的报道.本实验采用HPLC法测定双胆片中猪去氧胆酸的含量,为该制剂的质量控制提供了准确、快捷的测定方法.     

清开灵注射液中胆酸和猪去氧胆酸的药动学研究

目的 :以清开灵注射液为例 ,以制剂中不同化学组分为指标来研究中药复方药动学规律。方法 :8只家兔以 8m L/kg静注清开灵注射液 ,4h内采血 8次 ,血样经离心、提取后 ,采用双波长薄层色谱法同板测定清开灵注射液中胆酸和猪去氧胆酸两种成分不同时刻的血药浓度。结果 :经《药代动力学计算程序》计算 ,两成分的体内代谢均属二室模型。胆酸 t1 / 2 α=4.0 72 min,t1 / 2 β=1 1 8.89min,AUC=699.95 μg/m L·min,CL=0 .0 3 92L/min。猪去氧胆酸 t1 / 2 α =4.2 5 4min,t1 / 2 β =77.5 0 min,AUC=61 4.0 4μg/m L.min,CL=0 .0 5 3 1 L/min。二者t1 / 2 β,k2 1 ,CL有显著差异 ( P <0 .0 5 ) ,其他参数如 t1 / 2 α,k1 2 ,k2 1 ,AUC等无统计学差异 ( P >0 .0 5 )。结论 :中药复方制剂中不同成分的药动学特征有差异 ,复方制剂中某一成分的代谢情况无法反映整个制剂的水平。     

柱前衍生化HPLC-UV法测定天麻胶囊中齐墩果酸的含量

目的建立天麻胶囊中齐墩果酸的含量测定方法。方法以对硝基苯甲酰氯为衍生化试剂对齐墩果酸进行柱前衍生,用HPLC-UV法对衍生物进行测定,色谱条件为:Diamonsil(钻石)C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.2%磷酸水溶液(95∶5)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长254 nm。结果成功建立了天麻胶囊中齐墩果酸的柱前衍生测定法,衍生物线性回归方程为:Y=90 374X+90.208(r=0.999),在0.39-6.20μg范围内线性关系良好。结论柱前衍生化HPLC-UV法可用于天麻胶囊中齐墩果酸的含量测定,衍生物为对硝基苯甲酸齐墩果酸酯,检测波长红移至254 nm,方法准确,灵敏度高,可为天麻胶囊的质量评价提供依据。     

新型荧光试剂柱前衍生高效液相色谱定量分析小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质

目的 采用新合成的荧光试剂柱前衍生氨基酸类神经递质,建立其测定方法,并测定小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的含量。方法 以1,3,5,7-四甲基-8-苯基-（4′-O-（N-琥珀酰亚胺乙酸酯））-二氟化硼-二吡咯甲烷（TMPAB-OSu）作为柱前荧光衍生试剂,在pH 8.8的硼酸-硼砂缓冲溶液中,30℃衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物,在反相色谱柱上,采用梯度洗脱进行5种氨基酸类神经递质标准品衍生物的分离检测,荧光激发波长为497 nm,检测波长为509 nm。结果 5种氨基酸类神经递质的线性范围为0.01~1.2 μmol/L,线性回归系数均大于0.998 1,检出限为1 nmol/L（S/N=3∶1）。小鼠脑脊液中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸和丙氨酸的含量分别为0.06、0.20、0.26、0.03和0.07 μmol/L,标准加入回收率为96%~104%,RSD为0.7%~2.9%。结论 该方法的灵敏度高、重现性好,为小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的分析检测提供了一种新方法。     

柱前衍生RP-HPLC法测定泽泻中氨基酸的含量

目的 分析不同产地泽泻中氨基酸含量及其特征性。方法 采用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOC)联合柱前衍生RP-HPLC测定泽泻中的17种氨基酸。结果 氨基酸质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，r均在0．99以上。不同产地泽泻中氨基酸含量有一定差别。结论 该方法适宜泽泻药材中氨基酸含量的测定。     

邻苯二甲醛-9-氯甲酸芴甲酯柱前衍生HPLC法测定血必净注射液中氨基酸

摘 要：目的 通过建立HPLC分析法测定血必净注射液中氨基酸,为提高中药注射液质量标准提供依据。方法 通过 OPA-FMOC柱前衍生化法,建立同时检测血必净注射液中18种常见氨基酸的液相色谱法。色谱柱为Agilent SB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相A为0.02 mol/L醋酸钠溶液（含200 μL/L三乙胺和3.5 mL/L四氢呋喃,2%醋酸溶液调pH 7.2±0.05）,流动相B为0.02 mol/L醋酸钠溶液–甲醇–乙腈（200∶400∶400）（pH 7.2±0.05）,梯度洗脱;体积流量：0～38 min为1.0 mL/min;柱温40 ℃;检测波长0～32.5 min为338 nm,32.5 min以后为262 nm。结果 所测18种氨基酸在各自的高、低质量浓度范围内线性关系良好;3个批次血必净注射液中,游离氨基酸测定平均值为1.320 mg/mL,总氨基酸测定平均值为2.027 mg/mL。结论 所建立的氨基酸定量方法结果准确可靠,重现性好,有助于血必净注射液的质量控制,对中药注射剂安全评价标准的提高具有指导意义。     

柱前衍生HPLC测定阿胶中17种水解氨基酸含量

目的 建立柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)同时测定阿胶中17种水解氨基酸含量的方法.方法 用6 mol/L盐酸溶液水解阿胶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂;用Hypersil BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254nm,柱温为30℃.结果 17种氨基酸在60 min内均可得到很好的分离,回收率为97.4％～1 00.1％,RSD为1.6％～3.4％.结论 建立的方法可靠,可用于阿胶中17种水解氨基酸的含量测定.     

酶育牛黄的小鼠急性毒性实验研究

目的：观察酶育牛黄（ CBCG）淀粉混悬液经灌胃给药后小鼠的急性毒性反应,以评价酶育牛黄的安全性。方法选昆明小鼠20只（♀♂各半）,随机分为给药组和对照组。采用小鼠能耐受的最大浓度、最大体积,24 h内灌胃给药3次,给药后连续观察14 d,记录小鼠的行为表现、精神状态、进食量、体重和重要脏器的外观及其组织学变化和死亡情况。结果实验两组小鼠在行为表现、精神状态、进食量、体重和重要脏器方面均无异常,未见明显的毒性反应和死亡情况。结论小鼠灌胃酶育牛黄淀粉混悬液的最大耐受量为≥5 g/kg。     

柱前衍生化RP-HPLC法分析龟板中氨基酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对龟板中13种氨基酸进行分析。方法用6mol/L HCl水解提取龟板中总氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用外标法,梯度洗脱的方式分析。结果13种氨基酸在40min内均可得到很好的分离,回收率(除甘氨酸外)为91.68%~106.26%,RSD为0.718%~4.386%。结论所建立的方法分离效果好、灵敏、准确、简便,且采用普通的C18色谱柱,可广泛用于含有多种氨基酸样品的分析。     

柱前衍生化HPLC测定大鼠血浆和脑组织中与抑郁症相关的12种氨基酸

建立一种使用9,10-蒽醌-2-磺酰氯作为衍生化试剂的柱前衍生化HPLC法,用于测定大鼠血浆和脑组织中与抑郁症相关的12种氨基酸。血浆和脑组织样本经乙腈沉淀蛋白后,加入Kolthoff缓冲液(pH 8.8)和衍生化试剂,室温下反应5 min后进行色谱分析。采用Lichrospher C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-20 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH 7.5),梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;检测波长:254 nm。12种氨基酸在各自的浓度范围内线性良好。本方法灵敏准确、专属性高,可用于大鼠血浆和脑组织中与抑郁症相关的氨基酸的测定。     

高效液相色谱法测定马兜铃酸A在细胞培养基中含量变化*

[目的]建立细胞培养基中马兜铃酸A高效液相色谱(HPLC)法的测定方法,考察在细胞培养条件下马兜铃酸A在培养基中的稳定性。[方法]样品经甲醇沉淀蛋白,10 000 r/min,离心5 min,取上清液进样。采用HPLC法,Waters C18柱(150 nm×4.6 nm,5μm),甲醇-水(含3%的冰醋酸)(70∶30,V/V)为流动相;检测波长260 nm,柱温30℃,流速1 mL/min。[结果]马兜铃酸A在0.5~50 mg/L范围内线性良好,相关系数r=0.999 8;日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)分别为0.96%、1.92%;回收率为94.01%~104.34%。[结论]马兜铃酸A在培养基中3 d内含量稳定,该法简便、灵敏、特异性强,适用于细胞培养基中马兜铃酸A含量的测定。     

The Protective Effects of In Vitro Cultivated Calculus Bovis on the Cerebral and Myocardial Cells in Hypoxic Mice

The protective effects of in vitro cultivated calculus bovis （ICCB） on the cerebral and myocardial cells in hypoxic mice and the mechanism were examined. In one group, mice were intragastrically （i.g.） given ICCB for 15 days and then they were subjected to acute cerebral ischemia by decapitation, and then the panting time was recorded. In the other group, 12 min after exposure to hypoxia, mice was administered the ICCB i.g. for 5 days, and then the blood serum and tissues of brain, heart, liver were harvested and examined for SOD, GSH-px and T-AOC activity and content of MDA. The tissues of brain and heart were observed electron-microscopically for ultrastructural changes. The corpus striatum and hippocampus of brain were collected and examined for content of dopamine （DA） and norepinephrine （NE）. The ultrastrural examination showed that the pathological change in brain and heart in the ICCB group was very slight, while abnormal changes in the control group were obviously more serious. ICCB significantly prolonged the panting time of the hypoxic mice （P〈0.001）, increased the activity of SOD, GSH-px, T-AOC in serum and tissues of brain, liver, heart and elevated the content of DA and NE. ICCB also pronouncedly reduced content of MDA in serum and tissues of brain, heart and liver. Significant differences in these parameters were noted between ICCB group and controls. It is concluded that ICCB can exert protective effect on the cells of brain and myocardium by enhancing the tolerance of the tissues to hypoxia and the body＇s ability to remove free radicals and regulating the neurotransmitters.